全 文 ：中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 739·
液、金银花对照药材溶液、供试品溶液各10肛L，按上
述色谱条件测定，以外标法计算样品中绿原酸的量。
HPLC色谱图见图1。金银花对照药材、金银忍冬及
黄花忍冬花与花蕾中绿原酸定量测定结果见表1。
0 1 2 3 4 5 6 1 2 3 4 5 6 l 2 3 4 5 6
t／rain
圈1绿原酸对照品(A)、金银花对照药材(B)、金银忍冬花(C)、金银忍花■(D)、黄花忍冬花(E)和黄花忍冬花蕾(F)HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramofchlorogenicacidreferencesubstance(A)，flowerbudo L．japonica(B)。flowerof工．
maakii(C)，flowerbudofL．maak豇(D)，flowero L．chrysantha(E)，andflowerbudofL．chrysantha(F)
衷1各样品中绿原酸HPLC测定结果 通过上述研究结果表明，金银忍冬、黄花忍冬花
Table1 Determinationofchl rogenlc 及花蕾均含有绿原酸，量与金银花对照药材接近，高
．
扯坩in8ampiesbyHPLC 于《中国药典》金银花的标准，具有较高的开发利用
样品 绿原酸／％
金银花对照药材
金银忍冬花
金银忍冬花蕾
黄花忍冬花
黄花忍冬花蕾
2．65
2．20
1．92
Z．16
1．91
3讨论
HPLC定量测定结果表明，金银忍冬、黄花忍冬
花及花蕾中绿原酸的量均高于1．5％，符合《中国药
典》金银花药材的质量标准。并且二者花的量高于
花蕾。
价值，可以作为绿原酸的植物资源进行开发利用。
《中国药典》虽然规定金银花来源只有一种植
物，但是在实际应用中却有很多种同属植物人药。但
是这些植物均为出产于华北、华中地区，主产于东北
的金银忍冬和黄花忍冬还没有入药的记载，本研究
为开发利用这两种丰富的植物资源提供了参考。
’
参考文献：
[1]中国药典Es]．一部．2005．
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民出版社，1982．
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HPLC法测定不同产地板蓝根中表告依春
安益强1’2，贾晓斌h”，陈彦1，孙娥1，金晓勇1
(1．江苏省中医药研究院中药新型给药系统应用技术重点实验室，江苏南京 210028}
2．江苏大学药学院，江苏镇江212013)
摘 要：目的 建立板蓝根中抗病毒有效成分表告依春的HPLC测定方法，测定不同产地板蓝根中表告依春。方法
采用反相高效液相色谱法，色谱柱为ZORBAXSB—C18(150mrn×4．6mm，5弘m)；流动相为乙腈一(4．0mL磷酸+
0．3mL三乙胺+500mL水)8．5：91．5}体积流量为0．7mL／min}检测波长为245nm，柱温为30℃。结果测得6
批板蓝根中表告依春的量为0．66～4．2mg／g，其中以河北安国产板蓝根药材中含表告依春的量最高，安徽阜阳和
黑龙江大庆产的次之。其他几个产地的量相对较低I表告依春在0．0204～o．306pg与峰面积线性关系良好(r----
收稿日期：2008—04—04
基金项目：江苏省中医药领军人才资助项目(2006)I苏州市科技计划(SSY0606)
作者简介：安益强(1982一)，男，河南省开封人。江苏大学2006级硕士研究生，研究方向为中药活性成分筛选及其适宜新剂型设计．
Tel：(025)85637809E-mail：anyhe2006@yahoo．corn．crl
*通讯作者贾晓斌Tel：(025)85637809E—mail：jxiaobin2005@hotmail．com
万方数据
·1740· 中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第1I期2008年11月
0．9998)，平均加样回收率为98．99％，RSD为i．31％。结论该方法准确、可靠，可用于板蓝根药材的测定，不同产
地板蓝根中表告依春的量差异较大。
关键词：板蓝根；表告依春；高效液相色谱法
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)II一1739—03
板蓝根为传统中药，历代本草均有记载，始载于
《神农本草经》，《中国药典》2005年版一部收载为十
字花科植物菘蓝IsatisindigoticaFort．的干燥根[1]，
主产于安徽、河北、甘肃、河南等省，具有清热解毒、
凉血利咽之功效，广泛用于治疗多种疾病，如流感、
腮腺炎、温病发热、发斑、风热感冒、咽喉肿烂、流行
性乙型脑炎、肝炎等疾病[2]。表告依春为板蓝根抗病
毒的代表性有效成分之一[3]，是反映板蓝根药材质
量的一个重要指标；虽有文献报道过板蓝根提取物
中表告依春在大鼠体内的药动学研究[‘]，但至今尚
未有测定板蓝根药材中表告依春的方法报道。本研
究采用HPLC法对板蓝根中的表告依春的量进行测
定，同时采用建立的方法测定不同产地板蓝根中表
告依春的量，以期为选出优质药材提供依据。
1仪器与试药
Agilent1100型高效液相色谱仪(包括四元泵、
自动进样器、DAD二极管阵列检测器)IKQ5200型
超声波清洗器(昆山市超声仪器有限公司)；BP-
211D分析电子天平(德国Sartorius公司，十万分之
--)。乙腈、磷酸、三乙胺(TEDIA公司，色谱纯)，甲
醇、乙醇(南京化学试剂有限公司，分析纯)，水为超
纯水；表告依春对照品(中国药品生物制品检定所，
批号：111753—200601)；河北安国、黑龙江大庆、甘肃
岷县产板蓝根药材均购于河北安国市百合中药饮片
有限公司(批号分别为071230、071225、080101)；安
徽阜阳产板蓝根为广州白云山和记黄埔中药有限公
司惠赠(批号071224)；河南禹州和安徽毫州产板蓝
根为当地采收(2007年新货)，以上药材均由南京中
医药大学生药学教研室吴德康教授鉴定为十字花科
植物菘蓝IsatisindigoticaFort．的干燥根。
2方法与结果
2．1色谱条件：ZORBAXS —C。。色谱柱(150mm×
4．6mm，5tam)，流动相为乙腈一(4．0mL磷酸+
0．3mL三乙胺+500mL水)8．5：91．5；体积流量
为0．7mL／min，检测波长为245rlm，柱温为30℃，
进样量为20弘L。高效液相色谱图见图1。
2．2对照品溶液的制备：称取表告依春对照品约
1．0mg，精密称定，置于10mL量瓶中，加流动相至
刻度，摇匀，制成质量浓度为0．102mg／mL的对照
品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取板蓝根药材粉末(过40
O 2 4 6 8 10 12
t／nAn
·一表告依晷
--epigoitrin
圈1表告依春对照品(A)和板蓝根药材(B)的HPLC田
Fig．1HPLCChromatogramsfepigoitrinreference
substahoe(A)andRadixIs tidis(B)
目筛)约0．20g，精密称定，置50mL具塞锥形瓶中，
加水20mL，称质量，超声提取(功率250W，频率20
kHz)60rain，取出，放冷，再称质量，用水补足损失
质量，滤过，弃去初滤液，取续滤液2mL，水浴蒸干，
残渣加流动相适量溶解，并定容于10mL量瓶中，摇
匀，0．45tam微孔滤膜滤过，取续滤液即得供试品
溶液。
2．4线性关系考察：精密量取质量浓度为0．102
mg／mL的对照品溶液0．1、0．3、0．5、0．8、1．0、1．3、
1．5mL，分别置于10mL量瓶中，加流动相稀释至
刻度，摇匀，得到质量浓度分别为1．02、3．06、5．10、
8．16、10．2、13．3、15．3tag／mL的对照品溶液，分别
精密吸取上述对照品溶液20pL，按“2．1”项下色谱
条件进行测定，以峰面积(y)和对照品质量(X)进行
线性回归，回归方程为Y=171．12X+42．405，r=
0．9998，表告依春在0．0204～o．306tag与峰面积
呈良好的线性关系。
2．5精密度试验：精密吸取质量浓度为8．16弘g／mL
的对照品溶液20弘L，连续进样6次，测定，峰面积的
RSD为0．57％，表明精密度良好。
2．6重现性试验：称取同一产地板蓝根药材粉末
(过40目筛)约0．2g，平行6份，精密称定，制备供试
万方数据
中草焉ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第11期2008年11月· 741·
品溶液，精密吸取20pL测定并计算表告依春的量，
RSD为1．42％，表明本法重现性较好。
2．7稳定性试验：精密量取同一供试品溶液20弘L，
分别在0、2、4、8、16、24h进样，测定，峰面积的RSD
为1．01％。表明供试品在24h内稳定。
2．8 回收率试验：取已测定的板蓝根药材粉末约
0．1g(含表告依春约424pg)，精密称定9份，分别加
入0．3509、0．4386、0．5263mg表告依春对照品，
制备供试品溶液，测定，计算得平均回收率为
98．99％，RSD为1．31％。
2．9 样品测定：称取不同产地的板蓝根药材约
0．2g，精密称定，制成供试品溶液，按“2．I”项下色
谱条件进行测定，并计算各样品中表告依春的量，结
果见表1。
寰l不同产地板蓝根中的衷告依春(n----3)
TnUel EpigoitrininRadixIsatidisfromdifferent
habitats(糟=3)
药材产地／表(ra告g．依g-春t)Rs。／％药材产地，篙篡RSD／％
安徽毫州0．98 1．97河北安国4．2 1．42
河南禹州0．66 0．54甘肃氓县0．68 2．04
安徽阜阳 2．4 2．49黑龙江大庆 1．9z 2．16
3讨论
3。1板蓝根的产地比较广，文献记载主要分布河
北、安徽、江苏、河南等省，其他各省也有少量分布。
对于板蓝根的道地产区，仅有文献记载河北为道地
产区，丽具体地域并不明确[5]。但近年来，由于受市
场经济的影响，板蓝根的产区发生了很大变化，甘
肃、黑龙江为新型的板蓝根产区，产量较大，而传统
的大产区，如江苏近年来已基本不种植，河南的种植
面积也大大减少，故对新产区和传统产区所产板蓝
根的质量差异研究显得尤为重要。本实验结果表明，
几大主要产地的板蓝根药材中表告依春的量差异较
大，其中以河北安国产的板蓝根量最高，安徽阜阳和
黑龙江大庆的次之，其他几个产地的量相对较低。
3．2 比较了甲醇一水、甲醇一含酸水、乙腈一含酸水流
动相系统的洗脱情况，结果表明乙腈一含酸水流动相
系统明显优于甲醇一水和甲醇一含酸水系统；因甲醇一
水系统使表告依春和其他成分较难分开，甲醇一含酸
水系统也不能实现较好的分离。故选择乙腈一含酸水
流动相系统。供试品如果直接以甲醇溶解样品进样，
则使表告依春对应的峰产生肩峰，可能是在此条件
下，表告依春存在分子型和离子型两种状态引起，故
最后选择酸性流动相稀释样品，以使表告依春以离
子状态存在；不同的酸性条件下分离有显著差异，通
过比较不同的加酸量，最后确定500mL水中加入4
mL磷酸条件较好；三乙胺为峰形改良剂，同时也起
到了调节酸碱度的作用。
3．3在样品提取过程中，比较了6种不同提取溶媒
(甲醇、无水乙醇、70％乙醇、50％乙醇、30％乙醇、
水)，结果表明水提取效率远远高于其他5种溶媒；
以水为提取溶媒，比较了3种不同的提取方法，冷浸
法、热回流提取法、超声提取法，结果后者提取率明
显高于前两种提取方法；采用超声提取法，分别考察
了加入10、20、30、40、50mL水的提取效率，结果表
明20、30、40、50mL提取率无明显差别，故选择20
mL水进行提取；采用超声提取法，加入20mL水，
又分别考察了提取20、30、40、50、60、70rain的提取
效率，结果表明提取60、70min提取率无明显差别，
故提取时间选择60min。
参考文献：
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】989． ·
紫外分光光度法测定前胡药材中总香豆素
宣志红
(浙江省诸暨市中医院，浙江诸暨311800)
前胡为常用中药材，《中国药典12005年版一部
前胡为伞形科植物白花前胡Peucedanumpraerup—
torumDumn．的干燥根及根茎，有散风清热、降气化
痰的功效，用于风热咳嗽痰多，痰热喘满，咯痰黄
收稿日期：2008—03—15
作者简介：宣志红(1970一)．男，浙江诸暨人。主管中药师，研究方向为天然药物的研究。Telz13819596883E—mail：xuanhanfei@163．corn
万方数据
HPLC法测定不同产地板蓝根中表告依春
作者： 安益强， 贾晓斌， 陈彦， 孙娥， 金晓勇
作者单位： 安益强(江苏省中医药研究院,中药新型给药系统应用技术重点实验室,江苏,南京,210028;江
苏大学药学院,江苏,镇江,212013)， 贾晓斌,陈彦,孙娥,金晓勇(江苏省中医药研究院,中药
新型给药系统应用技术重点实验室,江苏,南京,210028)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(11)
被引用次数： 4次

参考文献(5条)
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1. 安益强.贾晓斌.袁海建.孙娥.许珍珍.AN Yi-qiang.JIA Xiao-bin.YUAN Hai-jian.SUN E.XU Zhen-zhen HPLC测
定板蓝根药材及其制剂中表告依春的含量[期刊论文]-中国中药杂志2008,33(18)
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2.索银科.王永平.刘宝辉 HPLC法测定复方氨酚葡锌片中(R,S)-告依春的含量[期刊论文]-中国药事 2011(5)
3.王瑞.杨海英.杨琪伟.黄山君.王峥涛 板蓝根的质量标准研究[期刊论文]-中草药 2010(3)
4.古丽斯坦·阿吾提.何承辉.马建红 多指标正交试验优选板蓝根有效成分的提取工艺[期刊论文]-新疆中医药
2010(6)


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