全 文 ：·550- 中革菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4,el
收，故选择此波长为检测波长。
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均匀设计法优选菝葜总皂苷的超声提取工艺
舒孝顺1，吕金海2，高中洪3，杨祥良3
(1．长沙理工大学生物与食品工程系．湖南长沙410076f2．怀化学院生物系，湖南怀化4I8000
3．华中科技大学药物研究所，湖北武汉430074)
菝葜为百合科菝葜属植物SmilaxchinaI。．的
根茎，又名金刚藤，具有消肿止痛、祛风利湿、活血化
瘀及抗肿瘤等作用o～⋯，临床单用或与其他药物配
伍用于各种炎症性疾病，如妇科盆腔炎症及炎症性
包块、前列腺炎、类风湿性关节炎及各种肿瘤等，均
取得满意疗效。菝葜属植物主要分布于全球热带地
区，共有300种左右，我国有60种和一些变种，大多
数分布于长江以南各省区，菝葜属植物资源丰富。皂
苷类成分是菝葜属植物的主要成分，其中主要是甾
体皂苷元及其苷。药理研究发现其具有抗炎、抗肿
瘤、抗凝血等重要药理活性”⋯，主治妇科盆腔炎症
及炎症性包块的金刚藤糖浆及胶囊，其用于制剂的
提取物浸膏就是用水煮醇沉工艺制备而来，但存在
着服用量大等缺点，而且目前也主要以薯蓣皂苷元
或其苷作为控制制剂质量的指标。为了提高其制剂
水平，进一步提高其疗效，有必要对其有效部位的提
取工艺进行进一步的研究。总皂苷的传统提取方法
多采用水煮和有机溶剂回流或浸取法，皂苷容易被
水解破坏，得率往往较低，而且生产周期长，能耗高。
超声波提取技术与传统方法相比，具有收率高、生产
周期短、不用加热、有效成分不被破坏等优点。为了
更好地利用菝葜，提高菝葜总皂苷的收率，本研究采
用了均匀设计法进行菝葜总皂苷超声提取工艺研
究。以筛选菝葜总皂苷超声提取的最佳工艺条件。
1仪器与试剂、材料
JY98Ⅲ型超声细胞粉碎机(上海新芝生物技
术研究所、宁渡新芝科器研究所，功率为0～2000
W)；BS300S型电子分析天平；7500紫外／可见分光
光度计(上海天美科学仪器有限公司)。菝葜根茎产
于湖南邵阳地区，粉碎干燥备用；香草醛、高氯酸、冰
醋酸均为分析纯；甾体总皂苷对照品购于中国药品
生物制品检定所。
2方法与结果
2．1总皂苷的测定
2．1．1总皂苷标准曲线的制备：精密称取甾体总皂
苷对照品，用甲醇配成248Pg／mL的对照品溶液。
分别精密吸取0．1、0．15、0．20、0．25、0．30、0．35、
0．40mL对照品溶液及0．40mL甲醇于8支10mL
试管中，于70C恒温水浴锅上蒸干，各试管再分别
加入0．20mL5％香草醛冰醋酸溶液及0．80mI。高
氧酸，摇匀后置于70c恒温水浴锅中保温15min，
取出迅速加入4mL冰醋酸摇匀，在462nm处测定
吸光度(4)。以加甲醇管为空白对照，以质量浓度
(C)对A回归，得方程A一0．0181 C一0．0043，
r一0．999，表明甾体总皂苷在5～20}Lg／mI．与吸光
度线性良好。
2．1．2测定：超声提取结束后提取液滤过，滤渣用
50mL相应溶剂洗涤、滤过，合并滤液，回收至干，再
加20mL热水溶解，以正丁醇120mL分3次萃取，
合并正丁醇萃取液，回收至干，再用甲醇定容到50
mL，从中取1ml，用甲醇稀释定容到10mI。，吸取
0．20mL，按总皂苷标准曲线的制备项下测其吸光
度，根据回归方程计算出相应的总皂苷量，计算总皂
苷的收率。
2．2均匀设计法进行工艺条件的筛选：用均匀设计
法，考察3个因素即溶剂体积与菝葜根粉质量比(液
固比)(x，)、超声提取时间(x。)和超声功率(x。)对
菝葜总皂苷超声提取率的影响。做7个样本，每个样
本精确称取预先处理好的菝葜根茎粉末(过100且
筛)5．00g，放人250mL具塞锥形瓶中，以相应溶
糕譬暑羿：嚣鉴嚣煞4一)，湖南淑浦人，副教授，长沙理_T大学生物工程教研室主任，现攻读中南大学药学院药学专业博士后．现主要
从事中药、天然药物的提取、药理和新药开发研究，发表科研论文30余篇。E—mail：sxs732@yahoocomcn
万方数据
中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月·551·
剂浸泡2h，再进行超声萃取，超声萃取方式为每次
超声4S、间隔6s，每60次摇匀1次，并间隔10S，
每一试验重复3次。均设7个水平，按U，(73)表进
行试验，见表l。
表1 U，(73)均匀设计方案
Table1 DesignofU，(73)uniformdesign
样本
x1渡固比／x2超声提取蝎超声功率／总皂甘
(mL·g叫)时间／rain(X】00w)收率／％
l 2 10 8 1 91
2 d 1j 8 2 06
3 6 20 12 2．45
4 8 25 12 2 50
5 10 30 16 2．60
6 12 35 l6 2．67
7 14 40 16 2．72
实验结果经多元线性回归统计处理“]，得回归
方程Y一1．5226+0．0164 X，+0．0041 x：+
0．0525x。；复相关系数R为0．9618，剩余标准偏
差0．1207，F值为12．46，具有良好的线性关系。多
元回归中标准偏差回归系数显示，对菝葜总皂苷超
声提取的影响效应依次为超声频率、溶剂用量和超
声时间，其中超声时间对菝葜总皂苷提取率的影响
很小，几乎可忽略。依据回归方程和实际经验，选择
菝葜总皂苷的最佳超声提取条件为70“乙醇的体
积与菝葜根粉的质量比为8～10，超声提取时间
10～20min，超声功率为1．6kW。
2．3验证试验：按上述优化的超声提取条件，进行
3次菝葜总皂苷的超声提取，结果得到优化条件下
的菝葜总皂苷提取率为2．58％，与回归方程的预测
值2．61％很接近，且重复试验相对偏差不超过
2，5％，说明超声优化条件重现性良好。
2．4超声法与常规法提取的比较：分别精密称取处
理好的菝葜根粉样品10．00g，常规70％乙醇提取
法采用10倍体积的70％乙醇于100℃回流两次，
每次2h，滤过后合并滤液，静置过夜，再滤过，滤液
回收至干，再加热水溶解并定容到2mL，以正丁醇
120mL，分3次萃取，合并正丁醇液，回收至干，再
用甲醇定容到50mL；常规水煮醇沉提取法用10倍
体积的水于i00C煎煮回流两次，每次2h，趁热滤
过合并滤液，加工业乙醇至乙醇体积分数为40％，
静置过夜，滤过，滤液回收至于，加热水溶解并定容
到20ml，，以正丁醇120ml。，分3次萃取，合并正丁
醇液，回收至干，再用甲醇定容到50mI。。经分析测
定，两种常规法提取的菝葜总皂苷收率分别为
2．53％和1．48％，均低于超声提取的总皂苷收率。
3讨论
菝葜总皂苷的超声提取，方法简便，提取率高达
2．72％，比常规提取方法的操作时间缩短10到20
倍，而且总皂苷得率高。超声提取很适用于对热敏
感、在较高温度易被酶水解破坏的有效成分加皂苷
等成分的提取。超声波破碎细胞过程是一个物理过
程，提提过程中无化学反应，也无需加热，被浸提的
生物活性物质其生物活性保持不变，同时提高了破
碎速度，缩短了破碎时间，提取效率大大提高，超声
提取天然药物有效成分具有周期短、成本低、不破坏
活性成分等显著优点，具有很好的应用前景。
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均匀设计法优选菝葜总皂苷的超声提取工艺
作者： 舒孝顺， 吕金海， 高中洪， 杨祥良
作者单位： 舒孝顺(长沙理工大学,生物与食品工程系,湖南,长沙,410076)， 吕金海(怀化学院,生物系
,湖南,怀化,418000)， 高中洪,杨祥良(华中科技大学药物研究所,湖北武汉430074)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(4)
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