全 文 ：中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·955·
肿、赤白带下。棉花肾中含有黄酮苷、酚类、氨基酸、有机酸等
成分。但其药理作用方面的研究尚未见报道。临床肾炎患者
蛋白阳性，常加棉花肾、苡仁各9g治疗。用本品30～60g合
猪蹄一只同煮．食汤及蹄，治腰肌劳损，本品常与肖梵天花
U．10bataL．混用。
1．7 花麦肾：为蓼科植物野养麦Fagopyrumcymosum
(Trey．)Meisn．的干燥全草，由于野荞麦和花麦形似，温州
民间将养麦称花麦，故名。其昧甘、涩、微苦．性凉。清热解毒、
排脓消肿、益肾。用于肺脓疡、盗汗、急性扁桃体炎、肾虚腰
痛、疖痛、毒蛇咬伤。花麦肾主要药效成分为野荞麦苷、双聚
原矢车菊素等。现代药理学研究表明，其具有抗癌、抗菌、解
热、镇咳等作用。民间治盗汗，常取其鲜嫩顶7～10个，切细
同鸡蛋炒食}或加雀麦(禾本科)30g，红枣10枚，糯米--d,把
同煮服．对阴虚潮热盗汗更为适用。
2验方。七肾汤”
2．1组成：红对叶肾、白对叶肾、龙芽肾、菜头肾、荔枝肾、棉
花肾、花麦肾各15g，水煎服。
2．2功能主治：本方补肾健脾，通络止痛。用于肾虚所致的
腰背酸痛、腰部扭伤、腰肌劳损、遗精盗汗、冲任不固等。
2．3辨证配伍：七肾汤中各肾草常常因病情不同而用药有
所侧重，如男性腰背酸痛、阳痿重用白对叶肾；女性腰背酸
痛、小腹隐痛、带下量多。重用荔枝肾；脾肾阳虚的慢性腹泻、
五更泻，重用红对叶肾、棉花肾；骨蒸劳热、阴虚盗汗，重用花
麦肾；肝肾阴虚、慢性肾炎腰痛，重用菜头肾；月经过多，重用
龙芽肾等。
3结语
肾草中的菜头肾是温州独特的草药，随着市场需求加
大，药源渐见匮乏，极有必要进行全国资源调查，引种栽培。
七肾汤一般可用全方，但亦可随症选用数味成“六肾
汤”、“五肾汤”或“四肾汤”等。如温州医学院附一院就用红对
叶肾、白对叶肾、棉花肾、荔枝肾、龙芽肾、花麦肾等“六肾汤”
制成“肾药合剂”治疗骨质疏松症，对于腰痛病症，总有效率
90．1％，疗效显著[2]。
参考文献：
[1]林泉．浙南药用植物中的一新种——菜头肾口]．植物分
类学报，1975，13(3)：93．
[2]吴春雷．肾药合剂治疗骨质疏松症的临床观察口]．浙南新
医药，2002，1(2)：19．
HPLC—ELSD在中药糖类分析中的应用
陈琴呜1，刘文英2
(1．丽水市食品药品检验所，浙江丽水323000；2．中国药科大学药物分析教研室，江苏南京210009)
高效液相色谱(HPLC)是20世纪60年代后期发展起来
的分离分析技术，是现代分离测定的重要手段。HPLC可与
多种检测器联用对样品进行测定。蒸发光散射检测器
(evaporativelight—scatteringdetector，ELSD)是一种通用型
质量检测器，由于其具有可测定无紫外吸收的化合物、可进
行梯度洗脱等特点，弥补了紫外检测器(UVD)和示差折光
检测器(RID)的不足。在分析领域应用十分广泛。在我国自
2001年首次在黄芪注射液质量标准中应用以后，其在药品
质量控制及药物分析中的应用得到了快速的发展。《中国药
典》2005年版。附录VD高效液相色谱法”检测器中收载了
ELSD，更促进了其在药物分析中的应用。糖类特别是多糖由
于其结构的特殊性，对其结构分析、质量控制一直是个难题，
ELSD的应用无疑给糖类的分析开辟了新的思路。本文就
HPLC．ELSD在中药糖类分析中的应用作一简要介绍。
1单糖、低聚糖的测定
近年来，国内有不少HPLC—ELSD法测定中药材及其提
取物中单糖的报道，具体方法及测定条件见表1[1“]。高效液
相色谱法分析糖类化合物所用流动相一般为水和乙腈的二
元混合溶液．流动相配比视分离组分的多少、相对分子质量
范围、结构组成等不同而定，如测定成分较多．采用梯度洗脱
可改善分离、缩短分析时间。但无论流动相配比如何变化，采
用反相化学键合相色谱体系分析单糖、低聚糖，其出峰顺序
取决于它们相对分子质量的大小，且相对分子质量相同的酮
糖较醛糖保留时间短。
色谱柱是HPLC的心脏，常用的色谱柱填料有硅胶和化学
键合硅胶；离子交换剂作为填料．用于离子交换色谱；凝胶或玻
璃微球等作为填料，用于分子排阻色谱等。由于糖类的强极性，
能在氨基键合相柱中保留，氨基键合相柱对糖类的分离能力极
强，因而得到广泛应用。但氨基键合相柱的化学降解导致了其
耐用性差，用一段时间后就会出现保留能力降低、峰形差等柱
效降低甚至损坏的情况。在使用ELSD检测器时，此问题更为明
显．因为这些检测器对非挥发性键合相的损失，导致基线噪音
或基线漂移。此外．许多氨基键合相柱需升高柱温．否则对一些
还原糖还会形成很差的峰形并产生双峰。
离子交换色谱柱和分子排阻色谱柱也常用于糖类的分
离。离子交换色谱柱必须采用水为流动相．且不能进行梯度
洗脱，一般来说要求提高柱温和降低体积流量才能进行分离
测定。同时色谱柱易受样品中金属的污染。固定相为树脂的
收稿日期；2008—01—25
作者简介：陈琴鸣(1966一)，男，浙江缙云人，主任药师。从事中药标准化研究。E—mail：cqm60224@126．com
万方数据
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分子排阻色谱柱则受到其对低聚糖的溶解能力低的限制，产
生的峰形十分差。
相比之下，Carbohydrate柱在分析糖类中效果较好。
Alhech公司在其网站公布了用PrevailCarbohydrateES柱
梯度洗脱分析葡萄糖、麦芽糖、麦芽三糖等lo多种糖类物质，
并与氨基键合相柱进行了比较[1⋯。同时，还提供了用Prevail
CarbohydrateES柱、ELSD检测分析蔬菜果汁中果糖、葡萄
糖、蔗糖，糖酒中赤藓醇、木糖醇、甘露醇、麦芽糖醇，以及其他
食品中的糖或醇类的HPLC—ELSD图谱，均为乙腈一水梯度洗
脱，分离效果良好。
亲水作用色谱(hydrophilicinteractionhr matography，
HILIC)是一种采用极性固定相(如硅胶或衍生硅胶)及含高
浓度极性有机溶剂和低浓度水溶液为流动相的色谱模式。它
与传统正相色谱相似，流动相的有机部分是弱溶剂，水溶液
是强溶剂。亲水性强的化合物先流出。但其所用的溶剂又与
反相色谱相似，采用与水互溶的极性有机溶剂(如乙腈、甲
醇)I而不用传统正相色谱中所用溶荆(如正己烷、三氯甲烷)，
且含水量较大，通常为5％或更高。HILIC在单糖、二糖和低
聚糖的应用也不少，Karlsson等[】1]用HILIC～ELSD对葡萄
糖、甘露糖、半乳糖、海藻糖、Ⅳ一乙酰一d一半乳糖胺、Ⅳ一乙酰神
经氨酸、D一葡糖醛酸、Ⅳ一乙酰葡萄糖胺进行了分离测定，检测
限为0．3～0．5tag。
刘振等[12]建立了HILIC—ELSD法用于1一脱氧野尻霉紊、
葡萄糖和葡萄糖胺的杂质分析。该方法以乙腈一水酸性系统为
流动相体系，色谱柱采用WatersAtlantisHILICSilica，采用
主成分自身对照法用于杂质限量的控制。
杨蕾等n卵对国外参考标准品传递测定和新建的两种检
测器测定方法进行对比．通过C。8色谱柱反相分离，ELSD检
测分别测定阿卡波糖及其相关物质的量，给对照品的标定提
供了一种新的途径。
值得注意的是，在用HPLC测定单糖时，由于易发生单糖
的转化，柱温对测定结果有较大的影响。Slimestad[1叼采用
HPLC—ELSD法对几种单糖进行测定，发现在45℃时葡萄糖
的量较20℃时减少了41％，而70℃时仅为20。C时的2％，而
各单糖的总量保持不变。其他几种单糖的变化则各有不同。
提示在单糖测定时控制温度极其重要，一般控制在20～30℃
为宜。
由于缺乏发色基团，HPLC法测定糖类时对检测器的要
求很严格，过去多采用RID或低波长的UV检测器(195～205
rim)。RID的低灵敏度和不能进行梯度洗脱使得其在糖类测
定中不甚理想，而低波长UV检测器灵敏度也不高，因而对流
动相的要求也十分严格。由于这两种技术均基于溶剂的光学
特殊变化，因此常会遇到基线漂移，并需长时间的平衡。
ELSD的工作原理是流动相在检测前蒸发，对流动相光学特
征和组成的改变不受影响，因而克服了RID和UVD检测器的
上述缺点．其对蔗糖的检测灵敏度(1Pg)比RID的灵敏度要
高5～10倍。
2多糖中单糖组分分析及相对分子质量分布测定
HPLC在多糖分析中，主要用于纯度分析、相对分子质量
分布、单糖组成及多糖的测定。
张赫等[1们采用高效凝胶过滤色谱(HPGFC)对云芝肽糖
中的单糖组成及其摩尔比进行了分析，以Licrospher100NH：
为色谱柱。柱温20℃，蒸发温度90℃，乙腈一水梯度洗脱。
ELSD为检测器。结果表明，云芝糖肽中含有葡萄糖、L一岩藻
糖、D一甘露糖、半乳糖、木糖。采用峰高定量，得云芝糖肽中各
种单糖的摩尔比。采用峰高进行定量原因：(1)用梯度洗脱时
所产生的基线漂移给积分带来误差；(2)甘露糖、葡萄糖和半
乳糖均为六碳糖，其分子结构中只因羟基位置不同而产生的
保留行为差异不足使他们达到基线分离；(3)峰面积定量的
进样精密度没有峰高定量的良好。金鑫等[153用HPLC—ELSD
法测定了仙人掌多糖的单糖组成及比例。
HPLC—ELSD在多糖纯度分析中。主要看峰是否单一或
各峰是否分开，峰形是否好，从而得出是单一多糖或几个分
离的多糖峰。此法常与多糖相对分子质量测定相结合。
徐从立等口们采用HPGFC—ELSD法对商陆多糖的重均相
对分子质量进行了测定。该法简便实用，结果满意。笔者曾采
万方数据
中草嚼 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第6期2008年6月·附1·
用HPLC—ELSD法在灵芝多糖的分离、纯化和相对分子质量
测定以及单糖组成中进行了研究，结果十分理想。
3结语与展望
ELSD给糖类研究和质量控制带来了新的研究方法和思
路。特别是随着HPLC色谱柱的不断改进和开发，用ELSD测
定单糖的方法已较成熟，且比常用的RID有较大的优点。但
在实际检测标准中使用不多，《中国药典》2005版首次在液相
色谱法项下收载了ELSD，并在多种药品中采用ELSD分析测
定无紫外吸收成分，而糖类等碳水化合物(乳果糖口服液、p
环糊精)测定仍采用RID测定。在实际检验工作中，ELSD的
使用比RID要多，据了解，在基层检验机构，近年配置ELSD
检测器的较多，而配置有RID的极少，在标准及实际应用中
ELSD的应用还有不断增加的趋势。因此，能否通过研究，在
新版标准中将单糖测定中增加使用ELSD检测器的方法，或
以ELSD替代RID(两者在流动相要求上也有差异)，以适应
基层检测机构仪器配备的实际。
如何控制多糖的质量一直是困惑药物分析工作者的难
题之一，除了多糖本身结构的特殊性外，分析手段的缺乏也
是原因之一。目前多糖研究中同一多糖不同的研究者、不同
的仪器设备得到的多糖结果可能都不一样。在现有质量标准
中，多糖进行质量控制的很少，且多糖量的测定多以葡萄糖
等作为对照品，通过紫外分光光度法测定，这种方法最大的
缺点就是无法保证是否掺杂葡萄糖等单糖或是其他多糖(如
淀粉)。Heron等[173通过测定结构相似的化合物的标准曲线
的斜率及截距。从而达到定量被测成分的目的，针对多糖缺
乏对照品，采用此法进行质量控制也是一种可行的方法。
参考文献：
[1]陶虹．陈冬云，马晓康．HPLC—ELSD法测定甘草浸膏中的
蔗糖含量[J]．新疆医科大学学报．2006，29(1)：71—71．
Ez]梁乾德．马百平．壬升．液相色谱／蒸发光散射测定四物汤
煎液中单糖和双糖的含量口]．中草药，2004，(4)：395—397．
郑春英，李庆勇，祖元刚．HPLC—ELSD法测定甘草中单糖的
含量[J]．东北林业大学学报，2006．34(2)：109一110．
鲍忠，蔡鸿，姜勇．等．HPLC-El。SD法测定肉苁蓉药
材中半乳糖醇含量[J]．药物分析杂志，2007，27(7)：1004—
1006．
嵇文亚，周利艳，盂江．HPLC—ELSD法同时测定熟地黄中
果糖、葡萄糖含量[J]．齐鲁药事，2007，26(6)：338—340．
王志斌，陈有根，李慧．HPI．C—ELSD法测定麦冬药材及其
提取物中果糖的含量[J]．中国中医药信息杂志，2007，14
(2)：47-48．
郑春英，平文祥，刘松梅．HPLC—ELSD法在刺五加药材糖类
成分分析中的应用I-J]．植物研究，2007，27(3)：376—379．
邬国庆，张小茜．高效液相色谱一蒸发光散射检测器法测定旋
甘口服液中木糖的含量口]．中国药学杂志，2004，39(2)：
145—146．
余娟．莫海涛，武金良．HPLC—ELSD法测定蜂蜜中的糖分
[J]．广西轻工业，2006．11(6)：97—98．
SlimestadR．VagenIM．Thermalst bilityofglucoseand
othersugarldosesinnormalphasehighperformanceliquid
chromatography[J]．JChromatogrA，2006，(1118)：281—
284．
KarlssouG，WingeS，SandlbergH．Separationofmono—
saccharidesbyhydrophilieinteractionhromatographywith
evaporativelightscatteringdetection[J]．JChromatogrAt
2005．(1092)：246—249．
刘 振，尹国寅，龚佑祥，等．HPLC--ELSD在l一脱氧野尻霉
素，葡萄糖和葡萄糖胺的杂质分析中的应用[J]．分析试验
室，2007：26(7)：83—86．
杨蕾，郭志渊，张悦杨，等．HPLC—ELsD／DAD测定阿卡
波糖工作参照品的含量I-J]．华西药学杂志，2006，21(4)：
392—393．
“
张 吉，邹巧根．宋吉吉，等．云芝糖肽的单糖组成分析口]．
中国药科大学学报，2001．23(2)：137一l40．
金鑫，赖凤英．GPC法测定仙人掌多糖的相对分子质量以
及HPLC—ELSD法测定其单糖组成[J]．中草药，2007：38
(1)：23—25．
徐从立，陈海生，谭兴起。等．HPGFC—ELSD法测定商陆多
糖的重均相对分子质量[J]．第二军医大学学报，2004，25
(1)：116—117．
HeronS，MaloumbiMG，DreuxM．eta1．Method
developmentfora quantitativeanalysisperformedwithoutany
standardusinganevaporativelight—scatteringdetectori-J]．J
ChromatogrA，2007(1161)：152—156．
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万方数据
HPLC-ELSD在中药糖类分析中的应用
作者： 陈琴鸣， 刘文英
作者单位： 陈琴鸣(丽水市食品药品检验所,浙江,丽水,323000)， 刘文英(中国药科大学,药物分析教研
室,江苏,南京,210009)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(6)
被引用次数： 4次

参考文献(17条)
1.陶虹;陈冬云;马晓康 HPLC-ELSD法测定甘草浸膏中的蔗糖含量[期刊论文]-新疆医科大学学报 2006(01)
2.梁乾德;马百平;王升 液相色谱/蒸发光散射测定四物汤煎液中单糖和双糖的含量[期刊论文]-中草药 2004(04)
3.郑春英;李庆勇;祖元刚 HPLC-ELSD法测定甘草中单糖的含量[期刊论文]-东北林业大学学报 2006(02)
4.鲍忠;蔡鸿;姜勇 HPLC-ELSD法测定肉苁蓉药材中半乳糖醇含量[期刊论文]-药物分析杂志 2007(07)
5.嵇文亚;周利艳;孟江 HPLC-ELSD法同时测定熟地黄中果糖、葡萄糖含量[期刊论文]-齐鲁药事 2007(06)
6.王志斌;陈有根;李慧 HPLC-ELSD法测定麦冬药材及其提取物中果糖的含量[期刊论文]-中国中医药信息杂志
2007(02)
7.郑春英;平文祥;刘松梅 HPLC-ELSD法在刺五加药材糖类成分分析中的应用[期刊论文]-植物研究 2007(03)
8.邬国庆;张小茜 高效液相色谱.蒸发光散射检测器法测定旋甘口服液中木糖的含量[期刊论文]-中国药学杂志
2004(02)
9.余娟;莫海涛;武金良 HPLC-ELSD法测定蜂蜜中的糖分[期刊论文]-广西轻工业 2006(06)
10.Slimestad R;Vagen I M Thermal stability of glucose and other sugar aldoses in normal phase high
performance liquid chromatography[外文期刊] 2006(1118)
11.Karlsson G;Winge S;Sandlberg H Separation of monosaccharides by hydrophilic interaction
chromatography with evaporative light scattering detection[外文期刊] 2005(1092)
12.刘振;尹国寅;龚佑祥 HPLC-ELSD在1-脱氧野尻霉素,葡萄糖和葡萄糖胺的杂质分析中的应用[期刊论文]-分析试
验室 2007(07)
13.杨蕾;郭志渊;张悦杨 HPLC-ELSD/DAD测定阿卡波糖工作参照品的含量[期刊论文]-华西药学杂志 2006(04)
14.张吉;邹巧根;宋喆 云芝糖肽的单糖组成分析[期刊论文]-中国药科大学学报 2001(02)
15.金鑫;赖凤英 GPC法测定仙人掌多糖的相对分子质量以及HPLC-ELSD法测定其单糖组成[期刊论文]-中草药
2007(01)
16.徐从立;陈海生;谭兴起 HPGFC-ELSD法测定商陆多糖的重均相对分子质量[期刊论文]-第二军医大学学报
2004(01)
17.Heron S;Maloumbi M G;Dreux M Method development for a quantitative analysis performed without any
standard using an evaporative light-scattering detector[外文期刊] 2007(1161)

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2. 陈俊.黄玉凤.王彬 HPLC-ELSD在中药分析及指纹图谱中的应用[期刊论文]-药学实践杂志2009,27(4)
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