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Effects of total flavones from Herba Epimedii on experimental myocardial ischemia and hemorheology of animals

淫羊藿总黄酮对动物实验性心肌缺血及血液流变学的影响



全 文 :中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月·1039·
细胞结合的程度及数量等因素有关。五。值实际上反
映了以上各种因素的综合作用,不能完全代表药物
在小肠内的吸收速率。在体法实验中不切断血管与
神经,且能避免胃内容物排出及消化管固有运动的
生理影响,因而能够真实地反映药物的吸收情况。离
体法使小肠完全离体,不受循环系统和消化系统的
影响,此法适用于研究药物的吸收机制,考察影响吸
收的因素及进行处方筛选。但由于实验中切断了小
肠的血管和神经,循环液的流速较大,故这种实验是
非生理性的,与实际的吸收有区别。笔者应用大鼠在
体肠吸收实验,可以给样本应用体内法不能承受的
剂量,容易通过控制或改变实验条件来观察受试药
物在肠中的整个消除过程和影响因素。
以小肠内剩余药量的对数(1nX)对取样时间
(£)做图,可得一条直线,从直线斜率可求得k。[6]。
本实验中,lnX对t进行线性回归,相关系数均≥
0.9,所以灯盏花素的大鼠肠吸收属于一级动力学过
程,不存在饱和现象,吸收机制为被动扩散。
药物浓度的变化对水在黏膜吸收的速率有一定
影响,因而需采用同浓度的药液平衡30min,使肠
道对水分的吸收达到稳定,此时药物吸收速率也趋
于稳定,而更符合Fick
7
S方程。大鼠在体吸收实验
应能代表药物在正常剂量下的吸收。成年人正常服
用灯盏花素的剂量为120mg/d,根据人与大鼠之间
的体表面积换算法,得到大鼠正常服用剂量为1.08
mg/100g[7]。本实验灯盏花素质量浓度确定为50~
150/19/mL,即40mL循环液含药物2~6mg,基本
可以代表药物在正常剂量下的吸收情况。
本实验结果表明灯盏花素在肠内志。较小,吸收
较慢(4h吸收率仅为20%左右)。原因可能是其水
溶性较小,且脂溶性亦较小,故不易透过生物膜所
致。若想制成理想的新型口服给药系统,还需通过制
剂手段提高其在胃肠道的吸收率。通过了解灯盏花
素在胃肠道的吸收转运情况,可以减少剂型设计的
盲目性,为剂型开发提供科学依据,是制剂处方前工
作的必要环节。由实验结果可知,灯盏花素在结肠吸
收量和吸收速率比小肠小得多,两者问有非常显著
性差异,但由于药物在结肠停留时间比在小肠停留
时间长得多,且结肠部位各种酶少,所以提示可通过
加入促进剂的方法使结肠吸收增加,对于促进剂能
否增加结肠吸收还有待进一步研究。
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淫羊藿总黄酮对动物实验性心肌缺血及血液流变学的影响
王秋娟1,潘志伟1,岳攀1,孔令义2
(1.中国药科大学生理学教研室,江苏南京210009;2.中国药科大学天然药物化学教研室,江苏南京210038)
摘 要:目的 观察淫羊藿总黄酮(TFHE)对动物实验性心肌缺血及血液流变学的影响。方法以垂体后叶素制
备大鼠急性心肌缺血模型和用高分子右旋糖酐制备大鼠急性血瘀模型,观察TFHE对急性心肌缺血模型大鼠心
电图J点及急性血瘀模型大鼠血液流变学等指标的影响;观察TFHE对小鼠凝血时间的影响。结果TFHE高、
中、低剂量(24、12、6mg/kg)组均能明显对抗急性心肌缺血大鼠心电图J点的偏移,能有效预防急性血瘀模型大
鼠的全血黏度(高、中、低切变率)、红细胞压积以及纤维蛋白原量的升高;TFHE高、低剂量(34、17mg/kg)能明
显延长小鼠凝血时间。绩论TFHE对缺血心肌有一定的保护作用,可能与其改善血液流变学、降低血液黏度、防
止血液凝固、改善冠脉循环有关。
箨霎品羿:望裴鲞9I撬3一),女,江苏苏州人,教授,博士生导师,长期从事心血管药理的研究,在该领域已发表论文80余篇,获新药证书作者简介 王秋娟(1943一),女,江 苏州人,教授,博士生导师,长期从事心血管药理的研究,在 余篇,获新药证书
8份及发明专利证书5份。Tel:(025)83271341E-mail:qjwangnji@sina.com.ca
万方数据
-1040· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
关键词:淫羊藿总黄酮;心肌缺血;血液流变学;垂体后叶素;高分子右旋糖酐
中图分类号:R286.2 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)07—1039—04
Effectsoftotalf avonesfrom日erbaimediionexperimentalmyocardialischemia
andhemorheologyofanimals
WANGQiu—juanl,PANZhi—weil,YUEPanl,KONGLing—yi2
(1.DepartmentofPhysiology,ChinaPharmaceuticalUn versity,Nanjing210009,China;2.Department
ofNaturalMedicinalChemistry,ChinaPharmaceuticalUniversity,Nanjing210038,China)
Abstract:ObjectiveToobserveth ffectsoftotalf avonesfromHerb口Epimedii(TFHE)onthe
experimentalmyocardialischemiaandhemorheologyofanimals.MethodsThemodelofacutemyocardial
ischemiaofr tswasestablishedwithpituitrinandthemodelofacutebloodstasiswasestablishedwith
high—moleculardext an.TheeffectsofTFHEonthe lectrocardiogramJ—pointof cutemyocardial
ischemiamodelandthehemorheologyofacutebloodstasismodelwereobserved.Besidesthese。theff cts
ofTFHEoncoaglutaionimeinmicewereobserved.ResultsA comparedwitht emodelgroups,high-,
middle一,andlow—dosagegroups(24,12,and6mg/kg)ofTFHEcouldobviouslyimprovethabnormal
electrocardiogramJ—pointofacutemyocardialischemiamodel,alsocouldeffectivelypr venttheascending
of.wholeb oodviscosity(high一,middle-,and10w-shearrate),packederythrocytevolume,and
fibrinogen.High—andlow—dosagegroups(34and17 mg/kg)ofTFHEcouldobviouslylengthenthe
coaglutaionimeinmice.ConclusionTheresultssuggestthatTFHEpossessesprotectiveeffectson
ischemicmyocardium,whichaybetterhemorheology,decreasethewholebloodviscosity,preventblood
fromcoagulatingndmprovethecirculatationofcoronaryartery.
Keywords:totalflavonesfromHerbaEpimedii(TFHE);myocardialischemia;hemorheology;
pituitrin;highmoleculardextran
淫羊藿HerbaEpimedii为小檗科淫羊藿属植
物。淫羊藿总黄酮(totalflavonesofHerba
Epimedii,TFHE)是从淫羊藿茎叶中提取的有效
成分。研究表明,TFHE具有增强免疫、延缓衰老、
抗肿瘤、抗骨质疏松、增加脑血流量等功效r1’2]。本实
验室前期研究还发现,TFHE能明显改善麻醉犬的
血流动力学[3]。基于此,本研究观察TFHE对动物
实验性心肌缺血及血液流变学的影响,为其开发利
用提供新的实验依据。
1材料与方法
1.1 药品与试剂:TFHE质量分数85.4%以上,
由中国药科大学天然药物化学教研室提供,用溶媒
溶解后配制成所需浓度。葛根素注射液,0.05g/mL,
北京协和药厂,批号020803;溶媒,由中国药科大学
中药制剂教研室提供;垂体后叶素注射液,天津市生
物化学制药厂,10U/支,批号20000501;血浆纤维
蛋白原测定试剂盒,宁波慈诚生化试剂厂提供,批号
030026;高分子右旋糖酐(Dextran—T500),相对分
子质量482000,SwedenPharmacia提供,10g/瓶
批号17032002;其他试剂均为市售分析纯。
1.2实验动物:SD大鼠,体重180~220g,雌雄各
半;昆明种小鼠,体重18~25g,雌雄各半;均由江
宁青龙山动物繁殖场提供,合格证号:SCXK(苏)
2002~0018。
1.3 主要仪器:ECG--6511型心电图仪,日本
NIHONKOHDEN公司;LBY—N6A+,旋转式锥
板黏度仪,北京普利生公司;TU一1800紫外可见分
光光度计,北京普析通用有限责任公司。
1.4方法
1.4.1 对大鼠急性心肌缺血模型心电图的影
响[4~6]:SD大鼠56只,随机分为7组:正常组(给
予等量生理盐水);模型组(给予等量生理盐水);溶
媒组(给予等量溶媒);阳性对照组(给予葛根素注
射液24mg/kg);TFHE高、中、低剂量(24、12、6
mg/kg)组。以上各组均尾iv给药,体积皆为
10mL/kg。给药5rain后,用3%戊巴比妥钠
(1mL/kg)ip麻醉后,仰卧位固定,接Ⅱ导联心电
图仪,记录一段正常心电图,异常者弃去不用。待稳
定后,除正常组外,其他各组均尾iv垂体后叶素
(O.75U/kg),记录注射后5S、30S、1min、2min、
5rain、10min、20min、30min时的心电图。以8个
时间点的J点(QRS波群的终点与T波交接处)偏
移总幅度(∑△J/mV)以及每组出现J点异常偏移
的动物数(以J点偏离基线≥0.1mV定为J点移
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月·1041·
位)作为评价心肌缺血程度和药物疗效的指标。
1.4.2对大鼠急性血瘀模型血液流变学的影响[7]:
SD大鼠56只,分组及给药剂量同1.4.1项。各组
均尾iv给药5d,每日1次,给药体积皆为
10mL/kg_除正常组外,各组均于第4天给药后立
即尾iv高分子右旋糖酐(500mg/kg),6h后重复
1次,第5天给药后再iv1次,15min后用10%乌
拉坦10mL/kgip麻醉。腹主动脉取血5mL,用肝
素抗凝;另取2mL血,用EDTA抗凝。吸取1mL
肝素抗凝血于旋转式血液黏度计上测定高、中、低切
变力下的全血黏度;取1mL肝素抗凝血,测定红细
胞压积。另外取2mLEDTA抗凝血,3600r/rnin
离心15min后,测定血浆中纤维蛋白原的量。检测
室温度控制在(20土1)℃。
1.4.3对小鼠凝血时间的影响[8]:昆明种小鼠50
只,雌雄各半,随机分为5组,每组10只。分别为正
常组(给予等量生理盐水),溶媒组(给予等量溶
媒),TFHE高、低剂量(34、17mg/kg)组,葛根素
注射液(34mg/kg)组。每组连续尾iv给药5d,各
组给药体积均为10mL/kg。第5天给药结束后,将
内径为1mm的玻璃毛细管插入小鼠内眦球后静脉
丛,自血液流入管内开始计时,血液注满后取出毛细
管平放于桌上,每隔30S折断两端毛细玻管约
0.5am,观察折断处有无血凝丝出现。计算从毛细
玻管采血到出现血凝丝的时间,即为凝血时间,毛细
管两端数据的平均值即为该鼠的凝血时间。实验室
温度控制在(15土1)℃。
1.5统计学处理:实验数据用z士S表示,采用单因
素方差分析进行组间显著性比较,两组间样本均数
比较采用t检验。
2结果
2.1对急性心肌缺血大鼠心电图J点的影响:由表
1可见,模型组和正常组比较,大鼠J点偏移的总幅
度明显升高(P型组比较,J点偏移的总幅度没有明显变化(P>
o.05);与正常组比较,J点偏移的总幅度明显升高
(P图J点的影响。和模型组相比,TFHE高、中、低剂量
组可使J点偏移的总幅度明显降低(P溶媒组相比,亦能使J点偏移的总幅度明显降低
(P大鼠心电图J点的变化。与模型组或溶媒组相比,葛
根素注射液同样可有效对抗急性心肌缺血大鼠心电
图J点的变化(P<0.01)。
2.2对急性血瘀模型大鼠血液流变学的影响:由表
2可见,与正常组相比,模型组的全血黏度(高、中、
低切变)、红细胞压积、纤维蛋白原的量均明显升高
(P大鼠血瘀模型。与模型组相比,溶媒组的全血黏度、
红细胞压积、纤维蛋白原的量无明显变化(P>
0.05);与正常组相比,溶媒组的全血黏度、红细胞压
积、纤维蛋白原的量均明显升高(P表1 TFHE对垂体后叶素所致大鼠急性心肌缺血心电图
J点的影响(;士s,厅一8)
Table1 EffectsofTFHEonJ-pointofECG
inratswithacutemyocardialischemia
inducedbypituitrinG±s,疗一8)
组别剂量/(mg·kg-1)ZAJ/mV J点移位动物数
与正常组比较:44P与溶媒组比较:△△_P4。P△△P与模型组比较:一P<0.01;
’。P表2 TFHE对大鼠急性血瘀模型血液流变学的影响(;土s,辟一8)
Table2 EffectsofTFHEonhemorheologyinacutebloodstasismodelofrats(x士s,H一8)
与正常组比较:44P。4P 万方数据
·1042· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第7期2007年7月
媒基本不干扰受试药物对血瘀模型大鼠血液流变学
的影响。与模型组相比,TFHE高、中、低剂量组均
可明显降低全血黏度(高、中、低切变)、红细胞压积
及纤维蛋白原的量(P<0.01、0.05);与溶媒组相
比,可明显降低全血黏度(高、中、低切变)、红细胞
压积及纤维蛋白原的量(P<0.01、0.05);表明
TFHE能明显改善血瘀模型大鼠的血液流变学。与
模型组或溶媒组相比,葛根素注射液同样能明显改
善血瘀模型大鼠血液流变学的各项指标(P0.05)。
2.3对小鼠凝血时问的影响:由表3可见,溶媒组
和正常组相比,两组凝血时间差异没有显著性意义
(P>0.05),表明溶媒基本不干扰受试药物对小鼠
凝血时间的影响。与正常组相比,TFHE高、低剂量
(34、17mg/kg)组均能明显延长小鼠凝血时间
(P能明显延长小鼠凝血时间(P具有明显的抗凝血作用。与模型组或溶媒组相比,
葛根素注射液同样具有明显的抗凝血作用
(P<0.01)。
表3TFHE对小鼠凝血时间的影响(;士s,辟一10)
Table3 EffectsofTFHEoncoagulationtime
inmice(;士s,n一10)
与正常组比较:44P44P3讨论
与溶媒组比较:△△PnaP给大鼠iv垂体后叶素后,可迅速使冠状动脉血
管收缩痉挛,血氧供应障碍,造成心肌缺血模型。心
肌缺血时伴有心电图的异常变化,如T波高耸、双
向、倒置,J点的偏移等,因此常将注射垂体后叶素
后J点偏移值、T波的变化等作为评价心肌缺血损
伤的指标。实验表明,TFHE高、中、低剂量组均可
有效对抗急性心肌缺血大鼠心电图J点的变化,从
而提示TFHE对改善大鼠急性心肌缺血具有一定
的功效。
此外,实验还通过iv高分子右旋糖酐建立大鼠
急性血瘀模型和观察TFHE对小鼠凝血时间的影
响。中医辨证中的血瘀证,在血液流变学上具有黏、
浓、凝、聚的特点,用全血黏度(高、中、低切变)、红
细胞压积、纤维蛋白原的量、凝血时间毒船标可有效
地反应出来。血液流变状态的异常变化与血栓的形
成有密切的关系,而血栓的形成是导致心肌缺血的
重要因素。实验发现,TFHE可明显降低急性血瘀
模型大鼠的全血黏度、红细胞压积、纤维蛋白原的量
以及延长小鼠的凝血时间。结果提示TFHE能改善
血瘀模型大鼠的血液流变学,从而减少了血栓的形
成,降低外周阻力,改善缺血心肌微循环,维持组织
的正常代谢,使血液免于瘀滞,避免了心肌缺血的进
一步加重。
实验表明,TFHE具有一定的抗急性心肌缺血
的作用,其机制可能与改善血液流变学有关,其他机
制有待今后进一步深入研究。
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万方数据
淫羊藿总黄酮对动物实验性心肌缺血及血液流变学的影响
作者: 王秋娟, 潘志伟, 岳攀, 孔令义, WANG Qiu-juan, PAN Zhi-wei, YUE Pan, KONG
Ling-yi
作者单位: 王秋娟,潘志伟,岳攀,WANG Qiu-juan,PAN Zhi-wei,YUE Pan(中国药科大学生理学教研室,江
苏,南京,210009), 孔令义,KONG Ling-yi(中国药科大学,天然药物化学教研室,江苏,南京
,210038)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(7)
被引用次数: 8次

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