全 文 ：中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月· 563·
龙胆药材的HPLC指纹图谱研究
江蔚新，钦浩，何文顺
(哈尔滨商业大学药学院，黑龙江哈尔滨 150076)
摘要：目的建立不同产地龙胆药材的HPLC指纹图谱，为整体控制和评价龙胆药材的质量提供依据。方法采
用HPLC测定10个不同产地的龙胆药材，制定指纹图谱。色谱条件：ODS柱，甲醇一水为流动相梯度洗脱，检测波长
254am，体积流量1．0mL／min．柱温25℃。结果建立了龙胆药材HPLC指纹图谱的共有模式．并对不同产地的药
材进行了相似度评价。结论HPLC指纹图谱稳定性、重现性好．简便可行，适用于龙胆药材的标准化种植及质量
控制。
关键词：龙胆药材}HPLC；指纹图谱，质量控制
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)10—1563—03
HPLCFingerprintofRadixGentianae
JIANGWei—xin，QINHao，HEWen—shun
(DepartmentofPharmacy，HarbinUniversityofCommerce，Harbin150076，China)
Abstract：ObjectiveToes ablishtheHPLCfingerprintofme hanol—resolublecompon ntinRadix
Gentianaecollectedfromifferenthabitatsandaccordinglyofferthevidenceforqualitycontrolandquality
evaluationofRadixGentianae．MethodsTenbatchesofRadixGentianaewermeasuredbytheRP—
HPLC，andtheirfingerprintswereobtained．Chromatographiccondition：ODS—column，gradientelution
withmethanol—water，thedetec ionwavelengthwasat254nm，flowratewasat1．0mL／min，andthe
columntemperaturewas25℃．ResultsThemutualmodeofRadixGentianaewas tupandthenthe
similaritywascomparedwithsoftwarewhichwaspublishedbytheCommitteeofPharmacopeiaofChin ．
ConclusionAccordingtotheanalysisof tatistics，thismethodis steady，accuratewithgood
repeatability．andcanbeusedasstandardizationmplantationndqualitycontrolofRadixGentianae．
Keywords：RadixGentianae；HPLC；fingerprint；qualitycontrol
龙胆为龙胆科植物龙胆GentianascabraBunge
的干燥根及根茎，性味苦寒，归肝、胆经，具有清热燥
湿，泻肝胆火的作用，临床上适用于湿热黄疸、口苦、
惊风、抽搐等症[1]。龙胆的有效成分主要为裂环烯醚
萜类化合物，如龙胆苦苷、当药苷及獐牙菜苦苷等。
众所周知，单一指标的定量测定很难反映中药的整
体质量，而指纹图谱具有系统性、特征性和重现性的
特点[z]，能较全面地反映中药的品质，现已成为控制
中药质量的有效途径之一。本实验以龙胆苦苷、当药
苷及獐牙菜苦苷为指标成分[3]，采用HPLC法构建
不同产地龙胆药材的指纹特征谱，为整体控制龙胆
的质量和龙胆的标准化种植提供依据。
1仪器与试药
1．1 仪器：Waters高效液相色谱仪(Waters2996
二极管阵列检测器，Waters600泵，Waters717自
动进样器，EmpowerI色谱工作站，AS3120超声清
洗器，R一202旋转蒸发仪，W一201恒温水浴锅，
Bs一110S分析天平。
1．2试剂：甲醇为色谱纯(天津科密欧化学试剂有
限公司)，水为娃哈哈纯净水，其他试剂均为分析纯。
1．3 试药：不同产地龙胆药材来源见表1，龙胆苦苷
(批号11070—200611)、当药苷(批号111742—
200501)、獐牙菜苦苷(批号0785—200203)对照品均
由中国药品生物制品检定所提供，全部药材经本院
金哲雄教授鉴定为龙胆科植物龙胆G．scrabaBunge
的干燥根及根茎。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱为AgilentEclipseXDB—C18
收稿日期：2008—02—28
基金项目：黑龙江省自然科学基金资助项目(120341)
作者简介：江蔚新(1957一)。男，黑龙江人，硕士，主要从事天然药物化学研究。

万方数据
·1564· 中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月
裹1龙胆药材的来豫
Table1 OriginsofRadixGentianae
柱(150mmX4．6mm，5弘m)；流动相A为水，流动
相B为甲醇，线性梯度洗脱：0min(15％B)---24min
(15％B)一34rain(44％B)一49rain(53％B)一60
min(79％B)一70min(100oAB)一98rain(100％B)f
检测波长254nm；柱温25℃；体积流量1．0ma／
min；进样量5弘L。理论塔板数以龙胆苦苷峰计算不
低于3000，峰的分离度均符合要求，所有组分在73
min内检测完毕。
2．2对照品溶液的制备：精密称取龙胆苦苷、当药
苷和獐牙菜苦苷对照品各10mg，分别置于10mL
量瓶中，用甲醇定容，制成质量浓度为1mg／mL的
对照品溶液，然后各吸引1mL加入到10mL量瓶
中，用甲醇定容，制成质量浓度为0．1mg／mL的混
合对照品溶液，备用。
2．3供试品溶液的制备：龙胆药材粉末过50目筛，
精密称取过筛后的龙胆药材0．5g，置于锥形瓶中，
加入甲醇40mL，密封、超声处理30rain，置冷、用甲
醇补足减失的质量，滤过，取滤液，减压回流至于，用
甲醇溶解，定容至10mL量瓶中备用。
2．4方法学考察
2．4．1稳定性试验：取同一批次样品(样品号4)制
备供试品溶液，在室温下放置，分别于0、2、4、6、8、
10、12、24、36h检测，记录色图谱，用“中药色谱指
纹图谱相似度评价系统2004A版”计算，其主要色谱
峰相对保留时间及其相对峰面积比值无明显变化，
RSD分别为0．00％～0．2％和0．00％～1．87％，符
合指纹图谱的要求，稳定性良好。
2．4．2精密度试验：取同一批供试品(样品号4)溶
液连续进样5次，记录色图谱，用“中药色谱指纹图
谱相似度评价系统2004A版”计算，其主要色谱峰相
对保留时间及其相对峰面积比值无明显变化，RSD
分别o．00％～o．3％和0．00％-I．46％，符合指纹图
谱的要求，精密度良好。
2．4．3重现性试验：取同一批样品(样品号4)，分别
制备5份供试品溶液，记录色谱图。用“中药色谱指
纹图谱相似度评价系统2004A版”计算，其主要色谱
峰相对保留时间及其相对峰面积比值无明显变化，
RSD分别0．00％～0．02％和0．00％～1．22％，符合
指纹图谱的要求，重现性良好。
2．5 样品的测定：在上述色谱条件下，依次测定10
批供试品，记录HPLC色谱图，结果见图1。
一R
--S10
一S9
～S8
一S7
～S6
--$5
一S4
一S3
一S2
O．∞ 17．4l 34．8l 52．22 69．62 87．03 104．43
t／min
S1～SlO一样品图谱R一对照图谱
S1一S10-fingerprintsofsample
R—fingerprintsofcontrol
圈1 10批龙胆药材的指纹圈谱
Fig．1FingerprintsoftenbatchesofRadixGenti啦naG
2．6共有峰的确定及龙胆指纹图谱共有模式的建
立：考察10批龙胆的色谱峰，用“中药色谱指纹图谱
相似度评价系统2004A版”以S1为参照图谱，经过
多点校正，自动匹配，以中位数法，生成对照图谱R，
由匹配数据的输出结果得到共有峰共11个，经过与
对照品的紫外图谱及保留时间的比较，确认7号峰
为獐牙菜苦苷，8号峰为龙胆苦苷，10号峰为当药
苷，其中龙胆苦苷的峰面积比例超过40％，因此选作
参照峰，建立龙胆HPLC指纹图谱共有模式见图2。
2．7指纹图谱的相似度评价：使用国家药典委员会
跹d．i 。9 Y 。
0．∞ 17．4l 34．8l 52．22 69．62 87．03 104．43
l／min
圈2龙胆HPLC指纹圈谱共有模式
Fig．2MutualmodeofHPLCfingerprints
ofRad／xGent／anae

万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第10期2008年10月· 565·
。中药色谱指纹图谱相似度评价系统2004A版”进行
相似度分析，将10批龙胆图谱的AIA格式的原始数
据导人该软件系统，以S1为参照图谱，经过多点校
正，自动匹配，以中位数法，生成对照图谱R，然后进
行相似度分析，结果见表2。一般成品的指纹图谱相似
度计算结果应在o．9-．一i．0，符合要求。由表2可知，10
批样品相似度除第10批样品以外，其他9批均符合要
求。由于来源、产地、气候、采收季节的不同，龙胆药材
所含的有效成分的种类和量有一定的差别。
裹2与共有模式比较的龙胆样昌的相似度
TaMe2 Comparisonofsimilarityinsamples
andmutualmode
样品号 相似度 样品号 相似度
1 0．995 6 0．997
Z 0．996 7 0．959
3 0．914 8 0．972
4 0．968 9 0．986
5 0．953 10 0．852
3讨论
3．1 制备方法的选择：本实验考察了不同提取溶剂
(甲醇、乙醇、水)及不同提取方法(回流提取、索氏提
取、超声提取)的提取效果，以龙胆苦苷的峰面积和
峰的数目为指标，最后确定甲醇超声提取法较好。同
时还考察了此方法的不同提取时间(20、30、40min)
的提取效果，30min提取较完全且不浪费时间，因
此采用甲醇超声提取30min。
3．2色谱条件的选择及优化：在流动相系统的选择
中，分别对甲醇一水系统及乙腈一水系统进行考察。结
果表明，甲醇一水系统分离效果较好，各峰的保留时
间适中，分离度较好，且基线稳定，有利于指纹图谱
的分析，因此采用甲醇一水系统。
3．3检测波长及分析时间的选择：对样品进行全波
长扫描，獐牙菜苦苷的最大吸收为239am，龙胆苦
苷的最大吸收为273nm，当药苷的最大吸收为245
nm。采用这3个波长提取色谱，发现基线均不平稳，
峰的数目较少，峰面积较小，且各峰分离度不好。而
在254nrn下提取的色谱基线稳定，峰的数目较多，
峰的分离度较好，因此选择254nm为检测波长。本
实验测定样品4，设定运行时间为2h。由所得图谱可
知，在73min以后没有峰出现，考虑到样品之间因
为采集时间和地点的不同，存在差异性，因此选择
104min作为分析时间。
3．4本实验研究不同产地龙胆药材的指纹图谱，实
验的精密度、稳定性、重现性较好，10批不同产地的
龙胆药材的特征峰的特征性和专属性很强，11个共
有峰稳定性较好，平均相似度为0．959，符合国家有
关部门的要求，也符合指纹图谱的要求。
参考文献：
[1]中国药典Is]．一部．2005．
[23谢培山．中药色谱指纹图谱[M]．北京：人民卫生出版社．
2004．
[3]肖墙根．新编中药志FM]．北京：化学工业出版社，2004．
菌根真菌对人工栽培金线莲糖类和无机元素的影响
唐明娟，孟志霞，郭顺星‘
(中国医学科学院北京协和医学院药用植物研究所，北京 100093)
摘要：目的在人工栽培条件下，研究金线莲促生菌根真菌AR一18对台湾金线莲和福建金线莲苗中糖类成分和
无机元素量的影响。方法 台湾金线莲和福建金线莲无菌苗经盆栽接种AR一18．以不接菌为对照，分别移栽于草炭
土或蛭石基质中。采用比色法和等离子光谱法分别对栽培1年后的两种金线莲苗的糖类成分和无机元素进行分析
测定。结果 接菌栽培的金线莲苗内果糖、蔗糖、多糖和可溶性总糖的量均高于不接菌栽培的金线莲苗。在所检测
的11种无机元素中，菌根真菌对两种金线莲中无机元素吸收的影响随金线莲种类和栽培基质不同而变化。结论
菌根真菌AR一18不但促进了金线莲的生长．而且提高了其中糖类成分的量，并影响其对无机元素的吸收。
关■词：台湾金线莲；福建金线莲；菌根真菌l糖类成分}无机元素
中圈分类号：R282．2 文献标识码：A 文章缩号：0253—2670(2008)10—1565—04
台湾金线莲Anoectochilusformo anusHay．和
福建金线莲A．roxburghii(Wall．)Lindl．同属兰科
(Orchidaceae)开唇兰属濒危药用植物。近年来，由于
金线莲对高血压、糖尿病及肿瘤等疑难病症疗效独
收稿日期：2008．01．27
基金项目：国家自然科学基金资助项目(39970018)l国家杰出青年科学基金资助项目(30325047)
作者简介：唐明娟(1972一)，女．四川达县人．博士．从事植物分子生物学研究。
-通讯作者郭顺星Tell(010)62829619E—mail：sxgu02006@yahoo．com．Cn

万方数据
龙胆药材的HPLC指纹图谱研究
作者： 江蔚新， 钦浩， 何文顺， JIANG Wei-xin， QIN Hao， HE Wen-shun
作者单位： 哈尔滨商业大学药学院,黑龙江,哈尔滨,150076
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(10)
被引用次数： 3次

参考文献(3条)
1.中国药典(一部) 2005
2.谢培山 中药色谱指纹图谱 2004
3.肖墙根 新编中药志 2004

本文读者也读过(10条)
1. 阎正.于趁.张智慧.蔡立鹏.王春云.苑若瑶.王继坤.YAN Zheng.YU Chen.ZHANG Zhi-hui.CAI Li-peng.WANG
Chun-yun.YUAN Ruo-yao.WANG Ji-kun 鹿茸的HPLC指纹图谱[期刊论文]-河北大学学报（自然科学版）2010,30(2)
2. 张翠英.常断玲.周应群.陈士林.ZHANG Cui-ying.CHANG Duan-ling.ZHOU Ying-qun.CHEN Shi-lin 乌拉尔甘草
水溶性成分的HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-北京中医药大学学报2009,32(12)
3. 许传梅.张春红.董琦.胡风祖.XU Chuan-mei.ZHANG Chun-hong.DONG Qi.HU Feng-zu 藏药提宗龙胆花的化学成
分研究[期刊论文]-西北植物学报2008,28(12)
4. 宋丽明.王文燕.张智超.SONG Li-ming.WANG Wen-yan.ZHANG Zhi-chao 陕西安康葛根药材的HPLC指纹图谱研究
[期刊论文]-中草药2008,39(3)
5. 汪金玉.帅欧.林励.廖辛莉.WANG Jinyu.SHUAI Ou.LIN Li.LIAO Xinli 橘叶HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中药
新药与临床药理2011,22(1)
6. 沈涛.金航.王元忠.张金渝.袁天军.杨维泽.赵振玲.杨涛 中药龙胆化学成分研究进展[期刊论文]-安徽农业科学
2010,38(30)
7. 邬云霞.吴启南.WU Yun-xia.WU Qi-nan 淡竹叶HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-南京中医药大学学报2009,25(3)
8. 刘涛.才谦.付玉芹.杨松松 中药龙胆的研究进展[期刊论文]-辽宁中医杂志2004,31(1)
9. 刘妍.游富英.毕慧敏 陕西祖师麻药材HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-安徽农业科学2010,38(7)
10. 尹秀莲.游庆红.杨欢欢 野马追药材HPLC指纹图谱的研究[期刊论文]-安徽农业科学2010,38(19)

引证文献(3条)
1.曹悦.左代英.刘敬武.孙启时 GAP生产基地龙胆的质量控制及评价[期刊论文]-中草药 2010(5)
2.张嫚丽.霍长虹.刘丽.李力更.王于方.史清文 土木香药材HPLC指纹图谱研究及土木香内酯和异土木香内酯测定
[期刊论文]-中草药 2010(9)
3.邵建强 中药指纹图谱的研究进展[期刊论文]-中草药 2009(6)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200810038.aspx