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Changes of endogenous hormone and gene expression during process of somatic embryogenesis in Panax ginseng

人参体细胞胚胎发生过程中内源激素变化和基因表达研究



全 文 :·1084· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月
为解决川贝母药材严重匮乏的主要方式,其主要做
法就是在海拔3000ITI以上地区集中繁育种子,然
后在海拔3500m的川I贝母适生群落中补播种子,
增加川I贝母种群密度,经过3~5年抚育生长收获药
材。由于川贝母种子存在深度休眠,补播种子休眠的
解除成为野生抚育成功须解决的关键技术环节之
一。伊贝母F.pallidift0112Schrenk、浙贝母F.
thunbergiiMiq.[1矗“¨种子休眠研究表明其为胚形
态后熟与发芽抑制物存在的混合休眠类型。
川贝母4种药材的基源植物中,只有川贝母F.
cirrhosaD.Don有少量研究,陈士林[1]、陈瑛[2]等研
究了卷叶贝母种子胚后熟的层积温度条件。笔者研
究揭示出川贝母种皮无吸水障碍;通过对不同层积
阶段种子胚的形态观察,揭示了川贝母种子从层积
前的心形胚发育至层积后期鱼雷形胚的动态过程,
这也表明川贝母存在胚形态后熟,且可以通过层积
方法促进胚完成形态后熟。采用白菜种子发芽法进
行生物鉴定,首次报道了川贝母种子存在发芽抑制
物,且为存在于种子表皮及种子内部的水溶性抑制
物质;另外还揭示了经过层积处理的JJI贝母种子发
芽适温。本实验首次揭示出了川贝母种子为混合休
眠类型,研究结果为深入了解川贝母种子休眠机制、
采用合适方法解除休眠奠定了基础。一
参考文献:
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人参体细胞胚胎发生过程中内源激素变化和基因表达研究
王 义1,赵文君2,孙春玉1,杨晶1,张美萍p
(1.吉林农业大学生命科学学院,吉林长春130118;2.白山经济开发区管理委员会,吉林白山134300)
摘要:目的探讨外源激素一内源激素一特异基因之间的关系,为阐明人参体细胞胚胎发生的分子机制奠定基础。
方法 对人参不同发生途径,不同时期的培养物进行AFLP分析,对体细胞胚胎发生不同时期培养物的内源IAA
和ABA以及皂苷的量进行了测定。结果在早期胚时期IAA的量最高,在成熟胚时期ABA的量最高,而ABA/
IAA的值在成熟胚时较高;不同发生途径,不同时期的培养物基因表达不同;体胚发生试管苗总皂苷的量比子叶胚
时期高出4倍多。结论IAA的存在是维持人参体胚正常发育到早期胚的条件,ABA与胚性启动,体胚发生、发育
相关,尤其对胚胎发育后期有较大的影响;在不同生理状态或不同的培养条件下产生了不同的基因调控类型,不同
的发育过程会有特异基因表达,导致了人参分化情况的不同;随着形态建成的逐步完成,也是次生代谢产物逐渐积
累的过程。
关键词:人参;内源激素;cDNA—AFLP
中图分类号:R282.1 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)07—1084—06
Changesof ndogenoush rmonea dgeneexpressionduringprocess
ofsomaticembryogenesisinPanaxginseng
WANGYil,ZHAOWen—iun2,SUNChun—yul,YANG—Jin91,ZHANGMei—pin91
(1.CollegeofLifeScience,JilinAgr culturalUniversity·Changchun130118,China;2.ManagementCommitt e
收稿日期:2007—10—15
基金项目:吉林省科技厅基金资助项目(250113)
作者简介:王 义(1964一).男.占林省德惠县人,博上,副教授,硕上生导师。吉林农业大学生命科学院副院长,主要从事药用植物细胞
工程、药用植物种质资源创新和开发领域的研究,主持和参加国家中医药管理局、省科技厅和省教育厅等课题12项,核心期
刊I:发表论文30余篇,出版著作1部。Tel:(0431)84533182 13504 5977E—mail;wanglaoshi2007@tom.corn
*通讯作者张美萍Tel:(0431)8453163013394489398E—mail:wzhaoyun@tom.con
万方数据
中草|s ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1085·
O{BaimountainEconomicDevelopmentRegion,Baishan134300。China)
Abstract:ObjectiveTos udytherelationshipdur ngexogenoush rmone—endogenoush rmone—
idiogene,andstablishthefoundationtO lluminatethemoleculemechanismduringprocessof omaticem—
bryogenesisinPanaxginseng.MethodsAFI。PAnalysisontheperiodof ifferentcul ureindevelopment
pathwayofP.ginsengwascarriedoutsimultaneously,theendogenousIAA,ABA,andthesaponincon—
tentintheperiodof ifferentcul uresduringprocessof omaticembryogenesisinP.g nsengwered ter..
mined.ResultsItindicatedthcontentofIAAwasthehighestinearlyembryoperiodandABAwasthe
highestinthematureembryoperiod.TheratioofABA/IAAwashigheratthestageofmatureembryo
thanthatofothers.Thegenexpressionwasdifferentinthedifferentp riodculturesduringprocessofSO..
maticembryogenesisinP.g nseng.Thetotalsaponinco tentoftest—tubeplantletisfourfoldhigherthan
thatintheperiodofcotylenembryo.ConclusionTheconditionhatmaintainsnormaldevelopmentofSO—
maticembryogenesisinP.g nsengisthepresenceofIAA.ABAcorrelateswiththembryopriming.SO—
maticembryogenesisa development.Especially,itinfluencesthelaterperiodofsomaticembryogenesis.
Itproducesthdifferenttypesofgener gulationindifferentphysiologyconditionordifferentcul urecon—
ditions.Thereisidiogeneexpressioninthedifferentd velopmentrocesses,whichinducesthedifferent
celldifferentiation.Withgraduallycompletionofm rphogenesis,iti theaccumulativeprocessofsec—
ondarymetabolite.
Keywords:Panaxgi sengMeyer;endogenoushorm ne;cDNA—AFLP
体细胞胚胎发生技术不仅成为植物快繁的重要
手段,而且也已发展成为研究植物胚胎发生机制和
遗传转化的重要系统,其在药用植物上的应用也很
受重视。对于植物组织培养过程中内源激素的研究,
国外从20世纪60年代起可见一些报道,随着内源
激素检测手段的不断改进,近年来已有国内外科学
工作者在一些植物上作过研究,这将对植物组织培
养过程中,有效指导合理添加外源激素,阐明植物组
织培养中脱分化、分化及再生长的生理机制起重要
作用。
cDNA—AFLP技术是近年发展起来的比较成熟
的用于差异基因筛选和分析RNA指纹图谱的技
术,能同时处理多个不同来源样品间基因表达的差
异。生物体表现出的各种特性,主要是由于基因的差
异表达引起的。由于基因差异表达的变化是调控细
胞生命活动过程的核心机制,通过比较同一类细胞
在不同生理条件下或在不同生长发育阶段的基因表
达差异,可为分析生命活动过程提供重要信息。
本实验以一年生人参茎叶为外植体,通过调节
外源激素,诱导离体体细胞胚胎发生。首次测定了胚
胎各个不同发育时期内源激素的变化,进行AFI。P
分析,且对皂苷的量进行了测定,以探讨在离体体细
胞胚胎发生过程中的外源激素一内源激素一特异基因
之间的关系,为进一步在分子水平上研究体细胞胚
胎发生机制奠定基础,也为人工种子研究提供理论
依据,具有十分重要的理论和实践意义。
1材料与方法
1.1材料:选用人参芽胞为外植体,诱导愈伤组织
的培养基为MS+2,4-D.0mg/L+BA0.2mg/
L;在MS+2,4一D1.0mg/I。+KT0.2mg/L培养
基上继代培养,获得胚性愈伤组织;在去掉2,4一D
的培养基上诱导胚状体发生和发育,转入无任何激
素的MS培养基上使胚状体快速生长,之后在1/
2MS培养基上进一步生长获得再生植株。蔗糖质量
浓度为30g/L,琼脂6.5g/L,灭菌前pH值调至
5.8,高温高压灭菌15~20min。培养温度(23±2)
℃,每日光照16h。
1.2 cDNA—AFLP
1.2.1RNA的提取:分别取不同发生途径不同时
期的培养物(愈伤组织、胚性愈伤组织、早期胚、成熟
胚、不定芽、再生植株)0.1g,液氮研磨,按50~100
mg加入1mLTrizol,转入离一0管,室温放置5rain,
使其充分裂解,12000r/rain离心5rain,按每1mI。
Trizol加200肛L氯仿的比例,向混合液中加入氯
仿,振荡混匀,4℃离心15min,加入异丙醇混匀,
12000r/min离一01 min,用75%乙醇洗涤2次,
8000r/rain离心5min,室温晾干或真空干燥,复溶
于50肛LddH20处理水中。
1.2.2cDNA的合成:eDNA的合成按Takara的
cDNAsynthesiskit(M—MLVversion)探作说明进f意
1.2.3cDNA—AFLP分析:用约i00ngcDNA进
行AFLP分析。cDNA—AFLP参照Bachem[11方法进
行。合成的双链cDNA经EcoRI/MseI双酶切并
加接头进行预扩增,将预扩产物稀释1000倍作为
万方数据
·1086· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月
模板,以E/M引物组合进行选择性扩增。扩增产物
在5%的聚丙烯酰胺凝胶上电泳,银染显色,E/M
引物分别为:M1:5
7GTTCACTACAGTGCCCAA
37;M2:5’GTTCACTACAGTGCCCAC3’;M3:5’
GTTCACTACAGTGCCCAT3 7; M4: 5
7
GTTCACTACAGTGCCCAG37;E2:5
7
GATAC—
CTTAGGAAATCAT37;E3:5
7
G TACCTTAG—
GAAATCAC37;E4:5
7
GATACCTTAG—
GAAATcAG37。引物组合方式为:(E4/M1,E4/
M2);(E4/M3,E4/M4);(E3/M1,E3/M2);(E3/
M3,E3/M4);(E2/M3,E2/M4)。
1.3 内源激素的EI。lSA测定:内源IAA和ABA
的测定均采用酶联免疫吸附法(enzyme--linkedim—
munosorbentassay,ELISA)。激素测定试剂盒购自
中国农业大学化控中心,按照ELISA说明书,用酶
联免疫检测仪进行测定。
1.4 HPI。C测定
1.4.1 仪器与试剂:高效液相色谱仪(Aglient一
1200,UVD检测器,美国);人参皂苷Rb,、Rc、Re、
Rh。、Rd(中国药品生物制品检定所),乙腈,色谱纯。
1.4.2 色谱条件:ODS—C18分析柱(250mm×4.0
mm,5肛m),流动相为乙腈(A)一水(B),梯度洗脱:o~
35rain,A19%;35~55min,A19%~28%;55~80
min,A28%;80~105min,A28%~40%;105~110
rain,A40%;110~113min,A40%~19%;113~
120min,A19%,体积流量:1.0mL/min,柱温:室
温,检测波长:203am,进样量10pL。在此条件下,
样品中人参皂苷Rb。、Rc、Re、Rh。、Rd达到良好基
线分离(图1~3)。
Rd
I一一T————————.r。一l
0 20 40 60 80 100 120
t/min
图1人参苷Rb,、Rc、Re、RhI、Rd对照晶HPLC谱
Fig·1HPLCChromatogramofginsenosidesRbI,
Rc,Re,Rhl,andRdreferencesubstances
1.4.3对照品溶液及供试品溶液的制备:精密称取
人参皂苷对照品,分别加甲醇制成溶液,即得。
将样品烘干后研磨成细粉,恒重后取3份,每份
1g。参照《中国药典>>2005版方法进行提取。总皂苷
用甲醇定容,供HPLC定量分析(样品由吉林农业
0 20 40 60 80 lOO 120
t/min
图2人参体细胞胚胎发生试管苗HPLC谱
Fig.2HPLCChromatogramofsom ticembryogenesis
ofP.ginsengregenerationplantlet
r一一lO 20 40 60 80 lOO 120
t/min
图3人参体细胞胚胎发生子叶胚HPLC谱
Fig.3HPLCChromatogramofsom ticembryogenesis
0fP·ginsengcotyledonmbryo
大学参茸测试中心测定)。
1.4.4线性关系考察:分别精密吸取各对照品储备
液适量,配制成含人参皂苷Rb。、Rc、Rd、Re、Rh。为
0.2、0.2、0.2、0.4、0.2mg/mL的质量浓度,依次注
入高效液相色谱仪,各进样10弘L,按上述色谱条件
测定峰面积。以峰面积(y)为纵坐标,进样量(X)为
横坐标,绘制标准曲线。回归方程、相关系数和线性
范围见表1。
袭1 5种人参皂苷成分的标准曲线
Table1 Calibrationcurveffivekinds
ofP·ginsengaponins
2结果与分析
2.1 人参体细胞胚胎发生:外植体在附加4mg/L
2,4一D和0.2mg/LBA的MS培养基上,21d后诱
导出愈伤组织,转移到含有2,4一D1.0mg/L和KT
0.2mg/L的培养基中培养,30d大部分愈伤组织
转变成胚性愈伤组织,在含有KT的培养基上胚状
趴吵

从k儿\v三=‰.
万方数据
中草蔼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1087·
体发育成熟,发育出心形胚和子叶形胚,转入无任何
激素的MS培养基上进一步成熟,长至2ClTI以上
后,在生根培养基上诱导生根,可得到再生植株。从
实验结果可以看出,外植体在脱分化并产生胚性细
胞时需要外源激素来启动,一旦胚性愈伤组织和原
胚形成后,内源生长激素的量提高,原来的外源激素
反而起抑制胚性细胞发育的作用,可以看到在胚分
化时不需要外源激素存在,外源激素只能使细胞停
留于脱分化状态。
2.2 内源激素:由外植体诱导的愈伤组织可分为胚性
愈伤组织(EC)和非胚性愈伤组织(NEC),在很大程度
上EC的形成和维持受内源激素调控。内源激素作为
执行细胞通讯的化学信息在代谢、生长、形态建成等植
物生理活动的各个方面均起着十分重要的作用。它对
胚状体的作用机制主要是诱导基因的差别表达。
2.2.1ABA、IAA量的变化:内源激素参与植物发
育的许多过程,比如衰老对环境胁迫的反应、气孔关
闭、生长抑制等,胁迫能够诱导植物内源激素量的升
高。在体细胞胚胎发生过程中,内源ABA和IAA与
胚性能力的启动或表达有关,并在调节体胚发育方
面扮演着特定角色。
体细胞胚发生过程中,ABA和IAA的量变化
见图4,胚性愈伤组织的内源ABA的量比较稳定,
但随着体胚的发育,内源ABA上升趋势明显,体胚
发育的早期,内源ABA的鲜质量较低,只有
186.585ng/g,当体细胞胚胎发育到成熟期时,
ABA达到最高值1180.09ng/g,说明体细胞胚胎
发育后期ABA较发育前期上升快,由此可见,ABA
对胚胎发育后期有较大的影响。而在胚性愈伤组织
阶段,内源IAA的量变化不明显,一直处于较高水
平。但在整个体胚的发育过程中,其内源IAA的量
变化显著。早期胚时,内源IAA形成了一个明显的
高峰,其鲜质量达到了最大值23.18ng/g,然而发
育到成熟胚时,其量却降低至4.16ng/g,由此可
见,高质量浓度IAA的存在是维持人参体胚正常发
育到早期胚的条件。
2.2.2内源激素的平衡:各激素在体胚发生中的作
用具有相对专一性,但体胚发生不仅需要内源激素
量达到一定水平,更重要的是不同激素间相互作用
及相互平衡。
由图5可知,体胚发育中ABA/IAA的变化比
较明显,在胚性愈伤组织阶段,ABA/IAA达到最
高,随着体胚的不断发育,ABA/iAA开始降低,到
早期胚时达到最低,说明早期胚时的ABA量比较

T




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1 2 3 4 5
l一胚性愈伤组织I 2-胚性愈伤组织I3-早期胚
4一成熟胚5一试管苗
1一embryoniccallusI 2-embryoniccallus3-earlierembryo
4-matureembryo5-regenerationplantlet
图4体细胞胚发生过程中ABA(a)、IAA(b)量的变化
Fig.4Changesof ndogenousABA(a)andIAA(b)
contentsduringsomaticembryogensis
1一胚性愈伤组织I 2-胚性愈伤组织I3-早期胚
4一成熟胚5~试管苗
卜embryoniccallusI 2-embryoniccallusI 3-earlierembryo
4-matureembryo5-regenerationplantlet
图5体细胞胚发生过程中内源ABA/IAA的变化
Fig.5Changesof ndogenousABA/IAA
duringsomaticembryogenesis
低,IAA量比较高;到成熟胚时期又开始上升,说明
这时的ABA量升高,IAA量降低;而到试管苗时
期,ABA/1AA有所回落,此时的ABA量降低,IAA
量又开始升高。
2.3人参培养物发生过程中基因的表达:由图6可
知,A。、B。、C。和E。在6个发育时期里都有出现,说
明,A,、B。、C,和E。片段的表达是人参形态建成各
个时期共同存在的,应该是管家基因;B。、E:在胚性
愈伤组织时期出现,可能和脱分化时的表达有关,是
胚性愈伤组织发生的标志,A。在胚性愈伤组织和早
期胚时期出现,且在早期胚时期表达量相对较高,然
而到成熟胚时期又消失,推测该基因可能和胚状体
早期分化有关;A。只在早期胚时期出现,说明此基
因为早期胚时期的特异表达基因;B。、B。和C:在成
熟胚时期进行特异表达,而其余谱带随着不同发育
时期发生变化,反映了这些时期不同的生理状态的
需要。A。、B。和D,在早期和成熟胚时期都出现,该






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5
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靼《《《《∞《
万方数据
·1088- 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月
图6不同时期cDNA—AFLP分析
Fig.6cDNA-AFLPnalysisduringdifferentp riods
基因可能与胚状体分化相关;A。只在器官发生型愈
伤组织中出现,推测可能是分化相关基因。A。在成
熟胚和不定芽丛里出现,这两个时期都将发育形成
再生植株,该基因可能是向再生植株发生的标志。
由ⅡE4/M3、E4/M4引物扩增结果可看出,另
外一组引物没扩增出第4带,说明此对引物的选择
性碱基在人参基因组中分布较少,不宜使用。
2.4样品测定结果:由表2可以看出子叶胚中的皂
苷量依次为:Re>Rh。>Rb。>Rd>Rc,而试管苗中
的皂苷量依次为:Re>Rc—Rd>Rb。>Rh。,无论在
哪一个时期人参皂苷Re的量均为最高。另外,试管
苗时期Re量比子叶胚时期高3.48倍,Rd比子叶
胚时期高出34.23倍,Rc高出44.44倍,Rb,高出
14.5倍,Rh,高出2.31倍;总皂苷量比子叶胚时期
高出4倍多。
袭2样品测定结果(聘一3)
Table2 Determinationofsample(聆一3)
3讨论
3.1 内源激素的作用:激素对胚状体的作用机制主
要是诱导基因的差别表达。多种植物的研究表明,器
官分化主要决定于外植体内源细胞分裂素和生长素
的平衡[2~4]。植物体细胞转化为胚性细胞的一个重
要前提是有相应的激素来诱导其细胞分化[5]。已有
的研究表明内源激素对基因活动起着调控作用,从
而影响一系列代谢过程,最终影响到植物细胞胚性
潜力的诱导、维持和表达。
在体细胞胚胎发生过程中,高水平的内源ABA
与胚性能力的启动或表达有关,并在调节体胚发育
方面扮演着特定角色。程玉兰[6]发现胡萝卜体细胞
胚胎发育后期,随着胚的发育,内源ABA上升得更
明显。本实验中可见体胚后期ABA较前期上升快。
本实验的研究结果与程玉兰的实验结果相同。可见,
ABA与胚性启动,体胚发生、发育相关,尤其对胚胎
发育后期有较大的影响。
邢登辉[7]研究皇冠草体胚发生过程发现,内源
IAA在球形胚时期形成了一个明显的高峰。本实验
发现,人参体胚发育过程中,IAA量先是在胚性愈
伤组织时期较高,随后到早期胚时最大,而到了成熟
胚时期IAA量又开始降低。当IAA达到峰值时,是
胚性细胞数量的最高期,当IAA下降时,开始进入
芽的分化。表明IAA的存在是维持人参体胚正常发
育到早期胚的条件。IAA的量急剧上升这说明胚状
体的萌发和迅速生长需要高水平的内源生长素。
3.2基因的差异表达:高等生物大约有30万个不
同的基因,但在生物体内任意细胞中只有10%的基
因得以表达,而这些基因的表达是按时间和空间顺
序有序地进行着,这种表达的方式即为基因的差异
表达。其包括新出现的基因的表达与表达量有差异
的基因表达。
不定芽的发生是植物再生过程的重要过程,是
植物再生能力的重要衡量标准。但植物愈伤组织形
成、不定芽发生过程受哪些基因的调控,这些基因与
诱导条件存在有怎样的关联,目前尚不能有明确的
理论支持¨J。
本实验通过cDNA—AFLP技术对人参形态发
生过程的mRNA表达进行了初步的研究。发现人参
体细胞胚胎发生过程中,基因表达有所不同,特异条
带主要出现在早期胚、成熟胚和器官发生型愈伤组
织时期,且主要集中在200~600bp。在不同发育时
期基因表达不同,这种差异的形成可能是由于不同
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第7期2008年7月·1089·
培养条件对人参培养物的影响,导致了人参分化情
况的不同。通过基因特异性表达分析,可以推测,不
同的发育过程会有特异基因表达。由此,可以通过调
节形态发生相关基因的表达实现提高植物再生能力
的目的,为解决生产实际问题提供理论依据。但是,
调控基因表达的因素以及调控的方式还有待于进一
步的研究。
3.3 HPLC结果可以看出,体细胞胚胎发生试管苗
各种单体皂苷的量均较子叶胚时期高几倍至几十
倍。表明随着形态建成的逐步完成,也是次生代谢产
物逐渐积累的过程。本实验体系下子叶胚和试管苗
有望成为种苗,实现工厂化生产。
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黄芪药材的HPLC—UV指纹图谱研究
白焱晶,王智颖,杜新刚,吕晓洁,赵玉英,张庆英。
(北京大学医学部药学院天然药物学系,天然药物及仿生药物国家重点实验室,北京 100083)
摘 要:目的 建立黄芪药材的HPLC—UV指纹图谱。方法采用HPLC—UV方法。色谱柱为YMC—PackODS—A
(250mm×4.60mm,5肛m);流动相:乙腈一0.1%磷酸水线性梯度洗脱(0----60min,20:80一40:60);体积流量:1
mL/min;检测波长:210am;柱温:室温。结果建立了黄芪药材的HPLC—UV指纹图谱,指定出16个共有指纹峰。标定
了其中7个指纹峰的结构:3号峰为毛蕊异黄酮苷,5号峰为芒柄花苷,8号峰为9,10一二甲氧基紫檀烷一3一O—pD一吡喃葡
萄糖苷,10号峰为毛蕊异黄酮,14号峰为芒柄花素,15号峰为(6aR,1laR)-3一羟基一9,10一二甲氧基紫檀烷,16号峰为
(3R)-8,2L二羟基一7,4L二甲氧基异黄烷。结论本法简便、准确、重现性好,可作为黄芪药材质量检测的方法。
关键词:黄芪;指纹图谱;HPLC—UV
中图分类号:R282.7 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2008)07—1089—04
黄芪为豆科植物蒙古黄芪Astragalusmem—
branaceus(Fisch.)Bungevar mongholicus(Bunge)
Hsiao或膜荚黄芪A.membranaceus(Fisch.)
Bunge的干燥根,具有补气固表、利尿托毒、排脓、敛
疮生肌之功效[1]。目前我国市场上黄芪用药量大,但
市售黄芪药材质量良莠不齐,严重影响其临床疗效。
为了更加科学准确地控制黄芪药材的质量,在建立
一个或几个有效成分的量测定的基础上,探讨并建
立黄芪药材的多成分综合评价体系是非常必要的,
而化学成分指纹图谱是评价中药或天然药物质量的
最有效的手段之一。近年来虽然也有一些文献对黄
芪的HPLC指纹图谱进行了研究[2“],但是这些指
纹图谱普遍存在没有对共有峰进行指认,或者即使
进行了指认但指认的峰数目过少(仅指认了1个或
2个色谱峰的结构)。因此,笔者对黄芪药材的
HPLC指纹图谱进一步进行了研究,对黄芪药材中
的主要成分进行了分离、结构鉴定,并对指纹图谱中
主要色谱峰进行了指认,为综合评价药材质量提供
了更多的信息。本实验测定了13个不同地区黄芪药
材的HPLC—UV指纹图谱,指定出16个共有指纹
峰,标定了其中7个指纹峰的结构,以其中3号峰
(毛蕊异黄酮苷)作为参照色谱峰。研究结果为黄芪
药材的质量评价进一步提供了科学参考依据。
1仪器与试药
收稿日期:2007—10一10
基金项目:国家自然科学基金项目(30371735);教育部长江学者和创新团队项目(985—2—063—112)
作者简介:白焱晶(1975一),男,讲师,主要从事天然药物化学的教学‘』研究工作。E—mail:yjbai@bjmu.edu.en
*通讯作者张庆英Tel:(010)82801725E—mail:qyzhang@bjmu.edu.en
万方数据
人参体细胞胚胎发生过程中内源激素变化和基因表达研究
作者: 王义, 赵文君, 孙春玉, 杨晶, 张美萍, WANG Yi, ZHAO Wen-jun, SUN Chun-yu,
YANG Jing, ZHANG Mei-ping
作者单位: 王义,孙春玉,杨晶,张美萍,WANG Yi,SUN Chun-yu,YANG Jing,ZHANG Mei-ping(吉林农业大
学生命科学学院,吉林,长春,130118), 赵文君,ZHAO Wen-jun(白山经济开发区管理委员会
,吉林,白山,134300)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2008,39(7)
被引用次数: 2次

参考文献(8条)
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1. 王义.赵文君.孙春玉.杨晶.蒋世翠.张美萍.WANG Yi.ZHAO Wen-jun.SUN Chun-yu.YANG Jin.Jiang Shi-cui.
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细胞胚胎发生及植株再生研究[期刊论文]-药物生物技术2008,15(4)
3. 师海荣.Shi Hairong 陆地棉愈伤组织诱导及体细胞胚发生的生化机制研究[期刊论文]-中国农学通报
2007,23(2)
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5. 吉艳慧.艾军.王英平.王振兴.JI Yan-hui.AI Jun.WANG Ying-ping.WANG Zhen-xing 人参花芽分化的形态学研
究[期刊论文]-特产研究2009,31(4)
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引证文献(2条)
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2.冯辉.杨硕.王超楠.付颖 青梗菜优异DH系的创制与利用[期刊论文]-中国农业科学 2009(9)


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