全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月·1069·
5种贝母药材的电喷雾离子阱质谱特征图谱研究
韩凤梅，王新立，蔡敏，陈 勇
(湖北大学生命科学学院，湖北武汉430062)
摘要：目的建立5种贝母药材的电喷雾离子阱质谱(ESI—MS)特征图谱，用于贝母药材的品种鉴别。方法用
18％氨水润湿贝母药材，乙醚一氯仿一乙醇(25：8：2．5)混合溶剂超声提取其中贝母生物碱，将提取物直接进样到电
喷雾离子阱质谱检测器进行正离子全扫描分析。结果在正离子一级质谱中，贝母生物碱易形成带一个正电荷的
准分子离子，并且在中性醇溶液中，贝母生物碱易形成二聚体，在酸性介质中则无此现象；二级碰撞诱导解离易使
贝母生物碱脱去一分子水；5种贝母对照药材的总生物碱提取液的一级电喷雾质谱图显示，主要分子离子峰基本相
同，但因品种不同相对丰度差异较大。结论5种贝母药材生物碱提取物的ESI—MS图谱特征性较强，重现性与精
密度较好，可用于不同品种贝母类药材的鉴别。
关键词：贝母；生物碱；电喷雾质谱；特征图谱
中图分类号：R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)07—1069一03
ESI—MScharacteristicspectraofalkaloidsinBulbusFritillariae
HANFeng—mei，WANGXin一1i，CAIMin，CHENYong
(CollegeofLifeScience，HubeiUniversity，Wuhan430062，China)
Abstract：ObjectiveTodevelopthecharacteristicESI—MSspectraoffiveBulbusFritillariaespecies
andtobeusedforidentificationofBulbusFritillariaespecies．MethodsTheBulb“5Fritiliariaemedicinal
materialsweredippedin18％ammoniasolution，thenthealkaloidswereextractedbyultrasonicusingthe
mixedsolventofether—chloroform—ethanol(25：8：2．5)．TheextractswereanalyzeddirectlybyESI—MS
inpositiveionmode．ResultsBulbusalkaloidseasilyformedmolecularions(EM+H]+)inMSand
dimerizedeasilyinalcoh01solution．whichdidnotdimerizeinaciditysolution．Collisioninducedd ssocia—
tion(S—CID)madethesealkaloidseasilyoseamoleculeofH20．TheMSspectraofthextractsoffive
BulbusFritillariaespeciesndicatedthathemajormolecularionsweresimilartoeachother，butdifferent
varietiesshowedv rydifferentlativeabundancesofthesemolecularions．ConclusionThetotalkaloid
extractsoffiveBulbusFritillariaespecieshavestrongcharacteristicESI—MSspectraandthesepectraa e
ofgoodreproducibilityandprecision，respectively．Thesecharacteristicspectraa eusefulfortheidentifi—
cationofBulbusFritillariaespeci s．
Keywords：BulbusFritillariae；alkaloid；ESI—MS；characteristicspectrum·
贝母是临床常用药材，主要药效成分为生物碱。
由于商品贝母植物来源复杂，外形较相似，品质评价
较困难。文献报道贝母药材的品质鉴别方法有薄层
色谱鉴别[1]、紫外光谱鉴别[2]、红外光谱鉴别[3]、裂
解气相色谱鉴别[4]、示波极谱鉴别[5]、一阶导数光谱
法鉴别[6]、贝母药材的基因分型和种类鉴别口]、聚类
分析曲3等。薄层色谱鉴别分辨率不高，特征性不强；
光谱鉴别法和示波极谱法因基于化合物官能团理化
特征而无法表征复杂体系的物质组成；DNA片段多
态性技术较复杂且分析成本较高；聚类分析仅是一
种数学分析方法，这些方法都不能直观表征贝母生
物碱的化学组成信息。运用电喷雾质谱技术研究贝
母生物碱特征图谱还未见报道。
电喷雾离子化(electrosprayionization，ESI)是
一种大气压电离技术，它能在大气压下从溶液里直
接产生完整的溶质分子的分子离子，是一种软电离
方式，通常不产生碎片离子，各样品(包括生物大分
子)都可得到准分子离子和／或其多电荷离子峰，因
收稿日期：2004—09—15
基金项目：科技部十五攻关项目(2001BA701A01)；湖北省青年杰出人才科学基金项目(2002AC004)
*通讯作者陈勇Tel／Fax：(027)88663590E—mail：cyl 1610@npc．gov．an
万方数据
·1070· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
而可得到复杂样品的化学物质组成信息[9]。笔者用
离子阱电喷雾质谱(ESI—MS)研究了5种《中国药
典》收载的贝母对照药材的ESI—MS图谱，为贝母药
材的鉴别提供了一种新方法，并对其主要活性成
分——贝母生物碱的质谱规律进行了初步探讨。
1材料
美国Finnigan公司LCQDUo质谱仪，JY92一Ⅱ
型超声细胞破碎机。川I贝母Fritillariacir hosaD．
Don、浙贝母F．thunbergiiMiq．、平贝母F．US—
suriensisMaxim．、伊贝母F．pallidifloraSchrenk
和湖北贝母F．hupehensisHsiaoetK．C．Hsia对
照药材及贝母甲素对照品均购自中国药品生物制品
检定所。甲醇为色谱纯，其他试剂为分析纯。
2方法与结果
2．1 质谱条件：离子源喷雾电压：4．5kV；毛细管
温度：200℃；毛细管电压：45V；鞘气(N：)流速：40
个单位；流动相：甲醇一水(50：50)；体积流量：0．2
mL／min；正离子一级全扫描范围：优屈100--一1200，
二级质谱碰撞能量：40％。
2．2供试液制备
2．2．1贝母甲素对照品溶液制备：配制54ttg／mL贝
母甲素甲醇溶液，取1．0mL于100 0r／min离心10
min，取上清液0．5mL进行一级质谱正离子全扫描，
源碰撞和二级质谱全扫描，得图谱(图1、2)。
2．2．25种对照药材总生物碱提取物供试液制备[10‘：
各取500mg对照药材予离心管中，以18％氨水1．0
mL润湿1h，加乙醚_氯zCs-乙醇(25：8：2．5)混合溶
剂7．5mL，超声提取20min(工作2S，间隙4S，功率
魁
*
m／z
魁
拂
稍毫T
400W，冰浴)，8000r／rain离心10min后取上清液，
重复提取3次，合并上清液并在60℃水浴蒸干，用氯仿
溶解并定容至25mL容量瓶中。分别各取1．0mL，挥
干氯仿，用甲醇溶解，10000r／min离心10min，取上
清液0．5mL至进样瓶中，采用同上方法进行一级质谱
正离子全扫描，得图谱(图3)。
世
* 。∥
4146
I
200300 400500600 700800900
m／z
图1贝母甲素一次质谱正离子全扫描图(甲醇溶解)
Fig．1Fullscanmassspectrumofpeimineinpositive
mode(dissolvedwithmethan01)
世
卅
A
414．i
200 400600800 900
m／z
似
件
B
图2贝母甲素源碰撞(A)和二次质谱(B)
图谱(甲醇溶解)
Fig．2S-CIDmassspectrum(A)andMS2spectrum
(B)ofpeimine(dissolvedwithmethan01)
B
430．6
28§住．5 701984。6．2
11414} Il
D
28嘶14．{ 828．2
b16．6432．65788 I§41
r| 44615926 ItI ll
越
忡
魁
*
4326 C
28：矗4垒 5927
H16．5l4m46．635、T卜．脚．1
E
4327
2885414．9
13,16．61,446．6 830群
A一川贝母B一浙贝母C一平贝母D一伊贝母E一湖北贝母
A-F．cirrhosaB-F．thunbergiiC—F．ussuriensi$D—F．pallidifloraE—F．hupehensis
图3 5种贝母对照药材正离子电喷雾全扫描图
Fig．3FullscanmassspectraoffiveBulbusFritUlariaespecies
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月·1071·
2．3 精密度与重现性试验：贝母药材总生物碱供试
液电喷雾质谱图的重现性与精密度较好(见表1)，
可用于贝母类药材的品种鉴别。
表1精密度与重现性试验(辟一3)
TableI PrecsionandreproducibiUtytest(n一3)
3讨论
3．1 贝母甲素电喷雾质谱规律研究：贝母甲素一级
质谱正离子扫描表明，贝母甲素易生成带一个质子
的准分子离子峰m／z432．6，此外还有较低丰度的
m／z846．1峰和m／z414．6峰(图1)，而在负离子全
扫描图中则无相关信息峰。对贝母甲素甲醇供试液
做源碰撞(sid=30V)显示，m屈846．1峰消失(图
2一A)，结合质荷比可推测m／z846．1是贝母甲素脱
水二聚体的分子离子峰[2M—H。0+H]+。m／z
417．7是贝母甲素二级裂解的主要碎片，说明贝母甲
素的准分子离子在离子阱中不稳定。另外，溶剂对贝
母甲素的一级质谱亦有很大影响。在醇等中性介质
中，贝母甲素一级质谱有二聚体存在，但在酸性介质
中则无二聚体存在。
贝母甲素的二级裂解图谱(图2-B)中的基峰为
m／z414．7，它是m／z432．6的脱水噼片离子峰
[M—H：o+H]+，表明碰撞诱导解离易使贝母甲素
失去一分子水。
3．2 5种贝母药材总生物碱供试液的质谱图：根据
5种贝母对照药材总生物碱提取液的ESI—MS图
谱，结合文献报道的贝母生物碱相对分子质量信息，
可以看出5种对照药材的生物碱组成基本相同，都
存在m／z414．7、416．7、430．6、432．7、446．6、
448．7、578．8和592．8等常见贝母生物碱的分子离
子峰[1川，由于贝母生物碱组成中有许多同分异构体
存在，因此，上述图谱只是在物质组成的质荷比上具
有较好的特征性。
通过对药材总生物碱供试液的ESI质谱研究
发现，其他贝母生物碱与贝母甲素存在极为相似的
质谱规律：即一级正离子质谱均形成带一个正电荷
的准分子离子峰；在中性醇溶液中均有脱水二聚体
存在，而在酸性介质中则无二聚体存在；二级碰撞诱
导解离易使贝母生物碱脱去一分子水。
3。3此外，值得注意的是在贝母对照药材总生物碱
供试液的ESI—MS图中，均有丰度很高的m／2
288．5峰和316．6峰，背景分析表明，这些不是系统
杂质峰，是贝母提取液中的未知成分。至于这些物质
具有何种化学结构与生物作用，还有待进一步研究。
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万方数据
5种贝母药材的电喷雾离子阱质谱特征图谱研究
作者： 韩凤梅， 王新立， 蔡敏， 陈勇， HAN Feng-mei， WANG Xin-li， CAI Min， CHEN Yong
作者单位： 湖北大学生命科学学院,湖北,武汉,430062
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(7)
被引用次数： 5次

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