全 文 ：·1084· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
2．1 色谱条件：色谱柱：Diamonsi／C18(250mm×
4．6mm，5pm，流动相：甲醇-如磷酸(45：55：
0．2)，体积流量：1．0mL／min，检测波长280nm；理论
塔板数按黄芩苷计算应不低于3000，进样量10弘L。
2．2对照品溶液的制备：精密称取黄芩苷对照品适
量，加50％甲醇制成80弘g／mL溶液，即得。
2．3供试品溶液的制备：取木蝴蝶(通过三号筛)粉
末约0．1g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加
70％乙醇50mL，称定质量，置水浴上回流30rain，
放冷，用70％乙醇补足质量，滤过，用0．45nm微孔
滤膜滤过，即得。
2．4可行性试验：分别取供试品溶液与黄芩苷对照
品溶液各lo肛L，注入高效液相色谱仪中，在上述色
谱条件下测定，色谱图见图1。
O 5 10 15 20 25
t／min
图1黄芩苷对照品(A)和木蝴蝶样品(B)HPLC色谱图
Fig．1HPLCchromatogramsfbaicalin
and0．ind如um
2．5 线性关系考察：精密称取黄芩苷对照品适量，加
50％甲醇制成163．68、491．04、818．4、1145．76、1
436．2弘g／mL溶液。精密吸取E述溶液各10肛L、按顺序
进样，按上述色谱条件测定峰面积，以峰面积为纵坐标，黄
芩苷质量浓度为横坐标绘制标准曲线，得回归方程：Y一
26．155X+2．842，r一0．9993 结果表明黄芩苷在
0．16368～1．43625弘g与峰面积的线性关系良好。
2．6 精密度试验：精密吸取同一对照品溶液10
牡L，重复5次，黄芩苷峰面积RSD为2．70％(咒一
5)，精密度良好。
2．7稳定性试验：取本品制备供试品溶液，精密吸
取供试品溶液10pL，每5h进样一次，各测5次，黄
芩苷峰面积RSD为0．94％，可见供试品溶液中黄
芩苷在20h内稳定。‘、
2．8重现性试验：取山东产地的木蝴蝶(通过三号
筛)，平行制备5份供试品溶液，进样，5份样品中黄
芩苷质量分数的RSD为2．16％。
2．9回收率试验：采用加样回收法。精密称取已知
质量分数(6．27％)样品，各5份，分别精密加入一定
量的黄芩苷对照品溶液，按供试品溶液的制备方法
处理，在上述色谱条件下测定黄芩苷，计算回收率，
结果平均回收率为102．55％，RSD为0．78％。
2．10样品测定：取本品按上述方法制备供试品溶
液，分别精密吸取供试品溶液和黄芩苷对照品溶液
各10弘L，注入高效液相色谱仪中，按上述色谱条件
测定，按外标法计算供试品溶液中的黄芩苷，结果见
表1。
3讨论
3．1样品的制备：木蝴蝶中翼纤维较多不易打成粉
末，故在打粉之前剪掉种翼，粉末应通过三号筛。
3．2样品提取的选择：通过实验预试得知木蝴蝶含
成分比较复杂，高效液相测出峰较多，因此本实验采
用50％、70％不同浓度的乙醇考察，用不同时间30、
60rain超声和回流提取方法，进样分析，结果表明
采用70％乙醇回流30min：黄芩苷量最高。故选用
了该方法。
3．3 流动相的选择：本实验考察了甲醇一水一磷酸
(49：51：0．2)；(47：53：0．2)；(45：55：0．2)；结
果以(45：55：0．2)分离效果最佳。故予以采用。
通过实验结果表明本实验选用的方法，测定木
蝴蝶中黄芩苷，色谱分离度好，样品测定稳定，重线
性好，精密度高，可控制木蝴蝶药材的质量。
RP—HPLC法测定沙苑子中沙苑子苷
刘春宇1，孙雄华1，张经硕1，胡延维1，顾振纶2
(1．苏州大学医学院药学系，江苏苏州215007；2．苏州大学医学院药理教研室，江苏苏州215007)
沙苑子，又名潼蒺藜，为豆科植物扁茎黄芪As—
tragaluscomplanatusR．Br．的种子，是补益肝肾的
传统中药。主要含有黄酮类、三萜类、有机酸类、氨基
酸、多肽、蛋白质、甾醇、多糖及铁、锌、锰、铜等微量
收稿日期：2004—09—21
作者简介：刘春宇(1961一)，女，副教授，主要从事中药有效成分及药理作用研究。
Tel：(0512)65221518E—mail：chunyu@publicl．sz．js．cn
l
i．二iii¨．，ll一2 童
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月·1085·
元素[1~4]。药理研究表明[5]，沙苑子具有保肝、调血
脂、降压、抑制血小板聚集、改变血液流变学指标、抗
炎、增强非特异性和特异倥免疫功能等作用。实验结
果显示沙苑子具有保肝、抗肝纤维化作用，沙苑子苷
为主要有效成分之一[6]。但迄今对沙苑子有效单体
成分的测定研究未见报道。本实验采用RP—HPLC
法测定沙苑子中沙苑子苷，并比较了不同产地、不同
批号沙苑子中沙苑子苷的质量分数。
1仪器与材料
1．1材料：沙苑子，苏州雷允上药业集团公司提供，
产地为陕西渭南，由苏州市药品检验所吴银生主任
药师鉴定为豆科植物扁茎黄芪A．complanatusR．
Br．的种子；沙苑子苷自制(98．5％)，ZTC一5型黄酮
吸附树脂(天津正天澄清技术有限公司，南开大学研
制)；乙腈、甲醇为色谱级，水为双蒸水，其他试剂均
为分析纯。
1．2 仪器：HPLC岛津LC—VPl0A系列；电子分
析天平(梅特勒一托利多仪器有限公司)；旋转蒸发器
R501、R201型(上海申生科技有限公司)；DZF真空
干燥箱(上海医用恒温设备厂)。
2方法与结果
2．1检测波长的选择：称取沙苑子苷适量，甲醇溶
解，于200～800rim波长扫描吸收光谱，结果沙苑
子苷于266nm处有最大吸收峰。
2．2 色谱条件：色谱柱：VP—ODS(150miD．×4．6
mm，5pm)；柱温40℃；流动相：乙腈_1％HAC溶液
(18：82)；体积流量：1mL／min；检测波长：266nm。以
雹场臼三苷计，理论塔板数不小于6000，分离度大于1．5。
2．3线性关系考察：精密称取沙苑子苷对照品5．0
mg，50％乙醇溶解并定容于50mL量瓶中，制成0．1
mg／mL的对照品贮备液，吸取对照品贮备液分别稀
释成5、10、20、40、80}tg／mL，溶液分别进样20弘L，
按上述色谱条件测定。以峰面积积分值为纵坐标，质
量浓度为横坐标，进行线性回归，得回归方程：
Y一46044．25C一3523．67，r一0．9999，沙苑子苷
在5～80／-tg／mL与峰面积呈良好的线性关系，色谱
图见图1。
_ ∥·--J--------------·-—-·—__-------------------------．．一、---------一
O 5 10 15 20 25 0 5 10 15 20 25
t?min
圈1沙苑子苷(A)及样品(B)HPLC图
Fig．1HPLCehromatogramofeomplanatuside(A)
andsample(B)
2．4精密度考察：吸取供试品溶液20弘L，在上述
色谱条件下重复进样6次，计算峰面积的RSD为
1．07％。
2．5重现性考察：取同一样品，按照供试品溶液制
备方法，制备5份供试品溶液，各进样20肛L，测量
峰面积。结果RSD为1．69％。
2．6稳定性试验：取同批供试品溶液，在室温放置
1、2、4、8、24、48h，依法测定，峰面积RSD为1．28％
(咒一6)，结果表明供试品溶液在48h内稳定。
2．7 回收率试验：准确称取已知沙苑子苷质量分数
的样品2．0g，加入一定量的沙苑子苷对照品，按样
品测定项下的方法提取，测定，计算回收率，结果回
收率为95．52％，RSD为1．86％(押=5)。
2．8样品测定：取沙苑子细粉2．0g，精密称定质
量，加石油醚60mL回流1h，滤过，药渣挥干石油
醚，准确加入80％乙醇60mL，称质量，回流2h，冷
却后称质量，补充乙醇至原质量，滤过。准确量取续
滤液25mL，挥去乙醇，用15mL蒸馏水溶解，通过
40mLZTC一5型黄酮吸附树脂，150mL水洗脱后，
50％乙醇洗脱，收集50％乙醇洗脱液250mL，减压
蒸干，50％乙醇溶解，于50mL容量瓶定容，在上述
色谱条件下进样20pL，测定结果见表1。
表1沙苑子样品中沙苑子苷(弹=3)
Table1 complanatusideinsamplesQ一3)
样品 沙苑子苷／％
1陕西
2陕西
3陕西
4陕西
5陕西
6陕西
7陕西渭南市大荔县朝邑农场三团
8陕西渭南市大荔县朝邑农场九连
9陕西渭南市临渭区南师乡南师村
3讨论
3．1 流动相的选择：分别以不同配比的甲醇一1％
HAC(42：58、41．5：58．5、41：59)和乙腈一1％
HAC(23：77、20：80、19：81、18：82)为流动相，
观察分离效果，结果以乙腈一1％HAC(18：82)分离
效果最佳。
3．2 提取条件的选择：分别以95％、80％、70％、
60％乙醇溶液提取，结果以80％乙醇提取沙苑子苷
质量分数高，杂质干扰少。
3．3 ZTC一5型黄酮吸附树脂洗脱条件的选择：样
品上柱后，依次以水，10％、20％、30％、40％、50％、
70％乙醇洗脱，测定各洗脱部位沙苑子苷，结果
10％～50％乙醇洗脱部位均含沙苑子苷，故选择
万方数据
·1086· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
50％乙醇洗脱。
3．4实验结果显示，此法测定沙苑子中沙苑子苷，
分离效果、线性关系、精确度、重现性好，准确性高，
可用于沙苑子药材和提取物中沙苑子苷的测定。不
同地区、不同批号沙苑子中沙苑子苷质量分数有一
定差异。
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l】0一】】4．
薄层扫描法测定枇杷叶中熊果酸
韩小龙，陈开勋。
(西北大学化工学院，陕西西安710069)
枇杷叶为常用中药材，是蔷薇科植物枇杷Eri—
obotryajaponica(Thunb．)Lindl．的干燥叶。枇杷
叶入药始载于《名医别录》，列为中品。枇杷叶归肺、
胃经，具清肺、止咳、降逆止呕作用，用于治疗肺热咳
嗽、气逆喘急、胃热呕逆、烦热口渴之症状。其有效成
分有挥发油、三萜化合物、皂苷和有机酸口]。其中所
含三萜化合物中的熊果酸现代药理研究表明具有镇
静、抗炎和增强机体免疫等作用，而且极有可能成为
有效的新型抗癌药物[2]。目前国内对枇杷叶中熊果
酸的测定尚未见具体报道，本实验采用薄层扫描法
测定其熊果酸的质量分数，方法简单、快速、重现性
好，效果令人满意。
1仪器与试药
TLC—Scanner3型薄层扫描仪(瑞士卡玛公
司)；熊果酸对照品(购自中国药品生物制品检定
所)；硅胶GF25。预制板(100mm×200mm，青岛海
洋化工厂分厂)；枇杷叶分批采自云南红河州云阳县
不同种植点(样品批号为1～5号)，经西北大学生命
科学院刘建利教授鉴定为蔷薇科植物枇杷E．
japonica(Thunb．)Lindl．的叶，试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1供试品溶液的制备：取枇杷叶，干燥粉碎过40
目筛。精密称取20g，置索氏提取器中用12倍无水
乙醇回流提取至近无色，减压回收乙醇，浓缩至适
量，转移至100mL量瓶中，用无水乙醇定容至刻
度，作为供试品溶液。
2．2对照品溶液的制备：精密称取熊果酸对照品
7．5mg，置10mL量瓶中，用无水乙醇溶解并稀释
至刻度，质量浓度为0．75mg／mL，作对照品溶液。
1一熊果酸对照品
2一枇杷叶样品
2．3薄层色谱条件：用微量注
射器点样于硅胶GF。。。薄层板
上(厚0．3mm)，展开剂：环己
烷一氯仿一醋酸乙酯一冰醋酸
(20：5：8：0．5)，展开方式：
上行展开，显色剂：10％硫酸乙
醇溶液，105℃烘约7min显
色，熊果酸斑点为粉红色，Rf
值约为0．33，取出在薄层板上
覆盖同样大小的玻璃板，周围
1-ursolicac dreference用胶布固定。双波长扫描，砖一
8ub8协”8}”“9k
520nm，k一700nm；狭缝
图1枇杷叶TLc图1．2mm×1．2mm；Sx一3，灵Ⅲ⋯⋯，＼l⋯⋯“●uX u，0，L
。
mat02，am敏度中等，色谱图见图1。
ofE，fo西一2·4线性关系考察：精密吸取
Dtryaleaf熊果酸对照品溶液1、2、3、4、5
弘L，分别点于同一硅胶GF。。。薄层板上，以上述条件展
开，显色，扫描，测定各斑点吸收峰面积，以吸光度积分
值对点样量作图，得回归方程：Y一275．11X+
收稿日期：2004—10～18
作者简介：韩小龙(1976一)，男，陕西澄城人，西北大学硕士，从事天然产物中有效成分的提取与分离研究。
*通讯作者陈开勋Tel：(029)88303452
万方数据
RP-HPLC法测定沙苑子中沙苑子苷
作者： 刘春宇， 孙雄华， 张经硕， 胡延维， 顾振纶
作者单位： 刘春宇,孙雄华,张经硕,胡延维(苏州大学医学院,药学系,江苏,苏州,215007)， 顾振纶(苏
州大学医学院,药理教研室,江苏,苏州,215007)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(7)
被引用次数： 4次

参考文献(6条)
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中医药信息杂志 2010(3)
3.牟英.彭少平.顾振纶 固相萃取-高效液相色谱法测定沙苑子苷含量[期刊论文]-中国野生植物资源 2009(3)
4.常玉华.张清安 沙苑子化学成分研究现状与展望[期刊论文]-陕西农业科学 2011(6)


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