全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1215·
的研究结果表明，肿瘤组织相对于正常组织整体呈
现低甲基化状态，这种特征可以通过检测基因组中
DNA甲基化胞嘧啶的丰度或者寻找带有甲基化敏
感性酶的重复序列来观察。
本实验主要探讨甜菜碱促人肝癌细胞HepG2
基因组范围为DNA甲基化高表达作用。根据文献
报道，采用了高效毛细管电泳法(HPCE)法来检测
甜菜碱作用的HepG2人肝癌细胞基因组范围的
DNA甲基化水平变化。实验结果表明，HPCE处理
DNA水解产物，用紫外光测定吸收峰值，以确定
5mdC水平，再通过公式计算面积比，发现基因组
整体的甲基化水平是随着给药浓度的增加而增加，
而在肿瘤细胞DNA中5mdC的量也跟着上升，有
一定的剂量依赖性，说明甜菜碱可促进HepG2细
胞基因组范围DNA甲基化水平的升高。当肿瘤细
胞DNA甲基化水平提高时，有可能恢复因为去甲
基化而失活原癌基因，或平衡细胞染色体不稳定的
易感因素，或导致细胞周期调控失常，信号传导等来
达到抑制肿瘤的作用。
研究提示，甜菜碱可能通过促使肿瘤细胞
DNA甲基化的升高，使得DNA甲基化模式随着细
胞分裂稳定的复制，而甲基化的异常更易于被逆转，
如细胞周期调控基因发生甲基化异常或其启动子区
域的CpG岛甲基化异常时，都可使细胞失去正常的
G，期调控，而使信号转导通路功能障碍、凋亡信号
缺失等，从而达到抗肿瘤的活性。但是有关甜菜碱对
肿瘤细胞DNA甲基化水平的改变是具体通过那种
途径而改变细胞周期来达到抑制肿瘤细胞的生长，
还有待进一步研究证实。
参考文献：
[1]李红，聂泽民．甜菜碱的研究进展EJ3．湖南农业科学，
2005(2)：33—36．
[2]SlowS，LeverM，LeeMB，矗a1．Betaineanaloguesalter
homocysteinemetabolisminratsEJ-I．IntJBiochemC ll
Biol，2004，36(5)：870—880．
[3]UelandPM，HolmPI，HustadS．Betaine：ak ymodulator
ofone—carbonmetabolismandho ocysteinestatus[刀．Clin
ChemLabMed，2005，43(10)：1069—1075．
[4]SchwahnBC，WendelU，Lussier—CacanS，eta1．Effectsof
betainenamurinemodelofmildeystathionine—beta-synthase
deficiency口]．Metabolism，2004，53(5)：594—599．
[5]傅冬和．高效液相色谱法测定葡萄叶中甘氨酸甜菜碱、脯氨
酸及葫芦巴碱EJ]．天然产物研究与开发，2007，19(2)；
313—315．
[6]季宇彬，高世勇，杨红丹，等．甜菜碱对HepG2人肝癌细胞
周期及凋亡的影响[J]．中草药，2008，39(6)：884—886．
[7]FragaMF，UriolE，BorjaDL，da1．High—performance
capillaryelectrophoreticmethodforthequantificationof5一
methyl2-deoxycytidineingenomicDNAl applicationto
plant，animalandhumcancertissuesEJ]．Electrophoresis，
2002，23l1677—1681．
二苯乙烯苷大鼠在体胃肠吸收动力学研究
王春英，李敏，袁志芳，杨 维，解凤立，张兰桐‘
(河北医科大学药学院药物分析教研室，河北石家庄050017)
摘 要：目的 建立同时测定胃灌注液及肠循环液中二苯乙烯苷及酚红质量浓度的HPLC／DAD法，并研究二苯
乙烯苷在大鼠胃、肠的吸收特性。方法采用大鼠在体胃、肠吸收模型，以HPLC／DAD法测定胃灌注液及肠循环
液中药物的量，色谱条件为DikmaDiamonsilC18色谱柱(250mmX4．6mm，5肛m)；柱温30℃；流动相为乙腈一甲
醇一0．2％磷酸(35：15。50)，体积流量1mL／min；检测波长320nm(二苯乙烯苷)和430nm(酚红)，进样量20
pL。结果二苯乙烯苷及酚红的线性关系良好，线性范围分别为3．5～140弘g／mL和l～40pg／mL，I／I内、日间精
密度(RSD)均小于3．1％，方法回收率均在99．48％～102．2％。不同质量浓度(2．5、5、10mg／mL)的二苯乙烯苷
在大鼠胃部的每小时吸收率分别为72．70A，67．70A和56．60A，不同质量浓度(30、60、120pglmL)的二苯乙烯苷
在肠道内的吸收速率常数(K．)分别为0．0477、0．0514、0．0563h～，三者之间无显著性差异(P>0．05)。结论
本实验首次建立了HPLC／DAD法同时测定胃灌注液及肠循环液中二苯乙烯苷及酚红的质量浓度，该法操作简
便、结果准确、灵敏度高。二苯乙烯苷在肠道内吸收较差，主要吸收部位是胃，为延长药物在胃内的停留时间，改善
生物利用度，适合制成胃漂浮片。 l
关键词：二苯乙烯苷，HPLC／DAD，在体胃肠吸收
中图分类号：R285．61 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1215一05
收稿日期：2008—01—11
基金项目：河北省自然科学基金资助项目(C2006000791)
作者简介：王春英(1972一)，女，讲师，在读博士，研究方向为中药有效成分的提取分离与药效物质基础研究．
Tel：(0311)86265625E—mail：wangcy730301@163．com
*通讯作者张兰桐Tel；(0311)86266419E—marllzhanglantong@263．net
万方数据
·1216· 中草稿 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
2，3，5，47一四羟基二苯乙烯一2一。一pD一葡萄糖苷
(简称二苯乙烯苷)为何首乌的主要水溶性成分，具
有多种药理活性，如抗衰老叭引、神经保护‘3叫]、调血
脂及抗动脉粥样硬化[6’73等。二苯乙烯苷吸收迅速，
主要以葡萄糖醛酸结合物的形式由胆汁排泄，但其
血药浓度一时问曲线未出现双峰现象[8]。因此，为了
更深入的探讨二苯乙烯苷在大鼠体内的吸收部位及
吸收特征，本实验旨在建立一种同时测定胃、肠循环
液中二苯乙烯苷和酚红的高效液相色谱法，并研究
二苯乙烯苷在胃及肠道内的吸收特征，对提高其生
物利用度和开发口服制剂提供理论依据。
1材料
AgilentTechnologies1200series高效液相色
谱仪(配有可见一紫外二极管阵列检测器，四元泵，
自动进样器，柱温箱)；SCQ一200超声波清洗器
(上海声谱超声波设备厂)ISZ一93自动双重纯水蒸
馏器(上海亚荣生化仪器厂)}HL一1S恒流泵(上
海沪西分析仪器厂)。二苯乙烯苷由本研究室从何首
乌中分离提取，经测定质量分数为98．3％；二苯乙
烯苷对照品购自中国药品生物制品检定所，批号
0844—200003；乙腈和甲醇为色谱纯；水为自制重蒸
水；其他试剂均为分析纯。大鼠，雄性，体质量(250
士20)g，河北医科大学实验动物中心提供。
2方法
2．1色谱条件：DikmaDi monsilC18色谱柱(250
mm×4．6mm，5pm)；柱温30℃；流动相为乙腈一
甲醇一0．2％磷酸(35l 15l 50)，体积流量1mL／
min；检测波长320nm(二苯乙烯苷)和430nm
(酚红)；进样量：20弘L。
2．2溶液的配制
2．2．1对照品贮备液的配制：精密称取二苯乙烯苷
对照品和酚红适量，置同一量瓶中，加甲醇溶解，配
制成含二苯乙烯苷和酚红质量浓度分别为0．70、
0．21mg／mL的混合液，即得。
2．2．2Krebs—Ringer试液(pH7．4，简称K—R试
液)的配制：称取NaCI7．8g、KCl0．35g、CaCl：
0．37g、NaHC031．37g、NaH2PO‘0．32g、MgCl2
0．02g、葡萄糖1．4g，加水定容至1000mL，即得。
2．2．3空白肠循环液的配制：精密称取酚红适量，
用K—R试液溶解并稀释成含酚红质量浓度为20
／xg／mL的溶液，即得。
2．2．4肠循环液的配制：精密称定二苯乙烯苷适
量，用空白肠循环液溶解并稀释成含二苯乙烯苷质
量浓度分别为30、60、120mg／mL的溶液，即得。
2．2．5 胃灌注液的配制：精密称定二苯乙烯苷适
量，用0．1mol／LHCI溶解并稀释成含二苯乙烯苷
质量浓度分别为2．5、5、10mg／mL的溶液，即得。
2．3 胃内容物中二苯乙烯苷的测定：取实验完成后
的胃，将胃内容物转移至50mL量瓶，用
0．1mol／LHCl溶液少量多次洗涤胃内部，洗涤液
一并转入上述量瓶，最后用0．1mol／LHCI溶液定
容，摇匀，于12000r／min高速离心10rain后过
0．45pm滤膜，取20pL注人液相色谱仪，记录320
nm处二苯乙烯苷的峰面积，以随行的标准曲线计
算质量浓度。
2．4肠循环液中二苯乙烯苷和酚红的测定：在不同
时间点取大鼠在体肠循环液样品，于12000r／rain
高速离心10min后过0．45pm滤膜，取20pL注
入液相色谱仪，分别在320nm和430nm处记录二
苯乙烯苷和酚红的峰面积，以随行的标准曲线计算
质量浓度。
2．5方法学验证
2．5．1专属性考察：分别取二苯乙烯苷和酚红的混
合对照品贮备液、空白肠循环液、肠循环后样品溶液
和胃灌注后样品溶液进样，在上述色谱条件下测定，
记录色谱图。在各自最大吸收波长处供试品中其他
成分不干扰测定，见图1。
2．5．2标准曲线的制备：精密量取上述对照品贮备
液 ．05、0．1、0．2、0．5、1．0、1．5、2．0mL，分别置10
mL量瓶中，用甲醇稀释至刻度，进样20pL，在上述
色谱条件下分离测定，记录色谱图，分别在320nm
和430nm处计算二苯乙烯苷和酚红的峰面积，以质
量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，进行线性回归。
2．5．3精密度和准确度：分别制备含二苯乙烯苷质
量浓度为140、35、3．5pg／mL的胃灌注液及肠循环
液质控样品，其中肠循环液中含酚红质量浓度分别
为40、10、1pg／mL。精密量取2．0mL胃灌注液质
控样品，按2．3项下操作，测定二苯乙烯苷的质量浓
度；取肠循环液质控样品，按2．4项下操作，测定二苯
乙烯苷和酚红的质量浓度。每个质量浓度5个样本，
于1d内测定，计算回收率及日内精密度；每个质量
浓度5个样本，于3d内测定，计算日间精密度。
2．5．4 稳定性考察：取二苯乙烯苷质量浓度为
2．5、5、10mg／mL的胃灌注液，置37℃水浴中，分
别于0、0．5、1．0、2．0、4．0、6．0h取样2．0mL，按
2．3项下操作，测定二苯乙烯苷在胃灌注液中的质量
浓度变化；另取二苯乙烯苷质量浓度为30、60、120
pg／mL肠循环液，置37℃水浴中，分别于0、0．5、
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1217·
—■iF矿—■iF万
C
2
．．．．．．_．．．．．．．．．．．．．_，、，．一
02 468 10 西i再可矿矿■i而
t／min
1---苯乙烯苷2一酚红
1-stilbeneglycoside2-phenolsulfonphthelein
图1 二苯乙烯苷和酚红的混合对照品溶液在320nm处(A)及430nm处(B)、空白肠循环液
在320nm处(C)及430nm处(D)、肠循环后样品溶液在320rim处(E)及430fin处
(F)、胃灌注后样品溶液在320nm处(G)的HPLC／DAD色谱图
Fig．1HPLC／DADChromatogramsofmixedsolutionofstllbeneglycosideanphenolsulfonphthaIeininmethanol
at320nm(A)and430nm(B)，blankintestinalcirculationsolutionat320nm(C)and430m(D)，sample
ofintestinalabsorptiona 320m(E)and430田(F)，andsampleofstomachalabsorptiona 320m(G)
1．0、1．5、2．0、2．5h取样，按2．4项下操作，测定二 为0时，其后每隔15min亦按同法取样并补加空白
苯乙烯苷和酚红在肠循环液中的质量浓度变化。 肠循环液，循环2h后，中止试验。按2．4项下操作，
2．6大鼠在体胃吸收实验[8’9] 测定各时间点样品中二苯乙烯苷和酚红的质量浓
2．6．1胃吸收实验方法：将实验前禁食12h(自由 度。根据Fick方程原理，以肠循环液中剩余药量的
饮水)，体质量(250+20)g的SD大鼠，按6mE／ 对数(1nX)对取样时间(￡)作图，得到一条直线
kg剂量ip25％乌拉坦溶液，麻醉后固定，切开腹 (方程为lnX=lnXo—K。￡)，从直线斜率可求吸收速
部，暴露胃，在贲门、幽门两处各切-d,口，分别插入 率常数匠，计算吸收半衰期(￡。／。)，t，／。=0．693／K．；
塑料管并结扎，用生理盐水将胃腔冲洗干净，取下塑 单位时间吸收百分率(P)，P=(C。×V。一C。×y。)／
料插管并重新结扎贲门，并将胃内溶液吸干。吸取胃 (C。×y。×￡)×100％(C。：肠循环液0时刻药物质量
灌注液2．0mL注射到胃内，结扎幽门。将胃放回腹 浓度；y。：肠循环液0时刻药物体积；ct：肠循环液t
腔，用红外灯保持体温37℃左右。胃灌注液中药物 时刻药物质量浓度；V。：肠循环液t时刻药物体积；￡：
质量浓度为初始质量浓度。1h后取出胃，将胃内容 循环液循环时间)。
物按2．3项下操作，测定二苯乙烯苷的质量浓度，量 2．7．2药物质量浓度对肠吸收的影响：分别将药物
瓶中药物质量浓度作为终质量浓度，根据药物初始药 质量浓度为30、60、120／-g／mL的肠循环液进行肠
量和终末药量之差(初始质量浓度×初始体积一终 吸收实验，考察药物质量浓度对肠吸收的影响。
质量浓度×终体积)与时间的比值计算药物吸收率。 3结果
2．6．2药物质量浓度对胃吸收的影响：分别将药物 3．1 酚红测定方法的考察结果：酚红的标准曲线为
质量浓度为2．5、5、10mg／mL的胃灌注液进行胃A=72．92C一55．01，，．=0．9994，线性范围1～40
吸收实验，考察药物质量浓度对吸收的影响。 pg／mL；酚红在肠循环液中的精密度和准确度考察
2．7大鼠在体肠吸收实验[1“111 结果见表1，表明此方法可用于肠循环液中酚红的定
2．7．1肠吸收实验方法：将实验前禁食12h(自由 量测定。稳定性考察结果表明，在含二苯乙烯苷不同
饮水)，体质量(250士20)g的SD大鼠，按6mE／ 质量浓度(30、60、120／-g／mL)的肠循环液中，酚红
kg剂量ip25％乌拉坦溶液，麻醉后固定，沿腹中线 在2．5h内峰面积的RSD为0．1％，表明酚红在肠
切开腹部，自十二指肠上部及结肠下部各插入直径 循环液中非常稳定。
约0．3am的塑料管，扎紧，用37℃生理盐水冲净3．2二苯乙烯苷测定方法的考察结果：二苯乙烯苷
肠内容物，再用空气排净残留液体，然后装好回流装 的标准曲线为A一62．11C一145．7，，．=0．9996，线
置。取预热至37℃的肠循环液，以5mL／min的体性范围3．5～140t。g／mL。二苯乙烯苷在肠循环液
积流量预循环10min后，将体积流量调为2．5mE／ 及胃灌注液中的精密度和准确度考察结果见表1，表
rain，立即自盛肠循环液的三颈瓶中取样1．0mL， 明此方法可用于胃灌注液及肠循环液中二苯乙烯苷
同时向三颈瓶中补加空白肠循环液1．0mL，此时计 的定量测定。稳定性考察结果表明，在不同质量浓度
万方数据
·1218· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月
(2．5、5、10mg／mL)的胃灌注液中，二苯乙烯苷在
6h内峰面积的RSD均小于0．5％，表明二苯乙烯
苷在胃灌注液中稳定性良好；在不同质量浓度
(0．03、0．06、0．12mg／mL)的肠循环液中，二苯乙
烯苷在2．5h内峰面积的RSD在5．O～1．5％，表
明二苯乙烯苷在肠循环液中稳定性较差，肠吸收实
验样品需立即测定，并且测定结果需进行校正，即：
取不同质量浓度(O．03、0．06、0．12mg／mL)的肠
循环液，置37℃水浴中，每隔15rain取样1．0
mL，依法测定，并计算每一时间点的降解率[D。，
D。=(1一C。／C。)×100％，C。：水浴0时刻药物质量
浓度；c。：水浴t时刻药物质量浓度]。肠吸收实验样
品测定结果按下式进行校正：实验剩余药量一测定
剩余药量+初始药量×D。。
表1 二苯乙烯苷及酚红在胃灌注液及肠循环液中的
精密度和准确度结果白=5)
Table1 Precisionandaccuracyofstilbeneglycoside
andphenolsuIfonphthaleininblankstoma-
chalperfusateandblankintestinalcircula—
tionsolution白=5)
3．3 胃吸收实验结果：大鼠在体胃吸收实验1h
后，二苯乙烯苷在胃内的吸收百分率见表2。可见二
苯乙烯苷在大鼠胃中吸收较好，对不同质量浓度的
二苯乙烯苷在胃内的每小时吸收率进行方差分析，
结果表明，低质量浓度与中质量浓度，中质量浓度与
高质量浓度之间无显著性差异(尸>0．05)，而低质
量浓度与高质量浓度之间则有显著性差异(P<
0．05)，说明二苯乙烯苷在胃内吸收不完全是被动吸
收，还可能存在其他的转运机制，如主动转运等，还
有待于进一步研究。
表2二苯乙烯苷大鼠在体胃吸收实验结果
Table2 Absorptionofstiibeneglycosideinstomachinrats
3．4肠吸收实验结果：大鼠在体肠回流2h后，不
同质量浓度的二苯乙烯苷在肠内吸收的K．、t，／2、尸
见表3。可见，各回归直线的r值均大于0．9，表明在
肠道内药物质量浓度的下降与循环时间呈线性关
系，故吸收动力学为一级吸收。对不同药量时的K。
进行方差分析，结果表明，不同药物质量浓度下的
K。间差异无显著性(P>0．05)。可知在30～120
ug／mL时，质量浓度对二苯乙烯苷在肠道内的吸收
速率没有影响，提示其在肠道内的吸收是被动扩散
的结果。二苯乙烯苷在肠道内吸收率约为5％，表明
吸收较差，故未对肠道吸收进行进一步的分段研究。
表3不同质量浓度二苯乙烯苷在大鼠在体肠的吸收参数
(；士S，n一5)
Table3 Absorptionparametersofstibeneglycoside
atvariousconcentrationinintestineinrats
(；士$，n一5)
质量浓度／(腿·mL一1) K。／h一1 tl／z／h P／％ r
30
60
120
4讨论
由于酚红不被肠道吸收，所以在肠吸收实验中
用于测定对水分的吸收，以计算肠循环液中药物浓
度的变化。通常采用紫外分光光度计另行测定肠循
环液中酚红浓度，专属性差，且操作繁琐。本实验采
用高效液相色谱法同时测定肠循环液中二苯乙烯苷
及酚红，既减少实验步骤，又增加数据的准确性。
稳定性考察结果表明，二苯乙烯苷在胃酸的酸
性条件下稳定，而在肠循环液的碱性条件下稳定性
较差，因此为了消除药物降解对肠循环实验结果的
影响，首先考察了不同质量浓度二苯乙烯苷的肠循
环液在37℃水浴中不同时间点的降解率，然后对
肠吸收实验样品测定结果进行了校正，实验结果令
人满意。此方法简便快速，结果准确，便于推广。
二苯乙烯苷为弱酸性药物，在胃内酸性条件下
大部分以分子形式存在，有利于药物的吸收，而在肠
道碱性条件下则以解离状态存在，导致吸收较差。因
此二苯乙烯苷主要在胃内被吸收，实验结果表明，在
胃内二苯乙烯苷的吸收量随药物剂量的增加而增
加，但吸收率却有所降低，说明其在胃部的吸收可能
不止是被动扩散的结果，具体机制有待进一步研究。
大鼠直接ig给予二苯乙烯苷后，其吸收速度
快，但生物利用率低，二苯乙烯苷主要以葡萄糖醛酸
结合物的形式经胆汁排泄[12】。通常药物的Ⅱ相代谢
产物经胆汁排入十二指肠后能在肠道菌及酶的作用
下转化为原型药物被重吸收入血，导致血药浓度出
现双峰现象。二苯乙烯苷的胃肠吸收研究结果表明，
i!；i
0
0
0ii；
nv
0
0士士士iilii；
4
4
3}士土士li!ilii
0
0
O
O
0
O
0
0
O士士士iii
O
0
0
O
0
O
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第8期2008年8月·1219·
二苯乙烯苷主要吸收部位是胃，在肠道内吸收较差。
这可能是二苯乙烯苷在进行药动学研究时吸收速度
快，生物利用率低以及未出现双峰现象的主要原因。
并且在进行肠吸收研究时在肠循环液中未发现代谢
物，这亦可能是由于二苯乙烯苷在肠道内吸收较差，
且组织分布较广，导致经胆汁排泄的代谢物量甚微，
故可忽略胆汁排泄对测定结果的影响。
鉴于二苯乙烯苷在胃肠道内的吸收特点，在对
二苯乙烯苷进行新药开发时，可以考虑通过选择合
适的剂型，如制成胃悬浮片等，来延长药物在胃内停
留的时间，从而改善二苯乙烯苷的吸收，提高生物利
用度，减少给药剂量。
参考文献：
[13RyuG，JuJH，ParkYJ，et02．Theradicalscavenging
effectsofstibeneglucosidesfromPoygonummuhiflDm”
[J]．ArchPharmRes．2002，25(5)：636—639．
[2]LvS，GuXH，TangJ，矗a1．Antioxidantactivityof
stilbeneglycosidefromPoygonummultiflorumThunb．in
vivo[J]．FoodChem。2007．104(4)：1678—1681．
[3]楚晋，叶翠飞，李林．等．二苯乙烯苷对D-半乳糖致脑
老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响口]．中国药房，
2005，16(1)：13-16．
谢文杰，李林，魏海峰，等．二苯乙烯苷对D一半乳糖拟痴
呆小鼠海马基因表达的影响[J]．中国药理学与毒理学杂志，
2005。19(1)：24—28．
张兰，邢颖，赵玲，等．不同时程APP转基因小鼠学
习记忆改变及参乌胶囊、二苯乙烯苷的干预作用口]．中国行
为医学科学，2006，15(3)：193—196．
高 埴，胡英杰，符林春．何首乌二苯乙烯苷的调节血脂作
用[J]．中国中药銮志，2007。32(4)：323—326．
YangPY，AlmoftiMR，LuL，eta1．Reductionofathe—
rosclerosisincholesterol-fedabbitsandecreaseofexpre—
ssionsofintracellularadhesionm lecule一1andvascular
endothelialgrowthfactorinfoamcellsbyawater—solution
fractionofPolygonummult班DⅢm[J]．JPharmacolSci，
2005．99(3)：294—300．
PassamontiS，VrhovsekU，VanzoA，eta1．Thestomach8
Bsiteforanthocyaninsbsorptionfr mfood[J]．FEBS
Lett，2003，544(1—3)：210—213．
Zhaog，EgashiraY·S nadaH．eta1．Ferulicac disquickly
absorbedfromratstomachasthefreeformandthen
conjugatedmainlyinliver[J]．JNutr，2004，134(11)l
3083—3088．
刘宏飞，苏显英。彭博，等．阿昔洛韦在大鼠胃肠道吸收
的研究[J]．中国新药杂志，2006，15(18)：1561—1564．
刘太明，蒋学华．黄芩苷和黄芩素大鼠在体胃、肠的吸收动
力学研究[JJ．中国中药杂志，2006，31(12)：999—1001．
孙江浩，裒志芳，王春英，等．何首乌中二苯乙烯苷在大鼠
体内的药动学[J]．中草药，2005。36(3)：405—408．
冬凌草甲素诱导膀胱癌MB49细胞凋亡及机制研究
车宪平1，韩瑞发2，周 晶3，肖劲逐1，张国庆1，陈道虎1
(1．海南省农垦总局医院泌尿外科，海南海口 570311；2．天津医科大学第二医院泌尿外科
天津市泌尿外科研究所，天津300211；3．天津医科大学药学院，天津300070)
摘要：目的研究冬凌草甲素对膀胱癌MB49细胞株的生长抑制及诱导凋亡作用及其机制。方法MTT法检测
冬凌草甲素对MB49细胞的生长抑制作用；Hoechst33258染色法观察细胞的形态学变化；流式细胞仪检查
AnnexinV—FITC—PI双染色法检测细胞凋亡率；分光光度法检测caspase一3、caspase一8和caspase一9活性变化；
Westernblotting检测Bcl一2和Bax蛋白表达的变化。结果冬凌草甲素对MB49细胞有明显的生长抑制作用，呈
明显的时间一效应关系和浓度一效应关系。随着冬凌草甲素作用浓度增加，凋亡细胞数和坏死细胞数均增加，浓度越
高，坏死细胞的比率增加越多。随着冬凌草甲素作用时间延长，MB49细胞的Caspase一3和Caspase一9活性均升高，
Bcl一2蛋白的表达逐渐减弱，Bax蛋白的表达逐渐增强，但Caspase一8未见明显变化。结论冬凌草甲素对膀胱癌
MB49有明显的抗肿瘤作用。冬凌草甲素可能主要通过Fas／FasL一线粒体途径上调Bax、下调Bcl一2，导致MB49细
胞凋亡的发生。
关键词：冬凌草甲素I凋亡}膀胱癌；Caspases
中图分类号：R286．91 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)08—1219—04
冬凌草甲素是从冬凌草Rabdosiarubescens
(Hemsl．)Hara中提取的一种贝壳杉烯二萜类化合
物。实验证明，冬凌草甲素对多种肿瘤细胞有明显的
抗肿瘤作用‘卜5。。临床研究发现，冬凌草有明显的预
防膀胱肿瘤复发的作用E33；但其预防与治疗浅表性
膀胱肿瘤的作用机制尚不清楚。本实验以膀胱癌
MB49细胞株为研究对象，探讨冬凌草甲素对
MB49细胞的生长抑制作用及机制，为冬凌草甲素
收稿日期：2008—03—28
作者简介；车宪平(1967一)，男，河南省焦作市人，医学博士，副主任医师，研究方向为泌尿系肿瘤。
Telz(0898)66808281E—mail：chexianping@126．com
幻
明
明
刀
胡
叼
叩
I=I
幻
[
[
[
[
[
[
口
口
口
万方数据
二苯乙烯苷大鼠在体胃肠吸收动力学研究
作者： 王春英， 李敏， 袁志芳， 杨维， 解凤立， 张兰桐
作者单位： 河北医科大学药学院药物分析教研室,河北石家庄,050017
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(8)
被引用次数： 6次

参考文献(12条)
1.Ryu G;Ju J H;Park Y J The radical scavenging effects of stibene glucosides from Poygonum
muhiflorum 2002(05)
2.Lv L S;Gu X H;Tang J Antioxidant activity of stilbene glycoside from Poygonum multiflorum Thunb.in
vivo[外文期刊] 2007(04)
3.楚晋;叶翠飞;李林 二苯乙烯苷对D-半乳糖致脑老化小鼠学习记忆及神经营养因子的影响[期刊论文]-中国药房
2005(01)
4.谢文杰;李林;魏海峰 二苯乙烯苷对D-半乳糖拟痴呆小鼠海马基因表达的影响[期刊论文]-中国药理学与毒理学杂
志 2005(01)
5.张兰;邢颖;赵玲 不同时程APP转基因小鼠学习记忆改变及参乌胶囊、二苯乙烯苷的干预作用[期刊论文]-中国行
为医学科学 2006(03)
6.高瑄;胡英杰;符林春 何首乌二苯乙烯苷的调节血脂作用[期刊论文]-中国中药杂志 2007(04)
7.Yang P Y;Almofti M R;Lu L Reduction of atherosclerosis in cholesterol-fed rabbits and decrease of
expressions of intraeellular adhesion molecule-1 and vascular endothelial growth factor in foam
cells by a water-solution fraetion of Polygonum multiflorum 2005(03)
8.Passamonti S;Vrhovsek U;Vanzo A The stomach as a site for anthocyanins absorption from food[外文期
刊] 2003(1-3)
9.Zhao Z;Egashira Y;Sanada H Ferulic acid is quickly absorbed from rat stomach as the free form and
then conjugated mainly in liver[外文期刊] 2004(11)
10.刘宏飞;苏显英;彭博 阿昔洛韦在大鼠胃肠道吸收的研究[期刊论文]-中国新药杂志 2006(18)
11.刘太明;蒋学华 黄芩苷和黄芩素大鼠在体胃、肠的吸收动力学研究[期刊论文]-中国中药杂志 2006(12)
12.孙江浩;裒志芳;王春英 何首乌中二苯乙烯苷在大鼠体内的药动学[期刊论文]-中草药 2005(03)

本文读者也读过(10条)
1. 陈束叶.李铜铃.张洁.张婷婷.贾毅敏.CHEN Shu-ye.LI Tong-ling.ZHANG Jie.ZHANG Ting-ting.JIA Yi-min 盐
酸帕罗西汀大鼠在体肠吸收动力学研究[期刊论文]-中国药学杂志2007,42(8)
2. 孙江浩.袁志芳.王春英.许慧君.张兰桐.SUN Jiang-hao.YUAN Zhi-fang.WANG Chun-ying.XU Hui-jun.ZHANG
Lan-tong 何首乌中二苯乙烯苷在大鼠体内的药动学[期刊论文]-中草药2005,36(3)
3. 王春英.张兰桐.袁志芳.金一宝.张峥.WANG Chun-ying.ZHANG Lan-tong.YUAN Zhi-fang.JIN Yi-bao.ZHANG
Zheng 何首乌醋酸乙酯提取部位与二苯乙烯苷的调血脂作用[期刊论文]-中草药2008,39(1)
4. 张英丰.李玉洁.杨庆.翁小刚.董宇.朱晓新.ZHANG Ying-feng.LI Yu-jie.YANG Qing.WENG Xiao-gang.DONG Yu.
ZHU Xiao-xin 大鼠在体单向肠灌流法进行丹参素、丹酚酸B的肠吸收研究[期刊论文]-中国实验方剂学杂志
2010,16(11)
5. 王春英.张兰桐.袁志芳.刘伟娜.孙江浩 何首乌有效成分二苯乙烯苷的药代动力学研究[期刊论文]-药学学报
2002,37(12)
6. 张新勇.张兴德.高运军.刘幸平.ZHANG Xin-yong.ZHANG Xing-de.GAO Yun-jun.LIU Xing-ping 灯盏花素自微乳
在大鼠肠道吸收动力学研究[期刊论文]-医药导报2009,28(5)
7. 赵玲.李雅莉.张丽.靳洪涛.李林 二苯乙烯苷对高胆固醇血症致β-淀粉样肽增高大鼠模型的影响[期刊论文]-中
国药理学通报2005,21(1)
8. 单进军.邓云天.吴皓.狄留庆 祖师麻香豆素类成分的大鼠小肠吸收研究[期刊论文]-南京中医药大学学报
2009,25(3)
9. 刘太明.蒋学华.LIU Tai-ming.JIANG Xue-hua HPLC同时测定肠循环液中黄芩苷、黄芩素和酚红的浓度[期刊论
文]-华西药学杂志2005,20(5)
10. 刘莉萍.杨耀防.何明.李卫东.邵立健.陈和平.李青.刘丹.Liu Li-ping.Yang Yao-fang.He Ming.Li Wei-dong.
Shao Li-jian.Chen He-ping.Li Qing.Liu Dan 二苯乙烯苷对人脐静脉血管内皮细胞缺氧复氧损伤的影响[期刊论
文]-中国组织工程研究与临床康复2009,13(7)

引证文献(6条)
1.王春英.张子建.刘西哲.张小幸.张兰桐 二苯乙烯苷正辛醇-水分配系数的测定[期刊论文]-河北医科大学学报
2010(8)
2.耿婷.朱慧.张丽.单鸣秋.丁安伟 荆芥内酯大鼠在体胃肠吸收动力学研究[期刊论文]-中草药 2011(7)
3.王春英.杨维.谷建敏.张兰桐 七宝美髯颗粒中二苯乙烯苷在大鼠体内的药代动力学研究[期刊论文]-中成药
2010(2)
4.曹颖.李永吉.吕邵娃 大鼠在体肠灌流模型在中药研究中的应用[期刊论文]-中医药学报 2010(3)
5.王健鲲.朱萱萱.孙建国 何首乌中二苯乙烯苷的药效学和药动学研究进展[期刊论文]-中国临床药理学与治疗学
2011(12)
6.谢岚 何首乌及二苯乙烯苷的研究进展[期刊论文]-天津药学 2010(3)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200808033.aspx