全 文 ：11 44%。表明供试品溶液在室温用量瓶密闭放置,
在 12 h内基本稳定。
21 8 精密度试验:精密吸取批号 700040裸花紫珠
片供试品溶液,进样 10 LL, 重复进样 6次, 测定木
犀草素的峰面积值, 求得 RSD为 11 34%。
21 9 重现性试验:取批号 700700裸花紫珠片 6份,
制备供试品溶液, 测定质量分数, 求得 RSD 为
11 93%。
21 10 回收率试验: 取批号 700700裸花紫珠片(含
木犀草素 21 843 1 mg/ g ) 01 2 g,分别称取 6份,精密
称定,分别精密加入 01 51 mg/ mL 木犀草素对照品
溶液 1 mL,制备供试品溶液, 测定, 计算, 结果平均
加样回收率为 1001 3% , RSD为 11 92%。
21 11 样品测定: 取 3 批样品, 依法制备供试品溶
液。精密吸取供试品溶液和木犀草素对照品溶液
10 LL, 注入液相色谱仪, 依照上述色谱条件测定峰
面积,按标准曲线法计算木犀草素的质量分数,结果
见表 1。
表 1 裸花紫珠片中木犀草素的测定结果(n= 3)
Table 1 Determination of luteolin in Luohua
Zizhu Tablets ( n= 3)
批号 木犀草素/ ( mg # 片- 1)
700060 1. 466 7
700070 1. 527 0
700080 1. 578 6
3 讨论
裸花紫珠片糖衣片的原质量标准均没有定量测
定项。本实验选择裸花紫珠中的有效成分之一木犀
草素作为指标性成分, 采用 HPLC 法测定其质量分
数,从而控制裸花紫珠片的质量,为裸花紫珠片的质
量控制提供了一个可行的测定方法。同时该法还可
以供制定裸花紫珠药材质量标准时参考。
参考文献:
[ 1] 宋永强,谌乐刚.分光光度法测定裸花紫珠片中总黄酮含量
[ J] .海南医学, 2005, 16( 6) : 152.
[ 2] 王祝年,韩 壮,崔海滨,等.裸花紫珠的化学成分[ J] .热带亚
热带植物学报, 2007, 15( 04) : 359-362.
RP-HPLC法测定麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱
祝 婧,钟凌云* ,龚千锋,张的凤
(江西中医学院药学院 ,江西 南昌 330004)
摘 要:目的 确定盐酸麻黄碱测定方法, 以检测麻黄不同炮制品中麻黄碱成分的变化。方法 采用 RP-H PLC
法。色谱柱为 Dikma Diamonsil C18 ( 250 mm @ 41 6 mm, 5 Lm) ;流动相: 乙腈-0. 1%磷酸(含 01 1%三乙胺)水溶液
( 4B 96) ; 体积流量 : 11 0 mL / min; 检测波长: 210 nm; 柱温: 30 e 。结果 盐酸麻黄碱线性回归方程为 Y =
291 939 X + 01 4095, r = 0. 999 5, 盐酸麻黄碱进样量在 01 06 ~ 11 8 Lg 与峰面积线性良好。加样回收率为
1031 78% , RSD为 11 89%。麻黄碱的量为生品> 沸水泡麻黄> 蜜炙麻黄> 炒麻黄。结论 建立的高效液相色谱测
定盐酸麻黄碱方法提取步骤简便,重现性高, 可以作为盐酸麻黄碱测定方法。
关键词:麻黄; 炮制;盐酸麻黄碱; 高效液相色谱
中图分类号: R286. 02 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 04-0580-03
麻黄为麻黄科多年生草本状小灌木植物草麻黄
Ephedr a sinica Stapf、中 麻 黄 E. intermedia
Schrenk et C. A. M ey . 或木贼麻黄 E. equiset ina
Bge.的干燥草质茎, 具有发汗散寒、宣肺平喘、利水
消肿等功效。麻黄中含有生物碱、黄酮、黄烷、鞣质、
挥发油、有机酸、多糖等多种成分,目前对其药理毒
理作用研究较明确的只有生物碱类, 其中盐酸麻黄
碱被认为是麻黄宣肺平喘的药效成分之一。麻黄通
过炮制可以缓和其发汗作用,并增强止咳平喘功效,
目前临床使用和文献记载麻黄的炮制方法主要有蜜
炙法、炒黄法及沸水泡法。5中国药典62005 年版对
麻黄药材以盐酸麻黄碱作为质控指标, 但样品的前
#580# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月
* 收稿日期: 2008- 07-17 基金项目:国家/ 十一五0科技攻关项目( 2006BAI09B06- 08-05)作者简介:祝 婧( 1985 ) ) ,女,江西中医学院 2006级硕士研究生。
* 通讯作者 钟凌云 T el: ( 0791) 7118995 E- mail: l y1638163@ 163. com
处理方法较为复杂。为了建立高效快速准确的测定
方法,本实验确定了样品处理方法简单,准确性高和
重现性好的测定方法, 并对麻黄不同炮制品如蜜炙
麻黄、沸水泡麻黄、炒麻黄中盐酸麻黄碱进行测定,
以期发现不同炮制方法对盐酸麻黄碱的影响, 为探
讨麻黄炮制机制及制定饮片质量标准提供参考。
1 仪器与试药
Dionex Ult iM ate3000液相色谱仪, PDA ) 3000
二极管阵列紫外检测器, Chromeleon 工作站,
KQ3200超声波清洗器 (昆山市超声仪器有限公
司) , M et tler AE 240型十万分之一电子天平(瑞士
Mett ler) , Sar to rius万分之一电子天平(德国赛多利
斯) , Raynger ST 型红外测温仪 (美国 Ray tek ) ,
RE52CS 旋转蒸发仪(上海亚荣生化仪器厂)。
乙腈为色谱纯( Dikma) ,其他试剂均为分析纯,
水为娃哈哈纯净水。盐酸麻黄碱对照品 (批号:
171241-200405)由中国药品生物制品检定所提供。
麻黄药材由内蒙古赤峰荣兴堂药业有限公司提供,
经本校中药鉴定教研室诸小兰教授鉴定为麻黄科植
物草麻黄 E. sinica Stapf 的干燥草质茎。
2 方法与结果
21 1 炮制品的制备
21 11 1 麻黄生品的制备:取原药材,除去木质茎、残
根及杂质,抖净灰屑,切段。
21 11 2 蜜炙麻黄的制备:取炼蜜 4 g, 加01 5倍量开
水稀释,淋入 20 g 麻黄段中拌匀,闷润,置炒制容器
内,用文火加热, 炒至不粘手时, 取出晾凉。得率
791 78%。
21 11 3 沸水泡麻黄的制备[ 2] : 取麻黄段 20 g, 置容
器内,倒入沸水浸泡 3 h, 用清水洗净, 晾干。得率
941 36%。
21 2 对照品溶液的制备:精密称取盐酸麻黄碱对照
品 5 mg,置 50 mL 量瓶中, 用甲醇溶解并稀释至刻
度,摇匀。精密量取 15 mL 置 25 mL 量瓶中, 用流
动相稀释至刻度, 摇匀, 即得 (含盐酸麻黄碱 60
Lg/ mL) 。
21 3 供试品溶液的制备:精密称取麻黄及各炮制品
粗粉 01 5 g , 置于锥型瓶中, 加入甲醇-水( 1 B 1)约
45 mL,超声提取 30 min, 放至室温, 滤过, 加入甲
醇-水( 1 B1)定容至 50mL,即得。
21 4 色谱条件: 色谱柱为 Dikma Diamonsil C18
( 250 mm @ 41 6 mm, 5 Lm) ;流动相: 乙腈-01 1%磷
酸(含 01 1%三乙胺)水溶液( 4B 96) ; 体积流量: 11 0
mL/ min; 检测波长: 210 nm;柱温: 30 e 。
21 5 线性关系的考察:取盐酸麻黄碱对照品溶液 l、
5、10、15、20、25、30 LL 分别注入液相色谱仪, 测定
峰面积积分值。以峰面积对进样量进行回归,得回
归方程 Y= 291 939 X+ 01 4095, r= 01 999 5,表明盐
酸麻黄碱进样量在 01 06~ 11 8 Lg 与峰面积线性
良好。
21 6 精密度试验:取麻黄生品供试品溶液 10 LL 注
入液相色谱仪,连续进样 5次,测定盐酸麻黄碱峰面
积,计算得 RSD为 01 99%。
21 7 重现性试验:取麻黄生品粗粉 5份,每份01 5 g,
精密称定,制备供试品溶液,精密吸取此供试品溶液
10 LL 进样测定, 测定各样品中盐酸麻黄碱的质量
分数,计算得 RSD为 11 78%。
21 8 稳定性试验: 取麻黄生品供试品溶液分别于
0、2、4、8、12 h进样 10 LL,测定盐酸麻黄碱峰面积,
计算得 RSD为 01 38% ,表明供试品溶液在 12 h 内
稳定。
21 9 加样回收率试验: 精密称取麻黄生品粗粉
01 08、01 1、01 12 g 各 3 份, 分别加入 01 60、01 72、
01 88 mg/ mL 盐酸麻黄碱对照品溶液各 1 mL, 制备
供试品溶液, 进样测定, 计算得平均回收率为
1031 78%, RSD为 11 89% ( n= 9)。
21 10 样品测定:取麻黄生品、炮制品各01 5 g, 精密
称定,制备供试品溶液。分别精密吸取供试品溶液
10 LL, 注入液相色谱仪,测定峰面积,根据回归方程
计算盐酸麻黄碱质量分数, 结果见表 1和图 1。结
果表明,麻黄经过炮制后,各炮制品中麻黄碱均有所
下降,且以炒麻黄降低最多,盐酸麻黄碱从高到低依
次为生品麻黄、沸水泡麻黄、蜜炙麻黄、炒麻黄。
表 1 麻黄及其炮制品中盐酸麻黄碱的测定结果( n= 3)
Table 1 Determination of ephedrine hydrochloride
in Herba Ephedrae and its processed
products (n= 3)
样 品 盐酸麻黄碱/ %
麻黄生品 1. 465 2
蜜炙品麻黄 1. 044 5
沸水泡麻黄 1. 186 9
炒麻黄 0. 970 7
3 讨论
在提取工艺的考察试验中,选择了盐酸-乙醇超
#581#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月

t / min
*-盐酸麻黄碱
* -ephedrin e hydrochloride
图 1 盐酸麻黄碱( A)、麻黄生品( B)、蜜炙麻黄( C)、
沸水泡麻黄( D)和炒麻黄( E)的 HPLC图谱
Fig. 1 HPLC Chromatograms of ephedrine hydrochloride ( A) ,
Herba Ephedra (B) , Herba Ep hedra stir-fried with
honey (C) , Herba Ephedra soaked by boiling water
(D) , and Herba Ephedra stir-fried without supple-
ment material ( E)
声提取法[ 1] 、乙醚萃取法 [ 2]、氯仿萃取法[ 3]、甲醇-水
超声提取法[ 4] ,测定结果表明甲醇-水超声提取法的
提取效果最好, 且过程简便、提取时间短,重现性好,
故在实验中选用甲醇- 水超声提取法。
实验中分别使用了 DIKMA Diamonsil C18 ( 250
mm @ 41 6 mm, 5 Lm)、Hanbon Packing Linchro-
spher C18 ( 250 mm @ 41 6 mm , 5 Lm)以及 DIONEX
Acclaim 120 C18 ( 250 mm @ 41 6 mm, 5 Lm)色谱柱
进行考察, 在同样使用乙腈和 01 1%磷酸(含 01 1%
三乙胺)水溶液的流动相体系之下,同种成分在不同
的色谱柱中达到最佳分离的色谱条件不尽相同。通
过综合比较和分析,本实验选用 DIKMA Diamonsil
C18 ( 250 mm @ 41 6 mm , 5 Lm)色谱柱。
取盐酸麻黄碱对照品 10 LL 进样, 在 200~ 800
nm 全波长扫描,结果表明盐酸麻黄碱在 210 nm 处
有最大吸收。
实验比较了流动相乙腈-01 1%磷酸( 9B 87)、乙
腈-01 1%磷酸(含 01 1%三乙胺) ( 4 B 96)以及乙腈-
01 02 mol/ L 磷酸二氢钾(加 01 2%三乙胺,用磷酸调
pH 至 21 7) ( 2B98) ,结果显示第一种流动相所得待
检色谱峰有严重拖尾现象, 影响色谱峰的分离; 第二
种流动相所得色谱峰峰形对称, 分离度良好, 可使
盐酸麻黄碱与其他成分获得基线分离; 第三种流动
相所得色谱峰峰形对称性及分离度均符合要求, 但
其保留时间过长, 且考虑使用缓冲盐会对色谱柱造
成较大损害, 从实验的实际情况出发, 选择乙腈-
01 1%磷酸(含 01 1% 三乙胺) ( 4 B 96)为本实验流
动相。
实验比较了 01 8 mL/ m in与 11 0 mL/ min两种
不同体积流量, 主要待检色谱峰的峰型及分离度均
无显著差异,但因为体积流量慢而导致了洗脱时间
长,在 01 8 mL/ min 下出峰时间延缓。为提高实验
效率,选择 11 0 mL/ min。
结果表明,麻黄炮制后盐酸麻黄碱有不同程度
的下降。由于盐酸麻黄碱是仲胺衍生物, 具有挥发
性,而麻黄的炮制过程均要经过加热处理,高温条件
使盐酸麻黄碱挥发,使有所减少。但该成分的减少
与麻黄炮制后缓和发汗作用及增强止咳平喘功效之
间的相关性,以及麻黄不同炮制品种由于成分变化
不同而可能导致的药效差异等, 还有待于进一步
研究。
参考文献:
[ 1] 林 凯,范 琦. RP-H PLC法测定麻黄中麻黄碱、伪麻黄碱
和甲基麻黄碱[ J] .中草药, 2006, 37( 2) : 282-283.
[ 2] 何夏秋,贺建华.麻黄正交提取工艺的研究[ J] .中国实验方剂
学杂志, 2005, 11 ( 1) : 1-2.
[ 3] 李红霞, 丁明玉,吕 琨,等. 高效液相色谱法则测定麻黄及其
制剂中的麻黄类生物碱和川芎嗪[ J ] .色谱, 2001, 19 ( 2) : 161-
163.
[ 4] 符继红.新疆不同产地麻黄草中有效成分提取研究[ D] .乌鲁
木齐:新疆医科大学, 2003.
#582# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 4 期 2009 年 4 月