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人参果中化合物 K的HPLC法测定¹
王继彦1 , 2, 李向高 2 ,杨秀伟3*
( 1. 长春中医药大学药学院、吉林 长春　130117; 2. 吉林农业大学中药材学院, 吉林 长春　130118;
3. 北京大学药学院 天然药物及仿生药物国家重点实验室, 北京　100083)
　　人参 Panax ginseng C. A . Meyer 为五加科人
参属植物, 不但其根药用, 而且其叶和果实亦供药
用,并有广泛的生物学活性。笔者从人参浆果中分离
得到苯甲酸、异人参皂苷 Rh3、人参皂苷 Rh2、人参
皂苷 Rh1、人参皂苷 Rg1、人参皂苷 Re、人参皂苷
Rd、人参皂苷Rc、人参皂苷 Rb2、人参皂苷 Rb1、B-谷
甾醇和化合物K 12个化合物[ 1, 2]。药理学研究表明:
不但化合物 K 原形有广泛的药理学活性[ 3～7] ,而且
其在肝脏转化形成的脂肪酸酯( EM 1)在抗癌转移
方面亦表现出了特殊性,如在离体试验中, 化合物 K
及其代谢产物 EM1皆能抑制 B16- F10黑色素瘤
细胞的生长,但EM1的毒性比化合物K 低。在整体
试验中,将 EM1和化合物 K 分别直接注入(静脉注
射可能会导致血浆酯酶水解 EM1)肝移植性 B16-
F10黑色素瘤细胞癌灶内,发现 EM1对肿瘤细胞生
长的抑制作用比化合物 K 更强; 在抗癌细胞转移方
面,两者的作用几乎相同。因此,化合物 K 在人参果
药理作用上可能扮演了重要作用。因此本文报道人
参果中化合物 K 的 HPLC 法测定, 为其质量控制提
供方法。
1　仪器、试剂和样品
Agilent 1100型高效液相色谱仪(四元梯度泵、
再线脱气机、柱温箱、VWD 检测器) , Agilent Chem
Stat ion 色谱数据工作站。
实验材料于 2001年 8月上旬采自吉林省长白
县,经吉林农业大学中药材学院李向高教授鉴定为
人参P . ginseng . C. A. M eyer 的新鲜果实。
2　方法与结果
2. 1　色谱条件: Agilent Zorbax SB-C18色谱柱( 150
mm×4. 6 mm, 5 Lm) ; 流动相: H2O ( A ) -CH3CN
( B) ,二元梯度洗脱: 0→16 min, 56%B; 16→20 min,
56%→100%B; 20→38 m in, 100%B; 38→45 min,
100%→56%B, 45→60 min, 56%B; 检测波长: 203
nm ;体积流量: 1. 0 mL/ m in; 柱温: 40 ℃。供试品和
对照品溶液进样量分别为 20 LL。所有组分皆在 50
m in内分析完成, 分析时间定为 60 min。
2. 2　溶液的制备
2. 2. 1　对照品溶液的制备: 精密称取在 60 ℃减压
干燥 10 h 的化合物 K 10 mg 置于 10 mL 量瓶中,
用甲醇溶解并稀释至刻度。精密吸取 0. 4 mL 溶液
置 10 mL 量瓶中,加甲醇稀释至刻度,摇匀,即得。
2. 2. 2　供试品溶液的制备:取两份粉碎后的人参果
肉冻干粉( 40目) ,每份 2 g ,精密称定, 1份干燥测定
含水量; 1份置索氏提取器中加氯仿-甲醇( 15∶1)
100 mL,于水浴上加热回流提取至无色。将提取液
滤过后置水浴上蒸发皿中挥干,加甲醇溶解、滤过并
定容于 25 mL 量瓶中,摇匀,微孔滤膜滤过,即得供
试品溶液,备用。
2. 3　线性关系考察: 精密称取在 60 ℃减压干燥 10
h 的化合物 K 10 mg 于 10 mL 量瓶中,用甲醇溶解
并定容,使对照品溶液的质量浓度约为 1 mg / mL。
分别吸取此溶液 50、100、200、400、800、1 600、3 200
LL 分别置于 10 mL 量瓶中。加甲醇稀释至刻度, 即
得不同质量浓度的对照品溶液。分别精密吸取 20
LL,进样分析。以色谱峰面积( Y )为纵坐标, 进样质
量( X )为横坐标, 绘制标准曲线, 得回归方程: Y =
405. 381 9 X + 32. 485 6( r= 0. 999 24) ,表明化合物
K 在 0. 103～6. 592 Lg 与峰面积呈良好的线性关系。
·225·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008 年 2 月
¹ 收稿日期: 2007-04-10作者简介:王继彦( 1953—) ,男,长春人,教授,博士,主要从事中药化学和中药新药开发研究。
T el: ( 0431) 86172211　E-mail: jiyanw ang 126@ 126. com
* 通讯作者　杨秀伟　Tel: ( 010) 82805106　E-mail : xw uam g@ bjmu . edu. cn
2. 4　精密度试验: 精密吸取 1 mg / mL 化合物 K 对
照品溶液 20 LL,按上述色谱条件进行分析, 重复进
样 5 次, 测定化合物 K 峰面积积分值, 计算得其
RSD为 2. 07%。
2. 5　稳定性试验: 精密吸取同一供试品溶液 20
LL,在 0、2、4、8 h 按上述色谱条件进样,测定化合物
K 峰面积积分值,结果其 RSD为 2. 6%。表明供试
品溶液在 8 h 内稳定。
2. 6　重现性试验:取同一批人参果肉样品 5份, 精密
称定,按上述方法处理制备供试品溶液。进样 20 LL,
按上述色谱条件进行分析,测定化合物K 的峰面积积
分值,计算其质量分数, 结果其 RSD为 2. 91%。
2. 7　回收率试验: 精密称取 6份含化合物 K 0. 26
mg / g 人参果肉干燥粉末, 每份 2. 0 g, 分别精密加
入 0. 5 mg 化合物 K对照品,制备供试品溶液, 按上
述色谱条件进行分析, 结果化合物 K 的平均回收率
为 99. 76% , RSD为 3. 18%。
2. 8　样品测定:分别取 6 批人参的鲜果肉冻干粉
( 40目) 2 g , 精密称定, 按上述样品制备方法处理,
分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液 20 LL, 以
外标法按上述色谱条件进行分析,结果见表1。色谱
行为见图 1。
表 1　人参浆果中化合物 K的测定结果( n= 3)
Table 1　Determination of compound K
in P . ginseng berry ( n= 3)
批号 化合物 K/ % 批号 化合物 K/ %
1-1 0. 032 6 2-2 0. 026 7
1-2 0. 033 8 3-1 0. 027 8
2-1 0. 027 4 3-2 0. 027 1
t/ min
* -化合物 K
* -compound K
图 1　化合物 K对照品( A)和人参浆果(B)的
HPLC色谱图
Fig. 1　HPLC Chromatograms of compound K reference
substance ( A) and P . ginseng berry ( B)
3　讨论
有关生物体液和组织中化合物 K 的分析,已开
发了酶免疫测定法[ 8]。EM1中化合物K 的定量测定
时,采用 10%NaOH-MeOH 溶液水解 EM1,水饱和
正丁醇萃取,直接注入 LiChroCART 250-4 LiChro-
spher 100 RP-18 色谱柱, 流动相为 CH 3CN-H2O
( 55∶ 45) , 检测波长 为 203 nm, 体积流量 为
1. 0 mL/ min进行测定 [ 9]。
　　本实验建立了人参浆果中化合物 K 的 HPLC
色谱测定法,样品处理简单,分析方法灵敏,化合物
K 在 0. 103～6. 592 Lg 与峰面积线性关系良好; 并
且结果重现性好, 加样回收率高, 平均回收率为
99. 76%, RSD 为 3. 18% ,测定结果准确, 适用于人
参浆果中化合物 K 的定量分析,并对含有化合物 K
的其他产品的检测亦具有一定的参考价值。
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·226· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 39卷第 2期 2008 年 2 月