全 文 ：白对照组, 可见局灶性心肌间质间隙扩大, 呈水肿
状,水肿灶面积较大,心肌间质水肿主要位于心室壁
的内、中层,外层少见, 间质水肿与正常心肌分界清
楚,在间质水肿灶内可见较多心肌纤维胞浆嗜伊红
浓染,胞核浓缩,个别肌纤维出现溶解,破坏,典型波
浪状排列肌纤维较少见。阳性药对照组,可见心肌间
质水肿灶,但其面积较空白对照组明显缩小,未见到
有心肌间质出血现象, 心肌间质水肿多呈小灶状,散
在分布于心室壁的内层和中层, 心室壁外层较少见,
心肌间质水肿灶与其周边的正常心肌分界明显,心
肌细胞胞核浓缩, 但未见肌纤维溶解破坏。舒心贴膏
小剂量组,心室壁内可见数个较大心肌间质水肿灶,
其面积较阳性药对照组较小, 与周边正常心肌纤维
分界清楚,主要位于心室壁的内层和中层, 未见有心
肌间质出血现象, 心肌间质水肿灶多呈灶状,但未见
明显心肌纤维嗜伊红浓染, 也未见肌纤维溶解破坏。
舒心贴膏大剂量组,心肌内可见数个间质水肿灶,其
面积比阳性药对照组及舒心贴膏小剂量组的面积
小,间质水肿灶内未见明显心肌纤维嗜伊红浓染,也
未见肌纤维溶解破坏, 表明舒心贴膏对心肌缺血有
明显的保护作用。
3　讨论
　　2 -ST 与 N-ST 两项心外膜电图是反映心肌缺
血损伤程度和范围的可靠指标, 缩小心外膜电图电
位是评价抗心肌缺血药物的常用手段。因为心肌缺
血后在细胞生化指标明显改变之前,心肌电生理就
有相应的改变,且此改变贯穿整个缺血细胞的全过
程。本研究采用结扎冠脉所致急性心肌梗死的方法,
观察整体动物给予舒心贴膏对麻醉犬急性心肌梗死
心外膜电图的影响,表明舒心贴膏可使心肌梗死犬
边缘区和中心区心外膜电位明显降低, 并且与给药
剂量成正比,其机制可能与舒心贴膏通过扩张冠状
动脉、降低冠脉阻力、增加心肌血流量、减少心肌耗
氧量有关。舒心贴膏对缺血损伤心肌超微结构具有
保护作用,缩小心肌梗死面积, 改善血清中 AST、
CPK、LDH 活性[ 5]。增加缺血心肌的血液供应,改善
缺血造成的心肌细胞能量代谢障碍, 从而起到对心
肌细胞的保护作用。急性缺血心肌从 4～12 h 起出
现凝固性坏死、核固缩和核溶解、胞浆萎缩、边缘坏
死、收缩带形成及胞核和胞浆条纹消失,且细胞间质
明显的中性粒细胞浸润。本实验病理形态学观察到
试药组心肌间质水肿比空白对照组明显缩小, 间质
水种程度减轻, 心肌纤维呈胞浆嗜伊红浓染消失, 证
明舒心贴膏对犬急性心肌梗死缺血性病变有明显减
轻作用。舒心贴膏通过穴位贴敷, 直接透皮吸收, 消
除首关效应,达到治疗目的。
Refer ences:
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penetrat ion enhancer [ J] . Chin J Exp Trad it Med F or m (中
国实验方剂学杂志) , 2002, 8( 2) : 61-62.
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[ 3]　Chen Q. Methodology in P harmacolog ical Study on Chinese
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白英水提物抗肿瘤作用的初步研究
孙立新, 任　靖,王敏伟,毕开顺X
(沈阳药科大学 药学院,辽宁 沈阳　110015)
　　茄科植物白英 Solanum lyratum Thunb. , 又名
白毛藤, 多产于江苏、浙江、江西,性味苦、辛、微寒,
归肝、胆经。常与他药伍用治疗肺癌、胃癌、肝癌等多
种癌症,此外还用于治疗疟疾、黄疸、水肿等。日本大
阪中医药研究所对 800 种中药进行抗癌药物筛选,
发现只有白英对癌细胞抑制率为 100%, 且对正常
细胞无任何影响。施文荣等[ 1]研究表明白英水提液
对 HL-60细胞既表现为短时间作用后的细胞杀伤,
·98· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 37 卷第 1 期 2006年 1月
X 收稿日期: 2005-05-26基金项目:沈阳市科技局攻关项目 (1032041-3-09)
作者简介:孙立新(1967—) ,女, 满族,辽宁新宾人,副教授, 硕士生导师,在读博士, 研究方向为抗肿瘤中药活性成分研究。
Tel : ( 024) 23986365　Fax: (024) 23915428　E-mail: slx@163. com
也表现为药物持续作用后的增殖抑制。笔者研究了
白英水提物及含药血清对多种肿瘤细胞株的细胞毒
作用,并以肉瘤 S180及肝癌 H22荷瘤小鼠为模型进行
了体内抗肿瘤实验,初步考察其抗肿瘤作用。
1　材料
1. 1　试药、试剂与仪器:白英饮片购于上海徐汇中
药饮片厂,由沈阳药科大学孙启时教授鉴定。MTT
(Amersco) , RPMI-1640 培养基 (HyClone, AMC-
15824) ,胎牛血清 (北京元亨圣马生物技术研究所,
020902) , 碘伏 (山东立尔康消毒科技有限公司,
040130) , 注射用环磷酰胺 (CTX, 江苏恒瑞医药股
份有限公司, 批号 0020266-0020270)。酶标仪
( TECAN SPECTRA) , 倒置式生物显微镜 ( Leica
DMIRB) , 二氧化碳培养箱 ( NU-47500) , CJ—1F
型医用超净台 (苏州市金燕净化设备有限公司) ,
LD4—2A 型低速离心机 (北京医用离心机厂)。
1. 2　细胞株:人宫颈癌细胞株 HeLa、人黑色素瘤
细胞株 A375、人乳腺癌细胞株 MCF7、小鼠纤维肉
瘤细胞株 L929 由本实验室冻存。
1. 3　瘤株:小鼠肉瘤 S180、小鼠肝癌 H 22, 由沈阳药
科大学 GLP 中心吴英良教授惠赠。
1. 4　动物:昆明种小鼠, 雄性,体重 18～22 g, 购自
中国医科大学第二临床医院实验动物中心, 许可证
号: SCXK (辽) 2003-0013; SD 大鼠, 雌雄各半,
350～400 g,由沈阳药科大学动物室提供。
2　方法
2. 1　药品配制
2. 1. 1　白英水提物制备:称取白英全草干品适量,
用蒸馏水适量浸泡 30 min 后, 回流提取 3次,每次
1 h,自然冷却, 滤过,去除药渣, 旋转蒸发挥去溶剂
得浸膏 (浸膏含甾体总苷 21. 84% ) ,备用。
2. 1. 2　细胞毒实验供试液制备:取白英水提物适
量, 加 PBS 溶解至 30 g/ L, 用培养液将其稀释至
0. 06、0. 30、1. 50、7. 50 g/ L,备用。
2. 1. 3　大鼠含药血清的制备:将 20 只 SD 大鼠随
机分为 5组, 每组 4只,雌、雄各半,分别为白英水提
物高、中、低 ( 48. 6、16. 2、5. 4 g/ kg) 组及阳性对照
(CTX, 54 mg/ kg) 组和空白对照组。各组均 ig 给
予相应剂量药物 (空白对照组给无菌生理盐水) ,连
续 3 d,每天 2 次, 于第 4天最后 1次 ig 前禁食 12
h, ig 1 h 后眼眶静脉丛采血,分离血清,经 56 ℃ 灭
活 30 min 后, 用 0. 22 Lm 的微孔滤膜滤过除菌,
置 - 70 ℃保存备用。
2. 2　细胞培养: HeLa、A375、MCF7、L929 细胞用
含 10% 灭活新生小牛血清的 RPMI-1640 培养基
在 37 ℃、5% CO2条件下培养, 取对数生长期细胞
用于实验。
2. 3　体外抗肿瘤实验:采用 MTT 法, HeLa、MCF-
7、L929细胞用培养液稀释至 1×105/ mL, A375 细
胞用培养液稀释至 5×104 / mL, 分别接种于 96 孔
培养板中,每孔 100 LL, 8～12 h 后,除去培养液, 每
孔加不同质量浓度的白英水提物 (或含药血清) 及
空白培养液 100 LL,每组均设 3 个复孔, 37 ℃、5%
CO2、饱和湿度条件下培养 48 h 后, 除去培养液及
药液, 并用 PBS 洗板后, 每孔加入 5 g/ L MTT 10
LL 和培养液 100 LL,继续培养 4 h 后,加二甲基亚
砜 150 LL 终止反应,用酶标仪在波长 492 nm 处测
定吸光度 (A) 值,计算抑制率。
抑制率= (1- A药物 /A对照)×100%
2. 4　体内抗肿瘤实验:选择腹腔接种 7～9 d、生长
良好的荷 S180(或 H22) 细胞株的小鼠, 断颈处死, 无
菌抽取腹水,再用无菌生理盐水稀释成 1×107 / mL
瘤细胞悬液。在无菌条件下,于健康小鼠右前肢腋部
皮下接种瘤液, 每只 0. 2 mL。接种次日,按体重随机
分组给药,每日 1次, 连续 10 d。阴性对照组 ig给予
等体积无菌生理盐水;阳性对照组 ip CTX 0. 02 g/
( kg·d) ;白英水提物高、中、低剂量组分别 ig 给予
相当于原药材 62. 4、31. 2、15. 6 g/ ( kg·d) 的药物。
3　结果
3. 1　白英水提物对不同肿瘤细胞的抑制作用:结果
见图 1。白英水提物对 A375、HeLa 细胞作用较敏
感, IC50分别为 0. 95 和 0. 99 g/ L, 对 L929 细胞作
用敏感性次之, IC50为 2. 0 g/ L, 对 MCF7 细胞抑制
作用较差, IC50为 3. 8 g/ L。且对各细胞株的抑制作
用呈剂量-效应关系。
图 1　白英水提物对不同肿瘤细胞的抑制作用
Fig. 1　I nhibition of aqueous extr act f r om S. lyr atum
on var ious tumor cells
3. 2　含药血清对不同肿瘤细胞的抑制作用, 结果见
·99·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 37 卷第 1 期 2006年 1月
图 2。白英水提物含药血清对肿瘤细胞具有一定的
的抑制作用, 且呈剂量-效应关系。白英水提物高剂
量组 20% 含药血清对 A375、L929、HeLa、MCF7
细胞的抑制率分别达到 28. 5%、16. 1%、28. 0%、
3. 0%, 对各细胞的敏感性与白英水提物直接作用于
各细胞时的结果相似, 但其抑制作用明显低于白英
水提物。
3. 3　白英水提物对 S180和 H22荷瘤小鼠的抑制作
用:结果见表 1和 2。白英水提物中、高剂量组对小
鼠 S180肉瘤和小鼠肝癌 H22的抑制作用与对照组相
图 2　含药血清对不同肿瘤细胞的抑制作用
F ig. 2　Inhibition of drug-conta ining serum
on var ious tumor cells
表 1　白英水提物对 S180小鼠肿瘤生长的抑制作用 (x±s)
Table 1　Inhibition of aqueous extra ct f r om S. lyr atum on tumor growth of S180 mice (x±s)
组　别 剂量/ ( g·kg- 1) 动物数/只开始 结束
体重/ g
开始 结束 瘤块质量/ g 抑瘤率/ %
对照 - 10 10 20. 33±1. 14 25. 52±2. 40 1. 71±0. 49 -
CTX 0. 02 10 10 20. 22±1. 07 21. 32±2. 31 0. 18±0. 12* * 89. 16
白英水提物 15. 6 10 10 19. 08±0. 84 23. 97±3. 39 1. 37±0. 22* 19. 77
31. 2 10 10 20. 41±0. 89 25. 63±2. 17 1. 17±0. 37* * 31. 56
62. 4 10 10 20. 39±1. 07 25. 90±1. 80 1. 01±0. 28* * 41. 00
　　与对照组比较: * P< 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P< 0. 01 vs cont rol group
表 2　白英水提物对 H22小鼠肿瘤生长的抑制作用 ( x±s)
Table 2　Inhibition of aqueous extr act fr om S. lyra tum on tumor growth of H22 mice (x±s)
组　别 剂量/ ( g·kg- 1) 动物数/只开始 结束
体重/ g
开始 结束 瘤块质量/ g 抑瘤率/ %
对照 - 12 10 19. 03±0. 61 21. 95±1. 68 1. 14±0. 41 -
CTX 0. 02 12 11 19. 21±0. 77 18. 89±5. 48 0. 51±0. 22* * 55. 30
白英水提物 15. 6 12 11 19. 34±1. 25 20. 09±1. 27 0. 89±0. 35* 22. 25
31. 2 12 12 20. 05±1. 74 20. 79±1. 88 0. 72±0. 19* * 36. 79
62. 4 12 11 20. 30±1. 62 21. 14±1. 60 0. 69±0. 23* * 39. 59
　　与对照组比较: * P< 0. 05　* * P < 0. 01
　　* P < 0. 05　* * P< 0. 01 vs cont rol group
比,具有非常显著的差异 (P < 0. 01) ,且各剂量组对
两种小鼠移植性肿瘤的抑制作用均呈现良好的剂
量-效应关系, 证明其具有明显的体内抗肿瘤作用。
4　讨论
　　用中药粗提物直接作用于肿瘤细胞, 中药的杂
质成分对肿瘤细胞的生长造成一定的影响, 由此得
出的结论并不十分可靠,而通过口服给药后,用含药
血清作用于肿瘤细胞, 更接近药物体内环境中产生
药理效应的真实过程。
体内、外抗肿瘤实验表明白英水提物具有明显
的抗肿瘤活性。但目前白英抗肿瘤的药效物质基础
还不十分明确, 且无质量控制方法。有研究表明白英
的化学成分主要为甾体生物碱和甾体皂苷等, 笔者
已初步确定了白英抗肿瘤作用的有效部位[ 2] , 以期
找到其发挥抗肿瘤作用的有效成分, 并对其进行质
量控制,为进一步开发利用提供依据。
Refer ences:
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[ J ] . J F uj ian Coll Tr adi t Chin Med ( 福建中医学院学报) ,
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保　护　环　境　　保　护　植　被
·100· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs　第 37 卷第 1 期 2006年 1月