全 文 ：表 2 　不同组合的药效预测
Table 2 　Prediction of responses in different components combination
配伍组 实验值
文献值 [2 ]
预测值 误差
SVMa)
预测值 误差
RBFNN
预测值 误差
配伍组 实验值
文献值 [2 ]
预测值 误差
SVMa)
预测值 误差
RBFNN
预测值 误差
ABCDEF 81 000 81 000 0 71816 - 01 184 71 997 - 01 003 BC / 71 133 / 71252 / 71 099 /
ABC 71 400 71 400 0 71442 　01 042 71 304 - 01 096 BCD / 61 867 / 61970 / 61 917 /
AB E 81 200 n1 a1 b) / 71990 - 01 210 81 037 - 01 163 BCDE / 71 400 / 71363 / 71 501 /
ADF 71 200 61 933 - 01267 71013 - 01 187 61 914 - 01 286 BCDEF / 71 733 / 71643 / 71 792 /
A EF 71 400 n1 a1 b) / 71598 　01 198 71 679 　01 279 CDEF / 71 067 / 71124 / 71 146 /
ACD 61 400 n1 a1 b) / 61594 　01 194 61 472 　01 072 D E / 61 867 / 61918 / 71 001 /
BCF 71 400 n1 a1 b) / 71523 　01 123 71 391 - 01 009 D EF / 71 200 / 71196 / 71 293 /
BDF 71 200 71 333 　01133 71360 　01 160 71 357 　01 157 EF / 71 467 / 71439 / 71 473 /
BDE 71 600 n1 a1 b) / 71493 - 01 107 71 649 　01 049 ABD / 71 267 / 71322 / 71 270 /
CDE 61 600 61 733 　01133 61801 　01 201 61 563 - 01 037 ABDE / 71 800 / 71716 / 71 855 /
CEF 71 600 n1 a1 b) / 71398 - 01 202 71 326 - 01 274 ABDEF / 81 133 / 71924 / 81 145 /
— 61 600 n1 a1 b) / 61795 　01 195 61 598 - 01 002 ACE / 71 267 / 71269 / 71 240 /
AB EF / 81 400 / 81165 / 81 327 / ACEF / 71 600 / 71533 / 71 531 /
CD / 61 200 / 61424 / 61 269 / BCE / 71 667 / 71667 / 71 682 /
AB / 71 533 / 71574 / 71 452 / BCEF / 81 000 / 71919 / 71 973 /
ABCD / 71 133 / 71164 / 71 121 / CDF / 61 533 / 61766 / 61 563 /
ABCDE / 71 667 / 71562 / 71 706 / 平均绝对误差c) 01 107 01 167 01 119
　　a) 主要参数 :LibSVM 2181 工具包 ,RBF 核函数 ,γ= 2 - 4 , C = 23 ,留一法检验 ; b) 未报道 ;c) 平均绝对误差 = ∑| 误差| / N ,其中 N 为 5 或 12
　　a) main parameters : LibSVM 21 81 package , RBF kernel ,γ= 2 - 4 , C = 23 , jackknife test ; 　b) not available ; 　c) mean absolute error =
∑| error| / N , where N equals to 5 or 12
参考文献 :
[ 1 ] 　严永清1 中药现代研究的思路与方法 [ M ]1 北京 : 化学工业
出版社 , 20061
[ 2 ] 　郑青山 ,何迎春 ,杨 娟 ,等 1 药物相互作用分析与复方药效模
拟 : 一个方法学研究[J ]1 中国药理学通报 ,2007 ,23 (8) :11062
11121
[ 3 ] 　姚美村 ,乔延江 ,袁月梅 ,等1 基于人工神经网络方法的中药功
效归类研究 [J ]1 中国中药杂志 ,2003 ,28 (7) : 68926911
[ 4 ] 　范骁辉 ,程翼宇1 中药复杂组效关系的变结构神经网络辨识方 法[J ]1 高等学校化学学报 , 2004 , 25 (11) : 2004220091[ 5 ] 　王　泽 ,顾勤兰 ,王志祥1 基于遗传神经网络的中药葛根及同属植物的质量评价研究 [ J ]1 中草药 , 2005 , 36 ( 10) : 1580215821[ 6 ] 　张玉瑞 ,陈剑波1 基于 RBF 神经网络的时间序列预测[J ]1 计算机工程与应用 , 2005 , 41 (11) : 742761[ 7 ] 　Chen C , Tian Y X , Zou X Y , et al1 Prediction of proteinsecondary st ructure content using support vector machine [J ]1Talanta , 2007 , 71 (5) : 2069220731
五福化毒丸的质量标准研究
郑 　瑾 ,张丽娟 3 ,宋新波 ,杨振容 ,刘黄刚
(天津中医药大学 ,天津 　300193)
摘 　要 :目的 　建立中成药五福化毒丸的质量标准。方法 　采用显微和薄层鉴别法进行定性鉴别 ,采用高效液相
色谱法进行测定。结果 　显微法鉴别出成药中 11 味药 ;采用薄层色谱法定性鉴别了方中的黄连和赤芍 ,色谱斑点
清晰 ,分离度良好 ,阴性无干扰 ;以 HPLC 法测定该丸剂中甘草酸和连翘苷 ,方法精密度、稳定性、重复性良好 ,回收
率分别为 95175 和 98149 % ,RSD 分别为 0155 %和 1112 %( n = 6) 。结论 　本实验所确定的质量分析方法稳定可
靠 ,可以用于五福化毒丸的质量标准研究。
关键词 :五福化毒丸 ;显微鉴别 ;薄层色谱 ;高效液相色谱 ;甘草酸 ;连翘苷
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821241205
　　五福化毒丸是《中国药典》2005 年版一部收载
的传统中药成方制剂 ,全方由水牛角浓缩粉、连翘、
青黛、黄连、牛蒡子 (炒) 、玄参、地黄、桔梗、芒硝、赤
芍、甘草 11 味中药组成的传统蜜丸。其具有清热解
·1421·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008210227　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :郑　瑾 (1983 —) ,女 ,天津人 ,在读硕士 ,主要从事中药提取纯化工艺和质量控制的研究。
Tel : (022) 23111486 　E2mail : nicolezhengjin @1631com3 通讯作者　张丽娟
毒、凉血消肿的功效 ,用于血热毒盛 ,小儿疮疖 ,痱
毒 ,咽喉肿痛 ,口舌生疮 ,牙龈出血 ,痄腮。在原标准
仅载有青黛、桔梗、黄连、牛蒡子、甘草及连翘的显微
鉴定和牛蒡子、青黛、甘草的薄层色谱鉴别。为进一
步提高其质量标准 ,更有效地控制其内在质量 ,本实
验拟通过显微鉴定法、TL C 法、H PL C 法对五福化
毒丸进行定性和定量研究 ,以完善五福化毒丸的质
量检测方法。
1 　仪器与材料
　　Olymp us C5050 —CX41 型显微摄影仪 ; Repro2
star 3 薄层色谱数码照相系统 ; Shimadzu L C —
10AD 高效液相色谱仪 , SPD —10A UV 检测器 ,
Thermo ODS C18 反相柱 ( 2 5 0 mm ×41 6 mm , 5 μm) , N —2000 双通道色谱工作站 (浙江大学 ) ,KQ2200DB 型数控超声波清洗器 (昆山超声仪器有限公司) 。　　五福化毒丸 (河北药都制药集团有限责任公司 ,批号 070602、070801、080101) 。各对照药材和盐酸小檗碱、芍药苷、甘草酸铵、连翘苷 (批号分别为1107132200208、1107362200629、1107312200513、1108212200609)对照品均由中国药品生物制品检定所提供。甲醇、乙腈为色谱纯 ,水为新制重蒸水 ,冰醋酸、三氯甲烷为分析纯。2 　显微鉴定　　以水溶解蜜丸 ,滤过后制备粉末制片 ,镜下观察各药味的鉴别特征。见图 1。
图 1 　五福化毒丸中组分的显微特征
Fig11 　Microcharacteristics of components in Wufu Huadu Pill
　　青黛 :靛蓝结晶为不规则蓝色块片或颗粒 ,聚集
成堆。
　　地黄 :薄壁细胞类多角形 ,大多皱缩 ,形状较不
规则 ,细胞中含有棕色类圆形梭状物。
　　桔梗 :菊糖呈扇形或不规则形 ,极多。乳汁管为
有节联结乳汁管 ,内有细微的黄棕色颗粒状物。
　　赤芍 :草酸钙簇晶较多 ,单个散在。
　　甘草 :晶鞘纤维多成束 ,细胞周围薄壁细胞含草
酸钙方晶。
　　连翘 :内果皮纤维成束或散在或上下交错排列 ,
壁厚 ,单个细胞成短梭形或不规则 ,具有较细的孔
沟。石细胞单个散在或成群 ,多呈类圆形 ,孔沟明
显。果皮表皮细胞黄棕色 ,细胞断面观呈类方形 ,表
面观细胞呈类圆形或类方形 ,内有黄棕色物质 ,外壁
增厚。
　　黄连 :石细胞黄色至黄棕色 ,类方形、类长方形、
类圆形或多角形 ,壁厚 ,有明显的孔沟和纹孔。鳞叶
表皮细胞黄棕色 ,长方形或长多角形 ,细胞壁波状弯
曲或连珠状增厚。木栓细胞壁较厚 ,黄棕色类多
角形。
　　牛蒡子 :内果皮石细胞表面观尖梭形镶嵌紧密 ,
侧面观呈类长方形或长条形 ,木化。
·2421· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
　　芒硝 :晶体多有棱角 ,呈多边形 ,有折光性。
　　玄参 :石细胞较多 ,多单个散在 ,黄棕色 ,呈长方
形、类方形、类圆形、三角形或棱形 ,多较大 ,壁较薄 ,
纹孔细小 ,孔沟多分叉 ,层纹明显 ,胞腔较大。
　　水牛角浓缩粉 :不规则 ,多呈柴片状 ,边缘不平
整 ,浅灰白色或淡灰黄色。纵断面碎片多见 ,表面可
见细长棱状纹理 ,呈同方向交错排列 ,有较多纵长裂
缝 ,布有细微灰棕色色素颗粒。
3 　薄层色谱鉴别
311 　黄连的薄层色谱鉴别 :称取五福化毒丸 81605
g ,加等量硅藻土研匀 ,加甲醇 25 mL 回流 15 min ,
滤过 ,收集滤液 ,浓缩至 5 mL ,作为供试品溶液。按
处方量自制成药 81605 g ,同法制备阳性对照溶液。
按处方量自制缺黄连的成药 81555 g ,同法制备阴性
对照溶液。取盐酸小檗碱对照品 1 mg ,制成 015
mg/ mL 的溶液 ,作为对照品溶液。用毛细管分别吸
取黄连阴性对照溶液、供试品溶液、阳性对照溶液、
盐酸小檗碱对照品溶液各 10μL ,分别点样于同一
硅胶 G 薄层板上 ,以苯2醋酸乙酯2异丙醇2甲醇2水
(6 ∶3 ∶115 ∶115 ∶013)为展开剂 ,置氨蒸气饱和的
展开缸内预饱和 15 min ,上行展开 ,取出 ,晾干。置
紫外灯 (365 nm)下检视。见图 2。结果在供试品溶
液、阳性对照溶液和盐酸小檗碱对照品色谱中相应位
置上均有一相同颜色的黄绿色荧光斑点 ,阴性则无。
图 2 　五福化毒丸中黄连的薄层色谱图
Fig12 　TLC Chromatogram of Rhizoma Coptidis
in Wufu Huadu Pill
312 　赤芍的薄层色谱鉴别 :称取五福化毒丸 81604 g ,
加等量硅藻土研匀 ,加乙醇 10 mL ,超声提取 10
min ,滤过。滤液蒸干 ,残渣加乙醇 2 mL 使溶解 ,作
为供试品溶液。按处方量自制成药 81604 g ,同法制
备阳性对照溶液。按处方量自制缺赤芍的成药
81104 g ,同法制备阴性对照溶液。取芍药苷对照品
2 mg ,加乙醇制成 2 mg/ mL 的溶液作为对照品溶
液。用毛细管分别吸取赤芍阴性对照溶液、供试品
溶液、阳性对照溶液、赤芍对照品溶液各 10μL ,分
别点样于同一硅胶 G 薄层板上 ,以三氯甲烷2醋酸
乙酯2甲醇2甲酸 (40 ∶5 ∶10 ∶012) 为展开剂 ,于展
开缸内预饱和 15 min ,上行展开 ,取出 ,晾干。喷以
5 %香草醛硫酸溶液 ,加热至斑点显色清晰。见图
3。结果在供试品溶液、阳性对照溶液和赤芍对照品
溶液色谱中相应位置上均有一相同颜色的蓝紫色斑
点 ,阴性对照则无。
图 3 　五福化毒丸中赤芍的薄层色谱图
Fig13 　TLC Chromatogram of Radix Paeoniae Rubra
in Wufu Huadu Pill
4 　五福化毒丸中甘草酸的 HPL C 法测定
411 　色谱条件 : C18 色谱柱 (250 mm ×416 mm ,5
μm) ;流动相 :乙腈2水2冰醋酸 (37 ∶60 ∶3) ;体积流
量 :110 mL/ min ;柱温 :30 ℃;检测波长 :254 nm。
412 　对照品溶液的制备 :取甘草酸铵对照品 1 mg ,
精密称定 ,置 50 mL 量瓶中 ,加入适量甲醇溶解 ,超
声处理 5 min ,取出放冷 ,加甲醇至刻度 ,摇匀 ,即得
(甘草酸铵质量浓度为 18μg/ mL) 。
413 　供试品溶液的制备 :五福化毒丸剪碎 ,取 114 g ,
精密称定 ,置 50 mL 的具塞三角瓶中 ,加入 2 %氨
水250 %甲醇 (1 ∶1) ,超声 60 min ,取出放冷 ,补足质
量 ,摇匀 ,用微孔滤膜滤过 ,取滤液 ,备用。
414 　阴性对照溶液的制备 :按处方量精密称取除去
甘草的各药材粉末 (粉碎过 100 目) ,混匀成阴性对
照粉末 ,按供试品溶液的制备方法操作 ,即得。
415 　标准曲线的制备 :取 18μg/ mL 甘草酸铵对照
品溶液 ,用微量注射器分别吸取 2、6、10、12、14、16
μL 注入高效液相色谱仪 ,进样测定 ,记录甘草酸铵
峰面积。以峰面积为纵坐标 ,进样量为横坐标绘制
标准曲线 ,得回归方程 Y = 5 07816 X + 3 67216 , r =
01999 3。结果表明甘草酸铵在 01036～01360 μg
与峰面积的线性关系良好。
416 　精密度试验 :精密吸取 18μg/ mL 甘草酸铵对
照品溶液 10μL 注入高效液相色谱仪 ,连续进样测
·3421·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
定 ,记录峰面积 ,结果其 RSD 为 0166 %( n = 6) 。
417 　重现性试验 :精密称取同一批五福化毒丸碎块
114 g ,精密称定 6 份 ,制备供试品溶液 ,进样测定 ,记
录甘草酸铵峰面积 ,计算得其 RSD 为 1176 %( n = 6) 。
418 　稳定性试验 :取同一供试品溶液 ,分别在 010、
210、410、610、810、12 h 进样 ,测定甘草酸铵峰面积 ,
计算得其 RSD 为 1163 % ,说明供试品溶液在 12 h 内
稳定。
419 　回收率试验 :称取样品 6 份 ,每份 017 g ,精密称
定 ,置于 50 mL 锥形瓶中 ,每份按甘草酸质量 1 ∶1 的
比例加入对照品 ,制备供试品溶液 ,进样测定。计算
得平均回收率为 95175 % ,RSD 为 0155 %。
4110 　样品测定 :取不同批号的五福化毒丸 ,剪碎 ,
每批称定 2 份 ,每份 114 g ,制备供试品溶液 ,微量注
射器准确吸取样品液 10μL 注入高效液相色谱仪 ,
进样测定 ,以外标法计算甘草酸的质量分数。结果
见表 1 ,色谱图见图 4。
表 1 　五福化毒丸中甘草酸和连翘苷的测定结果( n = 2)
Table 1 　Determination of glcyrrhizic acid and forsythin
in Wufu Huadu Pill ( n = 2)
批号 甘草酸/ (mg ·g - 1) 连翘苷/ (mg ·g - 1)
070801 01651 7 01497 2
070602 01711 3 01238 2
080101 01736 2 01544 0
5 　五福化毒丸中连翘苷的 HPL C 法测定
511 　色谱条件 : C18 色谱柱 (250 mm ×416 mm ,5
μm) ;流动相 :乙腈2水236 %冰醋酸 (22 ∶78 ∶1) ;体积
流量 :110 mL/ min ;柱温 :30 ℃;检测波长 :230 nm。
512 　对照品溶液的制备 :取连翘苷对照品 5 mg ,精
密称定 ,置 50 mL 量瓶中 ,加入适量甲醇溶解 ,加甲
醇至刻度 ,摇匀 ,即得 010700 mg/ mL 连翘苷对照品
贮备液。精密量取连翘苷对照品贮备液适量 ,加甲
醇制成 21μg/ mL 的对照品溶液。
513 　供试品溶液的制备 :五福化毒丸剪碎 ,取 6 g ,
精密称定 ,置具塞三角瓶中 ,精密加入甲醇 50 mL ,
密塞 ,称定质量 ,超声处理 30 min ,放冷 ,再称定质
量 ,用甲醇补足减失的质量 ,摇匀 ,滤过。精密量取
续滤液 25 mL ,蒸干 ,残渣加水 20 mL 使溶解 ,用三
氯甲烷振摇提取 5 次 ,每次 20 mL ,合并三氯甲烷
液 ,回收至干。残渣用 50 %甲醇溶解 ,转移至 5 mL
量瓶中 ,加 50 %甲醇至刻度 ,摇匀 ,用微孔滤膜滤
过 ,取续滤液 ,即得 ,备用。
514 　阴性对照溶液的制备 :按处方量精密称取除去
连翘的各药材粉末 (粉碎过 100 目) ,混匀成阴性对
t/ min3 2甘草酸3 2glcyrrhizicaciol
图 4 　阴性对照( A) 、甘草酸对照品( B)和五福化毒丸( C)的
HPLC色谱图
Fig14 　HPLC Chromatograms of negative sample ( A) ,
glcyrrhizic acid reference substance ( B) ,
and Wufu Huadu Pill ( C)
照粉末 ,按照供试品溶液的制备方法操作 ,即得。用
微量注射器吸取 10μL 测定峰面积。
515 　标准曲线的制备 :取 21μg/ mL 连翘苷对照品
溶液 ,用微量注射器分别吸取 2、4、6、10、12、18μL
注入高效液相色谱仪 ,进样测定 ,记录峰面积。以峰
面积为纵坐标 ,进样量为横坐标绘制标准曲线 ,得回
归方程 Y = 19 478 X + 2 32212 , r = 01999 7。结果
表明连翘苷在 01042～0142μg 与峰面积的线性关
系良好。
516 　精密度试验 :精密吸取 21μg/ mL 连翘苷对照
品溶液 10μL 注入高效液相色谱仪 ,连续进样测定 ,
记录峰面积 ,其结果 RSD 为 0153 %( n = 6) 。
517 　重现性试验 :精密称取同一批五福化毒丸碎块
6 g ,精密称定 6 份 ,制备供试品溶液 ,进样测定 ,记
录连翘苷峰面积 ,计算其 RSD 为 1114 %。
518 　稳定性试验 :取同一供试品溶液 ,分别在 010、
210、410、610、810、12 h 进样 ,测定连翘苷峰面积 ,
计算得其 RSD 为 1111 % ,说明供试品溶液在 12 h
内稳定。
519 　回收率试验 :称取样品 6 份 ,每份 3 g ,精密称
·4421· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
定 ,每份按连翘苷质量 1 ∶1 的比例加入连翘苷对照
品 ,制备供试品溶液 ,进样测定。计算得连翘苷平均
回收率为 98149 % ,RSD 为 1112 %。
5110 　样品测定 :取不同批号的五福化毒丸 ,剪碎 , 每批称定 2 份 ,每份 6 g ,制备供试品溶液 ,微量注射器准确吸取样品液 10μL 注入高效液相色谱仪 ,进样测定 ,以外标法计算连翘苷的质量分数。结果见表 1 ,色谱图见图 5。
t/ min3 2连翘苷3 2forsyt hin
图 5 　阴性对照( A) 、连翘苷对照品( B)和五福化毒丸( C)的 HPLC色谱图
Fig15 　HPLC Chromatograms of negative sample ( A) , forsythin reference substance ( B) , and Wufu Huadu Pill ( C)
6 　讨论
　　本实验采用显微鉴别的方法对五福化毒丸进行
显微鉴别 ,鉴别出全方 11 味中药 ,排除了干扰 ,结果
较令人满意。明确了对黄连、赤芍确实可行的薄层
色谱鉴别方法。对方中的甘草酸和连翘苷进行了高
效液相色谱法的测定 ,本实验的方法简便可行 ,结果
稳定 ,重复性好 ,可以用于五福化毒丸的质量标准的
研究。
辛夷鼻炎丸的质量标准研究
黄杰芳 ,李惠霞 ,邓慧敏 3
(广州中一药业有限公司 ,广东 广州 　510530)
摘 　要 :目的 　提高完善辛夷鼻炎丸的质量标准。方法 　采用 TLC 法对处方中的鹅不食草、苍耳子、防风进行了
定性鉴别 ;采用 HPLC 法测定防风中的升麻素苷进行了测定。结果 　在 TLC 图谱中可检出鹅不食草、苍耳子、防
风的特征斑点 ;升麻素苷在 50102 ～1 00410μg 线性良好 ,精密度试验 RSD 为 1117 % ( n = 6) ,加样回收率为
10114 % ,RSD 为 1103 %( n = 9) 。结论 　定性、定量方法简便、准确 ,能有效控制辛夷鼻炎丸的质量。
关键词 :辛夷鼻炎丸 ;鹅不食草 ;苍耳子 ;防风 ;升麻素苷 ;薄层色谱 ;高效液相色谱
中图分类号 :R286102 　　　文献标识码 :B 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0821245203
　　辛夷鼻炎丸为国家中药保护品种 ,由辛夷、苍耳
子、鹅不食草、防风、甘草等 13 味中药组成 ,具有祛
风清热 ,消炎解毒之功效。其中苍耳子、鹅不食草、
防风为方中主药 ,用量较大。本实验对鹅不食草、苍
耳子、防风进行薄层色谱鉴别 ,并以高效液相色谱法
测定防风中的升麻素苷。方法可靠 ,重复性好 ,可为
辛夷鼻炎丸的研究提供了定性、定量的检测方法。
1 　仪器与试药
　　Agilent 1100 型高效液相色谱仪 (自动进样器 ,二
元泵 ,DAD 检测器) ;Reprostar 3 薄层色谱摄像仪。
　　D2101 大孔树脂柱 ;硅胶 G(青岛海洋化工厂) ; 鹅不食草 (批号 105320301) 、苍耳子 (批号 1211682200503) 、防风对照药材 (批号 1209472200405) 、升麻素苷对照品 (批号 1115222200404) 均由中国药品生物制品检定所提供 ;甲醇为色谱纯 ;水为蒸馏水 ;其余试剂均为分析纯 ;辛夷鼻炎丸由广州中一药业有限公司提供。2 　方法与结果211 　鹅不食草的薄层色谱鉴别 :取本品 2 g ,研细 ,加醋酸乙酯 20 mL ,超声 30 min ,滤过 ,滤液蒸干 ,残渣加醋酸乙酯 2 mL 使溶解 ,作为供试品溶液。取鹅不食草对照药材和缺鹅不食草的阴性样品各 2 g ,
·5421·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 8 期 2009 年 8 月
3 收稿日期 :2008211227　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :黄杰芳 (1982 —) ,女 ,广东省四会市人 ,制药助理工程师 ,广州中一药业有限公司产品开发部工作 ,研究方向 :药品质量标准。
Tel :13570990594 　E2mail :zoedeed @hot mail1com