全 文 ：种 ~诱变育种 ~≈ 细胞杂交 ~…基因重组 ∀但目前
天麻优良品种的获得主要有两个途径 }一是从野生
天麻中筛选高产品种 ∀将收集来的野生种麻 o进行
人工种植 o从中将优良品种筛选出来 o这种方法比较
适合有野生天麻分布的天麻产区 ∀另外 o这种方法
也可以发现具有优良性状的杂交亲本 o为杂交育种
提供优良的材料 ∀该方法非常简单而且有效 o但多
代无性繁殖也将出现退化现象 ~二是通过杂交育种
获得优良品种是目前最好的手段 ∀
≈参考文献
≈t 郭顺星 o王秋颖 q促进天麻种子萌发优良菌株特性及作用 q菌物
系统 ousst ousk|l }ws{ q
≈u 王秋颖 o郭顺星 q不同蜜环菌菌株生物学特性及菌丝体多糖含
量的研究 q中国药学杂志 ousst ovyk|l }x{{ q
≈v 王秋颖 o郭顺星 q不同来源蜜环菌菌株对天麻产量的影响 q中草
药 ousst ovuk|l }{v| q
≈责任编辑 王康正
甘草中总黄酮的含量测定
张雪辉t o赵元芬u o陈建民t
kt q中国协和医科大学 中国医学科学院 药用植物研究所 o北京 tsss|w ~
u q华北制药维而康有限公司 o河北 石家庄 sxssvtl
≈摘要 目的 }测定甘草中总黄酮的含量 ∀方法 }分光光度法测定总黄酮含量 ∀结果 }总黄酮含量 w qu h ∗
w qw h oΡΣ∆ u qy h ∀结论 }乌拉尔甘草中总黄酮含量较高 o具有重要的开发利用价值 ∀
≈关键词 甘草 ~总黄酮 ~含量测定
≈中图分类号 u{w qt ≈文献标识码
≈文章编号 tsst2xvsukusstltt2szww2su
甘草中黄酮成分的含量测定方法已有报
道≈t ∗ v o但均有不满意之处 ∀据报道甘草中黄酮成
分以查尔酮类k如异甘草素 !异甘草苷l和二氢黄酮
类k如甘草素 !甘草苷l化合物为主 o利用二氢黄酮在
ts h 溶液的碱性条件下转化为查尔酮的特性 ∀
而且通常具有 wχ2羟基查尔酮在碱性条件下 o最大吸
收转移至 wss ±°以上的特点 o建立 t种较灵敏 !方
便 !准确检测甘草中总黄酮含量的比色法 ∀
1 仪器 !药品与试剂
1 q1 仪器 °≠ ∞ ≤ °{ss ∂ r∂≥ ¶³¨¦2
·µ²³«²·²° ·¨¨µ∀甘草生药样品由本所丁万隆副研究
员提供和鉴定 o全部为乌拉尔甘草 Γλψχψρρηιζα
υραλενσισ ƒ¬¶¦«q∀
1 q2 样品 药材 t宁夏盐池县野生甘草kt|||年
tt月l ~药材 u 宁夏盐池县 v 年生人工栽培甘草
kt|||年 tt月l ~药材 v内蒙古依克昭盟野生甘草
kt|||年 ts月l ~药材 w内蒙古依克昭盟 v年生人工
栽培干草kt|||年 ts月l ~药材 x内蒙古依克昭盟 w
年生人工栽培甘草kt|||年 ts月l ~甘草浸膏样品
≈收稿日期 usss2tu2tx
由本所杨峻山教授提供 ∀
1 q3 试剂 柚皮苷标准品 k中国药品生物制品检
定所l ~甘草苷标准品本所余竞光教授提供 ~氢氧化
钾k l !甲醇k l ∀
2 实验方法
2 q1 对照品溶液的制备 精密称定柚皮苷标准品
适量 o用甲醇溶解 o定容于 u °¯ 容量瓶中 o制得浓度
约为 t qs ª#pt的对照品溶液 ∀
2 q2 供试液的制备 取 v ª宁夏盐池县野生甘草
粉末 o精密称定 o加甲醇 xs °¯ o称重 o超声提取两次 o
每次 us °¬±o称重 o补足损失重量 o过滤 o收集续滤
液 o即得 ∀
2 q3 最大吸收峰的确定 精确吸取柚皮苷对照品
溶液 us Λ¯ o加入 t °¯ 甲醇 o再加入 ts h 溶液
s qx °¯ o室温放置 x °¬±o用甲醇稀释至 ts °¯ o用甲
醇做空白对照 o于 t|s ∗ xss ±°波长处扫描 o结果在
wtx ±° 处有最大吸收 ∀
精密吸取供试品溶液 w °¯ o用甲醇稀释定容于
tss °¯ o取上述稀释液 t °¯ o加 ts h 溶液 s qx
°¯ o室温放置 x °¬±o用甲醇稀释至 ts °¯ ∀另取稀释
ywz
第 uy卷第 tt期
usst年 tt月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quy o²qtt
²√ qousst
液 t °¯ o直接用甲醇稀释至 ts °¯ o作为空白对照 o
于 t|s ∗ xss ±°波长处扫描 o结果在 wts ±°处有最
大吸收 ∀
2 q4 标准曲线的测定 精确吸取 t qsz °ª# °¯ p t柚
皮苷对照品溶液 us ows oys o{s otss otus Λ¯ o分别加
入 t °¯ 甲醇 o再加入 ts h 溶液 s qx °¯ o室温
放置 x °¬±o用甲醇稀释至 ts °¯ o在 wtx ±°处测定
其吸收值 ∀以吸收度为纵坐标 o对照品的量kΛªl为
横坐标 o得线性回归方程 }Ψ u .zyyz ≅ tsp v n
w .tszx ≅ tsp v Ξ , ρ s q|||z o线性范围为 ut qw ∗
tu{ qw Λª∀
2 q5 重复性实验 取 y份宁夏盐池县野生甘草粉
末 o精密称定 ∀分别加入 xs °¯ 甲醇 o称重 o回流 u
«o称重 o补足损失的重量 o过滤 o收集续滤液 ∀各取
上述样品溶液 s qx °¯ o加入 s qx °¯ 甲醇 o再加入
ts h 溶液 s qx °¯ o室温放置 x °¬±o用甲醇稀
释定容至 ts °¯ ∀再各取上述样品溶液 s qx °¯ o直接
用甲醇定容于 ts °¯ o作为空白对照 o测定 ∀Κwtx ±°
生药中黄酮百分含量的 ΡΣ∆ u qy h ∀测定结果见
表 t ∀
表 t 重复性实验结果
编号
生药重量
r°ª
总黄酮量
r°ª
总黄酮含量
r h
t ttz q| x qtx w qw
u ttz q| x qts w qv
v ttx qw x qss w qv
w tut q{ x qvu w qw
x tut qy x qss w qt
y tuu qs x qwu w qw
2 q6 样品测定 取各种甘草生药材一份 o精密称
定 ∀分别加入 xs °¯ 甲醇 o称重 o回流 u «o称重 o补
足损失的重量 o过滤 o收集续滤液 ∀分别准确吸取各
样品液 s qx °¯ o按上述方法测定 o并计算相对药材的
百分含量 ∀测定结果见表 u ∀
表 u 甘草生药样品中总黄酮测定结果
药材编号
生药重量
r°ª
总黄酮量
r°ª
总黄酮
含量r h
t uw| q| ts q| w qw
u uxs qs x qxs u qu
v uww qs y q|t u q{
w uxw qt x q|y u qw
x uyx qt x qys u qt
取各浸膏粉末一份 o精密称定 ∀用甲醇定容于
ux °¯ 容量瓶中 ∀分别吸取各样品液 s qx °¯ o按上述
方法测定 o并计算相对于浸膏的百分含量 ∀测定结
果见表 v ∀
表 v 甘草浸膏样品总黄酮测定结果
编号
浸膏重量
r°ª
总黄酮量
r˪
总黄酮
含量r h
t tt qx tsu qt uu qu
u ts qz y| qu ty qu
v ts qv |z qv uv qy
w tt qt |t qs us qx
x tt qw |u qz us qv
2 q7 加样回收率实验 取宁夏盐池县野生甘草粉
末 x份 o精密称定 ∀分别置于锥形瓶中 o各加入柚皮
苷对照品溶液 t °¯ o再加入 ux °¯ 甲醇 o称重 o回流
提取 u «o称重 o补足损失的重量 o过滤 o收集滤液 ∀
按 u qx项下自/各取上述样品溶液 s qx °¯ , ,0依法
操
作 o测吸收度 ∀计算回收率 o见表w o结果平均为
|| qw h oΡΣ∆为 u qx h ∀
表 w 加样回收率实验结果
生药重量
r°ª
生药中总
黄酮量r°ª
计算的
黄酮量r°ª
加入的
黄酮量r°ª
回收率
r h
xt qv u quu v quz t qsw tst qz
xs qz u qt| v qt| t qsw |y qx
xs q| u qus v qut t qsw |z qs
xt qw u quv v qus s q|x tst q|
xs q| u qus v qtx s q|x || q{
3 小结
3 q1 封士兰报道≈t 中黄酮成分的测定方法中 o以芦
丁为对照品 o按5中国药典6比色法测定芦丁含量的
方法 o由于甘草中的黄酮成分主要为二氢黄酮类 o以
芦丁为对照品测定甘草总黄酮含量不合适 ∀由于甘
草苷标准品不易购买 o我们选择了可从药检所购买 !
分子结构 !理化性质与甘草苷很接近的柚皮苷为对
照品来测定甘草中总黄酮含量 ∀本方法中柚皮苷溶
液的最大吸收波长与样品溶液的最大吸收波长很接
近 ∀因此在无甘草苷标准品的前提下 o选择柚皮苷
为对照品是可行的 ∀如能购买到甘草苷标准品 o可
测其摩尔吸光系数 o使之与柚皮苷的摩尔吸光系数
相比 o用以校正以柚皮苷为对照品测定甘草中总黄
酮含量的方法 ∀
3 q2 李强≈u 等人报道以二氢黄酮的专属反应 ) ) )
k下转第 z|y页l
zwz
第 uy卷第 tt期
usst年 tt月
中 国 中 药 杂 志
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∂ ²¯ quy o²qtt
²√ qousst
更说明浙江人k目前大多为浙江省乐清县的农民l历来有加
工制作枫斗的传统 o并一直延续至今天 ∀这些有关/枫斗0历
史加工和应用的记载 o在现时中药文献中是很难得到的宝贵
资料 ∀
再者 o本书对在建国后出现的品种复杂的黄草石斛k黄
草 !川黄草l的历史 !名称和商品规格等亦有比较详细的论
述 ∀
5 重视物种保护
据调查研究报道 o目前高等植物每年约灭绝 uss种 o加
上其他物种 o大致每天灭绝一种 ∀一旦灭绝 o则不可能再现 o
这对人类及其子孙后代无疑是一个不可挽回的重大损失 ∀
石斛属植物为附生类植物或称附生兰 o它们大多生长在树干
上或附着在不毛的石头上或岩壁上 ∀鉴于石斛类植物生态
习性特殊 o生长 !繁殖不易 o加之人们对石斛类药材的需求日
益增多而农民在采集方面又有/掠夺性0 !/毁灭性0的野蛮采
挖行为 o这是对物种生存的严重威协 o故石斛属的一些种类
已被列为国家保护物种 ∀本书作者从植物资源保护意识出
发 o提出可贵的保护意见 }≠ 发动全民来保护石斛物种与野
生资源 ~ 强化法律意识 o各职能部门加强共同合作 o制定我
国天然药物资源开发利用的有关法规 ~≈对保护石斛属植物
的几点意见和建议k请见原书 w{页l ∀我认为这些意见十分
可贵 o不仅石斛如此 o中药材不少品种 o特别是属于珍稀濒危
的物种 o人们都要增强保护意识 o对其制订有力的保护措施 o
本书可作为一个较好的范例 ∀
6 栽培成果突出
由于天然药用石斛的产量有限 o赶不上临床用药的需
求 o则人工栽培石斛 o为势所必然 o然而石斛为兰科植物 o种
子细小且不具胚乳 o故种子繁殖有极大的困难 o在自然状态
下发芽率很低 o成苗更难 ∀为此 o先进的栽培技术多采用组
织培养试管苗 o然后移栽野外及大田栽培 o但此技术难度很
大 o非比一般 o前人有过失败的教训 ∀但本书主编之一 o有丰
富的栽培理论和实践经验 o其所在单位至今已建立起拥有每
批育苗 twss万株的铁皮石斛培苗大楼以及近千亩的大田栽
培基地 o这就为大面积农田栽培石斛闯出一条新路 ∀此项成
果经国家林业局鉴定为国内首创 o达到同类研究的国际先进
水平 ∀铁皮石斛能如此育苗栽培 o其他同属植物当然亦可如
法炮制 o此项突出成果 o学术性和实用性很强 o社会效益和经
济效益都很高 o值得大力推广 ∀
7 全书文图并茂
全书含总论与各论两大部分 o所占页数几乎各执一半 o
平分秋色 ∀总论分 ≠ 石斛的历史与研究工作概况 ~ 石斛类
药材的现状 ~≈ 石斛类药材的植物资源保护与合理开发利
用 ~…石斛属植物的栽培与组培试管苗移栽生产概况 o附彩
图 zw幅 ∀各论首先论述石斛属 xt种药用植物 o附彩图 tyx
幅 ∀其次论述金石斛属 !石仙桃属 !石豆兰属 !蜂腰兰属 !贝
母兰属 !毛兰属 !耳唇兰属 !笋兰属有关植物 o附图 t|幅 o以
上总计彩图为 ux{幅 ∀总论内容极为丰富 o对药用石斛的历
史 !现状 !品种的真伪 !造成混乱的原因 !成分 !药理与临床应
用以及资源保护与栽培研究等情况 o均有详细论述并提出作
者不少创见 ∀各论对 vx种石斛属植物的基原 !形态 !分布进
行了简明的描述 o多数兼述茎的横切面构造 o文后加以必要
的注述 ∀对其他有关种类则一般概述 o做到主次分明 ∀所有
植物彩图栩栩如生 o特征显明 o特别对某些重点种类 o还有花
的特写镜头 ∀我们知道 o采石斛固不易 o要拍摄到开花的石
斛则更属不易 o而且要把石斛属如此多的种类 o采齐拍全 o则
更是难上加难了 ∀可以想像 o作者们花了数十年的功夫 o亲
自深入全国产区 o攀崖越岭进行调查采集 o其间经过文革 ts
年动乱的干扰 o有些既得材料 o毁之一旦 o其后又继而调查潜
心研究 o这种锲而不舍的钻研精神 o为科研事业成功之本 o是
多么的可贵可敬 ∀
总之 o本书在中国药用石斛方面 o做到了全面系统调查 !
品种鉴定精确 !形态描述简明 !有创见 !有特色 !科学性强 !实
用性广 !文图并茂 !装帧精美 o在现有论述专属药用植物彩色
图谱中 o达到了国内领先水平 o堪称石斛专属的权威之作 ∀
阅读本书 o不但能丰富读者有关中药石斛的专业知识 o而且
在看图时 o还有一种艺术审美的享受 ∀
≈责任编辑 古云霞
k上接第 zwz页l
硼氢化钠k钾l反应来测定甘草中的总黄酮含量 o按
文献做发现 o通常样品浓度下显色 o稳定性很差 o只
有当吸收度低于 s qt时才比较稳定 ∀
3 q3 黄量等人报道≈w 含 x2羟基的二氢黄酮在碱中
转化查尔酮 o于 wss ±°左右出现一强峰 o从而产生
完全不同的光谱 ∀
3 q4 按照标准曲线测定条件操作 o在 wtx ±° 处
∞t h k甲醇l甘草苷与柚皮苷之间的校正系数©
t qs|y ∀
≈参考文献
≈t 封士兰 q甘草黄酮的提取分离和含量测定 q兰州医学院学报 o
t||{ ouwkwl }us q
≈u 李 强 o任 茜 q乌拉尔甘草黄酮类成分的质量评价 o中药材 o
t||s otvkzl }vu q
≈v 张爱华 o彭国平 o文红梅 o等 q甘草与附子配伍煎液的甘草黄酮
含量测定 q中成药 ot||| outkwl }t|y q
≈w 黄 量 q于德泉 q紫外光谱 q下册 q北京 }科学出版社 ot|{{ quwt q
≈责任编辑 王康正
y|z
第 uy卷第 tt期
usst年 tt月
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