全 文 ：·药理与临床·
决明子提取物对高血脂模型小鼠聚脂基因表达的影响
刘淑敏 ,孙 　超 3 ,谢伟华
(西北农林科技大学动物科技学院 , 陕西 杨凌 　712100)
摘　要 :目的 　研究决明子提取物对高血脂模型小鼠血脂水平和聚脂基因转录表达的影响。方法 　用两种不同剂
量的决明子提取物对小鼠进行 sc 给药 ,分别于 1、2、4 h 摘眼球取血后处死。试剂盒检测血脂生化指标 ,荧光定量
PCR 技术检测聚脂相关基因的转录表达规律。结果 　决明子提取物处理的高血脂模型小鼠 ,总胆固醇 ( TC) 、甘
油三酯 ( T G) 和低密度脂蛋白胆固醇 (LDL2C) 均有显著 ( P < 0105) 或非常显著 ( P < 0101) 降低 ,高密度脂蛋白
胆固醇 ( HDL2C) 非常显著升高 ( P < 0101) ,总体上低剂量处理效果较好。脂肪组织中决明子提取物上调过氧化
物酶体增殖物激活受体γ( PPARγ) 、固醇调节元件结合蛋白 (SREBP21c) 、激素敏感性脂酶 ( HSL) 和甘油三酯水
解酶 ( T GH) 的转录表达 ,1 h 达非常显著 ( P < 0101) ,下调脂肪酸合成酶 ( FAS) ,同样在 1 h 达非常显著 ( P <
0101) 。肌肉中决明子提取物下调 PPARγ、SREBP21c、HSL 和 T GH 的转录表达 ,其中 PPARγ在 2 h 达非常显著
( P < 0101) ,SREBP21c、HSL 在 1 h 达非常显著 ( P < 0101) , T GH 在 2 h 达非常显著 ( P < 0101) ,上调 FAS 转录
表达且 1 h 达非常显著 ( P < 0101) 。结论 　决明子提取物可调节高血脂模型小鼠的血脂 ,并通过调控脂肪组织和
肌肉中脂代谢相关基因的转录表达来调节动物体脂代谢。
关键词 :决明子 ; 血脂 ; 聚脂基因
中图分类号 :R286126 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0420583205
Effect of Semen Cassiae extracts on expression of l ipogenesis genes
in hyperl ipidemia model mice
L IU Shu2min , SUN Chao , XIE Wei2hua
(College of Animal Sciences and Technology , Northwest Agriculture and Foresty University , Yangling 712100 , China)
Abstract : Objective 　To st udy t he effect s of S emen Cassi ae ext ract on lipid metabolism of hyperlipi2
demia model mice. Methods 　In t his experiment , mice were sc injected wit h two different concent ration of
S emen Cassi ae ext ract , and sacrificed at 1 , 2 , and 4 h. The blood samples were wit hdrawn f rom the eye
vein. The plasma biochemical indexes were detected by using t he kit , and real time PCR was used to ana2
lyze the expression of adipogenesis genes wit h time series. Results 　For hyperlipidemia model mice t reated
with S emen Cassi ae ext ract serum total cholesterol ( TC) , t riglyeride ( T G) , and low density lipop rotein
cholesterol (LDL2C) could be decreased significantly ( P < 0105 , 0. 01) , while high density lipoprotein cho2
lesterol ( HDL2C) in serum could be increased significantly ( P < 0101) . In adipose tissue , S emen Cassi ae
ext ract up2regulated PPARγ, SREBP21c , HSL , and T GH , the level was very significant at 1 h ( P <
0101) , but FAS was down2regulated. In muscle , S emen Cassi ae ext ract down2regulated the expression
level of PPARγ, SREBP21c , T GH , and HSL , and PPA Rγwas very significant at 2 h ( P < 0101) ; SREBP2
1c and HSL were very significant at 1 h ( P < 0101) ; T GH was very significant at 2 h ( P < 0101) . The ex2
pression of FAS was up2regulated and very significant at 1 h ( P < 0101) . Conclusion 　S emen Cassi ae ex2
t ract could regulated t he blood2fat level in hyperlipidemia model mice and it could adjust lipid metabolism
by regulating t he expression of lipid metabolism gene.
Key words : S emen Cassi ae ; blood2fat ; adipogenesis genes
　　人和动物的肥胖症与其体脂代谢情况密切相
关。决明子为豆科植物决明 Cassi a obt usi f ol i a L .
或小决明 C. tora L . 的干燥成熟种子。其性味甘、
苦、咸 ,微寒 ,入肝、肾、大肠经 ,具有清肝明目、润肠
·385·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
3 收稿日期 :2008207228　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家自然科学基金资助项目 (30871785) ; 教育部新世纪优秀人才计划资助项目 (NCET20620865)
作者简介 :刘淑敏 (1982 —) ,女 ,河北衡水人 ,在读硕士 ,研究方向为动物生物技术。E2mail : shuminhebei @126. com3 通讯作者　孙　超　Tel : (029) 87092102 　E2mail : sunchao2775 @163. com
通便、降脂瘦身的功能。决明子尤其是醋酸乙酯可
溶性成分 ,可以通过抑制低密度脂蛋白 (LDL ) 氧
化作用对动脉粥样硬化产生预防作用[1 ] 。然而 ,决
明子提取物调节脂代谢相关基因表达的研究还未见
报道。本实验旨在研究决明子提取物在短期内对高
血脂模型小鼠血脂和聚脂基因表达的调节作用 ,为
进一步研究决明子调控脂代谢的分子机制提供理论
依据。
1 　材料与方法
111 　材料 : 昆明种小鼠 , 雄性 , 60 只 , 体质量
(2010 ±2. 0) g ,动物合格证号 SCXK(军) 20072007 ,
购于第四军医大学实验动物中心。决明子提取物
(主要为蒽醌类成分 ,约占 1 %) ,批号 20071028 ,西
安小草植物科技有限责任公司。RNA 提取试剂盒
TRIp ure Reagent (百泰克公司) ,反转录试剂盒
Revert Aid TM First St rand cDNA Synt hesis Kit
( Ta KaRa ) , Ta KaRa SYBR Premix Ex Taq kit
( Ta KaRa DRR041A ,大连 Ta KaRa 公司) ,总胆固
醇 ( TC) 、甘油三酯 ( T G) 、高密度脂蛋白2胆固醇
( HDL2C) 测定试剂盒 (中生北控生物科技股份有
限公司) ,其他试剂为国产分析纯。
112 　小鼠分组及处理 :小鼠按体质量随机分为对照
组 ,决明子提取物低、高剂量 (5、10 g/ kg) 组 ,每组
15 只。除对照组注射生理盐水外 ,其余各组均采用
文献方法[2 ] ,单次 ip 泰洛沙泊 (广州伟伯化工有限
公司 ,批号 20071012) 350 mg/ kg , 20 h 后建成高
脂血模型。决明子提取物溶于生理盐水中 ,将其制
成高、低浓度的均匀悬浊液备用。禁食 12 h ,给药
组和模型组小鼠分别 sc 温度在 37 ℃左右的对应
的药物或等体积的生理盐水 ,分别于给药 1、2、4 h
后 ,摘眼球取血然后脱颈处死 ,取腹部脂肪和股骨部
肌肉置于液氮中保存。
113 　血脂检测 :将新鲜血液制成血清后 ,按照试剂
盒操作说明书 ,使用紫外分光光度计检测 TC、T G、
HDL2C。低密度脂蛋白胆固醇 (LDL2C) 根据公式
[LDL2C = TC - ( HDL2C - T G/ 5) ]计算。
114 　总 RNA 提取及 R T2PCR :按照 TRIZOL 总
RNA 提取试剂盒说明书提取脂肪和肌肉的 RNA ,
提取完成之后 ,用 1 % 琼脂糖凝胶检测 ,并用 Fer2
mentas RevertAidTM First St rand cDNA Synt hesis
Kit 试剂盒合成 cDNA 第一链 :D EPC 水 6μL ,总
RNA 5μL ,012μg/μL random hexamers p rimer 1
μL ,70 ℃孵育 5 min ,置冰上冷却后加试剂 : 4μL
Buffer (5μL ×) ,2μL dN TP Mixture (10 mmol/
L) , 1μL Rnasinhibitor (20 U/μL ) , 25 ℃孵育 5
min ,加 1μL 反转录酶 (200 U/μL) ,总体积 20μL ;
25 ℃孵育 10 min ,42 ℃反应 60 min ,70 ℃延伸
10 min 终止反应 ,冰上冷却。合成的 cDNA 产物在
- 20 ℃保存。
115 　荧光定量 PCR 扩增 :引物序列由 Primer ex2
press 2. 0 软件根据 Genbank 提供的序列进行设
计 ,引物参数见表 1。PCR 反应在 R G3000A (Cor2
bet t) 机器上操作 ,反应总体积为 20μL ,灭菌水 714
μL 、SYBR Premix Ex TaqTM 10μL 、上下游引物各
018μL 、cDNA 产物 110μL 。反应条件 :95 ℃预变
性 10 s ;循环条件 :95 ℃、5 s , 60 ℃、35 s ,40 个循环
反应 ,同时检测荧光信号 ,各基因的表达水平由β2
actin 进行均一化 ,ΔΔCT 法检测实时定量 PCR 实
验中各基因表达的相对差异。通过检测各脂代谢相
关基因和β2actin 在实验小鼠组织中的相对表达量 ,
记录 CT 值。以模型组在 1 h 的 CT 值为基准设为
对照 ,其余各组脂代谢基因的ΔCT 值分别与其相
应对照组中ΔCT 值作差 ,得到ΔΔCT。ΔΔCT =
(CT靶基因 - CTβ2actin ) 处理组 - ( CT靶基因 - CTβ2actin ) 对照组 ,
脂代谢基因在各组织中的表达水平的变化采用靶基
因表达水平差异倍数 = 2 - ΔΔCT计算。因模型组的基
因表达水平的变化值为 1100 ,故省略。
表 1 　PCR 引物参数
Table 1 　Parameter of PCR Primers
基因 引物序列 (5′23′) GenBank登陆号 扩增目的片段长度/ bp
β2actin 正向引物 AATCGTGCGTGACATCAA NM 00739312 179
反向引物 AGAA GGAA GGCTGGAAAA
PPARγ 正向引物 ACCACTCGCA TTCCTTTGAC U01664 261
反向引物 CCACAGACTCGGCACTCAAT
SREBP21c 正向引物 CAGTACCTTTGGTTGTGGAC AB017337 213
反向引物 GCAAGACA GCA GATTTA TTCA
FAS 正向引物 GGGTCTA TGCCACGATTC BC046513 271
反向引物 TGTCCCATGTTGGATTTG
HSL 正向引物 GACTCACCGCTGACTTCC NM 010719 162
反向引物 CTGTCTCGTTGCGTTTGTA
TGH 正向引物 TTGCTACTCTTTCTGGGTGT NM 053200 171
反向引物 CATCAA TCACA GTAGGGA GG
116 　数据处理 :采用 SPSS 1310 统计软件单因素方
差 (ONE WA Y ANOVA ) 分析 ,数据以 x ±s 表示。
2 　结果与分析
211 　对小鼠血脂生化指标的影响 :见表 2 ,模型组
与对照组相比 ,血脂 T G 和 TC 水平均有极显著提
高 ( P < 0101) ,而且在模型组此两者的水平均达到
所使用试剂盒高血脂症的标准 ,因此可以确定高血
脂模型建立成功。高血脂的小鼠用决明子提取物处
理后 ,血脂 T G 和 TC 水平均显著 ( P < 0105) 或非
·485· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
常显著 ( P < 0101) 降低[3 ] ,其中在前 2 h 内高剂量
降低的较快 ,2 h 后低剂量持续缓慢降低 ,但高剂量
有所回升 ,说明低剂量比高剂量作用缓和 ,效果较
好。用决明子处理的高血脂模型小鼠 ,血脂 HDL2C 水平极显著升高 ,LDL2C 水平极显著的降低 ,甚至降低了 35 %～60 % , HDL2C 和 LDL2C 水平同 TG 和TC 一样 ,随着时间的变化低剂量作用缓和 ,没有高剂量那样的上下波动 ,对机体的代谢负面影响也小。
表 2 　决明子提取物对高血脂小鼠血脂生化指标的影响 ( x ±s , n = 5)
Table 2 　Effect of Semen Cassiae extracts on plasma lipid biochemical indexes of hyperlipidemia mice ( x ±s , n = 5)
组别 时间/ h T G/ (mmol ·L - 1) TC/ (mmol ·L - 1) HDL2C/ (mmol ·L - 1) LDL2C/ (mmol ·L - 1)
对照 1 01857 ±01 026 3 3 21 586 ±01350 3 3 11 537 ±01076 3 3 11115 ±01 119 3 3
2 01869 ±01 009 3 3 21 573 ±01201 3 3 11 643 ±01018 3 3 11104 ±01 037 3 3
4 01802 ±01 095 3 3 21 668 ±01076 3 3 11 659 ±01130 3 3 11101 ±01 050 3 3
模型 1 21461 ±01 102 41 257 ±01670 11 095 ±01070 31654 ±01 136
2 21457 ±01 086 41 141 ±01538 11 073 ±01052 31569 ±01 017
4 21516 ±01 034 41 136 ±01019 11 092 ±01039 31545 ±01 590
决明子提取物 1 11816 ±01 136 3 31 531 ±01156 3 11 360 ±01029 3 3 21413 ±01 370 3 3
(5 g ·kg - 1) 2 11643 ±01 086 3 3 31 269 ±01023 3 3 11 391 ±01056 3 3 21062 ±01 128 3 3
4 11590 ±01 070 3 3 31 071 ±01076 3 3 11 489 ±01110 3 3 11795 ±01 050 3 3
决明子提取物 1 11663 ±01 057 3 3 31 472 ±01057 3 11 446 ±01073 3 3 21235 ±01 103 3 3
(10 g ·kg - 1) 2 11537 ±01 115 3 3 21 871 ±01210 3 3 11 610 ±01129 3 3 11436 ±01 060 3 3
4 11780 ±01 360 3 31 496 ±01093 3 11 359 ±01025 3 3 21289 ±01 850 3 3
　　　与模型组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01
　　　3 P < 0105 　3 3 P < 0101 vs model group
212 　对转录因子 PPARγ时序表达的影响 :见表 3。
决明子提取物处理后 ,脂肪组织中 PPARγ表达量
在低剂量时持续上升 ,2 h 前变化幅度较大 ,2 h 后
变化幅度小但依然在升高 ;高剂量处理后 ,2 h 前上
升较快甚至作用效果快于低剂量 ,其后表达量有所
下降 ,但与模型组相比仍能达到显著水平 ( P <
0101) 。肌肉中 PPARγ表达量在低剂量时持续下
降 ,1 h 达到显著水平 ( P < 0101) ,随后下降幅度很
小与 1 h 没有显著差异 ;高剂量处理后 PPA Rγ表
达量 1 h 有所升高 ( P > 0105) ,随后大幅度的降低
并且能达到显著水平 ( P < 0101) 。说明脂肪组织中
决明子提取物对 PPARγ的影响与肌肉中相反 ,存
在组织差异性。
213 　对转录因子 SREBP21c 时序表达的影响 :见表
3。决明子提取物处理后 ,脂肪组织中 SREBP21c 表
达量在低剂量时持续上升 ,2 h 前变化幅度较大 ,2 h
后变化幅度较小 ;高剂量处理后 ,2 h 前上升较快甚
至作用效果快于低剂量 ,其后表达量有所下降 ,但与
模型组相比仍能达到显著水平 ( P < 0101) 。说明脂
肪组织中 SREBP21c 剂量效应同 PPARγ。肌肉中
SREBP21c 表达量低剂量时在 1 h 降低并达到显著
水平 ( P < 0101) ,高剂量时在 4 h 达到显著水平
( P < 0101) ,其余均差异不显著。表明决明子提取
物对聚脂转录因子 SREBP21c 基因的表达具有调节
作用 ,但存在组织特异性。
214 　对脂肪合成酶 (FAS) 时序表达的影响 :见表 3。
表 3 　决明子提取物对高血脂小鼠聚脂基因表达的影响 ( x ±s , n = 5)
Table 3 　Effect of Semen Cassiae extract on expression of lipogenesis genes of hyperlipidemia mice ( x ±s , n = 5)
组别 组织 时间/ h PPARγ SREBP21c FAS HSH T GH
决明子提取物 脂肪 1 11 140 ±01009 3 3 11130 ±01 009 3 3 01 770 ±01007 3 3 11380 ±01 010 3 3 11 530 ±01011 3 3
(5 g ·kg - 1) 2 11 410 ±01012 3 3 △△ 11380 ±01 020 3 3 △△ 01 460 ±01006 3 3 △△ 11510 ±01 012 3 3 △△ 11 930 ±01012 3 3 △△
4 11 550 ±01006 3 3 △△ 11530 ±01 058 3 3 △△ 01 260 ±01009 3 3 △△ 11640 ±01 009 3 3 △△ 21 050 ±01010 3 3 △△
肌肉 1 01 640 ±01009 3 3 01860 ±01 006 3 3 11 180 ±01010 3 3 01700 ±01 008 3 3 01 980 ±01009 3
2 01 580 ±01008 3 3 △△ 01980 ±01 010 △△ 11 120 ±01012 3 3 △ 01798 ±01 006 3 3 △△ 01 950 ±01010 3 3
4 01 560 ±01009 3 3 △△ 11030 ±01 008 3 △△ 11 150 ±01008 3 3 01690 ±01 007 3 3 01 730 ±01006 3 3 △△
决明子提取物 脂肪 1 11 280 ±01009 3 3 11310 ±01 008 3 3 01 550 ±01003 3 3 11660 ±01 009 3 3 11 920 ±01010 3 3
(10 g ·kg - 1) 2 11 480 ±01010 3 3 △△ 11490 ±01 013 3 3 △△ 01 340 ±01008 3 3 △△ 11730 ±01 013 3 3 △△ 21 230 ±01014 3 3 △△
4 11 380 ±01012 3 3 △△ 11320 ±01 014 3 3 01 440 ±01007 3 3 △△ 11390 ±01 014 3 3 △△ 11 770 ±01009 3 3 △△
肌肉 1 11 030 ±01007 3 11020 ±01 007 3 11 100 ±01011 3 3 01920 ±01 009 3 3 01 936 ±01003 3 3
2 01 660 ±01009 3 3 △△ 11010 ±01 010 11 240 ±01009 3 3 △△ 01860 ±01 009 3 3 △△ 01 630 ±01008 3 3 △△
4 01 603 ±01004 3 3 △△ 01910 ±01 009 3 3 △△ 11 110 ±01013 3 3 01700 ±01 004 3 3 △△ 01 938 ±01006 3 3
　　　与模型组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01 ; 与同组 1 h 比较 : △P < 01 05 　△△P < 01 01
　　　3 P < 0105 　3 3 P < 0101 vs model group ; △P < 01 05 　△△P < 0101 vs 1 h of same group
·585·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
决明子提取物处理后 ,小鼠脂肪组织 FAS 表达量在
低剂量时开始下降 ,1 h 达到显著水平 ( P < 0101)
且保持持续下降趋势 ,高剂量处理 2 h 前较低剂量
处理下降快 ,虽 2 h 后稍有升高但仍与模型组有显
著差异 ( P < 0101) ;肌肉中 FAS 表达量在低剂量 1
h 前上升随后有一段时间的降低 ,4 h 又能回升到 1
h 的水平 ,变化幅度小但总体是上升的 ,高剂量处理
2 h 前升高 ,2 h 后又有降低但仍能达到显著升高的
水平。表明脂肪组织中决明子提取物对 FAS 的影
响与肌肉中相反 ;脂肪组织中 2 h 之前高剂量处理
效果好于低剂量 ,2 h 之后低剂量处理效果好于高
剂量 ;肌肉中高剂量效果好于低剂量。说明决明子
提取物防止内脏周围脂肪积聚和体质量增加可能与
降低脂肪组织中脂肪合成酶 FAS 表达量有关。
215 　对脂肪分解相关酶 HSL 时序表达的影响 :见
表 3。决明子提取物处理后 ,脂肪组织中 HSL 表达
量低剂量时一直保持上升趋势 ,2 h 前上升的幅度
较大 ,2 h 后变化则趋于平缓 ,高剂量处理 2 h 前持
续上升 ,2 h 后有显著降低 ( P < 0105) ,但与模型组
相比仍能保持显著的上升趋势 ( P < 0101) ;在肌肉
中 HSL 的表达量低剂量时与脂肪组织中高剂量的
变化趋势相同 ,高剂量在 4 h 内持续降低 ,变化较平
缓。说明脂肪组织中 2 h 前高剂量好于低剂量 ,2 h
之后低剂量好于高剂量 ;肌肉中高剂量效果好于低
剂量。
216 　对脂肪分解相关酶 T GH 时序表达的影响 :见
表 3。决明子提取物处理后 ,脂肪组织中 T GH 的
表达规律与 HSL 的相同 ;表明决明子提取物对脂
肪分解基因 HSL 、T GH 的表达具有显著调节作用 ,
这可能是控制机体脂肪沉积的另一个主要原因。在
肌肉中 T GH 的表达量低剂量时持续下降 ,2 h 达到
显著差异 ( P < 0101) ,2 h 后继续保持显著的降低
( P < 0101) ,高剂量时 2 h 前显著降低并且效果快于
低剂量 ,2 h 后又有所回升。说明决明子提取物对肌
肉中 TGH 的影响随着时间的变化与剂量有关 ,2 h
前高剂量效果较好 ,2 h 后低剂量效果更好些。
3 　讨论
　　高血脂症和脂类代谢紊乱与冠心病、动脉粥样
硬化、充血性心脏病、2 型糖尿病等密切相关[4 ] 。然
而过高的 T G、TC、LDL2C 和过低的 HDL2C 是高
血脂症的集中体现。决明子提取物处理的高血脂模
型小鼠 , TC、T G 和 HDL2C 均有显著 ( P < 0105)
或非常显著 ( P < 0101) 降低 , HDL2C 有非常显著
升高 ( P < 0101) ,总体上低剂量效果较好。这一结
论与先前的报道一致[3 ] 。
脊椎动物细胞内的脂类平衡由膜结合转录因子
的一个家族 SREBP 调控。SREBPs 属于碱性螺旋2
环2螺旋2亮氨酸拉链转录因子家族 ( b HL H2Zip ) 。
SREBPs 进入核内 ,与固醇调控元件 (SRE) 或在其
启动子区内的 E2盒结合 ,激活与胆固醇及脂肪酸合
成相关基因的转录。目前 ,已证实 SREBPs 是调控
胆固醇、脂肪酸和甘油三酯及脂肪细胞分化过程的
关键转录调控因子。SREBP21c 是其中的一种异构
体形式 ,具有潜在的生脂作用 ,故也被称作脂肪细胞
定向分化因子 1 (ADD1) ,是重要的转录调控因子 ,
直接激活脂肪酸、甘油三酯合成和代谢的 30 多个
基因[5 ,6 ] 。SREBP21c 作为前期脂肪形成基础的螺
旋2环2螺旋的转录因子 ,可诱导 PPA Rγ的表达 ,
PPARγ参与脂代谢相关基因的表达调控 ,可以促进
脂肪细胞分化、调控多种脂肪细胞分泌的蛋白质因
子基因的表达 ,并且 PPARγ是许多肥胖病、糖尿病
治疗药物作用的分子靶点。中药与 PPARγ的研究
也日趋深入 ,越来越多的中药包括单味药、有效成分
及复方制剂都是通过调节 PPARγ的表达起到治疗
肥胖病作用[7 ] 。本实验发现 , SREBP21c 转录水平
在决明子提取物处理的高血脂模型小鼠的内脏脂肪
组织和肌肉中并没有降低而是升高了。同样在脂肪
组织中 ,决明子提取物能显著上调 PPARγ的转录
表达 ,这与 Pang 等[8 ] 的研究相吻合。肌肉中决明
子提取物下调 PPARγ、SREBP21c 的转录表达 ,其
中 PPARγ在 2 h 达非常显著差异 ( P < 0101) ,随
后基本保持平衡 , SREBP21c 在 1 h 达显著差异
( P < 0101) ,随后稍有变化但不显著 ( P > 0105) 。
肌肉中 PPA Rγ、SREBP21c 的变化情况与脂肪组织
中有所不同 ,此两种基因在肌肉中的表达情况相对
复杂 ,有利于肌内脂肪的形成。
FAS 可以促使脂肪组织利用葡萄糖等营养物
质转化为脂肪酸 ,FAS 表达水平的升高显著增加甘
油三酯在体内的沉积而导致肥胖[9 ] 。本研究中脂肪
组织的 FAS 转录表达下调 ,在 1 h 达到非常显著水
平 ( P < 0101) ,随后表达量持续下降 ,结合血脂中
T G 在决明子提取物处理后存在显著降低的趋势 ,
推测决明子提取物可通过抑制 FAS 转录表达从而
降低机体脂肪的沉积 ,减少肥胖的发生率。肌肉中
FAS 的表达量虽有上下波动的趋势 ,但总体上是上
升的 ,可见决明子提取物处理可作用于肌内脂肪并
增加其水平。
HSL 一直以来被认为是脂肪组织中脂解反应
·685· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
的限速酶 ,且 HSL 过表达抑制了甘油三酯在脂肪
细胞中的堆积。本研究发现 ,决明子提取物能上调
脂肪组织 HSL 和 T GH 的转录表达 ,1 h 达到显著
水平 ( P < 0101) ,这一结果与人类及啮齿类动物肥
胖个体中 HSL 表达量下降的结论相一致[10 ] ,说明
T GH 与 HSL 相同 ,其表达量高低与个体肥胖程度
存在着相关性。用决明子提取物处理后的肌肉组
织 , T GH 和 HSL 的表达量总体呈下降趋势 ,且
HSL 的趋势更显著 ,这与先前的研究相一致[11 ] ,
HSL 基因 mRNA 的表达量与哈萨克羊肌内脂肪量
呈负相关 ,同样说明决明子提取物处理高血脂模型
小鼠能增加其肌内脂肪的量。
本实验主要针对决明子提取物对高血脂小鼠的
血脂和聚脂基因的影响展开的研究 ,结果证实决明
子提取物在调血脂和调节聚脂基因表达上的确发挥
着重要的作用。然而决明子提取物本身富含多种有
效成分 ,是功能多样的一种中药 ,其作用机制、作用
途径也并非单一 ,这就造成了决明子研究的复杂性 ,
因此对其调脂有效成分的研究有待进一步深入。
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肾康注射液对慢性马兜铃酸肾病模型大鼠肾间质纤维化的拮抗作用
乔颖进1 ,2 ,谌贻璞1 3 ,芮宏亮1 ,董鸿瑞1 ,刘章锁2
(11 卫生部中日友好医院 肾病中心 ,北京 　100029 ; 21 郑州大学第一附属医院 肾病风湿科 ,河南 郑州 　450052)
摘 　要 :目的 　研究肾康注射液对慢性马兜铃酸肾病 (CAAN) 模型大鼠肾间质纤维化的拮抗效应。方法 　雄性
SD 大鼠随机分为对照组、模型组和干预组 ,每组 6 只。于 0、1、4、8、12 周末分别检测体质量、尿糖、24 h 尿蛋白定
量和肌酐清除率 (Ccr) ;第 12 周末处死大鼠留取肾组织 ,行 Masson 染色观察肾间质纤维化程度 ;并用逆转录实时
定量聚合酶链反应和免疫组织化学方法检测肾组织中转化生长因子2β1 ( T GF2β1 ) 、结缔组织生长因子 (CT GF) 、纤
溶酶原激活物抑制物21 ( PA I21) 、金属蛋白酶组织抑制物21 ( TIMP21) 和 Ⅰ型胶原 (Col I) mRNA 及蛋白表达。结
果　与对照组比较 ,模型组和干预组大鼠体质量明显减轻 ( P < 0101) ,但干预组大鼠体质量明显高于模型组 ,12 周
末时存在显著差异 ( P < 0105) 。与对照组相比 ,模型组大鼠 24 h 尿蛋白定量显著上升 ( P < 0101) ,Ccr 显著下降
( P < 01 01) ;12 周时肾间质纤维化面积显著增加 ( P < 0101) ;肾组织内上述各检测指标的 mRNA 及蛋白表达均显
著上调 ( P < 0101) 。与模型组相比 ,干预组大鼠各时间点 Ccr 均显著升高 ( P < 0101) ;第 12 周时 24 h 尿蛋白定量
及肾间质纤维化面积均显著降低 ( P < 0105、0101) ;上述高表达的 mRNA 及蛋白指标均被显著抑制 ( P < 0105) 。
结论 　肾康注射液可能通过抑制肾组织促细胞外基质 ( ECM) 合成因子 ( TF G2β1 、CT GF) 及抗 ECM 降解因子
( TIMP21、PAI21) 生成 ,而改善 CAAN 的肾间质纤维化及肾功能。
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3 收稿日期 :2008207209　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :卫生部属 (管) 医疗机构临床学科重点项目
作者简介 :乔颖进 (1982 —) ,女 ,河南洛阳人 ,肾病专业硕士生 ,研究方向为慢性肾衰竭的防治。
Tel : (0371) 66862202 　E2mail : abbie0616 @sina. com3 通讯作者　谌贻璞　Tel : (010) 84206174 　E2mail : Chen yipu @medmail . com. cn