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Comparison between ISSR and RAPD markers in genetic diversity of plants in Lycoris Herb

石蒜属植物遗传多样性的ISSR和RAPD标记比较研究



全 文 :中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月·1555·
石蒜属植物遗传多样性的ISSR和RAPD标记比较研究
袁菊红“2,孙视2,彭 峰2,冯 煦。,夏冰“2’
(1.南京农韭大学园艺学院,江苏南京210095;2,江苏省中国科学院植物研究所南京中山植物园,扛苏南京210014)
摘要:目的研究石蒜属4种植物的种问亲缘关系和同一种内不同采集地材料的遗传多样性.为其种质资源评
价和合理开发利用提供分子佐证。方法用ISSR和RAPD标记分别对不同采集地的37份石蒜属植物(石蒜18
份、中国石蒜lo份、换锦花5份、忽地笑4份)的基因组DNA的遗传多样性进行检测。结果(1)16条ISSR和17
条RAPD引物分别扩增出229和215帑带,多态比率分别为85.59%和69.77%.显然,ISSR检测出的多态性条带
的能力优于RAPD;(2)1SSR和RAPD标记检测同组供试材料种同或种内的Nei‘s遗传相似系数范围分别为
0.5459~0.9345.0.6419~1.000,平均为0.6836.0.7428。两者相美系数,=0.8582,达极显著水平。(3)ISSR
和RAPD标记的分子聚类结果相近,两种标记均能准确地把不同来源的材料先接种聚类,种间的分子分类结果与
传统经典分类相符{种内不同采集地材料间存在一定的遗传差异.其遗传多样性较为丰富。(4)用POPGENE3.2
分析的种阃基因分化系数(Gst)与用AMOVA进行的遣传变异巢式方差分析所得结果基本一致。结论两种标记
均可用于石蒜属植物种间亲缘关系与种内的遗传多样性研究,虽然ISSR标记在种间遗传多样性检测上分辨力较
RAPD标记低,但ISSR标记能检测到更高的种内遗传差异性,更适合种下水平的遗传多样性研究。
关键词:石蒜属;RAPD}ISSR;种间差异;遗传多样性
中图分类号:R282.710文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2007)10—1555—07
ComparisonbetweenISSRandRAPDmarkersingeneticd versityofplantsinLycorisHerb·
YUANJu—hon91”,SUNShi2,PENGFen92,XIABin91”,FENGXu2
(1.CollegeofHorticulture,NanjingAgriculturalU iversity,Nanjing210095,China;2。InstituteofBotany,]iangsu
ProvinceandChineseAcademyofScience,NanjingBotanicalGarden,Mem.SunYat—SeNanjing210014,China)
Abstract:ObjectiveToinvestigatetheinter-andintra—specificrelationshipsamongfourspeciesof
LycorisHerb.fromdifferenthabitatsandprovideth videnceforthevaluationandexploitationof he
germplasmofLycorisHerb.MethodsThegeneticd versitiesof37accessionsofLycorisHerb.fromdif—
ferenthabitatswereinvestigatedwi hthetechniqueofinter—simplesequencerepeat(ISSR)andrandom
amplifiedpolymorphicDNA(RAPD),whichwere18ofL.radiate,10ofL.chinensis,5ofL.sprengerl
and4ofL.aurea.Results(1)The229and215DNAbandswereamplifiedw th16ISSRand17RAPD
primersre pectively。thepercentageofpolymorphicbands(PPB)inISSRdetection(85.59蹦)washigher
thanthatinRAPD(69.77%).(2)Thecoefficientrangesofinterspeeifieandintraspecificgenetics milari—
tv(GS)inISSRandRAPDanalysesforthesamematerialswere0.5459—0.9345and0.6419—1.000,
respectively。theaveragewere0.6836and0,7428.Therewasignificantdifferenceofcorrelationcoeffi—
cienta 0.01levelbetweenISSRandRAPD(r一0.8582).(3)Thesimilarmolecularc usterr sultswere
obtainedfromRAPDandISSRanalyses,andhowedthatthegeneticd versityofintraspecificwashigh,
theinterspeeificr lationshipalsomatchedw llwiththeresultsoftypicallassification.(4)Thec efficient
ofgenedifferentiation(Gst)amongi ter pecificanalyzedbyPOPGENE3.2consistentwiththeresultof
molecularvarianceanalysisbvAMoVA.CnnclusionISSRandRAPDmarkerswerebothefficientm th—
odsinrevealinginterspecificorintraspecificgeneticd fferencesa diversityinplantsofLycorisHerb.The
acuitywithISSRdetectingforinterspecificgeneticd versityislowerthanthatwithRAPD,Themorein—
traspecificgeneticd fferencesared ctectedbyISSRmarker.However,ISSRismoresuitableforthestudy
收着日期:2007—01—26
基金项目:国家自然科学基金贷助项目(30370292);扛苏省自彝!;科学基金贷助项目(BK2004062)I江苏省遭地药材种质赍豫库建设硬目
(BM2006104)
作者筒丹:袁菊红(1975--)。女,南京农业大学博士研究生,研究方向为药用植物遗传多样性研究,种质资撙评价等。
E—mail:yuanjuhong@sirra.corn
‘通讯作者夏冰E—mail:bingxia@mailcnbg.net
万方数据
中草番ChineseTraditionalandHerl lDrugs第嬲卷第10期2007年10月
onintraspecificgeneticd versity.
Keywords:LycorisHe b.}randommplifiedpolymorphicDNA(RAPD)finter—simplesequence
re—
peat(ISSR);interspecificg neticd fferences;genetiediversity
石蒜属(LycorisHerb.)植物是一类具有很高
观赏价值和药用价值的植物,本属中12种为我国特
有,分布15个省区,而以江苏、浙江、安徽种类最多。
石蒜L.radiata(L’Herit.)Herb.自古即做药用,
主要用于治疗咽喉肿痛、痈肿疮毒、水肿、小便不利、
咳嗽痰喘、食韧中毒等症。本属其他种类与石蒜类
似,鳞茎中富含多种生物碱,是提取加兰他敏、力可
拉敏、石蒜碱等的重要原料,而加兰他敏、石蒜碱等
具有多种药理活性作用。石蒜碱是治疗阿米巴痢疾
药吐根代用品的原料。也有一定的镇痛和抗癌、抗肿
瘤作用;加兰他敏、力可拉敏具有显著抑制胆碱脂酶
活性,已被用于治疗轻中度老年痴呆症和&JL麻痹
后遗症恢复神经功能的要药。
在石蒜属植物经典分类及系统演化研究的基础
上,如何利用分子标记的方法研究石蒜属种间亲缘
关系及种内遗传多样性,对探讨本属植物物种的起
源演化和遗传资源的合理利用,发掘野生种中有利
基因和繁育新品种具有十分重要的意义。在众多的
DNA分子标记中,随机扩增多态性DNA(RAPD)
和简单序列重复间(ISSR)SY子标记因具有操作简
单、模板需要量少、引物容易得到和不需要知道被检
基因组序列等优点,被广泛地应用于物种亲缘关系
和遗传多样性研究中。近年来,石蒜属植物的种问亲
缘关系和杂交种起源的分子标记研究较多“’2]。而种
内遗传多样性研究除长筒石蒜L.10ngitubaY.
Hsu&G.J.Fan不同地理居群的RAPD分析及其
花色变异类型的ISSR分子标记研究外”1,本属中
其他种类的遗传多样性研究还未见报道。因此,本实
验利用ISSR和RAPD技术比较研究秋出叶类型的
石蒜L.radlata、忽地笑L.aurea(L’Herit.)
Herb.和春出叶类型的中国石蒜L.chlnensis
Traub、换锦花L.sprengeriComestBaker4个种
共37份材料的遗传多样性,为有效地评价石蒜属植
物遗传资源、合理开发利用、新品种选育及遗传多样
性保护等提供分子依据。
1材料与方法
1.1植物材料及其来源:试验材料于2004年7~9
月问从野外采集鳞茎,并种植于南京中山植物园苗
圃中,其编号、种名、采集地见表l,材料经南京中山
植物园姚淦和笔者共同鉴定。
裹1供试材料的种名和采集地
Table1 Speciesandhabitatsofinvestigatedplants
InLycorisHerb.
种名 编号 采集地 种名 编号 采集地
石蕃l安蕾宏材 20广西桂#
2 期南枢州苏仙轿区 2l壹卅黄果树
3贵州关蚌要 铭广西南宁
4贵州矗里 中国石蕃 23 安鼍琅珥山
5安t九华山 24 安鼍珀埠山甫天仃(豫黄色)
6安重体宁 25 安量琅球m甫天门(菠蓝色)
7广西全卅 孙 安簟琅珥山北城
8贵州安囊 27童■体宁
9橱甫肴山 2s扛苏宝华山l
lO 广西桂#雁山 29扛苏宝华山2
11广东乐目白石镇 30扛苏宝华山3
12湖南宜章 31 江苏宝华山鹿昌寺
13江苏西山 32壹州凤岗县
14 广东乐昌王边村 换锦花 船 所扛舟山小韩巨岛墙置
J5安誊黄山 3l 新扛舟山小鼻巨岛蕞南
16安毒齐云山 :15 新让普陀山巍音嗣
17福建明凄 36 淅扛苦陀山琨音嗣西
18扛苏宝华山 37 渐扛普陀山菩提南
忽地蓑 19 期南郴州挂阳
1.2方法
1.2.1DNA提取与检测:石蒜、忽地笑每个采集地
选取8个单株(22为1个单株),换锦花、中国石蒜
每个采集地取3个单株,每一单株采摘1个幼嫩叶
片混合后采用改良的CTAB法与PCR产物纯化试
剂盒结合法提取DNA。用1.O%的琼脂糖电泳检测
DNA的浓度和纯度。
1.2.2引物筛选:扩增反应在PE9700PCR仪上
进行,体系为20pL,用一个DNA样品分别对90条
ISSR引物和75条PAPD引物进行筛选,选择扩增
稳定、清晰条带的引物作为正式扩增。
1.2.3反应体系和扩增程序:通过对模板DNA浓
度、Mg”、dNTPs、Taq酶及退火温度等试验,得到
了两种标记最适反应体系和扩增程序,ISSR反应体
系:10×PCRbuffer2pL,2.5mmol/LdNTPsl
弘L,2/tmol/L弓I物4.uL,DNA(10~50ng)lpL,25
mmol/LMgCl21.6taL,1UTaqDNA聚合酶,用
ddWater补足到所需体积,RAPD反应体系与ISSR
基本一致,dNTPs为1.2/xL。ISSR扩增程序:94℃
预变性3rain,进入40个PCR循环(94℃变性45
s,58℃或60℃复性30s,72℃延伸90s),最后于
72℃延伸5rain,4℃保存。RAPD扩增程序:94℃
万方数据
中草焉 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月
预变性3min,进入38个PCR循环(94℃变性30
s,38℃复性30s,72℃延伸90s),最后于72℃延
伸7min,4℃保存。
吸取扩增反应产物12止加适量的Loading
buffer于1.5%琼脂糖电泳,电场强度为3~5V/
cm,电泳1.5h,FR一200A凝胶成像仪上拍照。
1。2.4数据统计与分析:对供试37份材料扩增的
电泳带总数和多态性带的数目进行统计。每个样品
按谱带有强带和弱带记为1,无带记为0,得到原始
数据表征矩阵。用POPGENE3.2软件计算等位基
因数(na)、有效等位基因数(nP)、基因多样性指数
(^)、Shannon多样性指数(j)、总的基因多样度
(Ht)、种内基因多样度(Hs)、基因分化系数(Gst)、
基因流(Nm),并得出遗传距离矩阵等。用
wINAMOvA软件和DCFA2[“司分析种问、种内的
遗传变异水平。同时用TFPGA软件包中的非加权
配对算术平均法(UPGMA)构建聚类图。
2结果分析
2.1两种分子标记的遗传多态性比较:通过引物筛
选,得出了符合要求的ISSR引物16条,RAPD引物
17条,引物名称、序列和多态位点百分比见表2。从中
可以看出ISSR引物扩增的多态位点百分比普遍高
于RAPD引物。两种标记扩增结果见表3。16条IS—
SR引物对石蒜属4个种37份材料的DNA扩增,共
获得229条带,194条为多态性带,多态性百分比达
85.59%。扩增条带数在9~23,平均每个引物扩增出
14.3条,DNA片段集中分布在200~200bp。17
条RAPD引物对上述同一组材料扩增后,共得215
条带,其中150条为多态性带,多态性百分比达
69.77%。平均每个引物扩增出12.8条带,DNA片
段集中分布范围为250~1800bp。因此,与RAPD
分析比较,ISSR对基因组DNA所检测到遗传多态
性能力更高。但两种标记均能反映出供试的4个物种
问、种内存在较高的DNA多态性(图1)。
裹2正式扩增的引糟名称、序刊和多杰位点百分比
Table2 PrimerRitme,senuenoes,andtheirPPB
多卷性引物数
多态性引物教扩平均每条引物扩扩增产物太小 扩增产物集中 柱测出的多态多态性条带占总
增出的条带总数 增出的条带数 范m/bp 分布范围 性条带总教 数的酉分数/聒
2.2供试材料的遗传分析:用POPGENE3.2软件
计算出种问多态谱带比率(PPB,%)值,ISSR种问
PPB(%)值高低顺序为:石蒜(66.81%)>中国石蒜
(55.90%)>忽地笑(40.17跖)>换锦花(27.95%)。
RAPD标记多态性结果也符合这一趋势(具体数据
略)。此外.na、ne、h、,、Ht、Hs、Ost、Nm等见表4、5。
从h值来看,两种标记有所差异,ISSR的高低顺序
与PPB值相同,但RAPD却为石蒜>忽地笑>中
国石蒜>换锦花。,值ISSR和RAPD标记变化
范围分别为0.161O~0.3547、0.0927~0.2214,
万方数据
·1558· 中羊1|毛Chl口eseTraditionalndHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月
石蒜
忽地姜
中层石荐
换锦花
石蒜屠木平
Sc Dc“
1.6681
1.4017
i,S∞0
1.2795
1.8559
(0,352o)
1.4081
1 302
1.3246
1.1868
1.5319
(0352
0.2375
0.1698
mi豁7
0.1090
0.3547
0.2459
0.Z9Z4
01610
l 4140
l_3305
±400
1.162B
1.2557
l 2484
1.24】S
11061
0.3078 0.4579 1 697 1.434O
(0l75口) (09378) fn4∞3) (0.3829)
0.1487
01413
0.14l2
0 0625
0.2503
f0】999)
0.2214
0.2055
氇2118
0.0927
O.3718
(02810)
表5石蒜晨4种檀物种问和种内遣传变异的分子方差分析
Table5 MolecularvarianceanalysisofInter-andJntra—specificinheritanceforfotlrplantsofLycorisHerb.
。1000次变换显著性柱撼
。significanceteBt5after1000permutations
属水平分别为0.4579和0.3718。换锦花的PPB值
和,均最低。POPGENE3.2得出的两种分子标记的
Gst在34.7l%~46.37%,与以AMOVA进行的遗
传变异巢式方差分析结果37.31%~51.11%基本
一致,前者稍小于AMOVA计算的结果。RAPD检
测种问差异大于ISSR,而ISSR却能检测到更高的
种内遗传差异。
ISSR标记检测石蒜属4种植物种问或种内的
Nei’s遗传相似系数范围为0.5459~o.9345,最大值
为0.9345(样本号35与36间),最小值为0.5459(样
本号24与】8之间)平均为0.6836。RAPD扩增结果
的遗传相似性系数处于0.6419~1.000,最大值
1.000(样本号12与13之问),最大值为0.6419(样
本号5与32),平均为0.7428。该指标也表明ISSR标
记比RAPD标记能检测到更大的遗传变异。
2.3供试材料的聚类分析:两种标记均将供试的
37份材料按种聚成了4大类,忽地笑和中国石蒜,
石蒜与换锦花先聚在一起,表明两两亲缘关系较近。
显然,两个聚类图都表明供试的4种植物的种间差
异大干种内差异。见图2。
种内不同来源的材料聚类分析:从ISSR聚类图
中可以看出,在遗传距离约0.31处,石蒜明显的分为
3支:第1支由l、5、15、12、13,10、11、14、16组成,包
括了广东、广西,湖南、江苏和安徽5省9份材料;第
2支由2、9(湖南)、7(广西)、3、8、4(贵州)、6(安徽)
组成,来自福建明溪17和安徽宝华山18构成了第3
支。换锦花5份材料是按来源进行聚类的,即来自浙
江舟山小郭巨岛与普陀山的分别聚在不同亚支。而中
国石蒜和忽地笑种内聚类却不明显按来源进行,如中
国石蒜,来自安徽琅琊山的4份材料23、24、25、26与
来自江苏宝华山的4份材料28、29、30、31交叉聚在
~起,然后再与安徽休宁材料27聚类,最后与来自贵
万方数据
中羊菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月
O500 0,400 0.300 O200 0]00 0.000 0.400 0.300 0.200 0100 m0Ilo
固2基于ISSR(A)和RAPD(B)数据绘制的37份供试材睾粤的聚类圈
Fig·2Dendrogramsofclasterfo37accessionsofLycorisHerb.based01]ISSR(A)andR PD(B)markers
州的32号聚类,表明后者与其他中国石蒜的亲缘关 (如25、27)的区分,ISSR也表现出比RAPD更强的
系较远。RAPD聚类图中,换锦花、忽地笑的聚类结区分能力。这与多位学者E6,73的研究结论一致。尽管
果与ISSR完全一致,而石蒜和中国石蒜种内不同来如此,本研究认为RAPD标记技术仍可以有效地应
源材料的聚类有一定的差异。石蒜18分材料中,除 用于石蒜属植物的遗传多样性评价研究中。ISSR和
1、5,17外,其他材料的聚类与ISSR基本相同;中国RAPD标记的遗传相似系数之间存在极显著的相
石蒜中除32与其他材料的遗传距离大,表现出较远 关性,也说明运用这两种标记技术分析石蒜属植物
的亲缘关系外,来自宝华山和琅琊山的材料聚类较紧 种质资源遗传多态性的可靠性,
凑,9份材料明显地分为两个亚支,第1亚支由23、 对于要求检测大量样本的遗传多样性和居群遗
26、27、28、29组成,第2亚支由24、25、30、31组成。传结构研究来说,检测手段的实验稳定性是至关重
来自琅琊山的24、25号样品花形一样,但花色上稍有 要的问题。本研究中RAPD对PCR反应的敏感,主
差别,前者深黄色、后者淡黄色,RAPD将其聚在一要表现在RAPD对退火温度、模板的纯度的改变非
起,相比之下,ISSR却能区分这两个花色不同的样常敏感,以致造成弱带的不稳定、带谱丰度的明显改
本。两种标记中安徽琅琊山和江苏宝华山的中国石蒜 变;而对Mg”、DNA模板、dNTPs及引物浓度在一
聚类存在明显的交叉现象。 定范围内改变却稳定得多。这一结果与Schierwater
2.4两种分子标记的相关性分析:为了检测同组样 等[B1和Skroch等-。-得出的结论相符。因此要获得稳
品内ISSR和RAPD分析的相关程度,对基于遗两种定可靠、重复性好的实验结果,必须在保证DNA模
标记的样品遗传相似性系数矩阵进行了相关分析。两 板质量的前提下,尽可能对反应条件的多项指标实
种标记检测的遗传相似’眭在供斌的4种植物37份材 行精确控制,并确保使用同一台PCR循环仪和同一
料中呈极显著的相关(,一0.8582>to.。”一666),批次的酶。相比之下,ISSR对PCR的反应敏感性较
这进一步验证了两种标记聚类结果的相似性。 低,这可能是本试验中用于扩增的ISSR引物长度
3讨论 都在16~18bp,反应退火温度偏高,引物与模板结
3.1 ISSR和RAPD标记试验结果的可靠性与实
验条件的稳定性:本研究的结果表明,ISSR和
RAPD对石蒜属4种植物进行遗传分析时,都能很
好地区分种问关系。但对种下水平区分时,RAPD
区分能力稍弱(如聚类图中lz和13),对中国石蒜
合较稳定所致。Gilbert等⋯和Yang等m的研究结
论同样表明ISSR的反应稳定性优于RAPD。
3.2遗传相似性与遗传分化:遗传相似性的高低可
以反映出样品问遗传差异的太小及其亲缘关系的远
近,本研究中37份供试材料的遗传相似系数的平均
}i;i;O;6i4}2,”mn¨j*撕;i0伸H”狰撕n盟船凹私滩如M拍”弛
万方数据
中草喃ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第10期2007年10月
值ISSR和RAPD分别为0.6836、0.7428,遗传距
离最小值分别为0.0677和0.000,表明样品间有
很高的遗传相似性。聚类图中石蒜与换锦花,中国石
蒜与忽地笑亲缘关系最近,这与笔者进行的种间Is—
SR标记(待发表资料)和张露等03的种问RAPD标
记及聂刘旺””同工酶谱分析的结果是一致的,也与
以往细胞学研究相符““”],因为石蒜和换锦花同时
存在染色体数目为2n=22或33的个体(核型22t
和330,而忽地笑和中国石蒜的染色体数和核型都
比较接近,忽地笑2n=14或16(核型8111+6T或
6m+10T)和中国石蒜2n=16(核型6m+10T或
8m+8T)。 。
遗传分化系数(Gst)和AMOVA分析结果表明
种间差异相当明显,基因流Nm=0.578z~
0.9406<1,说明种间产生了明显的遗传分化。其原
因可能是:(1)植物的基因流是借助花粉、种子、孢
子、营养体等遗传物质携带者的迁移或运动来实现
的,其中种子和花粉的传播是两种最主要的形式,供
试的4个种中,中国石蒜的花期较早,加上石蒜属植
物的自然花期短,因此它们之间通过花粉的扩散方
式进行基因交流几率较小。(2)石蒜属植物的种子与
花粉传播能力有限,有性繁殖产生的个体只存在于
2~6m口“,且野生状态下石蒜种子萌发率偏低。(3)
本属植物能以其鳞茎进行无性繁殖,可归类为克隆
植物,这势必使其基因流传递受到进一步局限。(4)
地理隔离或物理屏障在种群的分化和种群问的基因
交流中起到重要作用。
3.3遗传多样性:RAPD和ISSR标记均可显示出
种间与种内的遗传差异(图1),并能将供试材料按
种间差异或种内不同基因型差异的太小区分开来。
两种分子标记多项指标揭示的遗传多态性均以石蒜
最高,中国石蒜次之,忽地笑位居第三,换锦花最低。
一方面可能与其地理分布和来源有关,石蒜和忽地
笑均为广布种,而换锦花主要来自浙江舟山群岛,中
国石蒜的分布介于二者之间。另一方面可能与试验
中同种材料的样本数多少有关。
供试的4个种中,虽然换锦花的聚类与地理来
源呈一定的相关性,但其他3个种的聚类与地理来
源没有明显联系。中国石蒜和石蒜,来自贵州的与华
东地区的材料有较远的亲缘关系,原因可能是地理
隔离是植物种群间基因交流的一道天然屏障,削弱
了两地之间植物种群基因交流,从而导致种内出现
较明显的分化。可能与盾叶薯蓣南北居群产生了明
显的遗传分化的原因相【司[“]。石蒜中18号样本(江
苏宝华山)与同种其他材料的亲缘关系最远,也许是
因为江浙一带是我国石蒜属植物的分布中心,自然
资源十分丰富,种类繁多,种群之间发生了基因交
流。安徽琅琊山和江苏宝华山的中国石蒜材料聚类
存在明显的交叉现象,原因也是如此。本研究中的忽
地笑来自3个中西部省份,换锦花为浙江省两个不
同地方的材料,因此,对研究这两个种的遗传多样性
有一定的局限性,今后可收集更多分布区域的资源
进行居群遗传结构等研究。
3.4 石蒜属植物资源的合理开发利用与遗传多样
性保护:了解植物遗传变异大小及物种在空间上的
分布格局对于植物资源的合理开发利用和制定科学
的保护策略起着极为重要的作用。通过野外调查采
集实践和分子标记结果,笔者认为,供试的4种石蒜
属植物除换锦花外,野生资源及其遗传多样性都是
相当丰富的。从遗传学的角度来看,丰富的遗传多样
性意味着比较高的适应能力和具有较大的育种和遗
传改良能力。在天然状态下,石蒜、中国石蒜、忽地笑
具有很大的进化潜力,且我国数量多,难以自然灭
绝,但它们主要用鳞茎进行克隆繁殖,种子繁殖系数
较低,其中的三倍体物种不能产生种子,所以石蒜的
自然更新能力赶不上人为对其无计划、无节制的采
挖速度。因此,随着对石蒜属植物药用成分研究的深
入,人们在对野生资源开发利用的同时,更应加快繁
育新品种特别是高含量加兰他敏的品种选育及其相
应配套的栽培技术体系研究。以达到从根本上解决
用于现代制药行业所需的植物原料缺乏问题,从而
有效地避免对我国特有的野生花卉和药用石蒜资源
的过度采挖造成某些物种的濒危或灭绝。
References:
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白花蛇舌草氮、磷、钾吸收分配特性研究
李贺敏,李潮海。
(/al南农业大学农学院,河南郑州450002)
摘要:目的在大田条件下研究了白花蛇舌草对氮、磷、钾的吸收分配规律。方法定期取样研究干物质积累规
律,采用常规测定方法测定植株氟,碡,钾的量。结果 白花蛇舌草苗期对氮、磷、钾吸收较少,分枝开花期和结果期
吸收量快速增加,成熟期氯、磷吸收减少。钾出现“负吸收”。白花蛇舌草植株对氨亲吸收最多.钾趺之、磷最少,全生
育期植株对氮、磷、钾的吸收比率为1.00{0,16;0.54。苗期和分枝开花期氮、磷、钾主要积累在叶和茎中·其中氮
素以叶中分配最多,磷和钾则主要分配在茎中;结果期和成熟期氯、磷、钾多分配在花果和茎中,氮和磷花果中最
多,钾则茎中最高。结论 白花蛇舌草在苗期对肥料要求不多,可适当少施。分枝开花期和结果期吸收量骤增,要加
大施肥用量,结果期对磷肥和钾肥要求较多,应适当补施磷肥和钾肥以满足此期果实生长的需要。
关键词:白花蛇舌草f氮、磷、钾I吸收;分配
中国分类号:R282.2 文献标识码:A 立章编号;0253—2670(2007)10—1561—06
Absorptionandistributionofn trogen,phosphorus,andotas iumofHe咖otisdiffusa
LIHe—min,LIChaP—hai
(CollegecaAgronomy,HenanAgricultureUniv rsitytZhengzhou450002,China)
Abstract:ObjectiveTheabsorptionandistributionofn trogen(N),phosphorus(P),andotassi—
um(K)ofHedyotisdiffusawastudiednfieldtests.MethodsThroughregulars mpling,drymatter
accumulationwastudled,thecontentsofN,P,andKwereanalyzedbyconventionslmethods.Results
TheuptakeamountofN。P,andKbyH.diffusawagloweratseedlingstage,butincreasedrapidlyat
branching,blossoming,andfruitingstages,andtheuptakeamountofNandPdecreasedndKwasnega—
tivelyabsorbedatmaturestage.TheuptakeamountofNbyH.diffusawasthehighest,followingwas
KzO,whileP205wasthelowest.InthegrowingseasonofⅣ.diffusa,theratioofN,P20s,andK20was
1.00l 0.14l 0.54.NMainlydistributedinleafatseedling。branching,andblossomingstages,while
P205andK。Omainlydistributedinstem.Themineralnutritionmostlydistributedinstem,flowerst and
fruitsatfruitingandmaturestages,NandP205mostlydistributedinflowersandfruits,butKzOmainly
accumulatedins m.ConclusionAlittlef rtilizershouldbeappliedatseedlingstage,oppositlytheuse
收藕日期:2007·01—20
嚣喜蔷异:挲§盏嚣蓦要考墨只河(0南52上44蘩200人22.在)职博士,讲师.主要从事药用植物栽培研究
.通讯作者T“李’13潮5海9266T73tol7。(。导豫:娄譬翟2。02@16孓∞m




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万方数据
石蒜属植物遗传多样性的ISSR和RAPD标记比较研究
作者: 袁菊红, 孙视, 彭峰, 冯煦, 夏冰, YUAN Ju-hong, SUN Shi, PENG Feng, XIA
Bing, FENG Xu
作者单位: 袁菊红,夏冰,YUAN Ju-hong,FENG Xu(南京农业大学园艺学院,江苏,南京,210095;江苏省中
国科学院植物研究所,南京中山植物园,江苏,南京,210014), 孙视,彭峰,冯煦,SUN
Shi,PENG Feng,XIA Bing(江苏省中国科学院植物研究所,南京中山植物园,江苏,南京
,210014)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2007,38(10)
被引用次数: 12次

参考文献(14条)
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9.贺安娜.全妙华.欧立军.唐文超 基于光合特性的石蒜属植物聚类分析[期刊论文]-北方园艺 2013(13)
10.李婷.林文津.徐榕青.张亚敏 ISSR技术在药用植物种质研究中的应用[期刊论文]-中国民族民间医药 2010(1)
11.黄想安.董美芳.阎学燕.尚富德 石蒜属种间亲缘关系AFLP分析[期刊论文]-中草药 2011(1)
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