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阿魏胶囊对高脂血症大鼠血脂相关酶的影响
薛 　洁1 ,王 　茜2 ,张海英1 3
(11 新疆医科大学附属中医医院 ,新疆 乌鲁木齐 　830000 ; 21 新疆医科大学 ,新疆 乌鲁木齐 　830000)
摘 　要 :目的 　研究阿魏胶囊对血脂相关酶的影响。方法 　通过高脂血症动物模型 ,应用生物化学的方法研究阿
魏胶囊对血脂相关酶的影响。结果 　动物的脂蛋白脂肪酶 (L PL) 、肝脂酶 ( HL) 及羟甲基戊二酰辅酶 A ( HM G2
CoA) 还原酶活性的值与模型对照组比较 ,差异有统计学意义 ( P < 0105、0101) ,阿魏胶囊组 HL 和 L PL 的酶活性
增加 , HM G2CoA 酶活性降低。结论 　阿魏胶囊调节血脂主要机制有提升机体内的 HL 和 L PL 的酶活性 ,加速血
液中甘油三酯和游离胆固醇的降解 ,抑制 HM G2CoA 酶活性。
关键词 :高脂血症 ; 阿魏胶囊 ; 血脂酶
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 1021619203
　　高胆固醇和高脂蛋白血症是心血管疾病的主要
危险因素 ,降低血浆胆固醇水平是治疗动脉粥样硬
化疾病的有效方法。降脂类化学药物具有降脂快速
和效果明显的特点 ,但由于其潜在的不良反应[1 ] 、患
者对药物的依赖性以及作用靶点较为单一 ,因而很
难满足不同高脂血症患者的需求。与之相比较而
言 ,中药制剂对于治疗高脂血症这类复杂的疾病 ,具
有不良反应小、多靶点协同作用的优势[2 ] 。近年来 ,
医学科研工作者们通过大量的科学研究和临床实
验 ,发掘了一批具有显著降脂作用的中药[3 ] 。
随着分子生物学在降脂类药物作用机制研究中
的应用 ,近 10 年来 ,国内外的医学科研工作者发现
了很多与脂类代谢作用相关的重要酶和基因。涉及
脂类合成相关酶 ,如 HM G2CoA [4 ] (羟甲基戊二酰
辅酶 A) 、L PL (脂蛋白脂肪酶) 、HL (肝脂酶) 和
L CA T (卵磷脂胆固醇脂酰转移酶) 等重要酶类[4 ] ,
它们在胆固醇的分解吸收代谢过程中也起着极为重
要的作用。涉及脂类转运相关基因 ,如 Apo2E (载
脂蛋白 E) [5 ,6 ] 和 Apo2A4 (载脂蛋白 A4) [ 7 ] 均为胆
固醇在肝内外的转运 ,加速胆固醇的代谢。
临床应用和动物实验结果均表明阿魏胶囊在血
脂调节作用方面具有显著的作用[8 ] 。但是该药在体
内的什么部位起作用和究竟是如何起作用 ,是一个
需要解决的关键问题。因此 ,研究阿魏胶囊的降脂
作用机制对于该药的应用具有重要意义。
1 　实验材料
111 　仪器设备 :BecMan ( Allegra 64R) 低温冷冻
离心机、紫外分光光度计 ( Cint ra 20) 、Sartorius
BS224S 精密电子天平、Sartorius PB —19 普及型
p H 计、D K28D 型电热恒温水浴槽。
112 　试剂 :总脂酶测试盒 (L PL 和 HL) 购自南京
建成生物工程研究所 ;胆固醇 (游离型) 测定试剂盒
购自上海名典生物工程有限公司。HMG2CoA 购自
Sigma。其他常规化学试剂均为国产分析纯级。
·9161·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
3 收稿日期 :2009205226　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家“十一五”支撑资助项目 (2007BAI20B07)
作者简介 :薛　洁 ,女 ,博士 ,教授 ,硕士生导师。
113 　实验动物 : SD 大鼠 ,60 只 ,雌雄各半 ,购于新
疆实验动物研究中心 ,生产许可证号 : SCXK (新)
200320002 ,使用许可证号 :SYXK (新) 200320003。
114 　高脂乳剂 :参照文献方法[ 9 ] 自制 :取猪油 25 g
置于烧杯中 ,放在磁力搅拌器上加热 ,待温度升至
100 ℃后 ,加入 10 g 胆固醇 ,溶化后 ,再加入 1 g 丙
硫氧嘧啶 ,搅拌均匀 ,加入 25 mL 聚山梨酯280 ,使
混合均匀 ,制成油相。在另一烧杯中加入 30 mL 纯
化水和 1 ,2 丙二醇 20 mL ,加热至约 60 ℃,加入
2 g 脱氧胆酸钠 ,搅拌至完全溶解 ,制成水相。然后
将水相加入油相 ,充分混匀 ,即得。
115 　药物 :阿魏胶囊内容物 (没食子酸不少于 013
mg/ 粒) ,由新疆医科大学附属中医医院提供 ,阿魏
胶囊剂量以人临床拟用剂量为主要依据 ,按照体表
面积换算成大鼠的等效剂量为试验药物中剂量 ,取
2 倍中剂量为高剂量。确定阿魏胶囊组给药量分别
为生药 8、16 g/ kg。
2 　方法
211 　大鼠高脂模型建立 :将 60 只 SD 大鼠 ,随机分
成 6 组。除对照组外 ,每天都 ig 高脂乳剂 2 mL ,其
中 2 组造模当天分别 ig 阿魏胶囊药物中剂量 (预
防) 组和高剂量 (预防) 组混悬药液 ,连续造模 4 周
后 ,随机抽取各组大鼠 4 只 ,进行血脂生化指标测
定。待模型造模成功后 ,预防给药组继续 ig 阿魏胶
囊 4 周 ,治疗组以中剂量和高剂量在模型成功后 ,ig
以高脂乳剂的第 2 天 ig 阿魏胶囊药物混悬液 4 周。
212 　血脂相关酶活性的检测
21211 　大鼠 L PL 和 HL 粗酶液的制备 :大鼠处死
后 ,分别取一定量的心脏、肝脏 ,用冷生理盐水冲洗 ,
待将血迹完全冲洗干净后 ,用滤纸吸干水分。称取
心脏和肝脏的质量 ,按质量体积百分比加入一定量
的冷生理盐水 ,制成 10 % 的心组织匀浆和 10 % 的
肝组织匀浆。4 ℃、4 000 r/ min 离心 10 min 后 ,取
上清液 ,即为 L PL 和 HL 的粗酶液。
21212 　大鼠 HM G2CoA 还原酶的制备 :从 - 70 ℃
冰柜中取出大鼠肝脏 ,于 4 ℃缓慢融化。称取肝脏
2 g ,加入 5 mL 的 PES K 缓冲液 ,冰浴中匀浆。
4 ℃、10 000 r/ min 离心 20 min ,吸上清至一新的离
心管中。将上清液分装于 2 mL 离心管中 , 4 ℃、
13 000 r/ min 离心 60 min。弃上清液 ,沉淀 (为微
粒体) 于 - 30 ℃冻存。将微粒体于室温下融化
后 ,加入 400μL PES K ,4 ℃、13 000 r/ min 离心 60
min。收集上清液 ,沉淀再重复上述微粒体冻融 ,离
心步骤共 4 次。合并 5 次收集的上清 ,分装于 2 mL
离心管中 ,37 ℃水浴 90 min。4 ℃,13 000 r/ min
离心 30 min ,收集上清液。在装有 2 mL 上清液的
离心管中 ,加入 01352 g 硫酸铵 ,至饱和度为 30 % ,
4 ℃静置过夜。4 ℃、13 000 r/ min 离心 30 min ,收
集上清液。在上清液中 ,继续加入 01254 g 硫酸铵 ,
至饱和度为 50 % , 4 ℃静置过夜。4 ℃、15 000
r/ min 离心 30 min ,沉淀溶于 1 mL PES K ( PES K
中含甘油 33 % , KCl 为 1 mol/ L) 。Lowrry 法测定
酶浓度 ,并用 PES K ( PES K 中含甘油 33 % , KCl 为
1 mol/ L) 将酶液稀释至 80 g/ L 。
21213 　L PL 和 HL 酶活性测定 :参照南京建成生
物工程研究所总脂酶测试盒说明操作测定。
21214 　L CA T 酶活性测定 :参照上海名典生物工
程有限公司的胆固醇 (游离型) 测定试剂盒说明操
作测定。
21215 　HM G2CoA 还原酶活性测定 :在 5 mL 离心
管中加入以下成分 :磷酸缓冲液 (p H 6. 8) 1. 8 mL ,
NADP H 0. 3 mL , HM G2CoA 0. 3 mL , HM G2CoA
还原酶粗酶液 0. 6 mL ,总体积为 3 mL 。混匀后 ,于
340 nm 处测定吸光度 ( A) 值。
213 　数据处理方法 :实验所得数据经 Excel2003 软
件处理 ,组间采用双侧 t 检验 ,实验结果采用 x ±s。
3 　结果
311 　大鼠 L PL 、HL 和 L CA T 酶活性的变化 :实验
结果显示 :与模型组比较阿魏胶囊预防和治疗给药
组大鼠的心组织 L PL 和肝组织 HL 的酶活性均明
显提高 ( P < 0101) 。而给药组的 L CA T 酶活性均
出现了不同程度的降低。这可能因为阿魏胶囊中的
药物成分抑制了编码 L CA T 酶蛋白基因的表达量 ,
而 L CA T 酶浓度下降 ,导致了其酶活性降低。结果
见表 1。
312 　大鼠 HM G2CoA 酶活性的变化 :由数据显示 ,
相对于模型组来说 ,阿魏胶囊对大鼠的 HM G2CoA
酶活性有降低作用。结果见表 1。
4 　讨论
　　本实验结果表明阿魏胶囊能够提高高脂血症大
鼠的 HL 和 L PL 酶活性 ,但给药组的酶活性始终
低于对照组的酶活性 ,说明高血脂的确可导致 HL
和 L PL 酶活性的降低 ,阿魏胶囊未使其恢复到正常
水平。而给药组的 L CA T 酶活性均出现了不同程
度的降低。这可能因为阿魏胶囊中的药物成分抑制
了编码 L CA T 酶蛋白基因的表达量 ,而 L CA T 酶
浓度下降 , 导致了其酶活性降低。阿魏胶囊对
HM G2CoA的酶活性具有明显的抑制作用 ,但对
·0261· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
表 1 　阿魏胶囊对高脂大鼠 LPL、HL、LCAT 和 HMG2CoA 活性的影响 ( x ±s)
Table 1 　Effect of Awei Capsula on activities of LPL , HL , LCAT, and HMG2CoA in hyperlipidemia rats ( x ±s)
组别
剂量/
(g ·kg - 1)
动物/
只
肝组织 HL/
(μg ·mL - 1 ·h - 1)
心组织 L PL/
(μg ·mL - 1 ·h - 1)
LCA T/
(nmol ·mL - 1 ·h - 1)
HM G2CoA
( A)
模型 - 9 71724 ±01 755 101 918 ±01395 41 755 ±01285 01 217 ±01014
对照 - 10 151297 ±01 940 3 3 111 637 ±01413 3 61 248 ±01311 01 206 ±01003
阿魏胶囊 (预防) 8 7 101392 ±01 534 3 3 121 326 ±01501 3 3 11 569 ±01106 01 085 ±01005 3 3
16 8 121426 ±01 564 3 3 101 891 ±01273 21 298 ±01103 01 135 ±01024 3 3
阿魏胶囊 (治疗) 8 9 131925 ±01 287 3 3 151 466 ±01824 3 3 21 496 ±01351 01 135 ±01130 3 3
16 7 101859 ±01 869 3 3 141 122 ±01535 3 3 31 611 ±01355 01 145 ±01009 3 3
　　与模型组比较 : 3 P < 01 05 　3 3 P < 01 01
　　3 P < 0105 　3 3 P < 01 01 vs model group
L CA T 酶的活性作用不明显 ,不能够提高 L CA T 酶
活性。阿魏胶囊给药后 ,大鼠脂类代谢相关酶活性
均发生了改变。但其酶活性究竟是由于阿魏胶囊的
药物成分改变了这些酶作用的 p H 值和重金属离子
浓度 ,还是影响了脂类代谢相关酶基因的转录水平
和蛋白表达水平 ,尚需进一步深入研究。
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银杏叶片治疗冠心病心绞痛疗效观察
吕 　英1 ,陈文燕2 3
(11 浙江省台州市路桥中医院 内科 ,浙江 台州 　318050 ; 21 浙江省台州市黄岩红十字医院 ,浙江 台州 　381020)
摘 　要 :目的 　观察银杏叶片对冠心病心绞病的治疗效果。方法 　冠心病心绞痛患者 134 例 ,随机分为两组 ,治疗
组 88 例 ,在综合治疗的基础上给予银杏叶片 80 mg ,口服 ,每日 3 次 ;对照组 46 例 ,在综合治疗的基础上给予复方
丹参滴丸 ,每天 10 粒 ,舌下含服 ,两组均以 1 个月为 1 个疗程 ,均治疗 1 个疗程。对两组临床症状的改善、心电图、
血脂的变化进行对比观察。结果 　治疗组症状明显缓解 ,心电图心肌缺血明显改善 ,血清总胆固醇 ( TC) 平均下
降 0150 mmol/ L ( P < 0105) ,血清甘油三酯 ( T G) 平均下降 0125 mmol/ L ,高密度脂蛋白胆固醇 ( HDL2C) 平均升
高 0124 mmol/ L ( P < 0105) ,低密度脂蛋白胆固醇 (LDL2C) 平均下降 0153 mmol/ L ( P < 0105) ,心绞痛发作次数
和持续时间均有不同程度的降低 ( P < 0105) ,与对照组比较 ,疗效更好。结论 　银杏叶片是辅助治疗冠心病心绞
痛安全有效的药物。
关键词 :银杏叶片 ; 心绞痛 ; 冠心病
中图分类号 :R28611 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 1021621203
　　冠心病心绞痛是当前严重威胁人类健康的常见
病之一 ,2005 年 1 月至 2008 年 12 月 ,笔者采用银杏
叶片治疗冠心病心绞痛患者 88 例 ,取得显著疗效。
1 　资料与方法
111 　临床资料 :确诊冠心病 ,西医诊断参照国家心
脏病学会和协会及世界卫生组织临床命名标准化联
合专题报告《缺血性心脏病的命名及诊断标准》制
定 ,且常规心电图 ST 段水平型下降 ≥011 mV 者 ,
·1261·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 10 期 2009 年 10 月
3 收稿日期 :2009205205　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
作者简介 :吕　英 (1964 —) ,女 ,浙江台州人 ,副主任医师 ,从事临床内科及心血管内科 20 余年 ,研究方向为心血管疾病的中药治疗。
E2mail : lvying16888 @163. com