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Studies on the Antioxidative Effect of Constituents of Herba Epimedii (ESPS)

淫羊藿有效成分抗氧化作用研究



全 文 :淫羊藿有效成分抗氧化作用研究 3
曾南 孟宪丽 张艺
赖先荣 郑军 程龙琼 任长茂
k成都中医药大学 成都 ytsszxl
摘要 实验结果发现巫山淫羊藿多糖多相脂质体k∞≥°≥l能明显提高老龄动物红细胞及肝组织中
≥’⁄的活性 o提高老龄小鼠红细胞 Š≥‹2°¬的活性 ~能明显降低老龄动物血清及肝组织中 °’ 的含量 o
降低老龄小鼠心肌脂褐质的含量 ∀
关键词 淫羊藿 超氧化物歧化酶k≥’⁄l 过氧化脂质k°’l 谷胱苷肽过氧化物酶kŠ≥‹2°¬l
脂褐质kƒl
淫羊藿作为一味传统补肾壮阳药 o其来源 !
品种较多 o其中以巫山淫羊藿分布较广 o产量
高 ∀关于淫羊藿对内分泌系统 !蛋白质合成及
核酸代谢 !对心血管系统等的影响及其有效成
分淫羊藿黄酮的抗衰老作用均有报道≈t  ∀本文
主要观察了巫山淫羊藿有效成分k∞≥°≥l对老
龄动物老化相关酶活性及老化代谢产物生成的
影响 o以期揭示其补肾与抗衰老作用之间的关
系 ∀
1 材料
1 q1 药品及试剂
巫山淫羊藿有效成分k∞≥°≥l o成都中医药
大学药学系测试中心提供 o临用前用生理盐水
稀释成所需浓度 ∀维生素 ∞o广州星群制药厂
生产 o批号 |vs{sv ∀超氧化物歧化酶测试试剂
盒 o由四川省皮肤病性病防治研究所提供 o批号
|vttst ∀十二烷基磺酸钠k„ • l o广州化学试剂
分公司分装k日本进口l ∀硫代巴比妥酸k„ • l o
上海试剂二厂 o批号 {|tuu| ∀其余试剂均为
„ • 级 ∀
1 q2 动物
实验所用动物选用 ≥⁄雄性大鼠 ot{月龄 o
体重kv{s ? xslª~v 月龄 ≥⁄雄性大鼠 o体重
kt{s ? vslªo由华西医科大学实验动物中心提
供 ~昆明种小鼠 ot{月龄体重kw{ ? xlªou月龄
体重kuu ? ulªo由四川省计划生育研究所实验
动物中心提供 ∀
2 方法与结果
2 q1 对老龄小鼠血清及肝组织中 ≥’⁄活性和
红细胞 Š≥‹2°¬活力的影响
选健康老龄昆明种小鼠 xs只 o体重kw{ ?
xlªo随机分为 x组 o分别¬ª淫羊藿k∞≥°≥lvs o
ys otus°ªr®ª≅ xs§o∂¬·∞ ys°ªr®ª≅ xs§o老龄
对照组 ¬ª同体积生理盐水 ~另设一青年对照
组 o昆明种小鼠 ts只 o体重kuu ? ulªo¬ª等体积
生理盐水 o连续给药 xs天 ∀末次给药后 vs°¬±
迅速摘取小鼠眼球取血 o并随即取肝组织 o分离
血清及制备 t h肝匀浆 o按文献≈u 羟胺法测定
血清和肝组织内超氧化物歧化酶活性 ~按改良
‹¤©¨ ° ±¨法≈v 测定红细胞中 Š≥‹2°¬活力 o结
果见表 t ∀表明老龄对照组动物的血清和肝组
织中 ≥’⁄活性 !红细胞 Š≥‹2°¬活力明显低于
青年对照组k Π  s .st) ,巫山淫羊藿有效成分
各剂量均能明显提高老龄小鼠血清 ≥’⁄活性
k Π s .st) ;vs ,ys°ªr®ª剂量组均可明显提高
老龄小鼠肝组织中 ≥’⁄活性k Π  s .st) ;vs ,
tus°ªr®ª剂量组均能明显提高老龄小鼠的红
细胞 Š≥‹2°¬活力k Π s .sx ; Π s .st) ∀
3 四川省教育委员会基金项目
#yw# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 t期
表 t 巫山淫羊藿有效成分对老龄小鼠血清和肝组织中 ≥’⁄活性和红细胞中 Š≥‹2°¬活力的影响
组别 剂量°ªrk®ª#§l
≥’⁄ ‘∏r°¯ wl
血清 肝组织
Š≥‹2°¬
˜wl
青年对照组 ty| qws ? uu qvs tzy qz{ ? tu qw{ xv q| ? z qu
老龄对照组 tuw qws ? uz qvttl tv{ qyu ? tv qyvtl v{ qv ? | qstl
∞≥°≥组 vs t{{ qxy ? { qszvl tzt quv ? tt q|uvl xt qt ? ts qzul
ys tzz qst ? tu q|xvl t{w q{y ? | qs|vl wx qu ? ts q|
tus t{t qst ? t qzzvl twy qvt ? ty qtz x| qy ? x qxtvl
∂¬·∞组 ys tzu qus ? tw qtuvl t{v qv| ? x q{{vl xv qv ? z quvl
注 }≠ ξ ? σ  ν € ts ≈与青年对照组比较 t) Π s .st …与老龄对照组比较 u) Π s .sx v) Π s .st(下同)
w) t °¯ 反应液中 ≥’⁄抑制率达 xs h 时所对应的 ≥’⁄量为一个亚硝酸盐单位k‘∏r°¯ l o每毫升全血 o每分钟扣除非酶反应的
²¯ª≈Š≥‹ 降低后 o使 ²¯ª≈Š≥‹ 降低 tΛª分子为 t个酶活力单位k˜l
2 q2 对老龄大鼠血清和肝组织中 °’ 含量及
红细胞 ≥’⁄活性的影响
选取健康老龄 ≥⁄大鼠 xs只 o体重kv{s ?
xslªo按体重分层随机分为 x组 o分别¬ª巫山淫
羊藿有效成分k∞≥°≥lvs oys otus°ªr®ª≅ ys§o
∂¬·∞ys°ªr®ª≅ ys§o老龄对照组¬ª同体积生理
盐水 ∀另设一青年对照组 o≥⁄大鼠 ts只 o体重
kt{s ? vslªo¬ª等体积生理盐水 o连续给药 ys
天 ∀末次给药后 vs°¬±断头处死大鼠 o取血分
离血清 o并随即剖取肝脏组织制备 t h肝匀浆 o
按  ⁄„2ׅ„法≈w 测定血清和肝组织内过氧化
脂质的含量 ~同时取全血 xsΛ¯ o按邻苯三酚自氧
化法≈v 测定红细胞中超氧化物歧化酶的活性 o
结果见表 u ∀
表 u 巫山淫羊藿有效成分对老龄大鼠血清和肝组织中 °’ 含量及红细胞 ≥’⁄活性的影响
组别
剂量
°ªrk®ª#§l
°’ ±°²¯r
血清 肝组织
≥’⁄活力
˜r °¯ 全血
青年对照组 wy qwv ? tu q|u u|x qwu ? wz qz{ |zw qtw ? yu qu{
老龄对照组 xt qtz ? tz qz{ vwu qs| ? xs qzuxl {ty qz{ ? tsw q{ytl
∞≥°≥组 vs wx qzw ? { quv uvz qxu ? vu qy{vl |v{ qsz ? |z qzsul
ys vu q{s ? z q{vul tzs qss ? wx qwvvl ttvt qtx ? utx q{svl
tus uu qxu ? { q{yvl tzt qyv ? ut qvxvl tsw{ qys ? txy qt|vl
∂¬·∞组 ys ux q|z ? { qvyvl |y qsu ? ty qyxvl ttxy qsv ? tuz q|tvl
注 }与青年对照组比较xl Π s qsx
结果表明 o老龄对照组动物血清和肝组织
中 °’ 含量高于青年对照组 o巫山淫羊藿有效
成分k∞≥°≥l各剂量均能明显降低老龄大鼠肝
组织中 °’ 含量( Π s .st) ;ys ,tusªr®ª剂量
组可明显降低老龄大鼠血清中 °’ 含量k Π
s .sx , Π  s .st) ;v 个剂量均能明显提高老龄
大鼠红细胞中≥’⁄的活性k Π  s .sx或 Π 
s .st) ∀
2 .3 对老龄小鼠血清和肝组织中 °’ 含量及
心肌脂褐质kƒl含量的影响
选健康老龄昆明种小鼠 xs只 o体重kw{ ?
xlªo按体重分层随机分为 x组 o按表 v所示剂
量给药 xs 天 o老龄对照组给予等体积生理盐
水 ~另设青年对照组 o昆明种小鼠 ts 只 o体重
kuu ? ulªo¬ª同体积的生理盐水 o连续给药 xs
天 ∀末次给药后 vs°¬±迅速摘取小鼠眼球取血
分离血清 o并取肝组织制备肝匀浆 o按改良过氧
化脂质硫代巴比妥酸分光光度法≈x 测定血清和
肝组织中 °’ 的含量 ~同时迅速剖取小鼠心
肌 o按文献≈v 方法 o采用荧光分光光度计法测定
小鼠心肌中脂褐质含量 o以 t°ªros qt°²¯r
硫酸奎宁标准液的荧光强度 tss˜作标准 o计算
心肌脂褐质的荧光强度 o结果见表 v ∀
结果表明 o老龄对照组小鼠血清和肝细胞
中 °’ 及心肌脂褐质含量明显高于青年对照
组( Π s .st) ;淫羊藿有效成分( ΕΣΠΣ)高 !低
剂量均能明显降低老龄小鼠肝组织中 °’ 的
含量k Π s qstl ~各剂量组均能降低老龄小鼠
#zw# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 t期
表 v 巫山淫羊藿有效成分对老龄小鼠血清和肝组织中 °’ 含量及心肌 ƒ含量的影响
组 别
剂量
°ªrk®ª#§l
°’ ±°²¯r
血清 肝组织
心肌 ƒ
˜
青年对照组 x qus ? t qzu y qy| ? t q{s tx qwu ? w qsv
老龄对照组 ts qzs ? u qvstl tt qts ? v qsstl w| qyz ? ux qtytl
∞≥°≥组 vs z q{t ? t qysvl w qy| ? s q{yvl us qyz ? z q|wvl
ys z qv| ? s q{uvl ts qvz ? t q|| ty q{| ? y q{tvl
tus y qu{ ? s q|vvl z qyt ? t qs{vl tz quu ? v q{svl
∂¬·∞组 ys z qus ? v qswul ts q{s ? u qvs us qsx ? tu qy|vl
血清中 °’含量k Π s .sx , Π s .st) ,并能明
显降低老龄小鼠心肌脂褐质含量( Π s .st) ∀
3 讨论
衰老是随年龄增长而发生的人体各种功能
减退和体内稳态机能下降的过程 ,有关衰老的
理论学说多种多样 ,其中自由基学说认为机体
的衰老过程与脂质过氧化密切相关 ,脂质过氧
化是发生在细胞膜内不饱和脂肪酸中的一系列
自由基反应 ,过氧化脂质的生成使细胞膜脂质
组成发生变化 ,导致细胞膜内酶与蛋白质变性 ,
破坏细胞结构与功能 ,使体内重要脏器心 !肝 !
脑等受损 ,因此维持体内自由基的稳态和平衡 ,
清除有害的自由基反应 ,中断脂质过氧化 ,减少
过氧化脂质的产生 !积累 ,对延缓衰老十分重
要 ,这有赖于提高机体老化相关酶(≥’⁄oŠ≥‹2
°¬l活性 ∀另一方面 o脂褐质在心肌等组织的
沉积是衰老的一种标志 o其沉积程度与脂质过
氧化反应呈正相关 ∀目前中药抗衰老作用研究
中 o认为药物的抗衰老作用与促进代谢 !调节免
疫 !抗氧化等作用有关 ∀大多数补肾中药延缓
衰老的作用机制可能在于提高机体抗氧化活
性 o增强机体老化相关酶 ≥’⁄oŠ≥‹2°¬的活
性 o减少过氧化产物的生成 o从而避免机体生物
膜和组织遭受过氧化产物的损伤 ∀本实验结果
发现巫山淫羊藿有效成分能明显提高老龄动物
血液及组织中 ≥’⁄oŠ≥‹2°¬的活性 ~并能明显
降低老龄动物血清及肝组织中 °’ 的含量 o使
老龄小鼠心肌中脂褐质含量降低 o表明 ∞≥°≥
具有抗氧化 !延缓衰老作用 o为巫山淫羊藿的功
效及临床应用提供了药理学依据 ∀
4 参考文献
t 阴健等 q中药现代研究与临床应用 q北京 }学苑出版社 o
t||w }ywy
u 许士凯 q抗衰老药物学 q北京 }中国医药科技出版社 ot||w
v 陈奇 q中药药理研究方法学 q北京 }人民卫生出版社 ot||v
w 李仪奎 q中药药理实验方法学 q上海 }上海科学技术出版
社 ot||t
x 向荣等 q生物化学与生物物理进展 qt||s ~tzkvl }uwt
t||x p sy p u{收稿
紫苏与白苏药理作用的研究
王静珍 陶上乘 邢永春k宁夏药品检验所 银川 zxssswl
朱兆仪k中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所 北京 tsss|wl
摘要 紫苏水提浸膏和挥发油有显著的解热和止呕作用 ∀种子脂肪油有明显的镇咳与平喘作用 o
这些作用与白苏相同 ∀水提浸膏或种子脂肪油的急性毒性亦无显著差异 o表明白苏可代替紫苏作药用 ∀
关键词 紫苏 白苏 药理作用
紫苏为常用中药 o性味辛温 ∀紫苏子有降
气消痰 !平喘等功能 o紫苏叶与梗有解表散寒 o
行气和胃等功能≈t  ∀白苏是紫苏的同属植物 o
虽未被5中国药典6收载 o有些地区不作药用 o但
不少地区仍有栽培 o在四川 !贵州 !江苏等地与
紫苏同等使用≈u  ∀有关它们的药理作用报道
#{w# 中国中药杂志 t||z年第 uu卷第 t期