免费文献传递   相关文献

The Antitumor Activity of Diosgenin in vivo and in vitro

薯蓣皂苷元体内、外的抗肿瘤作用



全 文 :薯蓣皂苷元体内 !外的抗肿瘤作用
王丽娟t o王 岩t o陈声武t o马吉胜t o付 勤u o王本祥t
kt q吉林天然药物研究所 药理研究室 o吉林 长春 tvsstu ~
u q吉林省肿瘤研究所 药物毒理研究室 o吉林 长春 tvsstul
≈摘要  目的 }观察薯蓣皂苷元k§¬²¶ª¨ ±¬± o⁄¬²l的体内和体外抗肿瘤作用 ∀方法 }体内试验采用 w 种小鼠移植
性肿瘤k≥2t{s o‹ ³¨„ o˜tw和 ∞„≤l腋部皮下接种 o于接种后次日开始给药 ots 日内每天给药 t 次 o计算各给药组瘤
肿抑制率 ∀体外试验采用 w 种肿瘤细胞株k  ≤ƒ o|u| o„vzx2≥u o‹ ¨¤l o分别与不同浓度的药物共同培养 o染色后
计算其抑瘤率 ∀结果 }≠ 两种给药途径k¬ªo¬³l下 o⁄¬²对 ≥2t{s o‹ ³¨„ o˜tw小鼠移植肿瘤具有抑制作用 o抑制率在
vs h ∗ xs h o而对 ∞„≤ 没有抑制作用 ~ 体外 ⁄¬²对 |u| o‹ ¨¤o ≤ƒ肿瘤细胞株具有抑瘤作用 oŒ≤xs分别为 t qu o
t{ qu ot| q{ Λª# °p t o而对 „vzx2≥u细胞则效果不明显 ∀结论 }⁄¬²对 ≥t{s o‹ ³¨„ o˜tw等小鼠移植肿瘤和 |u| o
‹ ¨¤o ≤ƒ肿瘤细胞株具有明显抑制作用 ∀
≈关键词  薯蓣皂苷元 ~抗肿瘤作用
≈中图分类号  • u{x qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussults2szzz2sv
薯蓣皂苷元k§¬²¶ª¨ ±¬±o简称 ⁄¬²l是从我国特有
的薯蓣科植物穿龙薯蓣 ∆ιοσχορεα νιππονιχα ¤®¬±²
中分离得到的甾体皂苷元 o俗称薯蓣皂素 ∀该化合
物具有溶血 !降血脂 !抗菌 !消炎等作用 ∀近些年来 o
国内外已有许多学者报告薯蓣皂苷有抗肿瘤作
用≈t ∗ v  ∀我们观察了 ⁄¬²对肉瘤2t{sk≥2t{sl !肝癌
腹水型k‹ ³¨„l !小鼠宫颈癌2twk˜twl和艾氏腹水癌
k∞„≤l的体内抗肿瘤作用 ∀并观察了在离体条件
下 o⁄¬²对 w 种肿瘤细胞株人乳腺癌细胞k  ≤ƒl !小
鼠肺上皮癌细胞k|u|l !黑色素瘤细胞k„vzx2≥ul !
人宫颈癌细胞k‹ ¨¤l的细胞毒作用 ∀
1 材料和方法
1 q1 动物 w 种肿瘤腹水传代小鼠 o均购自吉林省
肿瘤研究所 ∀昆明种小鼠 ot{ ∗ uu ªo雌雄兼用 o购
自中国人民解放军农牧大学实验动物中心k动物合
格证号 }ts2xttul ∀
1 q2 试剂与药品 薯蓣皂苷元粉 o纯度  |s h o由
吉林天然药物研究所提供 ∀注射用环磷酰胺 o每支
uss °ªo批号 |{stst o上海华联制药有限公司产品 ∀
⁄ ≥’kŠ¬¥¦²l o × ×k≥¬ª°¤l ox2氟脲嘧啶kx2ƒ ˜l o
批号 ststtw o上海旭东海普药业有限公司产品 ∀
≈收稿日期  usst2s{2s{
≈通讯作者  电话 }kswvtlxxwt{zu 传真 }kswvtlxxwt{z{
∞2°¤¬¯}• ¤±ª¬­∏¤±#·¬¤±¼¤²q¦²° q¦±
1 q3 细胞株  ≤ƒ o„vzx2≥u 购自美国 „× ≤≤
k„ ° µ¨¬¦¤± ×¼³¨ ≤∏¯·∏µ¨ ≤²¯¯¨ ¦·¬²±l o|u| o‹ ¨¤由
日本横滨市立大学医学部惠赠 ∀
1 q4 细胞培养 • ° Œ2tyws培养液 o加入 ts h的
胎牛血清 ot h 的抗菌素ktssss ˜# °p t青霉素
和 t sss Λª# °p tl ou °°²#pt谷氨酰胺 o置于
x h的 ≤ ’u培养箱中培养 ∀
1 q5 仪器 ≤ ’u 培养箱k• ≤ ’vsss× ∂ …„ o• √¨¦²l ~
光学倒置显微镜kvz÷ „{ o’ ¼¯°³∏¶l ~酶标仪k  wxs o
…Œ’ • „⁄l ∀
1 q6 方法
1 q6 q1 体内抗肿瘤实验方法≈w  小鼠按常规接种
肿瘤 o次日给药 o随机分为对照k¬ª蒸馏水 us °#
®ªp tl !环磷酰胺k¬³us °ª#®ªp tl !⁄¬²k¬ª uss °ª#
®ªp t otss °ª#®ªp t和 xs °ª#®ªp tl和 ⁄¬²k¬³tss o
xs oux °ª#®ªp tl{ 组k每组 ts 只l o每日给药 t 次 o
连续 ts §∀给药结束次日 o将动物称重后脱臼处死 o
剥离出皮下肿块称重 o比较各组肿瘤生长情况 ∀
1 q6 q2 体外细胞毒性实验方法≈x   ≤ƒ o|u| o
„vzx2≥u o‹ ¨¤肿瘤细胞 o按常规方法培养 o细胞贴
壁后 o吸出培养液 o将细胞分为 x2ƒ ˜ 阳性对照组 !
各不同浓度 ⁄¬²药物组 o每组设 v 个平行孔 o每孔加
入含药物的培养液 tss ˏo同时设不加药物的阴性
对照组 !不含细胞的空白组 ∀继续培养 o弃上清 o每
孔加入 tss ˏ新鲜配制的含 s qu °ª# °p t  × ×
#zzz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu
无血清培养液 o继续培养 o弃上清 o⁄ ≥’ 溶解 o超声
振荡混匀 o用酶标仪在 xzs ±°测吸收度k Αl o计算
肿瘤细胞生长抑制率 ∀
抑制率k h l € Α阴性对照组 p Α药物组Α阴性对照组 p Α空白组 ≅ tss h
1 q6 q3 统计处理 数据采用 τ检验 o以 ξ ? σ表示 ∀
2 结果
2 q1 ⁄¬²对 w种实验性肿瘤的抗肿瘤作用 ¬ª给药
后结果见表 t ∗ w ∀
表 t ⁄¬²对小鼠 ≥t{s瘤重的影响k ξ ? σ, ν € tsl
组别
剂量
r°ª#®ªp t
体重rª
给药前 给药后
瘤重

抑瘤率
r h
对照组 t{ qy ? t qxt uw qv ? v qsy t qxy ? s qzs
环磷酰胺 us t| qs ? t qxy uu qx ? u qsz s qzs ? s quxul xx qt
⁄¬²k¬ªl uss t{ qz ? t q|x uv qv ? t q{v s qzz ? s qu|ul xs qy
⁄¬²k¬ªl tss t{ qw ? t qz{ uu qu ? u qxz s q{| ? s qvwtl wu q|
⁄¬²k¬ªl xs t{ qz ? t q|x uv qz ? v qws t qss ? s qvztl vx q|
注 }与对照组比较 tl Π s .sx u) Π s .st v) Π s qsst k表 u ov ow同l
表 u ⁄¬²对小鼠 ‹ ³¨„瘤重的影响k ξ ? σ l
组别
剂量
r°ª#®ªp t
ν
动物体重rª
给药前 给药后
瘤重

抑瘤率
r h
对照组 ts us qx ? t quz vs qt ? v qz{ u qut ? s qyy
环磷酰胺 us | us qz ? t qxz ux qz ? v quw s qzs ? s qv|vl y{ qv
⁄¬²k¬ªl uss ts us qy ? t qxt ux q{ ? t q|v s q|s ? s quwvl x| qv
⁄¬²k¬ªl tss ts us qv ? t qux uy qy ? u qy{ t qt| ? s qvy vl wy qu
⁄¬²k¬ªl xs ts us qv ? t qux u{ qu ? t qyu t qws ? s qty ul vy qz
注 }与对照组比较 tl Π s .sx u) Π s .st v) Π s qsst
表 v ⁄¬²对小鼠 ˜tw瘤重的影响k ξ ? σ l
组别
剂量
r°ª#®ªp t
ν
动物体重rª
给药前 给药后
瘤重

抑瘤率
r h
对照组 ts ut qt ? t qus u{ qt ? u qv{ u qtv ? s qy{
环磷酰胺 us ts us q| ? t qu| uw q{ ? u qw| s q|t ? s qwtvl xz qv
⁄¬²k¬ªl uss | ut qs ? t qus uy qu ? v qvt t qst ? s qxtvl xu qy
⁄¬²k¬ªl tss ts ut qu ? t qws uy qy ? v qsv t quw ? s qx{ul wt q{
⁄¬²k¬ªl xs { ut qv ? t qty u{ qt ? u qw{ t qv| ? s qxwtl vw qz
注 }与对照组比较 tl Π s .sx u) Π s .st v) Π s qsst
表 w ⁄¬²对小鼠 ∞„≤ 瘤重的影响k ξ ? σl
组别
剂量
r°ª#®ªp t
ν
动物体重rª
给药前 给药后
瘤重

抑瘤率
r h
对照组 ts us qw ? s q|z vs qv ? u qzt t q|t ? t qts
环磷酰胺 us ts us qw ? s q|z uy qy ? v q{| t qts ? s qvwtl wu qw
⁄¬²k¬ªl uss | us qx ? s q{x uz q{ ? v qxs t qwy ? s qzu uv qy
⁄¬²k¬ªl tss ts us qw ? s q|z uy q{ ? v q|| t qzs ? s qxw tt qs
⁄¬²k¬ªl xs | us qx ? s q{x u| qs ? u qt{ t qxs ? s qy{ ut qx
注 }与对照组比较 tl Π s qsx
表 t ∗ w 的结果表明 o⁄¬²经 ¬ª给药后 o对 ≥2 t{s o‹ ³¨„ o˜tw小鼠移植肿瘤具有抑制作用 o而对
#{zz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu
∞„≤小鼠没有明显的抑制作用 ~并且经¬³给药的结
果也可得出相同的结论k数据未列出l ∀
2 q2 ⁄¬²的体外细胞毒活性 ⁄¬²在 s qt ∗ tss Λª#
°p t的药物浓度内 o对 v 种肿瘤细胞株 k|u| o
‹ ¨„ o ≤ƒl具有明显的抑瘤效果 o且呈现较好的量
效依赖关系 o对 „vzx2≥u的作用不明显 ∀经量效曲
线作图可求得 |u| o‹ ¨¤o ≤ƒ v 种细胞的 Œ≤xs分
别为 }t qu ot{ qu ot| q{ Λª#°p t o且药物浓度在 tss
Λª#°p t时 o对 v 种细胞的抑瘤率分别为 {x qw h o
|{ qz h o{v qu h k表 xl ∀
表 x 不同浓度的薯蓣皂苷元对肿瘤细胞生长抑制率 h
药物浓度
rΛª#°p t
|u|
⁄¬² x2ƒ ˜
‹ ¨¤
⁄¬² x2ƒ ˜
 ≤ƒ
⁄¬² x2ƒ ˜
„vzx2≥u
⁄¬² x2ƒ ˜
s qt tu qu tw qv s qt t{ qt x q{ z qu s qt u qw
t w| qv ws qz tu qv ut qy | qv t{ qw z qz | qy
ts zx q{ y{ qv vz qv yv qu uw qy wt qs ty qu t| qv
tss {x qw tss |{ qz tss {v qu |u qv vz qv {| qu
3 讨论
⁄¬²在 uss otss oxs °ª#®ªp t ¬ª或 ⁄¬² tss oxs o
ux °ª#®ªp t¬³对 v种小鼠移植肿瘤 ≥t{s o‹ ³¨„ 和
˜tw均具有明显的抑制作用 o其抑瘤率均在 vs h ∗
xs h ∀但无论是¬ªo还是¬³o对 ∞„≤ 都没有抑制作
用k Π s qsxl ∀而在离体条件下 o⁄¬²浓度在 s qt ∗
tss Λª#°p t时 o对 |u| o‹ ¨¤o ≤ƒ v 种肿瘤细胞
具有明显的抑制作用 oŒ≤xs分别为 t qu ot{ qu ot| q{ Λª
#°p t o均在 us h以上 o在浓度为 tss Λª#°p t时 o
肿瘤生长抑制率分别达到{x qw h o|{ qz h 和
{v qu h o而对 „vzx2≥u 细胞则没有明显的抑制作
用 ∀这可能是由于不同细胞株对药物的敏感程度不
同所造成的 ∀我们的药物肠内菌代谢研究证明 o各
种薯蓣皂苷口服给药时 o其在肠道内都要被肠内菌
代谢 o主要吸收入血的代谢产物为 ⁄¬²∀所以可以推
测各种薯蓣皂苷口服给药时的抗肿瘤作用 o其真正
的抗肿瘤疗效成分可能为 ⁄¬²∀
≈参考文献 
≈t  Ž¨ ‹∏ o⁄²±ª „ o≠¤² ÷ o¨ ·¤¯ q„±·¬±¨ ²³¯¤¶·¬¦ „ª¨ ±·¶~Œq׫µ¨¨
≥³¬µ²¶·¤±²¯ Š¯ ¼¦²¶¬§¨¶©µ²° • «¬½²° ¶¨²© ∆ιοσχορεα χολλεττιι √¤µq
ηψπογλαυχα q °¯ ¤±·¤  §¨ot||y oyu }xzv q
≈u  ¬°¤®¬Žo‘¤®¤°∏µ¤ ’ o≥¤¶«¬§¤ ≠ o¨·¤¯ q≥·¨µ²¬§¤¯ ≥¤³²±¬±¶©µ²°
·«¨ …∏¯¥¶²© Λιλιυ µ λονγιφλορυ µ ¤±§ ׫¨¬µ„±·¬·∏°²µ2°µ²°²·¨µ
„¦·¬√¬·¼ q°«¼·²¦«°¬¶·µ¼ ot||w ovz }uuz q
≈v   ¬¨ ⁄²±ªo÷¬2½«¬ ƒ ±¨ªo…¨ ±2¬¬¤±ª • ¤±ªo ·¨¤¯ q× º² ‘²√¨¯
ƒ∏µ²¶·¤±²¯ ≥¤³²±¬±¶©µ²° ·«¨ • «¬½²° ¶¨²© ⁄²¶¦²µ¨¤ °¤±·«¤¬¦¤
°µ¤¬± ·¨…∏µ®¬¯¯ ¤±§ ׫¨¬µ≤¼·²·²¬¬¦„¦·¬√¬·¼ q× ·¨µ¤«¨ §µ²ousst o
xz }xst q
≈w  李仪奎 q中药药理实验方法学 q上海 }上海科学技术出版社 o
t||t qxtu q
≈x  司徒镇强 q细胞培养 q西安 }世界图书出版公司 ot||y qt{y q
Τηε Αντιτυµ ορ Αχτιϖιτψ οφ ∆ιοσγενιν ιν ϖιϖο ανδ ιν ϖιτρο
• „‘Š ¬2­∏¤± o• „‘Š ≠¤± o≤ ‹∞‘≥«¨ ±ª2º∏o „ ¬2¶«¨ ±ªoƒ ˜ ±¬± o• „‘Š …¨ ±2¬¬¤±ª
kt q⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²©³«¤µ°¤¦²¯²ª¼ o¬¯¬± Œ±¶·¬·∏·¨ ²© ‘¤·∏µ¨  §¨¬¦¬±¨ o≤«¤±ª¦«∏± tvsstu o¬¯¬± o≤«¬±¤
u q⁄¨ ³¤µ·° ±¨·²© °«¤µ°¤¦²¯²ª¼ ¤±§ ײ¬¬¦²¯²ª¼ o×∏°²µ¬±¶·¬·∏·¨ ²©¬¯¬± o≤«¤±ª¦«∏± tvsstu o¬¯¬± o≤«¬±¤l
[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε: ײ¬±√ ¶¨·¬ª¤·¨ ·«¨ ¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼ ²© ⁄¬²¶ª¨ ±¬± ιν ϖιϖο ¤±§ ιν ϖιτρο q Μετηοδ : ≥2t{s o ‹ ³¨„ o ˜tw
¤±§ ∞„≤ ·µ¤±¶³¯¤±·°¬¦¨ º µ¨¨ ª¬√ ±¨ ⁄¬²¶ª¨ ±¬±¬ª²µ¬³ √¨ µ¨¼§¤¼©²µts §¤¼¶o©µ²° ·«¨ ±¨ ¬·§¤¼ º«¨ ±·«¨ ¼ º µ¨¨ ¬±²¦∏¯¤·¨§¬± ¤¬¬¯¯¤q
×∏°²µªµ²º·«¬±«¬¥¬·µ¤·¨¶º µ¨¨ ¦¤¯¦∏¯¤·¨§ qƒ²∏µ®¬±§¶²©¦¨¯¯¶ o  ≤ƒ o|u| o„vzx2≥u ¤±§ ‹ ¨¤ oº µ¨¨ ¬±¦∏¥¤·¨§µ¨¶³¨ ¦·¬√¨¯¼ º¬·«
⁄¬²¶ª¨ ±¬± ιν ϖιτρο q ×∏°²µªµ²º·«¬±«¬¥¬·µ¤·¨¶º µ¨¨ ¤¯¶²¦¤¯¦∏¯¤·¨§ q Ρεσυλτ : Ιν ϖιϖο o¥²·«¬ª¤±§¬³ o⁄¬²¶ª¨ ±¬±¬±«¬¥¬·¨§≥2t{s o
‹ ³¨„ o˜ tw °¬¦¨ ·µ¤±¶³¯¤±··∏°²µo·«¨ ¬±«¬¥¬·µ¤·¨¶¥¨¬±ªvs h ∗ xs h o¥∏·¬·§¬§±²·¬±«¬¥¬··«¨ ∞„≤ °¬¦¨ ·µ¤±¶³¯¤±··∏°²µqΙν ϖιτ2
ρο o⁄¬²¶ª¨ ±¬±¬±«¬¥¬·¨§|u| o‹ ¨¤o ≤ƒ ¦¨¯¯ ªµ²º·« o¤±§Œ≤xs º µ¨¨ t qu ot{ qu ot| q{ Λª#°p t µ¨¶³¨¦·¬√¨¯¼ o¥∏·¬·§¬§±²·¶¬ª±¬©¬2
¦¤±·¯¼ ¤©©¨ ¦·„vzx2≥u ¦¨¯¯¶qΧονχλυσιον : ⁄¬²¶ª¨ ±¬± «¤¶¤± ²¥√¬²∏¶¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼ ²± ≥2t{s o ‹ ³¨„ o ˜tw ·µ¤±¶³¯¤±·°¬¦¨ ιν ϖιϖο
¤±§|u| o‹ ¨¤o ≤ƒ ¦¨¯¯¶ ιν ϖιτρο q
[ κεψ ωορδσ] §¬²¶ª¨ ±¬± ~¤±·¬·∏°²µ¤¦·¬√¬·¼
≈责任编辑 方文贤 
#|zz#
第 uz卷第 ts期
ussu年 ts月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ quz o‘²qts
’¦·²¥¨µqoussu