全 文 ：中草芮ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月·705·
A
●
0 4 8 12 16 20 24 28 32
+
B
．JL
0 4 8 12 16 20 24 28 32
r，min
*一红花黄色素A
*一hydroxysaffloweryellowA
图1羟基红花黄色素A对照品(A)和注射用红
花黄色素(B)的HPLC图谱
Fig．1HPLCChromatogramsfhydroxyafflower
yellowAreferencesubstance(A)
andSafflowerYellowInjection
羟基红花黄色素A极性较强，强酸性，具有亲
水性，根据反相离子对HPLC理论，可采用含有四
丁基氢氧化铵离子的流动相，羟基红花黄色素A在
流动相中与四丁基氢氧化铵离子生成不带电荷的中
性离子，增加了非极性固定相中的溶解度，使分配系
数增加，改善分离效果。加入磷酸盐是采用离子抑制
色谱法，加入磷酸盐是作为抑制剂，调节pH值，抑
制组分的分离，增加中性分子存在的几率。
在乙腈一0．03mol／L磷酸二氢钾溶液一10％四
丁基氢氧化铵溶液(170：800：15)为流动相，用磷
酸调pH时，当pH5．5时，图谱分离比较好。
乙腈一0．01mol／L磷酸二氢钾溶液一10％四丁
基氢氧化铵溶液(170：800：15)为流动相，用磷酸
调pH5．5时，改变磷酸二氢钾的浓度。当磷酸二氢
钾为0．05mol／L时，图谱分离比较好。
当10％四丁基氢氧化铵溶液为20mL时，图谱
分离比较好。
采用乙腈作为有机调节剂，流动相的黏度较低，
有利于色谱分析。乙腈比例降低，各组分的保留均增
加。乙腈比例变化对主峰的保留影响最大，乙腈比例
由17％降至12％，主峰的保留时间由11min增至
58min。在本色谱系统中，为同时兼顾色谱选择性和
分析时间等因素，乙腈比例定为17％。
本实验所采用的流动相具有足够的缓冲容量，
在线性范围测定过程中，羟基红花黄色素A的色谱
峰形不随其变化而变化，色谱峰形均正常。
References：
EliZhuM，GuoZX．DeterminationofthesaffloweryellowAin
CarthamintinctoriusI-Y1．JChinMedMater(中药材)，2000，
23(8)：458—459．
[2]YangXJ，WuGR，WangY．Studiesof xtractionmethods
ofutilityportioninCarthamustinctorius[J]．JXinjiangMed
Univ(新疆医科大学学报)，2005，28(1)：45—47．
[3]ZhaoMB，DengxL，WangYL，eta1．Determinationof
hydroxysaffloweryellowAinCarthamustinctoriusL．byhigh
performanceliquidhromatography[J]．ChinJChromatogr
(色谱)，2003，21(6)：593—595．
薄层扫描法测定胃康胶囊中人参皂苷Rg。和人参皂苷Rb。
马 莉1，唐健元1，李祖伦1，肖小河2，廖庆文3，冯少华2
(1．成都中医药大学，la)lI成都610075；2．解放军302医院全军中医药研究所，北京100039；
3．湖南中医学院，湖南长沙410007)
胃康胶囊为临床经验方，由人参、藿香、白扁豆、
甘草等中药组成，具有补脾益胃、化湿浊、和中止呕
的作用，临床用于治疗小儿脾虚湿蕴之吐泄不止，不
思饮食。方中以人参为君药，人参皂苷Rb。、人参皂
苷Rg，均为其特征的有效成分。为保证成品质量，本
实验建立了双波长薄层扫描法测定胃康胶囊中人参
皂苷Rb。和人参皂苷Rg。的测定方法。
1仪器与试剂
瑞士CAMAGTLCScanner--3；瑞士
CAMAGATS一4自动点样机；恒温鼓风干燥箱(黄
石市恒丰医疗器械有限公司)；AEl63型电子分析
天平(瑞士梅特勒公司)；高效硅胶G薄层板(青岛
收稿日期：2005—07—24
作者简介：马莉(1977一)，女，四川崇州人，助理研究员，在读博士，研究方向为中药学。
Tel：(010)63246736E—mail：marytjy66@yah001．com．cn
万方数据
·706· 中草药ChineseTraditionalandHerba．!Drugs第37卷第5期2006年5月
海洋化工厂)；人参皂苷Rb。对照品(批号704—
2000115)、人参皂苷Rg。对照品(批号0703—9611)
均购自中国药品生物制品检定所；试剂均为分析纯；
实验药材均购自四川成都五块石中药材市场，经成
都中医药大学鉴定教研室鉴定，符合《中国药典》要
求。胃康胶囊(规格为0．3g／粒，自制)。
2方法与结果
2．1 测定条件
2．1．1扫描条件：双波长扫描法：入s一540nm，k一
700nm；狭缝：6．00am×0．45mm；SX一3；扫描速
度：20mm／s。
2．1．2色谱条件：展开剂：氯仿一甲醇一水(13：7：
2)；显色剂：10％硫酸乙醇溶液。
2．2对照溶液的制备：精密称取105℃干燥至恒重
的人参皂苷Rb。对照品10．1mg、Rgl对照品10．2
mg，加甲醇溶解定容至10mL，制成含人参皂苷Rb。
(1．01mg／mL)、人参皂苷Rg，(1．02mg／mL)的溶
液，作为对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：精密称取胃康胶囊去囊壳
内容物1．0g，置具塞三角瓶中，加甲醇30mL，称定
质量，超声处理30min，放冷至室温，再称定质量，
用甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，滤液水浴挥干，残
渣分别加水20mL，正丁醇溶液15mL溶解，定量
转移至分液漏斗中，静置分层，分取正丁醇提取液，
水层继续用水饱和正丁醇萃取，合并提取液，用浓氨
试液洗涤2次，弃去下层液，减压回收正丁醇，残渣
加甲醇1mL使溶解，作为供试品溶液。
2．4扫描波长的选择：取对照品溶液3肛L，点于硅
胶G薄层板上，以氯仿一甲醇一水(13：7：2)下层液
为展开剂，10℃以下展开，取出，晾干，喷以10％硫
酸乙醇溶液，105‘C显色约5min，封板，采用钨灯在
人参皂苷Rb。、Rg。斑点中心，400～700nm波长内
进行扫描。结果人参皂苷Rb，、Rg。对照品斑点均在
540nm处有最大吸收，故选择扫描波长入一540nm。
2．5标准曲线的制备：精密吸取上述对照品溶液
1、2、3、4、5肛L，分别点于同一硅胶G板上，以氯仿一
甲醇一水(13：7：2)下层液为展开剂，10C以下展
开，取出，晾干，喷以10％硫酸乙醇溶液，105。C显色
约5min，封板，按上述条件测定。以峰面积对进样
量进行回归，得回归方程：人参皂苷Rb。：Y一
1278．9X+66．699(r一0．9996)；人参皂苷Rgl：
Y=3795．4x+109．58(r=0．9995)，人参皂苷
Rb。、人参皂苷Rg。在1．O～5．0pg，均有良好的线性
关系。
2．6 阴性干扰的考察：取缺人参的处方，按工艺制
成阴性制剂，按供试品溶液的制备方法操作，制备缺
人参阴性对照。取供试品溶液、对照品溶液及缺人参
阴性对照，分别点于同一硅胶G板上，展开，显色，
540Ftm下薄层扫描。结果缺人参阴性对照在人参皂
苷Rb。、Rg。对照品斑点相应位置无斑点，扫描图谱
无干扰。
2．7精密度考察
2．7．1 同板精密度试验：精密吸取人参皂苷Rb。、
Rg。对照品溶液，在同一硅胶G薄层板上点5点，每
点2肛L，展开，晾干，显色，扫描，测定峰面积积分
值，结果RSD分别为2．51％和3．04oA。
2．7．2异板精密度试验：精密吸取人参皂苷Rb。、
Rg，对照品溶液2弘L，在5块薄层板上点样，展开，
晾干，显色，扫描，测定峰面积积分值，结果RSD分
别为3．01％和2．97％。
2．8稳定性试验：吸取供试品溶液3肚L，对照品溶
液2、4弘L交叉点样，展开，取出，晾干、显色、封板，
每30min扫描1次，扫描5次，测定峰面积积分值，
结果人参皂苷Rb。、Rg。的RSD分别为3．15oA和
2．97％。
2．9重现性试验：取同一批号样品(批号040616)，
精密称取5份，制备供试品溶液，测定，结果人参皂
苷Rb。、Rg。的质量分数的RSD分别为3．12％和
2．75％：
2．10加样回收率试验：精密称取批号为040616的
样品5份，每份约0．5g，分别加入2mL人参皂苷
Rb。和人参皂苷Rg。的混合对照品溶液(人参皂苷
Rbl：1．406mg／mL，人参皂苷Rgl：1．980mg／mL)，
制备供试品溶液，点样3弘L，对照品溶液2、4肛L交
叉点样，测定峰面积，计算回收率。结果人参皂苷
Rb。的平均回收率为99．672％，RSD为2．39％
(咒一5)，人参皂苷Rg。的平均回收率为100．606％，
RSD为3．74％(咒一5)。
2．11样品测定：取胃康胶囊成品3批，各3份，每
份约1．0g，制备供试品溶液。精密吸取供试品溶液、
阴性对照各3肛L，对照品溶液2、4肛L交叉点样，展
开，取出，晾干，显色，封板，测定峰面积积分值，按外
标两点法计算，结果见表1。胃康胶囊质量控制指标
为：人参皂苷Rh，应不少于1．50rag／粒，人参皂苷
Rg。应不少于2．00mg／粒。
3讨论
薄层扫描法测定人参皂苷的文献报道较多，常
用的展开系统有氯仿一正丁醇一甲醇一水(20：40：
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第5期2006年5月·707·
表1 胃康胶囊中的人参皂苷Rb。和人参皂苷Rg。(n一3)
Table1 Resultsofdeterminationforg nsenosides
RblandRglinWeikangCapsules(疗一3)
10：20)；正丁醇一醋酸乙酯一水(4：1：5)；氯仿一醋
酸乙酯一甲醇一水(15：40：22：10)；氯仿一甲醇一水
(13：7：2)。在胃康胶囊测定方法研究过程中，发现
展开系统氯仿一甲醇一水(13：7：2)较氯仿一醋酸乙
酯～甲醇一水(15：40：22：10)分离效果更好，斑点
更圆整，所以选用该系统为分离条件。
薄层显色过程中，显色剂10％硫酸乙醇溶液的
用量不可过大，以免扫描时背景颜色过深，影响实验
结果。
HPLC—ELSD法测定益气糖康胶囊中黄芪甲苷
向 静1，陈 勇H，熊富良2，王玉巧2
(1．湖北大学中药生物技术省重点实验室，湖北武汉430062；
2．湖北省中药现代化工程技术研究中心，湖北武汉430052)
益气糖康胶囊由绞股蓝、黄芪、葛根等组成，具
有益气养阴、温阳活血等作用，主要用于气阴两虚症
糖尿病的辅助治疗。黄芪为方中君药，其主要成分有
皂苷、多糖、氨基酸等，具有促进免疫反应等活性。为
了有效控制益气糖康胶囊中黄芪甲苷的内在质量，
本实验参考有关文献报道[1矗]，采用HPLC—ELSD
测定法对本制剂中黄芪甲苷进行了测定。
1实验材料
1．1 仪器：日本岛津IOA高效液相色谱仪；HW一
2000色谱工作站(2．11版)；SEDEX75型ELSD检
测仪。
A
1．2药品：益气糖康胶囊(武汉健民科研所提供，批
号分别为20040701、20040702、20040703)；黄芪甲
苷对照品(中国药品生物制品检定所，批号0781—
9807)；甲醇为色谱纯；水为重蒸水；其他试剂均为分
析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：Kromasil—C18柱(250mm×4．6
mm，5肛m)；柱温25。C，甲醇一水(80；20)为流动
相；体积流量为1．0mI。／min；ELSD条件：漂移管温
度40C，氮气压为3．5×105Pa。理论塔板数以黄芪
甲苷峰计不低于3000，色谱图见图1。
O 2 4 6 8 10 12 14 16 0 2 4 6 8 10 1214 16 O 2 4 6 8 10 12 14 16
r，rain
*一黄芪甲苷
*一astragalosideIV
图1 阴性样品(A)、益气糖康胶囊(B)和黄芪甲苷对照品(C)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramsofnegativeample(A)，YiqiTangkangC psules(B)，
andastragalosdeⅣreferencesubstance(C)
2．2供试品溶液的制备：取益气糖康胶囊约5g研 丁醇提取液，接着用氨试液洗涤两次(每次25mL)，
细，精密称定后加甲醇溶液50mL超声提取1h，滤 弃去氨溶液，将正丁醇溶液蒸干，残渣加热水10mL
过并将滤液蒸干，残渣加水20mL使之溶解，用水 溶解，放冷后通过D一101大孔吸附树脂柱(内径1．5
饱和的正丁醇振摇萃取3次(每次25mL)，合并正 cm，长12cm)，用80mL水淋洗树脂柱并弃去淋洗
收稿日期：2005—09—09
*通讯作者陈勇
IL叫
万方数据
薄层扫描法测定胃康胶囊中人参皂苷Rg1和人参皂苷Rb1
作者： 马莉， 唐健元， 李祖伦， 肖小河， 廖庆文， 冯少华
作者单位： 马莉,唐健元,李祖伦(成都中医药大学,四川,成都,610075)， 肖小河,冯少华(解放军302医
院全军中医药研究所,北京,100039)， 廖庆文(湖南中医学院,湖南,长沙,410007)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(5)
被引用次数： 1次

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引证文献(1条)
1.刘明.李更生 乌鸡白凤浓缩丸中人参皂苷Rb1含量测定[期刊论文]-中南药学 2007(4)


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