全 文 ：贝母辛平喘作用及机制研究
赵 　益1 ,朱卫丰1 ,2 ,刘红宁1 ,2 ,余日跃2 ,梁迎春3 3
(11 现代中药制剂教育部重点实验室 ,江西 南昌 　330004 ; 21 江西中医学院 ,江西 南昌 　330004 ;
31 北京杰华生物工程研究院 ,北京 　100102)
摘 　要 :目的 　探讨彭泽贝母有效成分贝母辛平喘作用及机制。方法 　在离体器官水平 ,采用气管条浴槽实验方
法 ,观测不同浓度的贝母辛对乙酰胆碱 (Ach) 、组胺 ( His) 、CaCl2 、β受体阻断剂、一氧化氮合酶抑制剂 5 种刺激因
素诱发的气管平滑肌收缩的影响。结果 　贝母辛 (01046、01092 mmol/ L) 使 Ach 诱发的大鼠、豚鼠气管平滑肌的
EC50增大。贝母辛 (01092 mmol/ L) 对 His 的 EC50无影响。贝母辛 (01092 mmol/ L) 对 CaCl2致气管平滑肌收缩
的 EC50均无显著性差异。贝母辛 3 个剂量对 Ach 引起的气管平滑肌细胞内钙的释放具有显著的抑制作用 ( P <
0105、0101、01001) ,且具有剂量依赖关系 ;但对细胞外钙的内流均无明显抑制作用。与普萘洛尔 + DMSO 组比较 ,
普萘洛尔 + 贝母辛组对气管平滑肌张力无降低作用 ,加入 L2NAME 后 ,贝母辛组 3 个剂量均未能抑制气管平滑肌
的收缩。结论 　贝母辛通过作用于 M 受体、兴奋β受体和拮抗内钙释放 ,促进生成和释放一氧化氮从而舒张气管
平滑肌 ,实现平喘的作用。
关键词 :贝母辛 ; 气管平滑肌 ; 平喘
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0420597205
Antiasthmatic mechanism of peimisine in Fritill a ria mona nt ha
ZHAO Yi1 , ZHU Wei2feng1 ,2 , L IU Hong2ning1 ,2 , YU Ri2yue2 , L IAN G Ying2chun3
(11 Key Laboratory of Modern Preparation of Chinese Materia Medica , Minist ry of Education , Nanchang 330004 ,
China ; 2. J iangxi College of Traditional Chinese Medicine , Nanchang 330004 , China ;
3. Beijing Jiehua Institute of Bioenginnering , Beijing 100102 , China)
Abstract : Objective 　To app roach t he antiast hmatic mechanism of peimisine in Fri t i l l ari a monat ha.
Methods 　To observe t he effect of peimisine in t he different concent ration on the t racheal smoot h muscle
cont raction i n vi t ro organ induced by Ach , His ,β2receptor , CaCl2 , Pro , in nit ricoxide synt hase catastalti2
ca. Results 　Peimisine (0. 046 and 0. 092 mmol/ L) made t he EC50 induced by Ach increased ; The EC50 of
peimsine (0. 092 mmol/ L) was not changed by His ; The EC50 of peimisine (0. 092 mmol/ L) was not sig2
nificantly different to t racheal smooth muscle cont raction induced by CaCl2 ; Three dosages of peimisine
had significant inhibition on t he release of int racellular calcium induced by CaCl2 ( P < 0105 , 0. 01 , and
0. 001) in a dose2dependent manner . But ext racellular calcium influx was not significantly inhibited. Com2
paring wit h t he L2NAM E + dissolvant group , t hree dosages of peimisine couldn′t rest rain t he cont raction
and had no significant difference. Conclusion 　Peimisine could affect M2receptor , excitβ2receptor , rest rain
t he release of internal calcium , and promote to releaseing nit rogen monoxidum in order to relax t racheal
smooth muscle and relieve asthma.
Key words : peimisine ; t racheal smoot h muscle ; antiast hmatic
　　彭泽贝母 Fri t i l l ari a monant ha Migo 主要分
布于江西省彭泽、湖口等县 ,地处长江中下游南岸地
区。在当地 ,人们一直用其代替川贝母使用 ,临床上
用干燥鳞茎入药 ,具有清热润肺、化痰止咳的功效 ,
用于治疗痰热咳嗽、痰多胸闷、气管炎和慢性支气管
炎等常见疾病。本课题组已经研究了彭泽贝母止咳
平喘的药效物质基础 ,表明彭泽贝母中的生物碱和
皂苷类成分是其主要的活性物质。贝母辛是从彭泽
贝母中分离出的生物碱类有效成分[1 ] ,但到目前为
止 ,还未见对贝母辛舒张支气管平滑肌的报道。本
研究首次在器官水平上阐明了贝母辛在舒张支气管
平滑肌上的作用 ,揭示出平喘机制 ,为彭泽贝母的质
量标准中活性指标确定提供了依据 ,为进一步深入
开发江西彭泽贝母新资源提供科学依据。
·795·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
3 收稿日期 :2008208226　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金重点项目 (30160097)
作者简介 :赵　益 ,女 ,药理学硕士 ,助教 ,主要从事中药药理研究和新药开发。
Tel : 13576290914 　E2mail : zhysyz2008 @yahoo. com. cn
1 　材料
111 　动物 : Wistar 大鼠 , (220 ±20) g ; Hartley 豚
鼠 , (350 ±50) g ,雄性 ,军事医学科学院提供。
112 　试剂 :氯化乙酰胆碱、磷酸组胺 ( Sigma) ; K2H
营养液 (1 000 mL 蒸馏水中 NaCl 7. 67 g、KCl
0. 344 g、MgCl2 0. 254 g、CaCl2 0. 202 g、Na HCO3
2. 125 g、KH2 PO4 0. 16 g、葡萄糖 2. 189 g) ;二甲基
亚砜 (DMSO ,北京化学试剂公司) ,无钙 K2H 营养
液 (除去 CaCl2 ,加入 EGTA 011μmol/ L) ,普萘洛
尔 ;L2N2硝基精氨酸甲酯 ( L2NAM E) ;贝母辛对照
品由本实验室自制 ,结构经光谱鉴定 ,经高效液相色
谱分析质量分数大于 99 %。
113 　仪器 :Medlab2V/ 4CS 生物信号采集系统 (南
京易美科技有限公司) ;麦氏浴槽、恒温循环器 (军
事医学科学院实验仪器厂) 。
114 　药物的配制 :精确称取贝母辛 10 mg ,先加入
320μL DMSO 完全溶解后 ,再加入 680μL 蒸馏水
混匀制备成混悬液 ,质量浓度为 10 mg/ mL 。药液
配制后放置于 4 ℃冰箱 ,3 d 使用完后 ,再新鲜配
制。药物最终浓度为 01023、01046、01092 mmol/
L 。DMSO 最终体积分数为 01064 %。氯化乙酰胆
碱 :用生理盐水配制成 1 ×10 - 6 、1 ×10 - 5 、1 ×10 - 4 、
1 ×10 - 3 、0101、011、1 mol/ L 。组胺 :1 ×10 - 9 ～1 ×
10 - 3 mol/ L 。
2 　实验方法[2 ]
211 　气管条的制备 :处死大鼠或豚鼠 ,迅速取出主
气管置于冷的通有 95 % O2 + 5 % CO2 混合气体的
K2H 营养液中 ,剔除周围的软组织。大鼠气管剪成
4～5 mm 的气管条 ;将豚鼠气管剪成螺旋条 ,宽约 3
mm ,长约为 20 mm。悬挂于盛有 20 mL K2H 营养
液的恒温 (37 ±015) ℃麦氏浴槽中 ,上端接肌肉张
力换能器 ,传入 MadLab 生物医学信号采集处理系
统 ,调零 ,1 g 定标 ,大鼠气管条初负荷给予约 1 g ,
豚鼠将气管螺旋条初负荷给予 115～2. 0 g。每 15
min 换 1 次液 ,平衡约 1 h 后开始正式实验。
212 　对乙酰胆碱 (Ach) 诱导的大鼠、豚鼠气管平
滑肌收缩的影响 :待气管螺旋条基线稳定后 ,用累积
技术从 1 ×10 - 9 ～1 ×10 - 3 、0101 mol/ L 开始建立
Ach 量效曲线 ,记录各浓度引起气管收缩张力值
( E) ,以加入药物孵育前的 Ach 引起的最大收缩幅
度 ( Emax ) 为 100 % ,以 E/ Emax ×100 % 计算收缩
率 ,测定 Ach 量效关系曲线。待标本张力不再上升
时冲洗气管条数次 ,每 15 min 更换 1 次 K2H 营养
液 ,待基线恢复到实验前 ,分两次分别加入终浓度为
01046、01092 mmol/ L 贝母辛溶液 ,孵育 20 min ,并
分别重复上述 Ach 的加入过程 ,记录各浓度引起气
管收缩幅度 ,并重复建立 Ach 量效曲线。同上操作
设置溶剂 (DMSO) 对照组。
213 　对组胺 ( His) 诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的
影响 :方法参照 212 ,将 Ach 换成 His (1 ×10 - 9 ～
1 ×10 - 3 mol/ L) ,累积加药间隔时间为 90 s ,贝母辛
浓度为 01092 mmol/ L 。
214 　对 CaCl2诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的影响 :
豚鼠离体气管螺旋条先用 K2H 液平衡 1 h 后 ,再用
无钙 K2H、无钙高钾 K2H 液各平衡 30 min 之后 ,
每间隔 5 min 累积加入 CaCl2 ,使其浴槽中浓度为
1 ×10 - 5 、3 ×10 - 5 、1 ×10 - 4 、3 ×10 - 4 、1 ×10 - 3 、
3 ×10 - 3 、0101 mol/ L ,记录各浓度引起气管收缩幅
度 ( E) ,以 CaCl2引起的最大收缩幅度 ( Emax ) 作为
100 % , E/ Emax ×100 % 计算收缩率 ,测定其量效关
系曲线。冲洗气管条数次 ,在无钙高钾液中平衡后 ,
加入贝母辛 (01092 mmol/ L) ,孵育 20 min ,同上述
加样制备 CaCl2量效曲线。
215 　对 Ach 诱发的两相收缩的影响 :豚鼠离体气
管螺旋条于 K2H 液中平衡约 1 h 后 ,换用无钙 K2
H 液平衡 30 min ,加入 Ach (浴槽终浓度 2 ×10 - 5
mol/ L) ,待收缩至坪值 ,加入 CaCl2 (浴槽终浓度为
2 ×10 - 5 mol/ L) 以恢复 K2H 液中的 Ca2 + 浓度 ,使
气管条进一步收缩并达稳定 ,此时作为最大收缩
100 % ,以此为对照 ,冲洗数遍 ,重新平衡后 ,在无钙
K2H 液中给予不同浓度的贝母辛 (01023、01046、
01092 mmol/ L) 孵育 20 min 后 ,重复上述步骤 ,记
录各点气管平滑肌张力值 ,获得相应的收缩率。
216 　β受体阻断剂对贝母辛舒张气管平滑肌的影
响 :豚鼠气管螺旋条于 K2H 液中平衡约 1 h 后 ,加
入 Ach ,使其终浓度为 1 ×10 - 5 mol/ L ,观察收缩达
坪值后 ,再累积加入贝母辛 ,使累积浓度为 01023、
01046、01092 mmol/ L ,记录各时间点张力值 ,计算
其收缩幅度。冲洗数遍平衡后 ,先加入终浓度为
012 mmol/ L 的普萘洛尔 ,孵育 5 min ,同上述方法
加样 ,同时设置溶剂对照组。记录各时间点张力值 ,
以加入药物孵育前的 Ach 引起的收缩为 100 % ,计
算其收缩率。
217 　一氧化氮合酶抑制剂对贝母辛舒张气管平滑
肌的影响 :方法参照 216 ,将 Ach 浓度换成 2 ×10 - 5
mol/ L ,加入药物换为 L2NAM E , 1 ×10 - 4 mol/ L ,
同法操作测定。
218 　数据处理 :实验数据用 x ±s 表示 ,多组间统
·895· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
计学差异性比较用方差分析法 ( AVONA ) ,采用
SPSS 1115 软件进行。
3 　结果
311 　对 Ach 诱导的大鼠、豚鼠气管平滑肌收缩的
影响 :在加入贝母辛 01046、01092 mol/ L 孵育 20
min 后 ,可使 Ach 收缩大鼠、豚鼠气管平滑肌的
EC50都增大 ,且和溶剂对照组比较均有显著性差异
( P < 0105、0101、01001) 。随着贝母辛浓度的增加 ,
Ach 量效曲线右移 ,引起大鼠气管平滑肌的最大收
缩张力降低 ,而对豚鼠的最大张力无影响 ,显示贝母
辛对 Ach 具有显著的非竞争性拮抗作用 ,提示贝母
辛非竞争性拮抗气管平滑肌 M 受体从而抑制 Ach
引起的平滑肌收缩。结果中还可看出 , 溶剂
01064 % DMSO 对大鼠的气管平滑肌无影响 ,与对
照组比较无显著差异 ,但对豚鼠气管平滑肌的收缩
率有所增加且最大张力为 (2157 ±0133) g ,说明豚
鼠气管平滑肌对 DMSO 很敏感。结果见表 1 和图
1、表 2 和图 2。
表 1 　贝母辛对 Ach 收缩大鼠离体气管平滑肌作用的
影响 ( x ±s)
Table 1 　Effect of peimisine on tracheal smooth muscle
contraction of rats induced by Ach ( x ±s)
组 　别 C/ (mmol ·L - 1 ) 样本数 Ach 的 EC50 / (mmol ·L - 1 ) 最大张力/ g
对照 - 10 01022 4 ±01001 1 3122 ±1111
DMSO - 10 01029 5 ±01000 9 2193 ±1108
贝母辛 01046 8 01038 0 ±01001 2 3 2140 ±1103
01092 9 01051 0 ±01001 5 3 3 2125 ±0158 3
　　与对照组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 vs cont rol group
图 1 　贝母辛对 Ach 收缩大鼠离体气管平滑肌
量效曲线的影响
Fig. 1 　Effect of peimisine on dose2effect curve
of tracheal smooth muscle contraction
of rats induced by Ach
312 　对 His 诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的影响 :
加入贝母辛 01092 mmol/ L 孵育 20 min 后 , 与
DMSO 比较 , His 的 EC50 和最大张力无差异 ,说明
贝母辛对 His 的 EC50无影响。但加入贝母辛后 ,使
得 His 每个浓度引起的收缩率都有下降作用。结
表 2 　贝母辛对 Ach 收缩豚鼠离体气管平滑肌作用的
影响 ( x ±s)
Table 2 　Effect of peimisine on tracheal smooth
muscle contraction of guinea pig induced
by Ach ( x ±s)
组　别 C/ (mmol ·L - 1 ) 样本数 Ach 的 EC50 / (mmol ·L - 1 ) 最大张力/ g
对照 - 8 01009 5 ±01000 4 2151 ±0137
DMSO - 7 01006 4 ±01000 8 2157 ±0133
贝母辛 01046 6 01029 5 ±01001 1 3 3 3 2124 ±0172
01092 8 01027 5 ±01000 9 3 3 3 2144 ±0127
　　与溶剂组比较 : 3 3 3 P < 01 001
　　3 3 3 P < 01 001 vs DMSO group
图 2 　贝母辛对 Ach 收缩豚鼠离体气管平滑肌
量效曲线的影响
Fig. 2 　Effect of peimisine on dose2effect curve
of tracheal smooth muscle contraction
of guinea pig induced by Ach
果见表 3 和图 3。
313 　对 CaCl2诱导的豚鼠气管平滑肌收缩的影响 :
与 DMSO 组比较 ,贝母辛 01092 mmol/ L 对 CaCl2
的 EC50稍有降低且最大张力也无显著性差异 ;DM2
SO 对 CaCl2 的量效曲线无影响。与 DMSO 组比
较 ,贝母辛 01092 mmol/ L 在 CaCl2 浓度从 1 ×
10 - 4～0101 mol/ L 时对气管平滑肌收缩有一定的
舒张趋势 ,降低气管平滑肌的收缩幅度 ,但无显著性
差异。实验结果提示 ,在加入高钾去极化引起钙内
流后 ,气管平滑肌呈明显收缩 ,但加入贝母辛孵育后
对钙内流无抑制作用。结果见表 4 和图 4。
314 　对 Ach 诱发的两相收缩的影响 :加入 Ach 后
引起的细胞内钙释放所占比例较小 ,收缩幅度较小 ,
加入CaCl2 后Ach引起的细胞外钙内流致气管平
表 3 　贝母辛对 His 收缩豚鼠离体气管平滑肌作用的
影响 ( x ±s , n = 8)
Table 3 　Effect of peimisine on tracheal smooth
muscle contraction of guinea pig
induced by His ( x ±s , n = 8)
组 　别 C/ (mmol ·L - 1 ) His 的 EC50 / (mmol ·L - 1 ) 最大张力/ g
对照 - 01 007 9 ±01 000 8 21 25 ±01 36
DMSO - 01 006 3 ±01 000 7 21 18 ±01 22
贝母辛 01 092 01 007 9 ±01 001 0 21 06 ±01 24
·995·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
与 DMSO 组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101 　3 3 3 P < 01 0013 P < 0105 　3 3 P < 0101 　3 3 3 P < 01 001 vs DMSO group
图 3 　贝母辛对 His 收缩豚鼠离体气管平滑肌
量效曲线的影响
Fig. 3 　Effect of peimisine on dose2effect curve
of tracheal smooth muscle contraction
of guinea pig induced by His
表 4 　贝母辛对 CaCl2收缩豚鼠气管平滑肌作用的影响
( x ±s)
Table 4 　Effect of peimisine on tracheal smooth
muscle contraction of guinea pig
induced by CaCl2 ( x ±s)
组 　别 C/ (mmol ·L - 1 ) 样本数 CaCl2的 EC50 / (mmol ·L - 1 ) 最大张力/ g
对照 - 8 0137 ±0120 1120 ±0123
DMSO - 8 0137 ±0128 1135 ±0126
贝母辛 01092 7 0165 ±0125 1127 ±0127
图 4 　贝母辛对 CaCl2收缩豚鼠气管平滑肌
量效曲线的影响
Fig. 4 　Effect of peimisine on dose2effect curve
of tracheal smooth muscle contraction
of guinea pig induced by CaCl2
滑肌的收缩明显。从表 5 中可看出 ,与 DMSO 组比
较 ,贝母辛 3 个剂量对 Ach 引起的气管平滑肌细胞
内钙的释放具有显著的抑制作用 ( P < 0105、0101、
01001) ,且对细胞内钙的释放抑制作用具有剂量依
赖关系 ;但是对于 Ach 引起的气管平滑肌细胞外钙
的内流均无明显抑制作用 ;DMSO 组对 Ach 引起的
气管平滑肌依赖细胞外钙内流有促进作用 ,与对照
组比较有差异 ,DMSO 对气管平滑肌的依外钙收缩
有影响。在依外钙性收缩未被拮抗的情况下 ,贝母
辛 01023 mmol/ L 可抑制 Ach 引起的总的收缩。
以上结果说明贝母辛拮抗内钙释放的作用为其抑制
Ach 收缩气管平滑肌效应的主要机制。
表 5 　贝母辛对 Ach 诱发豚鼠气管条两相收缩的影响
( x ±s , n = 6)
Table 5 　Effect of peimisine on two2phase of tracheal
smooth muscle contraction of guinea pig
induced by Ach ( x ±s , n = 6)
组　别 C/ (mmol ·L - 1 ) 依内钙收缩率/ % 依外钙收缩率/ % 总收缩率/ %
对照 - 2110 ±318 7910 ± 318 10010 ± 010
DMSO - 1818 ±518 △△△ 10815 ±2017 127. 3 ±24. 7
贝母辛 01023 710 ±518 3 3 8711 ±1217 9411 ±1713 3
01046 516 ±317 3 3 3 9815 ±1215 10214 ±1215
01092 415 ±310 3 3 3 9616 ±2410 9711 ±2414
　　与 DMSO 组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 　3 3 3 P < 01001
　　与对照组比较 : △△△P < 01 001
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 　3 3 3 P < 01001 vs DMSO group
　　△△△P < 01 001 vs cont rol group
315 　β受体阻断剂对贝母辛舒张气管平滑肌的影
响 :与 DMSO 组比较 ,贝母辛 01046、01092 mmol/
L 对 Ach 引起的气管平滑肌收缩有明显的抑制作
用 ,具有显著性差异 ( P < 01001) ,贝母辛 01023
mmol/ L 无显著的抑制作用 ;在加入β受体阻断剂
普萘洛尔后 ,Ach 引起的气管收缩有明显升高 ,与
DMSO 组比较具有显著性差异 ( P < 0105) ;与普萘
洛尔 + DMSO 组比较 ,普萘洛尔 + 贝母辛组对气管
平滑肌张力无降低作用 ,说明贝母辛不能拮抗 Ach
所致气管平滑肌痉挛 ,由此可见 ,贝母辛松弛气管平
滑肌的作用有可能通过兴奋β受体所致。见表 6。
表 6 　β受体阻断剂对贝母辛舒张豚鼠气管平滑肌的
影响 ( x ±s , n = 8)
Table 6 　Effect ofβ2receptor blocking pharmacon
on relaxation of peimisine on tracheal
smooth muscle of guinea pig ( x ±s , n = 8)
组　别 C/ (mmol ·L - 1) 收缩率/ %
DMSO - 931 3 ± 51 6
普萘洛尔 + DMSO 01 2 1061 0 ±341 5 3
贝母辛 01 023 851 4 ±111 4
01 046 581 9 ±201 02 3 3 3
01 092 381 5 ±251 6 3 3 3
普萘洛尔 + 贝母辛 01 2 + 01 023 1171 9 ±281 6
01 2 + 01 046 971 9 ±381 6
01 2 + 01 092 751 9 ±421 4
　　与 DMSO 组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 3 P < 01001
　　3 P < 01 05 　3 3 3 P < 01001 vs DMSO group
316 　一氧化氮合酶抑制剂对贝母辛舒张气管平滑
肌的影响 :与 DMSO 组比较 ,贝母辛 01046、01092
mmol/ L 对 Ach 引起的气管平滑肌收缩有明显的
·006· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
抑制作用 ,具有显著性差异 ( P < 0105、0101) ,且呈
现出一定剂量依赖关系 ;加入 L2NAM E 抑制酶活
性后 ,气管的收缩明显升高 ,收缩率从 ( 9513 ±
1317) % 升高到 (12413 ±2215) % ,且有显著性差
异。加入 L2NAM E 后 ,贝母辛组 3 个剂量均未能
抑制气管平滑肌的收缩 ,与 L2NAM E + DMSO 组
比较无显著性差异。结果见表 7。
表 7 　L2NAME 对贝母辛舒张豚鼠气管平滑肌的影响
( x ±s , n = 6)
Table 7 　Effect of L2NAME on relaxtion of peimisine
on tracheal smooth muscle of guinea pig
( x ±s , n = 6)
组　别 C/ (mmol ·L - 1) 收缩率/ %
DMSO - 951 3 ±1317
L2NAME + DMSO 01 1 1271 9 ± 611 3 3 3
贝母辛 01 023 901 5 ±1012
01 046 701 8 ±2016 3
01 092 441 7 ±2914 3 3
L2NAME + 贝母辛 01 1 + 01023 1241 3 ±2215 3
01 1 + 01046 1121 2 ±2218
01 1 + 01092 1101 8 ±2414
　　与 DMSO 组比较 : 3 P < 0105 　3 3 P < 0101 　3 3 3 P < 01 001
　　3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 　3 3 3 P < 01001 vs DMSO group
4 　讨论
　　彭泽贝母已经被确定为国产贝母属植物在江西
的新分布 ,彭泽贝母中贝母辛的量远高于市售川贝
母和浙贝母 ,目前已经建立了贝母的定量测定方
法[3 ] ,可作为彭泽贝母的特征化学成分之一 ,为建立
可靠的彭泽贝母质量标准提供了指标选择。
　　贝母的平喘作用机制一般认为与其松弛支气管
平滑肌 ,减轻气管、支气管痉挛 ,改善通气状况有关。
支配气道平滑肌的神经主要有肾上腺素能神经和胆
碱能神经 ,以及非肾上腺素能非胆碱能神经。兴奋
支气管肾上腺素能受体 ,抑制胆碱能神经或阻断 M
受体均可引起支气管平滑肌舒张。因此本实验从兴
奋或抑制受体的角度出发 ,研究贝母辛在舒张气管
平滑肌上的作用 ,从而进一步揭示贝母辛的作用靶
受体和机制。从结果可知 ,贝母辛通过作用于 M 受
体、兴奋β受体和拮抗内钙释放 ,促进生成和释放
NO 从而达到舒张气管平滑肌 ,实现平喘的作用。
离体气管法是筛选平喘药常用的实验方法。豚
鼠气管对药物的反应较其他动物气管的反应更敏
感 ,且更接近于人的气管 ,因此豚鼠的气管是离体实
验常用的标本。由于离体实验脱离了正常的生理环
境 ,所得出的结论也有一定的局限性 ,所以在以后的
研究中 ,本课题组将从整体实验出发 ,更全面充分地
考察贝母辛的作用机制。
致谢 :军事医学科学院放射与辐射医学研究所
吕秋军教授对本实验的大力支持。
参考文献 :
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[ 3 ] 　黄兴发1 泽贝母化学成分及贝杏甘口含片的研究 [ D]1 南
昌 :江西中医学院 , 20041
正常人外周血单个核细胞对雷公藤内酯醇的耐药特征和机制的研究
张文娟 ,涂胜豪 3 ,胡永红 ,方 　赫
(华中科技大学同济医学院附属同济医院 中西医结合科 ,湖北 武汉 　430030)
摘 　要 :目的 　探讨正常人外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cells , PBMC) 对雷公藤内酯醇 (t rip2
tolide , TP) 的耐药特征和机制。方法 　采用递增 TP 剂量的浓度梯度诱导法使 PBMC 产生耐药。M TT 比色法
测定细胞对药物的敏感性及耐药指数 (resistance index , RI) ,逆转录2聚合酶链反应 (RT2PCR) 法分别检测正常对
照组和耐药组 PBMC 中多药耐药相关基因 (multidrug resistance gene , MDR1) 、多药耐药相关蛋白 ( multidrug
resistance2associated protein , MRP) 和肺耐药蛋白 (lung resistance2related protein , L RP) 的表达。酶联免疫吸附
试验 ( EL ISA) 检测上清液中 IL21β的量。结果 　和正常细胞组相比 ,耐药组细胞的群体倍增时间延长 217 h ,RI
是 1199 ,并且 MDR1 mRNA、MRP mRNA、L RP mRNA 表达量明显增加 ( P < 0101) 。TP 能显著抑制正常组 PB2
MC 分泌 IL21β ( P < 0105) ,但对耐药组的抑制作用不明显 ( P > 0105) 。结论 　TP 体外持续诱导可使正常人 PB2
MC 产生耐药 ,其耐药性的产生涉及多个相关基因的表达 ,这可能是导致类风湿关节炎 (RA) 病人临床服用雷公藤
·106·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
3 收稿日期 :2008208207　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :张文娟 (1982 —) ,女 ,湖北省武汉市人 ,硕士 ,主要从事风湿病方面的研究。Tel : 13720161213 　E2mail : zwj221 @163. com3 通讯作者　涂胜豪　Tel : (027) 83663379 　E2mail : shtu @tjh. tjmu. edu. cn