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阿魏胶囊对模型动物血脂、微循环及血液流变学的影响
薛 洁,韩 荣,张海英*
(新疆医科大学附属中医医院, 新疆 乌鲁木齐 830000)
摘 要:目的 探讨阿魏胶囊对大鼠血脂、小鼠微循环及血瘀模型大鼠血液流变学的影响。方法 以高脂饮食建
立高脂血症大鼠模型,将大鼠随机分为模型组, 阿魏胶囊低、中、高剂量组, 阳性对照组和对照组, 给药 5 周后,测定
胆固醇 ( TC)、甘油三酯 ( T G)、高密度脂蛋白 ( H DL-C)、低密度脂蛋白 ( LDL-C) 等指标。小鼠注射重酒石酸去甲
肾上腺素 ( Adr ) , 观察给予 Adr 前后 8 min 小鼠耳廓微循环情况。大鼠给药 12 d, 以高分子右旋糖酐建立大鼠血
瘀证模型,测定血液流变学各项指标。结果 阿魏胶囊可降低血清 TC、TG、LDL-C, 升高血 HDL-C/ TC 值 ,与模
型组相比差异有统计学意义 (P < 01 05)。阿魏胶囊中、高剂量组与模型组比较, A、V 血管收缩率和毛细血管网交
叉点减少明显降低 (P < 01 01、01 05)。阿魏胶囊能显著降低小鼠全血黏度和红细胞压积, 与模型组比较有显著性
差异 (P< 01 05、01 01)。结论 阿魏胶囊能降低高脂血症大鼠的血脂水平, 并对小鼠耳廓微循环和大鼠血液流变
学有明显改善作用。
关键词:阿魏胶囊; 血脂; 微循环; 血液流变学
中图分类号: R2861 1 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 02-0271-04
阿魏胶囊由阿魏、拳参、厚朴、白茅根等药材组
成,具有健脾除湿、化瘀泄浊之功效,主治痰湿内阻
证、瘀血内阻证及脾虚湿盛证,临床用于高脂血症的
治疗,疗效显著。根据其功能主治,本研究观察阿魏
胶囊对高脂血症动物模型、血瘀证动物模型的影响,
为其临床应用提供依据。
1 材料
11 1 仪器: YDA ) Ô型血液粘度计 (北京宏润达科
技发展有限公司) , T MS ) 1024i 型全自动生化仪
(日本 T OKYO BOEKI 公司) , M EK ) 6318K 血液
分析仪 (日本光电公司) , T GL ) 16G 高速冷冻离心
机 (上海科鑫仪器有限公司) , BI ) 2000 医学图像
分析系统 (成都泰盟科技有限公司) , BK1000 生物
显微镜 (重庆光电仪器有限公司) , M EK ) 5216 血
细胞分析仪 (上海光电医用电子仪器有限公司)。
11 2 试药: 阿魏胶囊, 新疆维吾尔自治区中医医院
提供,批号 20071016;辛伐他汀,哈药集团三精制药
有限公司,批号 0709204;复方丹参片, 陕西利君恒
心堂药业有限公司,批号 050601; 地奥心血康胶囊,
成都地奥制药集团有限公司,批号 702013。
11 3 试剂: 总胆固醇 ( T C) (批号 71210K021)、甘
油三酯 ( T G) (批号 80103L021)、高密度脂蛋白胆
固醇 ( HDL-C) (批号 71017I011)、低密度脂蛋白胆
固醇 ( LDL-C) (批号 711125011) 检测试剂盒, 购
自北京利德曼生化技术有限公司。溶血剂 (上海东
湖生物科技有限公司, 批号 20071107)、稀释液 (上
#271#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
* 收稿日期: 2008- 08-10基金项目:国家/ 十一五0科技支撑计划项目 ( 2007BAI20B07)作者简介:薛 洁( 1962 ) ) ,女,陕西人,教授,在读博士,研究方向为中药新药研发。
T el : ( 0991) 5801584 E-mail: kjk xuejie@ 163. com
海东湖生物科技有限公司, 批号 071119) , 香柏油
(国药集团化学试剂公司, 批号 20040820) , 戊巴比
妥钠 (成都市科龙化工试剂厂, 批号 20060727) , 重
酒石酸去甲肾上腺素注射液 (上海禾丰制药有限公
司, 批 号 070903 ) , 高 分 子 右 旋 糖 酐
( DEXT RAN500) 批号 0501622,肝素钠注射液 (南
京新百药业有限公司,批号 070201) , 01 9% 氯化钠
注射液 ( 四川科伦药业股份有限公司, 批号
D061003E) , 乌来糖 (成都科龙化工试剂厂, 批号
20060727)。
11 4 饲料: 高脂颗粒饲料配方为猪胆盐 01 5%、胆
固醇 2%、蛋黄粉 10%、进口猪油 10%、全脂无糖奶
粉 20%、基础饲料 571 5% ,苏州双狮实验动物饲料
科技服务有限公司提供。造模用高脂乳剂自制, 制
备方法 [ 1]为取猪油 25 g 置于烧杯中,放在磁力搅拌
器上加热, 待温度升至 100 e 后, 加入 10 g 胆固
醇,溶化后,再加入 1 g 丙硫氧嘧啶,搅拌均匀,加入
25 mL 聚山梨酯 - 80,使混合均匀, 制成油相。在
另一烧杯中加入 30 mL 纯化水和 1, 2-丙二醇 20
mL,在电炉上加至约 60 e ,然后加入 2 g 脱氧胆酸
钠,搅拌至完全溶解,制成水相。然后将水相加入油
相,充分混匀,即得。
115 实验动物及环境: SD 大鼠,体质量 130~ 160 g,
由成都中医药大学实验动物研究中心提供。合格证
号: SCXK (川) 2004-11。昆明种小鼠,体质量 23~
26 g,雌雄各半,由四川省医学科学院实验动物研究
所提供,合格证号: SCXK (川) 2004-15。动物房 (等
级) :一级动物房,实验动物使用许可证号: 006, 温度:
18~ 28 e ,相对湿度: 40% ~ 70% ,换气次数: 10~ 15
次/ h,光照条件: 12 h 昼/ 12 h 夜交替。
2 方法与结果
21 1 对高脂血症大鼠血脂的影响: 取 SD 大鼠, 雌
雄各半。按随机抽取 12 只大鼠为对照组, 以鼠颗
粒饲料喂养。剩余动物以高脂饲料喂养, 并每日 ig
给予高脂乳剂 1 mL/ 100 g 造模[ 2, 3] (对照组 ig 等体
积 01 5% CMC-Na)。造模 4周后,随机抽取对照组
和造模组部分大鼠禁食不禁水 16 h, 眼眶后静脉丛
取血,测定血清中 TC、T G、HDL-C 和 LDL-C,确认
高脂血症模型成功后,将造模动物随机分成 5组, 阳
性对照组 ig 辛伐他汀 1 mg / kg,阿魏胶囊低、中、高
剂量组分别 ig 给药 4、8、16 g/ kg, 模型组 ig 等剂量
01 5% CMC-Na, 连续 5周。给药期间动物隔日 ig
给予高脂乳剂 (对照组 ig 等体积 01 5% CMC-Na)
1 mL/ 100 g。动物处死前禁食不禁水 12 h, 给药后
1 h, 眼眶后静脉丛取血, 测定血清中 TC、T G、
HDL-C 和 LDL-C,并计算 HDL-C/ TC 值。数据以
x ? s 表示,使用 SPSS 111 0 统计分析软件进行单因
素方差分析(以下实验数据处理方法相同)。
造模 4周后, 对照组和模型组大鼠血脂指标结
果见表 1。给药 5 周后, 各组大鼠血脂指标见表 2。
在第 1阶段的造模过程中, 造模组大鼠连续 4周给
予高脂乳剂和高脂饲料后, 血清 T C、TG、LDL-C 较
对照组显著升高 ( P< 01 01、01 05) , HDL-C/ TC 值
较对照组显著降低 ( P< 01 01) , 提示高脂血症动物
造模成功。在第 2阶段为期 5 周的治疗过程中, 模
型组的血脂指标与对照组比较有显著性差异 ( P<
01 01、01 05) ,说明该模型继续成立。阳性药辛伐他
汀能够降低血清 T G 水平 ( P< 01 05) , 对血清 T C、
LDL- C 量表现出降低的趋势, 并能够升高 HDL-C/
T C 值 ( P< 01 05) , 符合辛伐他汀的药理作用特点。
阿魏胶囊 3个剂量组对血清 TC、T G、LDL-C 水平
均有一定降低作用, 对 HDL-C/ TC 值均有一定升
高作用; 其中, 中剂量能显著降低血清 T G 水平
( P< 01 05) , 高剂量能明显降低血清 LDL-C 水平
( P< 01 05)。
表 1 造模 4周后正常和模型大鼠血脂的比较 (x ? s)
Table 1 Comparison of blood lipid between normal and
model rats after four weeks of modeling ( x? s)
组 别 动物/
只
T C/
( mmol# L- 1 )
TG/
( mmol # L- 1)
LDL-C/
( mmol# L- 1 )
HDL-C/
T C
对照 9 11 45 ? 01 39 01 92 ? 01 27 01 36 ? 01 14 01 91 ? 01 07
模型 30 41 66 ? 11 65* * 11 48 ? 11 08* 21 37 ? 01 99* * 01 49 ? 01 07* *
与对照组比较: * P < 01 05 * * P < 01 01
* P < 01 05 * * P< 01 01 v s cont rol g rou p
表 2 阿魏胶囊对高脂血症大鼠血脂的影响 ( x? s)
Table 2 Effect of Awei Capsula on blood lipid
in hyperlipidemia rats ( x ? s)
组 别 剂量/
( g # kg- 1 )
动物/
只
TC/
( mmol# L- 1 )
TG/
( mmol# L- 1 )
LDL-C/
( mmol # L- 1)
HDL-C/
TC
对照 - 10 11 11 ? 01 26 11 19 ? 01 36 01 3 4 ? 01 08 01 96 ? 01 18
模型 - 13 21 73 ? 11 19* * 11 68 ? 11 24* 11 3 2 ? 01 82* * 01 61 ? 01 16* *
辛伐他汀 01 001 11 21 47 ? 11 12 01 98 ? 01 37# 11 0 4 ? 01 70 01 73 ? 01 16#
阿魏胶囊 4 10 21 41 ? 01 73 11 25 ? 01 64 01 9 1 ? 01 36 01 70 ? 01 11
8 13 21 41 ? 01 84 01 98 ? 01 33# 11 0 2 ? 01 48 01 70 ? 01 09
16 12 21 08 ? 01 59 11 09 ? 01 48 01 8 4 ? 01 31# 01 72 ? 01 11
与对照组比较: * P < 01 05 * * P < 01 01
与模型组比较: # P < 01 05
* P < 01 05 * P< 01 01 v s con tr ol group
# P < 01 05 v s model group
21 2 对小鼠耳廓微循环的影响: 取昆明种小鼠 50
只,随机分为 5组,每组 10只,雌雄各半。阳性对照
#272# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
组 ig 复方丹参片 01 72 g/ kg ,阿魏胶囊低、中、高剂
量组分别 ig 药物 8、16、32 g/ kg,模型组 ig 等剂量
01 5% CMC-Na。连续 7 d。末次给药后 40 min, 小
鼠 ip 01 3% 戊巴比妥钠溶液麻醉给药体积 01 2
mL/ 10 g。麻醉后将小鼠固定在显微镜观察台上,
在耳廓表面滴加少许香柏油, 生物显微镜在 40 ~
100 倍下观察小鼠耳廓微循环情况, 利用医学图像
分析系统微循环测定功能测定小鼠细动脉 ( A) 和
细静脉 ( V) 管径、计数毛细血管交叉网点、描述血
细胞流态[ 4, 5] 。随后每只小鼠 ip 重酒石酸去甲肾上
腺素 ( Adr) 注射液 200 Lg / kg, 给药体积 01 1 mL/
10 g。观察给予 Adr 后 8 m in 左右小鼠耳廓微循环
情况,测定指标与给 Adr 前相同。计算血管收缩率
[血管收缩率= (给 Adr 前血管管径- 给 A dr 后血
管管径) /给 A dr 前血管管径 @ 100% ]、交叉点减少
率[交叉点减少率= (给 Adr 前血管交叉点数- 给
Adr 后血管交叉点数) /给 Adr 前血管交叉点数 @
100% ]。结果见表 3。各组注射 Adr 后 8 min, 阳
性药组和阿魏胶囊中、高剂量组与模型组比较, A、
V血管收缩率和毛细血管网交叉点减少率明显降
低 ( P< 01 01、01 05)。
213 对高分子右旋糖酐所致大鼠血瘀模型血液流变
学的影响:取 SD 大鼠,雌雄各半。随机分为6组,
表 3 阿魏胶囊对小鼠耳廓微循环的影响 ( x? s, n= 10 )
Table 3 Effect of Awei Capsula on microcirculation
of auricle in mice ( x ? s, n= 10 )
组 别 剂量/ ( g # kg- 1 ) A 血管收缩率/ % V 血管收缩率/ % 交叉点减少率/ %
模型 - 331 5 ? 51 8 391 2 ? 51 5 421 8 ? 71 3
复方丹参片 01 72 221 1 ? 61 7# # 321 5 ? 51 5# # 301 3 ? 51 9# #
阿魏胶囊 8 301 0 ? 101 4 391 9 ? 61 5 451 5 ? 71 2
16 241 3 ? 51 5# # 281 6 ? 51 7# # 331 4 ? 91 5#
32 171 0 ? 61 7# # 221 2 ? 41 0# # 291 6 ? 101 6# #
与模型组比较: # P < 01 05 # # P < 01 01
# P < 01 05 # # P< 01 01 v s m odel group
阳性对照组 ig 地奥心血康 60 mg/ kg ,阿魏胶囊低、
中、高剂量组分别 ig 给药 4、8、16 g / kg,对照组及模
型组 ig 等体积 01 5% CMC-Na,连续 12 d。于实验
前 iv 10% 高分子右旋糖酐 ( 01 5 mL/ 100 g ) [ 6] , 15
m in 后, 10% 乌来糖麻醉, 腹主动脉取血, 取 1 mL
全血 EDTA 抗凝,测定红细胞压积 ( HCT ) , 取约 5
mL 血液以 4 000 r/ min 离心 10 min,取血浆, 测全
血及血浆黏度。结果见表 4。结果表明, 模型组的
全血高、中、低切黏度, 血浆黏度及红细胞压积与对
照组比较有显著性差异 ( P< 01 01、01 05) ,表明模型
成立。阳性对照组, 阿魏胶囊高、中、低剂量组的全
血黏度和红细胞压积与模型组比较差异显著 ( P<
01 05、01 01)。
表 4 阿魏胶囊对血瘀模型大鼠血液流变学的影响 ( x? s)
Table 4 Effect of Awei Capsula on hemorheology in blood stasis model of rats ( x? s)
组 别 剂量/
( g # kg- 1)
动物/
只
全血黏度/ ( mPa# s)
高切 中切 低切
血浆黏度/
( m Pa # s)
H CT /
%
对照 - 9 7182 ? 11 69 91 76 ? 11 47 111 40 ? 11 81 31 04 ? 01 16 361 08 ? 71 20
模型 - 8 15139 ? 21 93# # 161 28 ? 21 53# # 181 66 ? 21 14# # 31 45 ? 01 31# 471 72 ? 61 99# #
地奥心血康 01 06 8 10122 ? 21 11* * 111 86 ? 21 35* * 141 22 ? 21 94* * 31 42 ? 01 34 351 02 ? 61 18* *
阿魏胶囊 4 9 11172 ? 21 32* * 121 77 ? 11 72* * 141 47 ? 11 66* * 31 50 ? 01 45 401 97 ? 71 14* *
8 8 11157 ? 21 78* * 121 88 ? 21 69* * 141 75 ? 31 19* * 31 67 ? 01 35 371 90 ? 41 88* *
16 8 12148 ? 11 52* 131 58 ? 11 21* 161 81 ? 21 32 31 44 ? 01 30 391 71 ? 51 39*
与对照组比较: # P< 01 05 # # P< 01 05; 与模型组比较: * P < 01 05 * * P < 0101
# P< 01 05 # # P < 01 01 vs cont rol group; * P < 01 05 * * P < 01 01 v s model group
3 讨论
阿魏胶囊对高脂血症大鼠的影响实验结果表
明,阿魏胶囊能够降低高脂血症大鼠模型血清 TC、
TG、LDL- C 的水平, 并能够升高血清 HDL-C/ TC
值,说明其具有调节血脂的作用。
阿魏胶囊对血瘀证动物模型的研究表明, 注射
Adr 前镜下观察,各组小鼠大部分微血管血流处于
2级线粒流状态, 即血流较快、呈条索状,稍有颗粒
感;少数血管处于 3级粒线流状态, 即血流较慢, 虽
连续成线,但有明显颗粒感或处于 4级粒流状态, 即
血流慢、轴流缘流混杂, 如泥沙样,个别血管血流处
于 5级或 6级状态,即血流呈泥沙样,连续缓慢流动
或血流呈泥沙样, 虽向前流、但前后摆动。注射 Adr
后 8 min, 模型组和阿魏胶囊低剂量组处于 2级线
粒流状态,血管明显减少, 血流速度明显降低,粒缓
流、粒摆流明显增多,少数血管血流停滞, 部分血管
不清晰,看不到血管和血流; 阳性药组和阿魏胶囊
中、高剂量组处于 2 级线粒流状态, 血管有一定减
少,血流速度有所降低,粒缓流、粒摆流增多不明显,
血流停滞现象少见,少数血管不清晰,看不到血管和
血流; 因此, 从微血管血流流态看, 注射 Adr 前后,
模型组比阳性药组和阿魏胶囊中、高剂量组血流流
#273#中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
态改变明显,血流速度降低更明显。
阿魏胶囊具有对抗 Adr 收缩小鼠血管的作用,
明显降低 A、V 血管收缩率和毛细血管网交叉点减
少率,并改善小鼠耳廓微血流流态,表明其具有抗微
循环障碍的作用;对高分子右旋糖酐所导致的大鼠
血瘀证模型,阿魏胶囊能够降低全血黏度及红细胞
压积率,表明其具有调节血液流变性的作用。
综上所述, 阿魏胶囊具有治疗高脂血症、改善微
循环和血液流变学的作用。
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灯盏花素不同途径给药对大鼠实验性脑缺血防治作用的比较研究
石森林1 , 张韩清2 ,储利胜1 ,吴瑾瑾3 ,沈 伟1 ,葛卫红1 ,李昌煜1*
( 11 浙江中医药大学药学院, 浙江 杭州 310053; 21 金华市中心医院, 浙江 金华 321000;
31 杭州市第四医院,浙江 杭州 310004)
摘 要:目的 比较灯盏花素鼻腔给药、口服给药与静脉给药对大鼠实验性脑缺血的防治作用。方法 采用 Lon-
ga 线栓法制备 SD 大鼠右侧局部脑缺血模型, 脑缺血 1 h,再灌注 24 h, 随机分为假手术组,模型组, 灯盏花素鼻腔
给药高、低剂量组, 灯盏花素口服给药与静脉给药组,每组 6 只,分别给予相应药物,观察各组对脑缺血大鼠神经功
能、脑梗死体积的影响。结果 脑缺血 1 h, 再灌注 24 h 时模型组大鼠神经功能缺损严重,而经鼻腔多次给药后神
经功能得到有效的保护;模型组脑梗死体积平均为 211 82% ,鼻腔给药组的脑梗死体积为 91 37% 和 121 14% ,口服
组给药组、静脉给药组为 161 76% 与 141 01% , 4 个给药组与模型组比较均有显著性差异; 鼻腔给药组明显优于口
服给药组、静脉给药组, 均有统计学意义;鼻腔给药高剂量优于低剂量, 但无统计学意义。结论 灯盏花素鼻腔给
药对大鼠实验性脑缺血的防治作用优于口服给药与静脉给药。
关键词:灯盏花素; 脑缺血; 鼻腔给药
中图分类号: R2851 5 文献标识码: A 文章编号: 0253-2670( 2009) 02-0274-02
灯盏花, 又名灯盏细辛, 系菊科植物短葶飞蓬
Er igeron br ev iscapus ( Vant . ) Hand.-M azz. 的干
燥全草。性寒、味苦、微辛, 具有散寒解表、祛风除
湿、活络止痛之功效。临床主要用于治疗脑血栓形
成、脑栓塞等脑血管意外所致完全性及不完全性瘫
痪。灯盏花的主要有效成分灯盏花素, 具有改善脑
微循环、增加脑血流量、降低血管阻力、抗缺血、抗缺
氧、抗血小板聚集、抑制血管内凝血、促进纤溶活性
等功能。灯盏花素在治疗脑梗死方面有确切疗效,
但是目前临床上主要采用口服和注射途径给药, 口
服生物利用度低,注射剂使用又受到一定限制,不适
于长期给药,其安全性也是问题,因此为了满足预防
和治疗脑血管疾病长期用药的需要,有必要进行其
他给药途径与剂型的研究。前期灯盏花素鼻腔给药
体内研究发现,灯盏花素经鼻给药后,虽绝对生物利
用度并不是很高, 但部分脑组织中药物浓度明显高
于静脉给药, 具有脑内靶向分布特征。提示灯盏花
素经鼻给药对脑血管病等脑部疾病的治疗具有一定
的潜在的治疗优势。本实验通过比较灯盏花素不同
给药途径对急性脑缺血模型大鼠神经功能和脑梗死
体积的影响,从主要药效学角度研究其经鼻给药对
脑缺血的防治作用。
1 材料
11 1 药物: 灯盏花素 (质量分数 95% ) , 购于云南
玉溪万方天然药物有限公司; 红四氮唑 ( T TC) , 中
国华东 师范 大学 化 工厂 ( 分析 纯 ) , 批 号:
20021115; 01 5% T TC,将红四氮唑溶于人工脑脊液
中即得,临用时配制。
#274# 中草药 Chinese Traditional and Herbal Drugs 第 40 卷第 2 期 2009 年 2 月
* 收稿日期: 2008- 09-19基金项目:浙江省科技攻关项目 ( 2003C33017) ; 国家中医药管理局项目 ( 06- 07ZP24) ; 金华市科技局项目 ( 2004-2-311)作者简介:石森林( 1971 ) ) ,男,博士,副教授,硕士生导师,主要从事中药制剂体内过程,新剂型与中药新药开发等研究工作。
T el : ( 0571) 86613524 E-mail: pjstone@ 163. com