全 文 ：中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrags第39卷第12期2008年12月·1895·
7、9、11、13、16肛L，注入高效液相色谱仪，按上述条
件测定，绵马贯众素色谱峰峰面积积分值(X)与质
量浓度进行回归，得回归方程Y=461599+
1718503X，r一0．995，质量浓度在0．4～1．6肛g
与峰面积积分值成良好的线性关系。
2．6精密度试验：按上述色谱条件精密吸取对照品
溶液10pL，连续进样5次，测峰面积，RSD为
3．2％。
2．7重现性试验：精密称取供试品5份，分别按供
试品溶液制备方法制备，按上述色谱条件测定峰面
积并计算质量分数，结果RSD为1．78％。
2．8稳定性试验：按上述色谱条件，精密吸取对照
品溶液10弘L，每隔2h测定1次，测定峰面积，结
果RSD一1．53％。
2．9 回收率试验：精密称取已测定的样品粉末5
份，每份0．25g，分别精密加入一定量对照品溶液，
依照2．3项下操作，测得绵马贯众素平均回收率为
101．23oA，RSD为2．6％。
2．10样品测定：取不同产地绵马贯众药材，照2．3
项下操作，测定其绵马贯众素的量，结果见表1。
3讨论
从绵马贯众中分离得到了绵马贯众素，质量分
数达99％以上，建立了RP—HPLC测定东北贯众素
裹1绵马贯众中绵马贯众素的测定结果(一=2)
Table1 Determinationofdry crassin
inD．crassirhizoma(露=2)
的方法。本方法简便，准确，重现性好。
测定了不同市售药材的绵马贯众素的量，结果
差别较大，其中浙江、四平、南京、通化等地的绵马贯
众未测出绵马贯众素，而长白县、安图、抚松量高达
10％以上，说明市售药材质量不一。绵马贯众素为
绵马贯众的主要药效成分，绵马贯众素的量可以为
绵马贯众的临床合理应用提供依据。
参考文献：
r-1]中国药典[s]．一部．2005．
[2]宋立人，丁绪亮。藏载阳，等．现代中药学大辞典(上册)
[M]．北京：人民卫生出版杜，2001．
HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素一4，4r_二一O—p—D一二葡萄糖苷
何立巍，李祥。，陈建伟，夏怡，汪莹莹
(南京中医药大学，江苏南京210046)
摘 要：目的 建立板蓝根药材抗病毒活性成分落叶松脂素一4，4-二一D．pD一二葡萄糖苷(直铁线莲宁B，
clemastaninB)的定量测定方法。方法采用高效液相色谱法，色谱柱为Lichrospher—C。e柱，流动相：甲醇一乙腈一水
(24；1：75)，体积流量：1．0mL／min；紫外检测波长：280nm。结果测定了板蓝根主要产地药材中落叶松脂素一4，
4-二一。一pD一二葡萄糖苷的量，平均质量分数为0．041％，加样回收率为98．8％，RSD为0．60％。结论本方法简
便、灵敏、结果可靠，可作为板蓝根药材质量控制的定量方法。
关键词：板蓝根；落叶松脂素一4，4-二一。一pD一二葡萄糖苷；HPLC
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1895一03
板蓝根为清热解毒类常用中药，但在药材质量
控制标准上，直至2005年版《中国药典》中仍没有定
量测定项。落叶松脂素一4，4-二一O—pD一二葡萄糖苷
(直铁线莲宁B，clemastaninB)是在板蓝根抗病毒
有效部位中分离得到的量最多的木脂素类化合物，
占有效部位的2％左右，占生药量的0．04％。体外
收稿日期：2008—04—09
基金项目：江苏省科技厅高技术研究课题(BG2003315)I江苏省高校自然科学基础研究项目(07KJD360165)，江苏省中医药管理局科
技研究专项基金(HZ07044)
作者简介：何立巍(1974一)，男，黑龙江省哈尔滨人，博士，讲师。E—mail：heliwei@sina．corn
*通讯作者李祥Tel：(025)51998182E—mail：Lixiang一8182@163．com
万方数据
·1896· 中草镐ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月
抗HSV病毒活性研究结果表明，直铁线莲宁B在质
量浓度为0．06．-一0．50mg／mL，均表现出一定的抑制
HSV一1和HSV一2型病毒效果，且文献报道直铁线莲
宁B具有抗氧化和清除自由基活性，即具有超氧化物
歧化酶样作用，对细胞具有显著的保护作用[1’2]。直铁
线莲宁B化学性质稳定，利用HPI。C法可以准确、快
速检测，故可作为板蓝根的定量指标成分。
1实验材料
1．1 仪器：岛津CBM--10A高效液相色谱系统；
SPD--10A紫外检测器；ClassSailnetDriver工作站。
1．2试药：直铁线莲宁B对照品由板蓝根药材中
自行分离，经UV、IR、NMR、MS检测并对照报道
文献[3]，鉴定为直铁线莲宁B。经HPLC及TLC检
验为单一成分，HPLC蜂面积归一化法检测质量分
数为99．2％。
1．3药材：板蓝根药材购自江苏、安徽、河北等主要
产地，经本校鉴定教研室陈建伟教授鉴定为菘蓝
IsatisindigoticaFort．干燥根。甲醇、乙腈等试剂均
为色谱纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱为Liehrospher—C18(250mm×
4．6mE．)，江苏汉邦科技公司产品；柱温：25‘C；流
动相：甲醇一乙腈一水(24：1：75)；体积流量：1．0
mL／rnin；进样量：10弘乙；检测波长：280nm。理论塔
板数按直铁线莲宁B计算不低于3000，主色谱峰
与其相邻其他色谱分离度不小于1．5。
2．2 对照品溶液的制备：取直铁线莲宁B对照品
适量，精密称定，加甲醇制成10yg／mL的溶液。
2．3供试样品溶液的制备：精密称取板蓝根粉末
(过40目筛)1g，置于25mL量瓶中，加60％甲醇
适量，60℃超声摄取1h，再加60％甲醇定容至刻
度，离心(3500r／min)10min，上清液过0．45弘m
微孔滤膜后，得供试品溶液，备用。
2．4对照品和样品的色谱行为：按上述色谱条件，
进行样品及对照品HPLC检测，样品与对照品在相
同的保留时间处有相应的色谱峰，且与杂质峰得到
较好的分离，见图1。
2．5线性关系考察：取直铁线莲宁B对照品适量，
精密称质量，甲醇定容。配成质量浓度为0．11rag／
mL的对照品溶液，精密吸取此溶液0．5、2．5、5．0、
7·5、10mL，加甲醇定容至10mL，分别取上述各对
照品溶液进样10肛L，HPLC测定，以峰面积对样品
的量做图。结果表明，对照品在5．5～110．0弘g／mL
线性关系良好，回归方程为：A一2548．05C—
O 10 20 30
t／min
图l板蓝根药材(A)及对照品(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsfRadixl atidis(A)
andclemastaninB(B)
3547．65，，．一0．9992。
2．6精密度试验：取同一对照品溶液连续进样7
次，以峰面积计算其精密度，RSD为2．89％。
2．7重现性试验：同时称取江苏产板蓝根样品粉末
1 g，共5份。按“供试品溶液的制备”项下进行样品
处理，测定，计算药材中直铁线莲宁B的量。结果表
明，该方法重现性良好，RSD为2．79％。
2．8稳定性试验：同一供试样品溶液，每隔2h测
定1次，结果表明，该样品溶液在12h内稳定，RSD
为2．87％。
2．9加样回收率试验：精密称取已测定的江苏产板
蓝根粉末约1g，共6份，每份加入适量的对照品，
精密称定。按“供试品溶液的制备”项下进行样品处
理，测定，计算回收率，得直铁线莲宁B的平均回收
率为98．80％，RSD为0．60％。
2．10样品测定：分别取板蓝根各产地样品1g，精
密称定，按“供试品溶液的制备”项下进行处理，测
定，结果见表1。
表1板蓝根主产地样品定量测定结果(n----3)
Table1 Determinationofsamplesfrommain
}
habitats(矗一3)
产地 直铁线莲宁B／(mg·g一1)产地 直铁线莲宁B／(mg·g一1)
河南商丘0．3461 吉林延边0．6192
河北定县0．4124 湖北房县0．2138
河北安国0．3656 江苏莲云港0．5240
安徽毫州0．4407
3讨论
3．1 为保证色谱峰定性的准确性，除上述流动相外，
还用甲醇一水(25：75)、乙腈一水(10：90)作为流动
相，进行了样品和对照品的定性比较，结果在不同洗
脱条件下样品中均有相同的色谱峰与对照品对应。
3．2检测波长的选择：直铁线莲宁B的紫外扫描
结果表明在220和280nE．有最大吸收，但是在
220nm处，样品溶液中其他成分干扰较为严重，所
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第39卷第12期2008年12月·1897·
以选定检测波长为280am。
3．3样品提取方法的选择：根据对照品的溶解性，选
择以甲醇为溶剂。考察了甲醇质量分数、提取方式、时
间、温度和提取次数对样品中所测成分的影响，以直
铁线莲宁B的峰面积为评价指标，结果表明60％甲
醇60rc下超声提取1h为最佳提取条件。
3．4量的限定：板蓝根药材的主产地为河北、河南、
安徽、江苏等地，对主产地药材定量测定结果表明，
不同产地板蓝根药材直铁线莲宁B的量差别较大，
以江苏、吉林、安徽、河北量较高。各产地平均量为
0．041％，以降低20％为限度计，板蓝根药材中直
铁线莲宁B的量应不低于0．033％。
板蓝根抗病毒的有效成分不明确，导致其原药
材及其制剂的质量控制方法相对落后。本实验是建
立在对板蓝根抗病毒有效成分已进行系统筛选的基
础上，在水提物中已经分离得到31个化合物中，以
木脂素糖苷直铁线莲宁B的量最高，且具有明显的
抗病毒及抗氧化活性，此前对该物质的定量测定方
法未见报道。
参考文献：
[-13HiranoH。TakashiT，ToshioY，eta1．Isolationoffree
radicalseavengerfromCoptidisRhizoma[J]．NatMed，
1997，5l(6)：5391．
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[3]张永文，俞敏倩，陈玉武，等．板蓝根中的木脂素双葡萄糖
苷【J]．中国中药杂志．2005，30(5)t395—399．
RP—HPLC法测定赤芍药材中没食子酸、儿茶素、芍药苷、
芍药内酯苷、苯甲酸
董 玄，高文远。，高 颖
(天津大学药物科学与技术学院，天津300072)
摘要：目的 建立了用RP—HPLC对赤芍中没食子酸，儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸同时定量的方法，并
对不同产地赤芍药材进行考察。方法高效液相色谱法，色谱柱为WatersSunfirecolumnsC】8(150mm×4．6mm，
5gm)，流动相为甲醇一乙腈一0．1％磷酸梯度洗脱；检测波长采用变波长检测；柱温为40fc；进样量为10pL。同时
测定了赤芍中没食子酸、儿茶素、芍药苷、芍药内酯苷、苯甲酸的量。结果没食子酸在0．013～0．506腭线性关系
良好(r一0．9996)、儿茶素在0．025～0．9936tzg线性关系良好(，．=0．9997)、芍药苷在0．200～8．017弘g线性关
系良好(r----0．9996)、芍药内酯苷在0．030～1．184pg线性关系良好(r一0．9996)、苯甲酸在0．037～1．485pg线
性关系良好(r----0．9996)。平均回收率没食子酸为98．08％，RSD为1．65％；儿茶素为101．80％，RSD为3．07％≯
芍药内酯苷为99．18％，RSD为3．25％；芍药苷为95．95％，RSD为1．39％；苯甲酸为101．85％，RSD为1．35％。
结论本方法测定了不同产地、不同批号赤芍样品中5种化学成分的量，该方法分离度好，快速，简便，重现性好。
关键词：赤芍；没食子酸；儿茶素；芍药苷；芍药内酯苷；苯甲酸；高效液相色谱法
中图分类号：R282．6 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2008)12—1897一03
赤芍为毛茛科植物芍药Paeonialactiflora
Pall．或川赤芍P．veitchiiLynch的干燥根[1]。主产
于内蒙古、辽宁、河北、黑龙江、吉林等地，甘肃、山
西、青海等地亦产[2]。赤芍的功能为清热凉血、散淤
止痛n]。赤芍总苷中主要含有芍药苷
(paeoniflorin)、芍药内酯苷(albiflorin)、羟基芍药
苷(oxypaeoniflorin)、苯甲酰芍药苷(benzoyl
paeoniflorin)等单萜类化合物，还有儿茶素((+)一
catechin]、没食子酸(galicacid)等多酚类物质。此
外，赤芍中还含有苯甲酸(benzoicac d，BA)【3“]。本
实验采用RP—HPLC法测定了赤芍中有效成分没食
子酸JL茶素、芍药内酯苷、芍药苷的量，同时对苯甲
酸也进行了定量。
1仪器与试药
美国HPll00色谱仪Agilent公司，G1311A四
元泵，G1322A、G1314AVWD检测器，HPRev．
A0501化学工作站；甲醇、乙腈为色谱纯，康科德公
司生产；实验用水为娃哈哈纯净水，其余试剂均为分
收稿日期：2008—06—22
基金项目：天津市科技创新专项资金项目(06FZZDSH00404)
作者简介：董玄(1985一)，女，天津人，在读硕士。主要从事中药资源学及中药质量控制方法研究。
*通讯作者高文远Tel／Fax：(022)87401895E—mail：pharmgao@tju．edu．cn
万方数据
HPLC法测定板蓝根中落叶松脂素-4,4-二-O-β-D-二葡萄糖
苷
作者： 何立巍， 李祥， 陈建伟， 夏怡， 汪莹莹
作者单位： 南京中医药大学,江苏,南京,210046
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2008,39(12)

参考文献(3条)
1.Hirano H;Takashi T;Toshio Y Isolation of free radical seavenger from Coptidis Rhizoma 1997(06)
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