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Determination of Flavonoids in Ginkgo biloba L. Leaves from Different Producing Areas

不同产地栽培银杏叶中黄酮类成分的含量测定



全 文 :不同产地栽培银杏叶中黄酮类成分的含量测定
王 弘 o赵国斌 o刘叔倩 o果德安 o郑俊华
k北京医科大学 药学院 o北京 tsss{vl
≈摘要  目的 }比较不同产地银杏叶样品中黄酮类成分含量 ∀方法 }‹°≤ 法测定 vx个产地银杏叶中 v种主
要黄酮甙元即槲皮素 !山奈酚 !异鼠李素的含量 o并以此换算出总黄酮含量 ∀结果与结论 }各产地银杏叶中黄酮类
成分含量差异较大 o其中产量大的江苏邳州 !广西兴安 !贵州正安 !湖北安陆等地的银杏叶总黄酮含量较高 ∀
≈关键词  银杏叶 ~‹°≤ ~黄酮
≈中图分类号  • u{u qx ≈文献标识码  … ≈文章编号  tsst2xvsukussslsz2sws{2sw
银杏 Γινκγο βιλοβα q为银杏科银杏属植物 o主
产于我国 ∀近 us ¤来的药理研究表明银杏叶中黄
酮成分具有扩张冠状动脉血管 !增加脑血流量 o改善
脑营养及抗菌作用≈t  o同时在延缓衰老 !益寿延年以
及食品保健 !美容美发等方面广泛应用 o因此倍受国
内外市场关注 ∀
目前江苏 !山东 !湖北 !广西等省已大量栽培 o但
由于各地地理环境条件及加工方法的差异 o势必会
造成有效成分含量差别 o从而影响银杏叶的质量 ∀
为此参考有关文献≈u ov  o经试验比较后采用 ‹°≤
法 o测定了不同产地银杏叶样品中 v个主要黄酮苷
元即槲皮素 !山奈酚 !异鼠李素的含量 o加样回收率
可达 |{ qz h ∀并以该苷元成分的含量换算出总黄
酮含量 o此方法能简便快速 !准确的测定多个样品的
总黄酮含量 o为银杏叶的质量控制提供了依据 ∀
1 实验材料和仪器
银杏叶 }为 t||z年 |月中旬采集于各产地栽培
银杏的叶 ∀
对照品 }槲皮素k ∏´¨µ¦¨·¬±lk≥ŒŠ  „ 公司l纯度
|{ h ~山奈酚k®¤¨ °³©¨µ²¯l !异鼠李素k¬¶²µ«¤°±¨ ·¬±l
k中国药品生物制品检定所l ∀
仪器 }‹°≤ 为 ×≥°公司 °w sss系统 !色谱柱
Œ±¨ µ·¶¬¯’⁄≥2v柱kw qy °° ≅ txs °°l o检测器 ˜ ∂
v sss ∀
试剂 }甲醇k色谱纯l o‹≤¯o‹u°’wk分析纯l ∀
2 测定方法与结果
2 q1 样品的提取纯化处理
≈收稿日期  t|||2s|2s|
≈基金项目  国家教育部高等学校博士学科点专项科研基金资
助k|zusl
银杏叶采集后及时干燥 !粉碎过 ws目筛 o精密
称取 t ª样品 o加入索氏提取器中 o加甲醇 tss °¯ 热
回流 { «o提取液定量移入 tss °¯ 量瓶中 o加甲醇至
刻度 o摇匀 o精密吸取 xs °¯ 于分液漏斗中 o用石油
醚萃取 w次 o弃去石油醚层 o甲醇减压蒸干 o加 ux h
盐酸 t °¯ !甲醇 z °¯ o溶解后 o于沸水浴中加热回流
t «水解 o冷却后定量移入 ts °¯ 量瓶中 o加甲醇至
刻度 o摇匀 o用 s qx Λ° 的微孔滤膜过滤 o滤液供
‹°≤ 分析用 ∀
2 q2 ‹°≤ 测定及数据处理
色谱条件 }流动相甲醇2水2磷酸kysΒwsΒs qul o流
速 t qs °¯ #°¬±p t o检测波长 vys ±° o柱温 vs ε o进
样量 ts Λ¯ ∀
标准曲线制备 }精密称取槲皮素 !山奈酚 !异鼠
李素对照品 x qt ow qt ou qu °ªo置于 xs °¯ 量瓶中 o用
甲醇溶解后 o加甲醇至刻度 o摇匀 o精密吸取 u ow oy o
{ ots Λ¯ 注入高效液相色谱仪中 o记录色谱图 o测定
峰面积分别以槲皮素 !山奈酚 !异鼠李素的峰面积对
相应的浓度进行回归计算得回归方程 ∀Α槲 €
p u qyzx ≅ tsx n z quvy ≅ tsy Χoρ€ s q|||z o线性范围
为s qs{{ ∗ s qww °ª# °¯ p t ~Α山 € p u qu{| ≅ tsx n
z q|s{ ≅ tsy Χ oρ € s q||| o线性范围s qtyw ∗
s q{us °ª# °¯ p t ~Α异 € p t qutv ≅ tsx n z quys ≅
tsy≤ oρ€ s q|||z o线性范围 s qs{{ ∗ s qww °ª# °¯ p t ∀
样品的测定及数据处理 }精密吸取上述处理后
待测样品 ts Λ¯ o注入高效液相色谱仪中 o记录色谱
图 o测定峰面积 ∀测得样品的色谱见图 t ∀以上述
对照品回归方程计算出槲皮素k±l !山奈酚kŽl !异
鼠李素kŒl的含量分别为 ± h oŽh oŒh o以下式计算
出黄酮总含量≈w 
#{sw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
黄酮总含量 € ± h kzxy qzrvsu qul n Žh kzws qsru{y qul
n t h kzzs qxrvty qul € u qxt ≅ ± h n u qv| ≅ Žh n u qyw ≅ Œh
图 t ‹°≤ 分离图谱
t1 槲皮素 u1 山奈酚 v1 异鼠李素
2 q3 加样回收率和精密度测定
精密称取已知含量的银杏叶细粉 o加入一定量
的槲皮素对照品 o按测定样品处理方法制备供试液 o
按照样品 ‹°≤ 测定方法测定 o计算出加样回收率
为 |{ qz h k ν € vl oΡΣ∆ € t qt h ∀
按测定样品处理方法制备供试液 o依照样品
‹°≤ 测定方法重复进样 x 次 o分别测定 o计算其
ΡΣ∆ € t qx h o说明精密度良好 ∀
2 q4 样品中槲皮素 !山奈酚 !异鼠李素的含量测定
k表 tl
表 t 不同产地 |月份银杏叶黄酮类成分含量 h
产地
槲皮素
含量 × ƒ
山奈酚
含量 × ƒ
异鼠李素
含量 × ƒ
总黄酮
江苏邳州港上镇 s quu xz q| s qtu vt qy s qsw ts qx s q|y
江苏邳州陈楼 s qtx xv qy s qs| vu qt s qsw tw qv s qzt
邳州银杏实业总公司 s qt| xx q| s qtt vu qv s qsw tt q{ s q{y
江苏邳州铁富乡 s qtv xs qs s qts v{ qx s qsv tt qx s qyy
江苏如皋开发区 s qtu xw qx s qs{ vy qw s qsu | qts s qxy
江苏泰兴 s qs{ vw q{ s qs| v| qt s qsy uy qt s qx{
江苏南京 s qs{ v{ qt s qs| v{ qt s qsx uv q{ s qxv
湖北随州谢家林场 s qtt ww qs s qtu v{ qs s qsu { qs s qyw
湖北随州 s qs| v| qt s qtu xu qu s qsu { qz s qx|
湖北安陆 s qtv ww q{ s qtw w{ qv s qsu y q| s qzw
湖北武汉 s qs{ ww qw s qs{ ww qw s qsu tt qu s qwy
山东济南 s qsz vy q{ s qs| wu qt s qsw ut qt s qw{
河南新县 s qty xz qt s qts vx qs s qsu z qu s qzt
河南三门峡 s qsz v| qu s qs| w| qz s qsu tt qt s qwy
浙江杭州 s qsz vx qs s qtt xx qs s qsu t qs s qxt
上海 s qsx vx qz s qsy wu q| s qsv ut qw s qvx
广西兴安 s qux yz qy s qtt u| qz s qst u qz s q|w
广西桂林林科所 s qtt ww qv s qs| v{ qu s qsw tz qw s qyv
贵州正安黄秧坪 s quy x| qt s qtx vx qv s qsv x qz t qtt
贵州正安流渡 s qtx ww qu s qtx ww qu s qsv ts qu s q{w
贵州正安桴嫣 s qux xz qz s quu wv q{ s qsu w qz t quy
贵州正安谢坝 s qux xz qz s quu wv q{ s qsv { q| s qz|
贵州遵义 s qsx u| qt s qs| xw qv s qsv ty qz s qwt
贵州惠水 s qs| vy q| s qs| vy q| s qsy uy qu s qyt
四川成都 s qs| ws q| s qts wx qx s qsv tv qy s qxy
河北保定 s qs| wu q| s qs{ v{ qt s qsw t| qs s qxv
河北石家庄 s qs| v{ qx s qtu w{ qu s qsv tv qw s qyu
天津 s qtu ww qs s qtu ww qs s qsv tu qs s qy|
北京植物园 s qtt vy qz s qtw wy qz s qsx ty qz s qzy
辽宁丹东 s qtv wt q| s qtv wt q| s qsx ty qu s qz|
辽宁大连 s qs| vw qy s qtv xs qs s qsw tx qw s qyz
广东南雄 s qtv w{ qu s qts vz qs s qsw tw q{ s qy{
福建宁德 s qts wz qy s qs{ v{ qt s qsv tw qv s qxv
山西太原 s qtt wv q| s qtt wv q| s qsv tu qt s qyu
陕西西安 s qsy u| qx s qtt xy qs s qsv tw qx s qxt
注 }× ƒ为各黄酮苷元占总黄酮的百分比
#|sw#
第 ux卷第 z期
usss年 z月
中 国 中 药 杂 志
Χηινα ϑουρναλ οφ Χηινεσε Ματερια Μεδιχα
∂ ²¯ qux o‘²qz∏¯¼ ousss
3 讨论
国内外采用 ‹°≤ 法测定银杏叶中黄酮苷黄酮
苷元成分含量的报道也较多≈x ∗ z  o但由于银杏叶中
黄酮类成分复杂 o直接用 ‹°≤ 测定甙类成分分离
效果不好 ~采用梯度洗脱高效液相分析常引起基线
漂移 o给定量来误差 ∀本文中的 ‹°≤ 方法 o测定经
纯化处理后的银杏叶样品 o能很好的分离黄酮中 v
个主要苷元 o且保留时间短 o稳定性好 ∀以该苷元成
分的含量换算出总黄酮含量 o为准确 !快速的测定多
个银杏叶样品的总黄酮含量提供了一个有效方法 ∀
本实验结果表明 o各产地银杏叶黄酮类成分含量存
在的较大的差异 ∀其中 v个主要苷元成分大部分产
地是以槲皮素含量最高 o山奈酚次之 o而异鼠李素含
量最低 ~总黄酮含量范围为 s qvx h ∗ t quy h o其中在
全国各产区中产量大的江苏邳州 !广西兴安 !贵州正
安 !湖北商南等产地的银杏叶总黄酮类成分进行了
测定 o还不能全面的说明银杏叶质量的优劣 ∀因此
还有待于对其银杏叶内酯等其它有效成分进行分析
比较研究 ∀
≈参考文献 
≈t  5全国中草药汇编6编写组 1 全国中草药汇编 1 上册 1 北京 }人
民卫生出版社 ot|{u1u|x q
≈u  ‹¤¶¯ µ¨ „ o≥·¬¦«¨µ’ o ¬¨¨µ…qŒ§¨ ±·¬©¬¦¤·¬²± ¤±§ ⁄¨ ·¨µ°¬±¤·¬²± ²©
·«¨ ƒ¯ ¤√²±²¬§¶ ©µ²° Γινκγο βιλοβα ¥¼ ‹°≤ q ≤«µ²°¤·²ªµo
t||u oysxktl }wt q
≈v  曾建国 o杜方麓 1 银杏叶及其提取物中黄酮甙测定法再探 1 中
草药 ot||z ou{k增刊l }yt q
≈w  陈仲良 1 银杏叶提取物的化学成分和制剂的质量 1 中国药学
杂志 ot||y ovtkyl ovuy q
≈x  庄向平 o虞杏英 o杨更生 o等 1 银杏叶中黄酮含量的测定和提取
方法 1 中草药 ot||u ouvkvl }tuu q
≈y  ²¥¶·¨¬± „ o•¬¨·¶¦«2­¤®²o‹¤±ª2…¨ µµ∏µ¬¨µ o¨·¤¯ q≥ ¤¨¶²±¤¯ ∂¤µ¬2
¤·¬²±¶²©·«¨ ƒ¯ ¤√²±²¬§¶≤²±·¨±·©µ²° Γινγο βιλοβα ¨¤√ ¶¨q°¯ ¤±·¤
 §¨ot||t oxzkxl }wvs q
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[ Αβστραχτ] Οβϕεχτιϖε:ײ¦²°³¤µ¨ ·«¨ ¦²±·¨±·¶²©©¯¤√²±²¬§¶¬±·«¨ ¯¨ ¤√ ¶¨²© Γινκγο βιλοβα ª¤·«¨ µ¨§©µ²°
vx ³µ²§∏¦¬±ª ¤µ¨¤¶qΜετηοδσ: ≥ ³¨¤µ¤·¬±ª ¤±§ §¨·¨µ°¬±¬±ª v ©¯¤√²±²¬§ ¤ª¯¼¦²±¨ ¶o ∏´¨µ¦¨·¬±o®¤¨ °³©¨µ²¯ ¤±§
¬¶²µ«¤°±¨ ·¬±o¥¼ «¬ª« ³¨µ©²µ°¤±¦¨ ¬¯´∏¬§ ¦«µ²°¤·²ªµ¤³«¼ q¤±§ ·«¨ µ¨ ¥¼ ¦¤¨¦∏¯¤·¬±ª ·«¨ ·²·¤¯ ¦²±·¨±·¶ ²©
©¯¤√²±²¬§¶qΡεσυλτσ:׫¨ ¦²±·¨±·¶²©©¯¤√²±²¬§¶¬±·«¨ ¯¨ ¤√ ¶¨²© Γ . βιλοβα ª¤·«¨ µ¨§©µ²° §¬©©¨ µ¨±·³µ²§∏¦¬±ª¤µ¨¤¶
¤µ¨ §¬©©¨ µ¨±·o¥∏·¬±·«²¶¨ ª¤·«¨ µ¨§©µ²° °¬½«²∏o«¨ ±ª. ¤± ÷¬±ª. ¤±o„±¯ ∏o¨·¦q¤³³¨ ¤µ«¬ª«¨µq
[ Κεψ ωορδσ] Γινκγο βιλοβα ~ ‹°≤ ~©¯¤√²±²¬§¶
≈责任编辑 王康正 
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