全 文 ：·704· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
mL，每一供试品浓度重复两反应管。将两系列的反
应管置(374-1)℃水浴中，保温(60土2)min。反应
结果见表2。
2．3 干扰试验：根据初筛试验结果，选择样品稀释质
表2大蒜素注射液初筛试验结果
Table2 ScreeningtestforAllitrideInj ction
量浓度为0．2mg／mL，即内毒素限值为0．5EU／mL。
选取灵敏度为0．5EU／mL的不同产家鲎试剂，用
细菌内毒素检查用水将样品稀释至质量浓度为0．2
mg／mL，进行干扰试验。干扰试验按《中国药典》
2005年版细菌内毒素检查法的供试品干扰试验项
进行，结果见表3。结果显示，Es在0．5入～2．O入且
Et在0．5Es～2．0Es，故认为将供试品稀释至质量
浓度为0．2mg／mL以下时，对不同厂家生产的鲎试
剂不产生干扰。
裹3大蒜素注射液干扰试验结果
Table3 ResultsofInterferencetestforAllitrideInj ction
2．4细菌内毒素检查法与热原检查法对比试验：取
3批热原检查合格的大蒜素注射液(每批各取5支)
分别用细菌内毒素检查用水稀释至0．2mg／mL，使
用灵敏度为0．5EU／mL的鲎试剂按药典方法检查，
结果全部呈阴性。
3讨论
注射剂质量控制中，采用家兔法控制细菌内毒
素，由于操作复杂，影响因素多，而且费时，采用鲎试
验法操作简单、迅速且灵敏度高。
初筛试验只是一种预试验，最终要经干扰试验
验证，其目的是评价样品质量浓度对鲎试剂与内毒
素凝集反应的干扰程度及干扰性质，以便初步筛选
出对检查无干扰的样品质量浓度范围及相应的鲎试
剂灵敏度，从而为干扰试验提供必要的参数，避免鲎
试剂的浪费。样品对细菌内毒素检查的干扰性质为
抑制作用，质量浓度为0．4mg／mL时对鲎试剂与细
菌内毒素的凝集反应呈不明显的干扰作用，质量浓
度为0．2mg／mL时无干扰作用，故选择灵敏度为
0．5EU／mL的鲎试剂对相应的样品稀释质量浓度
作干扰试验。
参考文献：
[1]中国药典Is]．二部．2005．
[2]黄清泉，夏振民．药品细菌内毒素检查的实验设计口]．中国
药学杂志，1997，32(2)：72．
[3]何清林，田洪．不同浓度依达拉酮注射液的细菌内毒素检测
方法[J]．中国医院药学杂志，2003．23(5)：270．
[4]施震，尹银嘉，李华．注射用头孢替唑中细菌内毒素的检
测l-J]．中国药学杂志，2003，38(5)；377．
HPLC法测定四味益气胶囊中人参皂苷Re和人参皂苷Rg。
郑新元1，赵晨1，黎先军2，吕曙华1
(1．天津市药品检验所，天津300070；2．天津宏仁堂制药有限公司，天津300122)
四味益气胶囊是由人参茎叶总皂苷、维生素E、
维生素B。和刺五加提取物等加工制成的制剂，具有
益气健脾等功效，主要适用于气虚证，症见精神倦
怠，气短乏力，食欲不振，肢冷，健忘等。处方中人参
茎叶总皂苷为君药，故参考有关文献报道叭23以人参
皂苷Re和人参皂苷Rgt为定量指标，制定人参茎
收稿日期：2007—09—26
作者简介：郑新元(1980一)，男，硕士，山西人．Tell(022)23374076E-mail：zhengxingyuan362@sohu．conl

万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月·705·
叶皂苷的测定方法，以有效地控制该产品的质量。
1仪器与试药
ShimadzuLC一2010AHT高效液相色谱仪，人
参皂苷Re(批号110754—200320)和人参皂苷Rgl
(批号110703—200424)对照品均由中国药品生物制
品检定所提供，四味益气胶囊由天津宏仁堂药业有
限公司提供；乙腈为色谱纯，水为去离子水，其他试
剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱AgilentHCC18(250mm×
4．6mm，5pm)；流动相：乙腈(A)一水(B)，进行梯度
洗脱，O～35min，19oAA，35～55min，19％A～25％
A，55～60min，25％A～50％A，60～65min，50％
A～190．4A；柱温：40℃；体积流量：1．0mL／min；测
定波长：203nm。人参皂苷Re和人参皂苷Rg。色谱
峰分离度符合要求。
2．2对照品溶液的制备：取人参皂苷Re、人参皂苷
Rg。对照品适量，精密称定，加甲醇制成各含人参皂
苷Re0．4mg／mL，人参皂苷R910．2mg／mL的混
合溶液，即得。
2．3供试品溶液的制备：取装量差异项下的本品，
研细，取粉末约0．6g，精密称定，置具塞锥形瓶中，
精密加入甲醇50mL，称定质量，浸泡过夜，加热回
流1h，放冷，再称定质量，用甲醇补足减失的质量，
摇匀，滤过。精密量取续滤液25mL，蒸干，残渣加水
15mL使溶解，用水饱和的正丁醇振摇提取4次
(20、20、10、10mL)，合并正丁醇液，用氨试液洗涤2
次，每次10mL，弃去氨试液，正丁醇液蒸干，残渣加
甲醇使溶解，转移至5mL量瓶中，加甲醇至刻度，
摇匀，即得。
2．4阴性干扰试验：取缺人参茎叶总皂苷的阴性样
品，按照供试品溶液的制备方法制备阴性对照溶液。
取人参皂苷Re、Rg，对照品溶液、四味益气胶囊供
试品溶液和缺人参茎叶总皂苷的阴性对照溶液，进
样分析，得色谱图，见图1。
2．5线性关系考察：分别取人参皂苷Re、人参皂苷
Rg。对照品适量，精密称定，加甲醇制成1．8405、
0．8370mg／mL的溶液。精密吸取1、2、3、5、7、10
mL置10mL量瓶中，加甲醇至刻度，作为对照品溶
液。分别精密吸取10肛L，进样分析，测定各自峰面
积。以进样质量为横坐标，峰面积为纵坐标，绘制标
准曲线，得回归方程。人参皂苷Re：Y=303518．1
X+5089．1，，．=0．9999；人参皂苷R91：Y一
347914．5X一1918．19，，．=0．9999。结果表明人参
h !． 五 ．．八、．—^．———．———，．、—————．————————————————，—2ⅡL—．√＼、、
厂—矿—百—1F■矿—丽—1F]o
0 10 20 30 40 50 60 70
0 lO 20 30 40 50 60 70
t／rain
l一人参皂苷Rgl2-人参皂苷Re
1-ginsenosideRgl2-ginsenosideRe
图1混合对照品(A)、四味益气胶囊(B)和阴性
对照(C)的HPLC色谱圈
Fig．1HPLCChromatogramsfmixedreference
substances(A)，SiweiYiqiCapsula(B)，
andnegativesample(C)
皂苷Re在1．8405～18．405pg、人参皂苷Rg。在
0．837～8．370pg与峰面积的线性关系良好。
2．6 精密度试验：精密吸取供试品溶液(批号
061401)，分别精密吸取10弘L，连续进样6次，测定
各自峰面积，计算，结果人参皂苷Re、人参皂苷Rg。
峰面积的RSD分别为0．94％、0．75％。
2．7稳定性试验：取供试品溶液(批号061401)，分
别在0、4、8、12h内测定各自峰面积，计算，结果供
试品溶液在12h内基本稳定，人参皂苷Re、人参皂
苷Rg。峰面积的RSD分别为0．34％、1．07％。
2．8 重现性试验：取同一批样品(批号061401)6
份，制备供试品溶液，进样分析，分别测定并计算样
品中人参皂苷Re、人参皂苷Rg。的质量分数，结果
人参皂苷Re、人参皂苷Rg。的质量分数分别为
6．646、2．607mg／g，RSD分别为2．12％、1．71％。
2．9加样回收率试验：称取含人参皂苷Re6．646
mg／g、人参皂苷Rg。2．607mg／g的同一批样品(批
号061401)约0．3g，取6份，精密称定，分别精密加
入人参皂苷Re、人参皂苷Rg。混合对照品溶液(含人
参皂苷Re0．08635mg／mL、人参皂苷Rg。0．03405
mg／mL)25mL，制备供试品溶液，进样测定，计算得
二者的回收率分别为99．04％(RSD为0．73％)、
99．34％(RSD为0．82％)。
2．10样品测定：取四味益气胶囊样品3批，制备供
试品溶液，进样测定，按外标法计算样品中人参皂苷
Re、人参皂苷Rg。的质量分数，结果见表1。

万方数据
·706· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第5期2008年5月
表1 四味益气胶囊中人参皂苷Re和人皂苷Rg。的
测定结果(一：2)
Table1 DeterminationofginsenosideReandginsenoside
RglinSiweiY qiCapsula(矗=2)
批号 人参皂苷Re／(mg-g一1)人参皂苷Rgl／(mg·g一1)
3讨论 ，
原标准中采用等度洗脱方式，人参皂苷Rg，与
人参皂苷Re分离效果较差。人参皂苷Rg。与人参
皂苷Re结构极其相似，是造成二者分离效果较差
的主要原因。本实验采用梯度洗脱的方式，克服了上
述现象，使两者的分离度与理论板数均有较大提高，
内在质量得以体现。
供试品溶液制备方法的选择与确定分别对提取
溶剂(甲醇与2％氢氧化钾甲醇溶液)、提取方法(加
热回流 h，超声处理1h、浸泡过夜后加热回流1h
及浸泡过夜后加热回流2h)、提取溶剂用量(25、50、
75mL)、正丁醇提取次数(1、2、3、4、5次)进行了考
察，最终确定以甲醇50mL浸泡过夜，加热回流1h，
水饱和的正丁醇振摇提取4次作为最佳提取方式。
参考文献：
[1]孙艳，张卫同，陈海滨，等．HPLC法测定参芪颗粒中人参
皂苷Rgl和Re[J]．中草药，2007，38(7)l1009—1010．
[2]中国药典[s]．一部．2005．
壳聚糖用于山茱萸水提液除鞣质工艺的探讨
安晓娇，康 勇+，范福洲
(天津大学化工学院，天津300072)
山茱萸是我国传统的中药材，在免疫系统、降血
糖、抗休克、强心等方面具有一定的活性。山茱萸中
含有苷类、有机酸类、糖类和鞣质类成分，其中苷类
为强心作用的主要成分。马钱苷(又名番木鳖苷)是
环烯醚萜苷类成分，为山茱萸的主要有效成分，也是
重要的心血管活性的物质，在预防心血管疾病方面
具有十分有效的作用[1]。鞣质是一种相对分子质量
较大的多元酚类化合物，许多中药提取物中都含有
鞣质。中药制剂中含有鞣质，会影响制剂的稳定性和
澄明度，还可能会引起一系列的严重不良反应，如某
些鞣质一旦注入体内会引起黄疸和肝坏死等一系列
临床症状；中药注射液中的鞣质将使血液中蛋白质
凝固，从而引起皮下出血，导致组织坏死，造成无菌
炎症；鞣质还能加速红细胞的凝聚，并能与血红蛋白
形成药物性沉淀[2]。此外，在对中药的有效部位进行
生理生化活性研究时，鞣质往往为有害或干扰成分。
因此，从中药提取物中去除鞣质已经引起广泛关注。
本实验采用壳聚糖絮凝法去除山茱萸水提液中的鞣
质，保留其有效成分马钱苷，为进一步提纯山茱萸水
提液作准备。
1仪器与试药
高效液相色谱仪，LabAllianceModel500紫外检
测器；混凝试验搅拌仪(潜江市梅宇仪器有限公司)，
WGZ一100型散射式光浊度仪(上海珊科仪器厂)。
山茱萸为炙萸肉，由天津市中药饮片厂提供；马
钱苷对照品由中日友好医院临床医学研究所提供，
HPLC检测其质量分数为98．42％；壳聚糖为分析
纯，脱乙酰度为90．58％，玉环县海洋生物化学公司。
2方法与结果
2．1 山茱萸水提液的制备：取山茱萸400g，加水
3．2L，煮沸1h后倒出药液，药渣再加水3．2L，煮
沸后lh倒出药液。合并两次水煮液，即得(以生药
计质量浓度为0．12g／mL)。
2．2 壳聚糖絮凝剂的配制：用0．1％冰醋酸配制
1％壳聚糖冰醋酸溶液，溶胀24h，备用。
2．3马钱苷的HPLC法测定
2．3．1色谱条件：色谱柱为WatersSperisorbODS
2(250am×4．6nm，5pm)；流动相：甲醇一水(30：
70)；体积流量：1．0mL／min；检测液长：240nm；柱
温：室温；灵敏度：0．05AUFS。在此条件下马钱苷
可以与其他成分达到很好的分离。见图1。
2．3．2标准曲线的制备：精密称取马钱苷对照品
收稿日期：2007-09—12
作者简介：安晓娇(1980一)，女，河北石家庄人，硕士，研究方向为非均相固液分离以及中药除杂研究。
Tel：(022)87401578E—mail：anxiao／iao@eyou．tom
*通讯作者康勇Tel：(022)27408813E—mail：ykang@tju．edu．cn

万方数据
HPLC法测定四味益气胶囊中人参皂苷Re和人参皂苷Rg1
作者： 郑新元， 赵晨， 黎先军， 吕曙华
作者单位： 郑新元,赵晨,吕曙华(天津市药品检验所,天津,300070)， 黎先军(天津宏仁堂制药有限公司
,天津,300122)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(5)

参考文献(2条)
1.孙艳;张卫同;陈海滨 HPLC法测定参芪颗粒中人参皂苷Rg1和Re[期刊论文]-中草药 2007(07)
2.中华人民共和国药典(一部) 2005


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200805024.aspx