全 文 ：·986· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
HCl反应阳性。13C—NMR见表2。1H～NMR、
13C—NMR与文献报道[9]比较，鉴定化合物XII为槲
皮素(quercetin)。
化合物xⅢ：黄色粉末，mp248～249℃，Mg—
HCl反应阳性。13C—NMR见表2。1H～NMR、
13C—NMR和文献报道[10]比较，鉴定化合物xⅢ为柚
皮素(naringenin)。
化合物xⅣ：黄色粉末，mp174～176℃，Mg—
HCl反应阳性。13C—NMR(DMSO—d6，125MHz)见
表2。1H—NMR、13C—NMR同文献报道raa]基本一致，
鉴定化合物XN为山柰素一3一O一葡萄糖苷(kaempfer—
ol一3一O—glucopyranoside)。
表2化合物Ⅺ～XVI的”C—NMR数据
Table2 13C-NMRdataofcompoundsⅪ一XⅥ
化合物xV：白色粉末，nap172～174℃；硫酸香
草醛显色呈红色，13C—NMR(CD。OH，400M z)数
据见表2。1H—NMR13C—NMR和文献报道mlJL茶素
基本一致，化合物xV鉴定为儿茶素(catechin)。
化合物XVI：白色粉末，mp239～241℃；硫酸香
草醛显色红色；13C—NMR(CD。oH，400M z)见表
2。1H—NMR、”C—NMR和文献报道F13]基本一致，化
合物XVI鉴定为表儿茶素(epicatechin)。
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枸杞子多肽的MALDI—TOF—MS定性分析
张志斐1’2，杨兆勇3
(1．河北医科大学药学院药物分析教研室，河北石家庄050017；2．华北煤炭医学院药学系，河北唐山063000；
3．中国医学科学院医药生物技术研究所国家新药筛选中心，北京 100050)
多肽类化合物广泛存在于自然界中，应用这些 活性肽可作为药物、疫苗、导向药物、诊断试剂、酶抑
收稿日期：2004—11-22
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月··987·
制剂及药物先导化合物等[1’2]，随着分离、纯化技术
和结构鉴定等研究方向的飞速发展，越来越多的具
有某种生物活性及药用价值的天然多肽类化合物被
分离鉴定出来。
枸杞子具有滋补肝肾、益精明目之功效。现代药
理研究表明：枸杞子具有提高机体免疫功能、抗氧
化、抗衰老、保肝、增加白细胞等作用。本实验采用传
统的多肽提取方法，由该种枸杞子中获取多肽提取
液，对其各组分进行了分析，从而为其定性及进一步
深入研究奠定基础。
1材料和方法
1．1 材料：枸杞子为枸杞LyciumbarbarumL．的
果实，采自内蒙古自治区呼和浩特市托克托县，由内
蒙古医学院药学系鉴定，洗净晾干后备用。
1．2 仪器与试剂：Voyager—DETMPRO型质谱仪
(美国ABI公司)；Milli—Q纯水系统(美国Milli—
pore公司)；20pL加样器、50～200肛L加样器
(Beckman公司)；10kD孔径的滤膜、0．22弘m滤膜
(华美公司)；其余试剂均为分析纯。
1．3步骤与方法
1．3．1枸杞子多肽的制备：取洗净晾干枸杞子，置
于3倍于枸杞子质量的水中，4℃条件下浸泡24h，
充分搅拌，滤过，收集浸泡液，室温条件下5000r／
min，离心20rain。取上清弃沉淀，称取一定量的硫
酸铵置于此上清液中，4℃条件下静置12h，5000
r／min离心10min，弃上清取沉淀，低温真空干燥，
称定质量待用。应用时取干燥固体若干，溶于一定量
超纯水中，用相对分子质量为1oo@L径的滤膜进行
超滤，得到枸杞子多肽。
1．3．2组成成分及各组分相对分子质量的测定：质
谱条件：激光：N。；波长：37nm；激光的脉冲宽度：2
ns；加速电压：25kV；检测电压：1750V；基体：芥子
酸。所有谱图均是100次累加的结果，未经任何圆滑
处理。相对分子质量用外标法校准。取样品5弘L、基
体溶液5弘L混匀，取1弘L滴于靶片，空气中室温吹
干后放入激光质谱仪中测试。
2 结果
经传统的多肽提取方法，由枸杞子中可获得微红
色多肽液体。应用MALDI—TOF—MS，在上述的条件
下获得如图示的图谱1。结果表明枸杞子多肽主要由
5种成分组成，相对分子质量分别为2810．37、
3211．45、3563．72、3682．96、4230．84Da。
3讨论
对具有一定生物活性多肽的研究，一直是药物
2400．132922．30 3400．0l 390725 440849
图1枸杞子多肽主要组分质谱图
Fig．1GSchromatogramofmaincomponents
inpolypeptidesfromL．barbarumfruit
研究中的一个活跃领域。本实验建立在已对枸杞子
多肽进行一定药理学的基础上，对其组成成分及各
组分相对分子质量进行定性分析，从而为此种多肽
的深入研究奠定理论基础。
MALDI—TOF—MS是近年发展起来的一种主要
用于展示生物大分子相对分子质量分布的质谱
仪[4]，具有较高的分辨率，测量精度可达0．005％，
且已广泛用于蛋白质、核酸、寡糖等生物大分子的分
析。它除了具有传统质谱的灵敏度高、速度快的优点
外，可用于复杂体系中混合物的同时测定以及抗干
扰能力强是其区别于传统质谱的重要特点。其基本
原理是通过基质分子吸收了激光的能量，转化为系
统的激发能，导致大分子样品的电离和气化，生成的
离子在真空无场区飞行并到达检测器。不同质荷比
的离子依次到达检测器，实现分离和检测。目前国内
外多为将MALDI—TOF—MS用于小分子药物组分
的相对分子质量分布测定嘲。此外，与电喷雾质谱法
(ESI／MS)相比，MALDI—TOF—MS法对样品的基
体要求低，允许有少许盐和其他杂质存在，且质量测
定范围大，样品消耗少，是蛋白质，多肽等大分子相
对分子质量测定的首选工具。
MALDI—TOF—MS分析中，基体的选择直接影
响分析结果。考察了多种基体后发现，基体芥子酸是
一种适用性较广的基体，对多种化合物的分析都取得
了较好的结果。且其在低相对分子质量部分背景较
少，当相对分子质量高于600时已基本没有基体芥子
酸造成的质谱峰。因此本实验采用芥子酸作为基体。
应用MALDI—TOF—MS对中草药进行分析具
有速度快(几分钟完成一次分析)、信息量高、无明显
的组分歧视效应(对无紫外吸收的组分不需要衍生
就可直接测定)等优点。许多中草药在性状上极为相
近，难以区分。利用MALDI—TOF—MS分析中草药
万方数据
·988· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第7期2005年7月
的优势，结合迅速发展的计算机技术，建立中草药的
指纹数据库，将为中草药的研究与开发提供一种新
的快速鉴别与分析的手段。这对于中草药走向世界
以及中草药的现代化都具有重要意义。
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白桂木的化学成分研究
甘茂罗1，欧阳胜H，谢平1，熊彦芬2，陈黎明2
(1．江西中医学院中药化学教研室，江西南昌 330006；2．江西东风药业股份有限公司，江西乐平333300)
白桂木ArtocarpushypargyreusHance为桑科
波萝蜜属植物，又名将军树，红面将军，分布于江西、
广东、海南、福建、湖南、广西、云南等地区。其根入
药，味甘、淡，性温，具有祛风利湿、活血通络等功效，
主治风湿痹痛、腰膝酸软、头痛、胃痛、黄疸、产妇乳
汁不足等症[1]。在粤北、赣南地区民间应用较广，用
于治疗风湿性关节炎，慢性腰腿疼痛等。白桂木的化
学成分至今未见报道。本实验从白桂木根的木质部
90％乙醇提取物的氯仿部分分离并鉴定了6个化合
物，分别是p一谷甾醇(B—sitosterol，I)、棕榈酸(hex—
adecanoicac d，Ⅱ)、5，27 4-三羟基一7一甲氧基一3一(3一
甲基一2一丁烯基)一6一(3一甲基一1一丁烯基)黄酮(arto—
carpin，Ⅲ)、香豆酸(P—coumarinicacid，1V)、5，7，27
47一四羟基黄酮(norartocarpetin，V)、胡萝卜苷
(daucosterol，y1)以上化合物均为首次从该植物中
分离得到。化合物Ⅳ首次从波萝蜜属植物中分得。
1仪器与材料
X一4型显微熔点测定仪。NMR使用日本电子
JNM--ECA一400超导核磁共振波谱仪(1H—NMR，
400MHz；13C—NMR，100MHz)，TMS为内标。EI—
MS用MicromassZabSpec高分辨磁质谱仪。薄层
色谱和柱色谱硅胶均为青岛海洋化工厂产品，试剂
均为分析纯。样品于2003年9月采自江西于都县山
区，由江西中医学院中药鉴定教研室刘庆华鉴定。
2提取和分离
白桂木根心材干燥粗粉40kg，90％乙醇回流提
取3次，每次3h，合并提取液，回收乙醇至无醇味后，
加水适量稀释，依次以石油醚、氯仿、醋酸乙酯、正丁
醇萃取，分别回收溶剂，得到石油醚部分98g浸膏、
氯仿部分390g浸膏、醋酸乙酯部分540g浸膏、正
丁醇部分450g浸膏。取氯仿部分浸膏200g，经硅胶
柱色谱，以氯仿一甲醇(100：o～0：1)梯度洗脱，每
1 000mL为l流份，利用TLC检测合并相同流份。
第36-40流份(氯仿洗脱部分)析出白色针状结晶，
经重结晶得化合物I 500mg；合并第7，4～84流份，
即氯仿一甲醇(100：1)洗脱部分，经硅胶柱色谱(氯仿
丙酮梯度洗脱)，氯仿一丙酮(50：1)洗脱的流份再经
SephadexLH一20柱色谱，以氯仿一甲醇(1：1)洗脱
(下同)，纯化得化合物Ⅱ60mg；合并第118～120
流份，即氯仿一甲醇(60：1)洗脱部分，经反复硅胶柱色
谱及SephadexLH一20柱色谱纯化，得化合物Ⅲ110
mg；第129～142流份，即氯仿一甲醇(60：1)洗脱部
分，析出淡黄色粉末状结晶，经SephadexLH一20柱色
谱纯化并经丙酮一环己烷反复重结晶得化合物N260
mg；合并第196～204流份，即氯仿一甲醇(30：1)洗脱
部分，再经反复硅胶柱色谱及SephadexLH一20柱色
谱纯化得化合物V 220mg；第204216流份，即氯
仿一甲醇(30：1)洗脱部分，析出白色粉末，经反复硅胶
柱色谱(氯仿一甲醇洗脱)得化合物Ⅵ430mg。
3结构鉴定
化合物I：白色针状结晶(氯仿)，mp138～140
℃，Liebermann—Burchard反应阳性。与B一谷甾醇对
收稿日期：2004一10—12
作者简介：甘茂罗(1976一)，男，江西高安人，江西中医学院天然药物化学专业2002级硕士研究生。
Tel：(0791)7118993E—mail：maoluogan@yahoo．corn．cn
*通讯作者欧阳胜
万方数据
枸杞子多肽的MALDI-TOF-MS定性分析
作者： 张志斐， 杨兆勇
作者单位： 张志斐(河北医科大学药学院,药物分析教研室,河北,石家庄,050017;华北煤炭医学院,药学
系,河北,唐山,063000)， 杨兆勇(中国医学科学院医药生物技术研究所,国家新药筛选中心
,北京,100050)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(7)

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