全 文 ：藤黄酸对急性白血病细胞 U937 增殖和凋亡的影响
及对核孔蛋白 Nup88 的调控作用
舒文秀, 陈　燕Ξ , 何　静, 崔国惠
(华中科技大学同济医学院协和医院血液病研究所, 湖北 武汉　430022)
摘　要: 目的　观察藤黄酸对白血病细胞株 U 937 增殖和凋亡的影响及其对核孔蛋白 N up88 的调控作用, 研究藤
黄酸诱导凋亡作用与其调节 N up 88 的相互关系。方法　采用M T T 比色法检测细胞增殖活性, A nnex in2V F ITCö
P I 双标法及 Hoech st 33258 染色法分析细胞凋亡的改变, 流式细胞术分析细胞周期和细胞内核孔蛋白 N up 88 的
改变, R T 2PCR 检测藤黄酸对白血病细胞内 N upp88 基因表达的调控作用; 共聚焦显微镜观察 N up 88 蛋白的细胞
分布情况。结果　藤黄酸能明显抑制 U 937 细胞的增殖, 其抑制作用呈时间、剂量依赖性, 其 24 h 的 IC50为
(11019±01134) m göL ; 此外, 藤黄酸还具有诱导 U 937 细胞凋亡和 G0öG1期阻滞的作用。核孔蛋白N up 88 弥漫分
布于白血病细胞的核浆之间, 以细胞浆和核膜为主, 经藤黄酸干预后, N up88 的蛋白和 mRNA 表达水平明显下降,
主要集中于核膜的胞浆面, 偶见胞浆中表达。结论　藤黄酸能明显抑制 U 937 白血病细胞的增殖, 并诱导其凋亡。
而藤黄酸诱导的核孔蛋白 N up88 的重新分布以及表达量的下调可能参与了其诱导凋亡作用。
关键词: 藤黄酸; 白血病; 凋亡; N up 88
中图分类号: R 286191　　　文献标识码: A 　　　文章编号: 025322670 (2008) 0120074205
Effect on prol ifera tion and apoptosis and regula tion on nucleopor in Nup88
in acute leukem ic cell U937 by gam bog ic ac id
SHU W en2x iu, CH EN Yan, H E J ing, CU I Guo2hu i
( Inst itu te of H em ato logy, U nion Ho sp ita l, TongjiM edical Co llege, H uazhong U niversity
of Science and T echno logy, W uhan 430022, Ch ina)
Abstract: Objective　To invest iga te the effect on p ro lifera t ion and apop to sis and the regu la t ion on nu2
cleopo rin N up 88 in acu te leukem ic cell U 937 by gam bogic acid (GA ) in v itro. To study the rela t ion sh ip be2
tw een the effect and the regu la t ion. M ethods　T he effect of GA on the grow th of U 937 cells w as studied
by M T T assay. A pop to sis w as detected th rough A nnex in2V F ITCöP I doub le2labeled cytom etry and
Hoech st 33258 sta in ing. T he influence on cell cycle w as studied by a p rop id ium iodide m ethod. Bo th flow
cytom etry (FCM ) and R T 2PCR techno logies w ere app lied to assessing the exp ression of N up 88, w hereas,
the cell localiza t ion of N up 88 w as determ ined by u sing confocal m icro scopy m ethod. Results　GA p resen t2
ed strik ing p ro lifera t ion inh ib it ion, as w ell as apop to sis induct ion po tency on U 937 cells in v itro in a t im e2
and do se2dependen t m anner. T he IC 50 value fo r 24 h w as (1. 019±0. 134) m göL. M o reover, cells t rea ted
w ith GA show ed accum u lat ion in G0öG1phase and reduct ion in the percen tage of cells in S phase. T he ex2
p ression of N up 88 w as dow n2regu la ted in U 937 cells by GA in a do se2dependen t m anner, and the dispo si2
t ion of N up 88 w as also sw itched from w idely dispersed in bo th nucleu s and cytop lasm to situa te on ly at the
cytop lasm ic side of nuclear rim , occasionally in cytop lasm spo radica lly. Conclusion　GA exh ib its the po2
ten t p ro lifera t ion inh ib it ion, apop to sis induct ion, and cell2cycle arrest in leukem ia cells, w h ich m igh t co r2
respond to the dow n2regu la t ion of the exp ression, as w ell as the dispo sit ion, of nucleopo rin N up 88.
Key words: gam bogic acid (GA ) ; leukem ia; apop to sis; N up 88
　　近年来, 藤黄酸的抗肿瘤作用倍受人们关注, 藤
黄酸是传统中药藤黄 Ga rcin ia m orella D esv. 的主
要成分, 其抗肿瘤作用在多种实体瘤细胞中已得到
证实, 对其作用机制也作了一些推测, 但其对白血病
的作用研究甚少。在前期研究中, 发现核孔蛋白
N up 88 在白血病发病中起着关键作用。本研究通过
·47· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007204230
基金项目: 国家自然科学基金资助项目 (30472267)
作者简介: 舒文秀 (1979—) , 女, 湖北省武汉市人, 在读博士, 住院医师, 研究方向为血液的恶性肿瘤。
T el: (027) 85726387　E2m ail: teengel@ 126. com3 通讯作者　陈　燕　T el: (027) 85726387　Fax: (027) 85726916　E2m ail: yanchen@public. w h. hb. cn
观察藤黄酸对急性白血病细胞株U 937 细胞增殖和
凋亡的影响及其对N up 88 的调控作用, 探讨两者的
相互关系, 为藤黄酸的临床应用提供新的理论基础。
1　材料
　　藤黄酸质量分数> 95% , 购自美国 Calb iochem
公司, 用二甲基亚砜 (DM SO ) 稀释成 4 göL , 等量
分装, - 20 ℃ 保存, 临用前用 R PM I21640 培养液
稀释。四甲基偶氮唑盐 (M T T )、DM SO、碘化丙锭
(P I)、Hoech st 33258 荧光染液、RN ase A 均购自
Sigm a 公司; A nnex in—V F ITCöP I 试剂盒购自深
圳晶美生物工程有限公司; RNA 抽提试剂 T rizo l
和 R PM I21640 培养基由 Gibco BRL 公司提供; 胎
牛血清 (FCS) 购自杭州四季青生物工程材料有限
公司。氯仿、异戊醇、乙醇为国产分析纯。R T 2PCR
试剂盒购自 Ferm en tas 公司, 引物由上海英骏生物
技术有限公司合成。小鼠抗人单克隆抗体N up 88 购
自美国 San ta C ruz 公司, F ITC 标记的山羊抗小鼠
二抗 IgG 购自北京中杉试剂公司。人急性白血病细
胞株U 937 由华中科技大学同济医学院免疫教研室
提供。
2　方法
211　细胞培养及处理: U 937 细胞使用含 10% 灭
活 FCS、青霉素 100 IU ömL、链霉素 100 ΛgömL 的
R PM I21640 培养液, 37 ℃、5% CO 2、水饱和湿度条
件下培养。每 1～ 2 天换液传代1 次, 取活细胞大于
98% 的对数生长期细胞, 细胞悬液终浓度为 1×
106ömL , 分别与不同质量浓度的藤黄酸共同培养
后, 检测各项指标。
212　M T T 比色法检测细胞增殖: 将处于对数生长
期的U 937 细胞 (2×105ömL ) 接种于 96 孔板, 每
孔体积 200 ΛL , 经不同质量浓度藤黄酸处理 24～
72 h 后, 加入 5 m gömL M T T 20 ΛL , 37 ℃ 继续孵
育 4 h, 小心吸去培养上清液, 每孔加入 150 ΛL
DM SO , 振荡 10 m in, 使结晶充分溶解后于B io2R ad
M 450 酶标仪测定 492 nm 波长处的各孔吸光度
(A ) , 计算细胞增殖抑制率[增殖抑制率= (1- 实验
组A 值ö对照组A 值)×100% ]。实验重复3 次。
213　A nnex in2V F ITCöP I 双标法流式细胞术检测
细胞凋亡: 收集不同质量浓度藤黄酸处理后的
U 937 细胞及对照组细胞, 用 4 ℃ 预冷的 PBS 洗涤
2 次, 以 1×106ömL 的细胞密度重悬于 100 ΛL 的
1×结合缓冲液中, 加入 5 ΛL A nnex in2V F ITC 和
10 ΛL P I 染液, 轻轻混匀, 避光室温反应 15 m in, 再
加入 1×结合缓冲液 300 ΛL , 于 1 h 内上机检测。
214　Hoech st 33258 荧光染色观察: 收集各处理组
的U 937 细胞, PBS 洗1 次, 加 015 mL 甲醇2冰醋酸
(3∶1) 室温固定 20 m in, 离心去除固定液, PBS 洗1
次, 将细胞涂到预先经多聚赖氨酸处理的玻片上, 置
于空气中干燥; 用含有 012% T riton X—100 的
PBS 处理 5 m in, PBS 洗1 次; 滴加 Hoechest 33258
染液 (10 ΛgöL ) 37 ℃, 20 m in, 避光; 弃去染色液,
用蒸馏水洗3 次; 甘油封片。于荧光显微镜下观察,
并照相保存。
215　流式细胞术检测细胞周期: 收集各处理组的
U 937 细胞 1×106个, 以 PBS 缓冲液清洗 2 次, 用
70% 冷乙醇 4 ℃ 固定过夜, 离心, 用 PBS 洗 1 次,
加入 20 ΛL RN ase A 于 37 ℃ 水浴 30 m in, 再加入
300～ 500 ΛL P I 染液混匀, 至 4 ℃ 避光 30 m in, 用
流式细胞仪 (美国 Becton D ick in son 公司) 进行检
测, 记录激发波长 488 nm 处的红色荧光。
216　流式细胞术检测 N up 88 蛋白的表达: 收集各
处理组的 U 937 细胞, PBS 洗 1 次, 调整细胞数为
1×106ömL , 分别加入小鼠抗人 N up 88 (1∶100) ,
4 ℃ 孵育过夜, PBS 洗 1 次, 滴加 F ITC 标记的
IgG1 二抗 (1∶100) , 37 ℃ 孵育 30 m in, PBS 洗 1
次, 400 ΛL PBS 重悬, 上流式细胞仪检测。
217　激光共聚焦显微镜检测 N up 88 的细胞分布:
收获各处理组细胞, 4% 多聚甲醛固定 10 m in; 含
012% T riton X—100 PBS 置冰上破膜 10 m in; 用
含 3% 牛血清蛋白及 0102% T riton X—100 的
PBS 封闭 30 m in; 加一抗 N up 88 (1∶100) , 37 ℃
孵育 60 m in; PBS 洗6 次; P I 染细胞核 15 m in; PBS
洗 3 次; 再将细胞涂到预先经多聚赖氨酸处理的玻
片上; 甘油封片后, 用激光共聚焦显微镜 (O lym 2
pu s, 日本) 观测。
218　R T 2PCR 检测 N up 88 mRNA 表达: T rizo l 法
提取细胞总 RNA , 按说明书合成 cDNA。以细胞
cDNA 的第一链为模板, 进行 PCR 反应。N up 88 的
PCR 扩增条件为: 94 ℃、5 m in, 94 ℃、30 s, 60 ℃、1
m in, 循环 10 次; 94 ℃、30 s, 58 ℃、40 s, 72 ℃、1
m in, 循环 30 次; 72 ℃ 延伸 7 m in, 4 ℃ 保存。PCR
产物的电泳分析: 取 5 ΛL 产物经 115% 的琼脂糖
凝胶电泳, 紫外照相并进行扫描分析, 以N up 88öΒ2
act in 进行N up 88 基因表达水平的半定量分析。
N up 88 引物序列为: 上游引物: 5′2GGA G2
CT T GCT T T GAAA CT GG23′; 下 游 引 物: 5′2
A T T TCCCGCA GA CT T T TCCT 23′; 扩增产物为
741 bp。Β2act in 引物序列为: 上游引物: 5′2T GA 2
·57·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
GA CCT TCAA CA CCCCA G23′; 下游引物: 5′2GC2
CA TCTCT T GCTCGAA GTC23′; 扩增产物为 312
bp。
219　统计方法: 应用统计学软件 SPSS 1310 进行
分析, 数据以 x ±s 表示, 组间比较采用 t 检验。
3　结果
311　藤黄酸对白血病细胞U 937 增殖的影响: 分别
以 01062 5、01125、0125、015、110、210、410 m göL
藤黄酸作用 U 937 细胞后, 各处理组细胞的增殖活
性明显低于对照组。随着药物作用时间和作用质量
浓度的逐渐增加, 藤黄酸对 U 937 细胞的增殖抑制
作用逐渐增强, 其 24 h 的 IC 50为 (11019±01134)
m göL , 随着药物作用时间的延长, 其 IC 50值也逐渐
减小, 48、72 h 的 IC 50 分别为 ( 01450± 01107)、
(01325±01079) m göL , 见图1。
图 1　藤黄酸对 U937 细胞增殖抑制的时效与量效关系
(x±s, n= 3)
F ig. 1　Time-effect and dose-effect rela tion sh ip
of prol iferation inh ibition by GA
on U937 cells (x±s, n= 3)
312　藤黄酸对白血病细胞 U 937 凋亡的影响: A n2
nex in V 2F ITCöP I 双标法检测藤黄酸对U 937 细胞
凋亡的影响, 其中早期凋亡细胞指 A nnex in V 2
F ITC 标记阳性, 而 P I 标记阴性的细胞群; 晚期凋
亡细胞指的是 A nnex in V 2F ITC 与 P I 均标记阳性
的细胞群; 总凋亡率为早期凋亡率与晚期凋亡率的
总和。表1 结果所示, 随着藤黄酸质量浓度的增加,
越来越多的U 937 细胞发生凋亡, 015 m göL 藤黄酸
诱导 24 h, 其早期凋亡率为 (8153±0163) % , 当藤
黄酸质量浓度达到 210 m göL 时, 其早期凋亡率升至
(22168±1113) % , 总凋亡率为 (31196±1131) %。
另外, 藤黄酸干预 (110 m göL , 作用 24 h) 的 U 937
细胞经 Hoech st 33258 染色后, 也出现了典型的细胞
凋亡形态的改变, 如染色质浓缩、边缘化, 核膜裂解、
染色质分割成块状和出现凋亡小体等。
313　藤黄酸对 U 937 细胞周期的影响: 藤黄酸可诱
表 1　藤黄酸对 U937 细胞凋亡的影响 (x±s, n= 3)
Table 1　Effect of GA on apoptosis of U937
cells (x±s, n= 3)
组别
Θö
(m g·L - 1)
早期凋亡率ö
%
晚期凋亡率ö
%
总凋亡率ö
%
对照 - 2129±0118 1113±0113 3143±0130
藤黄酸 015 8153±01633 3 4173±0119 13127±01793 3
110 16177±11063 3 7107±012 23184±11263 3
210 22168±11133 3 9128±0149 31196±11313 3
　　与对照组比较: 3 3 P < 0101
　　3 3 P < 0101 vs con tro l group
导 U 937 细胞周期阻滞于 G0öG1期, 随着藤黄酸质
量浓度的增加, G0öG1期的细胞越来越多, 相应的 S
期细胞逐渐减少, 而 G2öM 期细胞改变不明显。此
外, 当藤黄酸达到作用的最高质量浓度 (210 m gö
L ) 时, 可见明显的亚二倍体峰—凋亡峰, 其凋亡率
达 (13189±1136) % , 见表2。
表 2　藤黄酸对 U937 细胞周期的影响 (x±s, n= 3)
Table 2　Effect of GA on cell cycle of U937 cells
(x±s, n= 3)
组别
Θö
(m g·L - 1)
细胞周期分布ö%
G0öG1 S G2öM 细胞凋亡率ö%
对照 - 36122±1104 47192±1156 16159±0172 0187±0142
藤黄酸 015 38165±1146 43121±2107 18113±3106 1162±0144
110 51199±21073 3 34129±31003 3 13171±2181 3112±01813
210 65188±21703 3 22101±11223 3 12110±3154 13189±11363 3
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
314　藤黄酸对白血病细胞 U 937 核孔蛋白 N up 88
表达的调控作用: 在未处理的U 937 细胞中, 存在较
高荧光强度的N up 88 蛋白的表达, 其阳性细胞占总
射门细胞的 90% 以上。随着藤黄酸质量浓度的增
加, 其蛋白荧光强度逐渐减弱, 阳性细胞比例也逐渐
减少。当藤黄酸质量浓度达到最大值 (210 m göL )
时, N up 88 蛋白阳性细胞的比例也降至最低值。为
了进一步检测藤黄酸对 N up 88 转录水平的调控作
用, 应用 R T 2PCR 技术检测了U 937 细胞内N up 88
基因表达水平的改变, 同样, 藤黄酸以质量浓度依赖
方式下调 U 937 细胞内核孔蛋白 N up 88 的转录水
平, 结果见图2 和表3。
315　激光共聚焦显微镜观察 N up 88 的细胞分布:
激光共聚焦显微镜下,N up 88 弥漫分布于白血病细
胞的核浆之间, 见图3 所示。对照组细胞荧光强度值
高达 180193±8131, 经 110 m göL 的藤黄酸作用 24
h 后, N up 88 的荧光强度明显减弱, 降至 105141±
9175 (P < 0105) , 其在细胞的分布也主要集中于核
膜的胞浆面, 偶见于胞浆中表达。
·67· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
图2　藤黄酸对U937 细胞内Nup88 蛋白mRNA 表达的影响
F ig. 2　Effect of GA on expression of Nup88 mRNA
in U937 cells
表 3　藤黄酸对 U937 细胞核孔蛋白 Nup88 的
影响 (x±s, n= 3)
Table 3　Effect of GA on expression of nucleopor in
Nup88 in U937 cells (x±s, n= 3)
组别 Θö(m g·L - 1) N up 88 蛋白表达ö% N up 88 基因表达 (N up88öΒ2actin)
对照 - 961437±11944 01931±01040
藤黄酸 015 871720±315483 01853±010243
110 681507±314523 3 01627±010443 3
210 501277±317803 3 01481±010453 3
　　与对照组比较: 3 P < 0105　3 3 P < 0101
　　3 P < 0105　3 3 P < 0101 vs con tro l group
A 2藤黄酸治疗前N up88 在细胞内分布　B2110 m göL 藤黄酸
治疗后N up88 在细胞内的分布　a2F ITC 标记的蛋白荧光图
b2P I 标记的 DNA 图　c2图a 与图b 的融合图
A 2exp ression of N up88 in U 937 cells of con tro l　B2exp ression
of N up88 in cells treated by 1. 0 m göL GA 　a2p ro tein stained
w ith F ITC　b2DNA stained w ith P I　c2m erging figure a w ith
figure b
图 3　藤黄酸对Nup88 蛋白在 U937 白血病
细胞中分布的影响
F ig. 3　Effects of GA on subcellular loca l ization
of Nup88 in U937 cells
4　讨论
　　早在20 世纪80 年代, 就有学者对藤黄抗肿瘤特
性进行了相关报道, 并进一步确定了其有效成分藤
黄酸的不同于一般抗癌药物的特性, 它能选择性地
杀死癌细胞, 以实体瘤报道的最为多见, 而对正常的
造血细胞及心、肝、肾等组织器官均无明显损害, 故
被认为是一种安全有效, 可以长期连续使用的抗癌
药物[1, 2 ]。有关其抗癌机制, 已有一些报道, 但其在白
血病中的研究甚是少见。本实验以体外培养的急性
单核细胞白血病细胞系 U 937 作为研究对象, 观察
藤黄酸对 U 937 细胞的生长抑制和诱导凋亡作用,
并探讨其可能的分子机制。
本研究发现, 藤黄酸能明显抑制 U 937 细胞的
增殖, 该抑制作用与药物作用时间和药物作用质量
浓度呈正相关。同时, 藤黄酸对U 937 细胞具有较强
的诱导凋亡作用, 极低质量浓度的藤黄酸 (015 m gö
L ) 即能诱导U 937 细胞发生凋亡, 并逐渐出现染色
质浓缩、边缘化, 核膜裂解、染色质分割成块状和凋
亡小体等凋亡形态的改变。研究发现, 藤黄酸抗凋亡
作用可能与其抑制端粒酶活性, 诱导 c2M yc、bcl22
降解, 促进 bax、P53 等促凋亡蛋白表达有关[3, 4 ]。另
外, 转铁蛋白受体做为新发现的藤黄酸结合的受体
蛋白, 可能在其启动的线粒体途径的凋亡过程中发
挥重要作用[5 ]。
郭青龙等[6 ]在对人胃腺癌 SGC27901 细胞的研
究中发现, 藤黄酸可能通过抑制周期调控蛋白如
CDC2öp 34、CD K7 和 cyclin H 的表达而诱导细胞周
期阻滞于 G2öM 期, 从而发挥诱导 SGC27901 细胞
凋亡的作用。为研究藤黄酸对U 937 细胞的诱导凋
亡作用是否也与其阻滞细胞周期进展有关, 本研究
进一步观察了藤黄酸对 U 937 细胞的周期调控作
用。与上述结果相反的是, 藤黄酸并不能诱导U 937
细胞周期阻滞于 G2öM 期, 随着藤黄酸质量浓度的
增加, G0öG1期的细胞逐渐增加, S 期的细胞逐渐减
少。当藤黄酸作用质量浓度达到最大值 210 m göL
时, 可见明显的亚二倍体凋亡峰。
无论是细胞增殖, 或是细胞凋亡, 都是在一系列
分子的精细调控下进行的。而这些分子又并非一成
不变的固定于同一亚细胞结构, 因而物质的核浆穿
梭行为成为调控细胞生物学特性的关键环节之一。
作为跨越核膜的唯一通道, 核孔复合物 (N PC ) 在
核浆穿梭的过程中发挥着重要作用。而核孔蛋白
(N ucleopo rin s, N up s) 作为 N PC 的重要组成成
分, 除了参与大分子的核质转运, 它还在细胞周期、
信号转导、凋亡等生命过程中发挥“非转运”的作用。
此外, 某些 N up s 的异常直接影响了原癌基因或抑
癌基因产物以及信号转导分子等穿梭蛋白的核质转
运过程, 这往往是导致细胞癌变的一个重要原因。因
此, 对 N up s 与肿瘤关系的深入研究, 将为肿瘤的诊
断和治疗开辟一条新思路。在众多研究的N up s 中,
N up 88 的高表达与肿瘤的关系最为密切。截至目前
为止, 已在多种肿瘤细胞系和原发的肿瘤组织如胃
癌、肝癌、乳腺癌、卵巢癌、肾癌、前列腺癌等实体瘤
·77·中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
中检测到 N up 88 高表达, 并呈弥漫分布, 而并未检
测到其他核孔蛋白 (如 N up 214 和 N up 153) 的表
达异常; 相比之下, 在对应的正常组织、良性肿瘤或
增殖性病变中,N up 88 呈弱表达和散在分布, 因此,
Gou ld 等[7 ]认为 N up 88 可以作为肿瘤诊断的检测
指标之一。此外, 大量研究还显示, 肿瘤细胞内
N up 88 的高表达, 无论是在生物学特性方面, 还是
生化指标上, 都预测着肿瘤的高度侵袭性和转移倾
向, 而其他核孔蛋白并无此特性[8 ]。在之前的研究
中, 也发现N up 88 在白血病细胞系U 937 中呈现高
表达, 并弥漫分布于细胞的核浆之间, 诱导 N up 88
蛋白表达下调后可能抑制了白血病细胞的增殖[9 ]。
而 Ro th 等[10 ]推测 N up 88 蛋白表达量的异常或基
因的突变均将影响其他蛋白的异常定位, 从而导致
物质输出障碍。本实验的初步结果表明, 在U 937 细
胞中N up 88 蛋白呈高表达, 经不同质量浓度的藤黄
酸处理后, 其蛋白和基因表达水平均以质量浓度依
赖性的方式逐渐递减, 在藤黄酸质量浓度达到 210
m göL 时, N up 88 蛋白和基因转录水平也降至最低
值。正常情况下, N up 88 蛋白主要定位于核膜的胞
浆面, 而在U 937 细胞中, N up 88 蛋白弥漫分布于细
胞的核浆之间, 以细胞浆和核膜为主, 经藤黄酸干预
后, N up 88 的荧光强度明显减弱, 其细胞定位也主
要集中于核膜的胞浆面, 偶见于胞浆中, 这和之前的
研究结果相类似。由此可见, 藤黄酸极有可能通过调
控核孔蛋白 (N up 88) 的表达以及分布来影响某些
关键分子的核浆穿梭, 从而调控白血病细胞的生物
学活性, 诱导细胞发生凋亡。然而,N up 88 究竟是如
何影响核浆穿梭异常的, 它又改变了哪些重要分子
的穿梭仍不得而知, 有待进一步研究。
参考文献:
[ 1 ]　雷秋模, 刘金妹1 藤黄抗癌作用研究的回顾与展望 [J ]1 肿瘤
防治杂志, 2003, 10 (2) : 21622191
[ 2 ]　Guo Q L , Q i Q , You Q D , et a l. Tox ico logical studies of
gam bogic acid and its po ten tial targets in experim en tal an i2
m als [J ]1 B asic C lin P harm acol T ox icol, 2006, 99 (2) : 1782
1841
[ 3 ]　Yu J , Guo Q L , You Q D , et a l. Rep ression of telom erase
reverse transcrip tase mRNA and hT ERT p romo ter by in2
h ib ito ry effects of oncogene C2m yc in gam bogic acid treated2
hum an gastric carcinom a cells [J ]1 Cancer Chem oth P harm a2
col, 2006, 58 (6) : 43424431
[ 4 ]　Zhao L , Guo Q L , You Q D , et a l. Gam bogic acid induces
apop to sis and regu lates exp ressions of Bax and Bcl22 p ro tein
in hum an gastric carcinom a M GC2803 cells [J ]1 B iol P harm
B u ll, 2004, 27 (7) : 998210031
[ 5 ]　Kasibhatla S, Jessen K A , M aliartchouk S, et a l. A ro le fo r
transferring recep to r in triggering apop to sis w hen targeted
w ith gam bogic acid [J ]1 P roc N a tl A cad S ci U SA , 2005,
102 (34) : 120952121001
[ 6 ]　郭青龙, 赵　丽, 尤启冬, 等 1 藤黄酸诱导人胃腺癌 SGC2
7901 细胞的凋亡作用 [J ]1 中国天然药物, 2004, 2 (2) : 1062
1101
[ 7 ]　Gould V E, O rucevic A , Zen tgraf H , et a l. N up88 (kary2
opo rin) in hum an m alignan t neop lasm s and dysp lasias: co rre2
lat ions of imm uno stain ing of tissue sections, cyto logic
sm ears, and imm unob lo t analysis [J ]1 H um P athol, 2002,
33 (5) : 53625441
[ 8 ]　A gudo D , Gom ez E F, M artinez A F, et a l. N up88 mRNA
O verexp ression is associated w ith h igh aggressiveness of
b reast cancer [J ]1 In t J Cancer, 2004, 109 (5) : 71727201
[ 9 ]　L iu H L , Chen Y, Cui G H , et a l. D eguelin regu lates nucle2
ar po re comp lex p ro teins N up98 and N up88 in U 937 cells in
v itro [J ]1 A cta P harm S in, 2005, 26 (10) : 1265212731
[ 10 ]　Ro th P, XylourgidisN , SabriN 1 T he dro soph ila nucleopo rin
DN up88 localizes DN up214 and CRM 1 on the nuclear enve2
lope and attenuates N ES2m ediated nuclear expo rt [J ]1 J Cell
B iol, 2003, 163 (4) : 70127061
何首乌醋酸乙酯提取部位与二苯乙烯苷的调血脂作用
王春英, 张兰桐Ξ , 袁志芳, 金一宝, 张　峥
(河北医科大学药学院 药物分析教研室, 河北 石家庄　050017)
摘　要: 目的　研究何首乌醋酸乙酯提取部位 (EA FF2PM ) 与有效成分二苯乙烯苷的调血脂作用。方法　观察
EA EF2PM 和二苯乙烯苷对正常小鼠血脂及肝脏指数的影响; 小鼠 ip T riton 致急性高脂血症模型, 观察 EA EF2
PM 和二苯乙烯苷对模型小鼠血脂水平的影响; 以大鼠食饵性高脂血症为模型, 给予高脂饲料的同时给予 EA EF2
·87· 中草药　Ch inese Traditiona l and Herbal D rugs　第 39 卷第 1 期 2008 年 1 月
Ξ 收稿日期: 2007205224
基金项目: 河北省自然科学基金资助项目 (C2006000791)
作者简介: 王春英 (1972—) , 女, 讲师, 在读博士, 研究方向为中药有效成分的提取分离与药效物质基础研究。
T el: (0311) 86265625　E2m ail: w angcy730301@ 163. com3 通讯作者　张兰桐　T el: (0311) 86266419　E2m ail: zhanglan tong@ 263. net