全 文 ：表 1　样品中各有效成分的测定结果 (n= 3)
Table 1　Analysis results of samples (n= 3)
样品 收购地 (批次)
芍药内
酯苷ö% 芍药苷ö% 苯甲酰芍药苷ö%
1 浙江磐安新渥镇上葛南坡 (药材) 01306 11991 01177
2 浙江磐安大盘镇学田 (药材) 01211 21043 01165
3 浙江磐安冷水镇岩潭 (药材) 01250 21489 01181
4 浙江磐安新渥镇上葛北坡 (药材) 01378 21276 01299
5 浙江磐安新渥镇祠下 (药材) 01241 21379 01117
6 浙江杭州武林药店 (生白芍饮片) 01618 01510 01083
7 浙江杭州张同泰药店 (生白芍饮片) 01992 01734 01080
8 浙江杭州天天好大药房 (生白芍饮片) 01773 01607 01069
9 浙江磐安 (炒白芍饮片, 040814) 01579 01312 01051
10 浙江磐安 (炒白芍饮片, 050621) 01504 11004 01067
11 浙江磐安 (炒白芍饮片, 060224) 01557 01475 01057
成分的峰形也得到了优化, 最终选择水2乙腈2磷酸
体系为流动相体系。
　　在所测样品中, 杭白芍饮片中芍药苷和苯甲酰
芍药苷的量均明显低于杭白芍药材。以往研究亦有
报道芍药中芍药苷在炮制后的量均有所下降[3 ] , 通
过比较杭白芍药材与饮片的H PL C 图谱, 发现饮片
中出现一新成分 (峰4)。通过进一步质谱分析, 该化
合物相对分子质量m öz 544, 通过多级质谱研究其
与芍药苷裂解规律, 推测该化合物为芍药苷 4 位羟
基与 SO 2 结合形成的人工产物芍药苷璜酸酯
(paeon if lo rin su lfonate) [4 ] , 苯甲酰芍药苷与芍药苷
有相似的母核, 也生成相应的璜酸酯导致其量下降。
测定结果表明饮片中的芍药苷的量未能达到《中国药
典》2005 年版一部的要求, 而芍药苷璜酸酯的量较
高, 按照《中国药典》2005 年版一部规定, 生白芍的炮
制工艺: 洗净, 润透, 切薄片, 干燥; 炒白芍: 取白芍净
片清炒至微黄, 根据上述研究, 推测白芍在炮制过程
中可能采用硫磺熏制, 从而导致芍药苷的量下降。
参考文献:
[ 1 ]　周　强, 栗占国 1 白芍总苷的药理作用及其在自身免疫性疾
病中的应用[J ]1 中国新药与临床杂志, 2003, 22 (11) : 6872
6911
[ 2 ]　王　巧, 刘荣霞, 毕开顺, 等 1 H PL C 法测定白芍总苷胶囊中
芍药内酯苷、芍药苷和苯甲酰芍药苷[J ]1 中草药, 2005, 36
(11) : 1630216321
[ 3 ]　张家富, 孟　楣, 邢安之1 H PL C 法测定白芍不同饮片中芍药
苷的含量[J ]1 安徽医药, 2005, 9 (8) : 58825891
[ 4 ]　H ayes P Y, L ehm ann R , Penm an K1 Sodium paeon iflo rin
su lfonate, a p rocess derived artifact from paeon iflo rin [J ] 1
T etrahed ron L ett, 2005, 46: 2615226181
超微冻干人参的粉体特征、皂苷测定及功效研究
赵伯涛1, 钱　骅1, 徐德然2, 张卫明1, 戴　岳2, 黄晓德1Ξ
(11 南京野生植物综合利用研究院, 江苏 南京　210042; 21 中国药科大学中药学院, 江苏 南京　210038)
摘　要: 目的　研究超微粉碎对冻干人参粉体特征、皂苷的量及功效影响。方法　采用电子显微镜扫描、H PL C 分析、
动物试验对超微粉碎冻干人参粉进行粉体特征观察、皂苷溶出量测定和抗应激能力比较。结果　超微粉碎使冻干人
参细胞壁破碎、皂苷溶出量提高、小鼠耐缺氧和低温游泳时间显著延长。结论　超微粉碎可提高冻干人参功效。
关键词: 人参; 冻干; 超微粉碎; 粉体特征; 皂苷溶出; 耐缺氧
中图分类号: R 28611　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 0253- 2670 (2008) 03- 0380- 03
　　人参是我国传统滋补中药。冻干加工的人参其
热敏性成分丙二酸单酰基皂苷损失很少, 传统经热
处理加工的人参 (如红参等)中丙二酸单酰基皂苷成
分大部分降解; 人参冻干加工可保留鲜人参中绝大
部分的活性成分, 药性与鲜人参相同, 偏凉平和, 适
合大部分人群应用[1 ]。冻干人参抗疲劳作用显著[2 ]。
超微粉碎技术是近年来发展起来的一种粉碎新技
术, 在中药加工上的应用研究日趋增多, 取得了良好
的效果。由于超微粉碎使颗粒微细化导致表面积和
孔隙率增加, 细胞破壁, 活性成分溶出速率和含量提
高, 因而能加强生物活性。对冻干人参进行超微粉碎
加工, 在保持成分稳定和药性平和基础上, 可提高人
参的生物利用度、减少用药量、使活性作用增强。本
实验研究了冻干人参超微粉碎对粉体特征、皂苷成
分和小鼠抗应激能力的影响。
1　仪器与材料
　　GQU S—300 型气流粉碎机,A gilen t 1100 高效
液相色谱系统, G1312A 泵, G1313A 自动进样器,
·083· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月
Ξ 收稿日期: 2007205208
基金项目: 科技部成果转化项目 (05EFN 2172200440)
G1315B 二极管阵列检测器, G1316A 柱温箱; A gi2
len t R ev1A 10901 化学工作站, JSM —5610LV 型扫
描电子显微镜。
　　人参皂苷R e、R b1、R b2、R d、丙二酸单酰基R b1 对
照品由吉林农业大学郑毅男教授提供, 质量分数>
99% ; 甲醇、乙腈为色谱纯, 水为超纯水。冻干人参由
本课题用吉林长白参隆集团提供鲜人参制备。
　　雄性 ICR 小鼠由中国药科大学实验动物中心提
供, 合格证号: SCXK (苏) 200220011。
2　方法与结果
211　粉体的制备: 取冻干人参粗粉, 然后采用气流
粉碎, 得冻干超微粉。气流粉碎条件: 进料粒度≥80
目, 进气工作压力018 M Pa, 空气耗量6 m 3öm in。其
中粉碎1 次, 得率为98%。
212　粉末特征的观察: 分别取2 种中药的细粉和超
微粉适量, 铺于电镜铜台上, 喷金镀膜后置电镜下观
察、摄影、测量、描绘, 结果见图1。可见用常规方法粉
碎的颗粒较大, 形状不规则, 粒径不均匀, 可以看到
原药材的粉末特征; 超微粉碎粒度明显变小, 且大小
均匀, 已很难观察到明显的原药材特征。颗粒由几
个、十几个、甚至更多的细胞组成, 偶尔见个别细胞
壁破裂。超微粉在电子显微镜下看到绝大多数是细
胞碎片, 仅有极个别完整的细胞存在。传统的中药粉
碎一般颗粒大小约100 Λm , 而超微粉碎则粉碎到几
个微米。中药经过超微粉碎后, 除了植物的细胞壁破
碎外, 颗粒的表面积增大了, 其分散性、吸附能力、表
面活性等都起了综合性变化。表明利用气流粉碎对
冻干人参进行超微粉碎后, 在电子显微镜下观察大
多数细胞都已破壁, 且粒度均匀。
213　人参皂苷的比较
21311　人参皂苷对照品溶液的配制: 人参皂苷对照
品R e 6126 m g、R b1 5138 m g、R b2 5131 m g、R d 5165
m g, 分别用甲醇定容到 5 mL , 取 1 mL 配制好的母
液, 置于 10 mL 量瓶中, 再加入甲醇定容至刻度; 精
密称取丙二酸单酰基R b12113 m g 于10 mL 量瓶中,
加入甲醇定容到刻度, 即得不同对照品溶液。
21312　供试品溶液的配制: 精密称取人参冻干普通
粉和超微粉各 115 g, 分别倒入 50 mL 三角瓶中, 加
入10 mL 甲醇, 精密称重, 超声提取 20 m in, 然后静
置, 滤过, 即得。
21313　色谱条件: 色谱柱为M erk L ich roCA R T R P
C 18 (250 mm ×416 mm ) , 流动相: 0104% 磷酸 (A ) 2乙
腈 (B ) , 梯度洗脱: 0～ 20 m in, 20%B; 20～ 30 m in,
20%～ 32%B; 30～ 60 m in, 32%～ 33%B; 60～ 80
图 1　冻干人参普通粉 (A)和超微粉 (B)的电镜照片
F ig11　Scann ing electron m icroscop ic observation
of common powdered samples (A) and
ultra-f ine powdered samples (B)
m in, 33%～ 42%B , 柱温: 30 ℃, 检测波长: 203 nm。
21314　冻干人参不同粉碎处理的人参皂苷溶出的
比较: 取供试品溶液和对照品溶液各适量, 进样测
定, 采用外标法计算样品中各对应成分的量, 结果见
图2 和表1。冻干人参经超微粉碎后, 人参皂苷溶出
量明显增加, 表明人参超微粉碎后, 细胞破碎, 细胞
内含有的有效成分充分暴露, 能够释放出来使其量
增加。
表 1　不同粉碎冻干人参粉中皂苷的测定
Table 1　Con ten t of g in senosides in ultra-f ine powdered
and common powdered samples
样　品
人参皂苷
Reö% 人参皂苷Rb1ö% 丙二酸单酰基人参皂苷
Rb1ö% 人参皂苷Rb2ö% 人参皂苷Rdö%
冻干超微粉 01432 01685 01634 11099 01085
冻干普通粉 01131 01340 01332 01519 01040
214　小鼠耐缺氧试验: 雄性 ICR 小鼠70 只, 体重18
～ 22 g, 随机分为 7 组, 每组 10 只, 分别为空白对照
组 (蒸馏水 20 mL ökg) , 普通粉低、中、高剂量 (115、
3、6 gökg) 组, 超微粉低低、中、高剂量 (0175、115、3
gökg)组。 ig 给药, 每日1 次, 连续7 d。末次给药后
1 h, 将小鼠置于装有20 g 钠石灰的250 mL 广口瓶
中, 5 m in 后密闭瓶盖, 记 录 小 鼠 存 活 时 间,
结 果见表2。可见人参普通粉3、6 g ökg和超细粉
·183·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月
töm in
图2　人参皂苷对照品Re (A)、Rb1 (B)、丙二酸单酰基Rb1
(C)、Rb2 (D )、Rd (E)、冻干人参超微粉 (F)、冻干人
参普通粉 (G)的HPLC 图谱
F ig12　HPLC Chromatogram of Re (A) , Rb1 (B) , ma-
lonyl-g in senoside Rb1 (C) , Rb2 (D ) , Rd (E) re-
ference substance, ultra-f ine powdered (F) ,
and common powdered samples (G)
表 2　不同粉碎冻干人参粉对小鼠耐缺氧的影响
(x±s, n= 10)
Table 2　Effect of ultra-f ine powdered or common
powdered samples on hypox ia tolerance
of m ice (x±s, n= 10)
组别 剂量ö(m g·kg- 1) 耐缺氧存活时间öm in 提高率ö%
对照组 　　— 2718±318 —　
普通粉 　　115 3117±419 1410
　　3 3211±3113 1515
　　6 3515±3173 3 2717
超微粉 　　0175 3116±3143 1317
　　115 3215±5113 1619
　　3 3416±4143 3 2415
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
0175、115、3 gökg ig 给药 7 d, 明显延长小鼠耐缺氧
存活时间, 超微粉的作用强于等剂量的普通粉。
215　小鼠低温游泳试验: 雄性 ICR 小鼠70 只, 体重
18～ 22 g, 随机分为 7 组, 每组 10 只, 分别为空白对
照组 (蒸馏水 20 mL ökg )、普通粉低、中、高剂量
( 115、3、6 gökg) 组、超微粉低、中、高剂量 (0175、
115、3 gökg)组。ig 给药, 每日1 次, 连续7 d。末次给
药后1h, 将小鼠负重 (体重的5% ) , 置于水深40 cm ,
水温 (15±015) ℃的水槽内, 记录小鼠低温游泳存
活时间, 结果见表3。可见人参普通粉3、6 gökg 和超
细粉115、3 gökg ig 给药7 d, 明显提高小鼠低温游泳
时间, 超微粉的作用强于等剂量的普通粉。
表 3　不同粉碎冻干人参粉对小鼠低温游泳的
影响 (x±s, n= 10)
Table 3　Effect of ultra-f ine powdered or common
powdered samples on hypox ia tolerance
of m ice (x±s, n= 10)
组别 剂量ö(m g·kg- 1) 游泳时间öm in　　 提高率ö%
对照组 　— 1019±212 —　
普通粉 　115 1113±312 317　
　3 1417±4103 3419　
　6 1518±2193 3 4510　
超微粉 　0175 1115±213 515　
　115 1418±3133 3518　
　3 1512±3113 3 3914　
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
3　讨论
丙二酸单酰基人参皂苷是鲜人参中的特有成
分, 在传统经过热处理人参加工中, 其受热极易分
解, 脱去丙二酸形成相应的苷, 而且经过高温加工的
人参药性发生变化, 冻干加工可以保持鲜人参特有
成分和药性。冻干人参超微粉碎后, 仍然含有较高量
的丙二酸单酰基2R b1 皂苷, 表明超微粉碎对不稳定
成分没有影响; 超微粉碎使冻干人参细胞破壁, 皂苷
溶出量提高, 说明人参细胞内含有一定的有效成分,
而且在细胞壁未破的情况下, 细胞内成分不易溶出。
动物试验证明超微粉的功能作用强于相同剂量的普
通粉。冻干后再超微粉碎对保持偏凉平和的药性和
提高人参的功效有明显作用, 临床应用冻干人参超
微粉可提高功效和减少用药量。
参考文献:
[ 1 ]　李向高1 药材加工学 [M ]1 北京: 农业出版社, 19941
[ 2 ]　谢英彪, 赵伯涛, 张卫明 1 冻干活性人参脆片临床应用报告
[J ]1 中华医林核心杂志, 2005, 7 (1) : 1221
·283· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 3 期 2008 年 3 月