全 文 ：·216· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2,El
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正交设计优选蔓荆子中总黄酮的提取工艺
尹文清1，陈柳生1，王力生2，张青松1
(1．广西师范大学化学化工学院，广西桂林541004；2．桂林三金药业股份有限公司，广西桂林541004)
蔓荆子始载于《神农本草经》，被列为上品，为马
鞭草科牡荆属多年生落叶小灌木单叶蔓荆Vitex
trifoliaL．var．simplicifoliaChain．或三叶蔓荆y．
trifoliaL．的于燥成熟果实，主要产于山东、江西、
浙江、福建、广东、广西及云南等地，具有疏散风热、
清利头目、止痛的功效[1]。民间常用于治疗感冒、头
痛、周期性头痛及眼痛等E2|。其主要活性成分为黄酮
类化合物，具有抗炎、降低血压、抗癌、镇痛等多种药
理活性[3]。本实验通过L。(34)正交试验优选出蔓荆
子中黄酮类化合物的提取工艺条件，为蔓荆子的综
合利用提供了依据。
1材料、试剂与仪器
蔓荆子由广西桂林市临桂县广益农业开发有限
公司提供，经广西师范大学生命科学学院教研室鉴
定为单叶蔓荆V．trifoliaL．var．simplicifolia
Cham．的干燥成熟果实。芦丁对照品由中国药品生
物制品检定所提供，其他试剂均为分析纯。
TU一1901双光束紫外可见分光光度计(JL京
普析通用仪器有限责任公司)，旋转蒸发仪(上海亚
荣生化仪器厂)，电子天平(沈阳龙腾电子称量仪器
有限公司)，B一220型恒温水浴锅(上海亚荣生化仪
器厂)。
2方法与结果
2．1 蔓荆子中总黄酮的UV法测定[4]
2．1．1标准曲线的绘制：准确称取干燥至恒重的芦
丁对照品10mg，用无水乙醇水浴微热溶解，并完全
转入50mL量瓶中，用无水乙醇定容，得0．2000
mg／mL的芦丁对照品溶液。精密吸取0、0．25、
1．Oo、2．00、3．00、4．00mL上述芦丁对照品溶液，分
别置于7支lomL刻度试管中，加5％NaNO：0．30
mL，摇匀后放置6min，加10％Al(N03)30．3
mL，摇匀后放置6min，加4％NaOH2．00mL，再
用无水乙醇稀释成刻度，摇匀后放置15min，于510
nm处测定吸光度(以第一管为测定空白)。芦丁质
量浓度(c)与吸光度(A)进行线性回归，得回归方
程：A一0．0104C一0．0071，r一0．9998。结果表明
芦丁在5～80t-tg／mL与吸光度线性关系良好。
2．1．2样品的测定：精密地称取10g干燥至恒重
的蔓荆子9份，回流提取。提取液减压浓缩后水沉，
滤过后定容到250mL量瓶中，分别精密地吸取上
述2mL溶液，按标准曲线的绘制项下方法操作，测
定吸光度，根据回归方程计算样品中黄酮类化合物
的量。
2．2提取溶剂的选择：蔓荆子中的主要黄酮类化合
物是紫花牡荆素，其他黄酮的量较少。紫花牡荆素不
溶于水，易溶于甲醇、乙醇、丙酮、醋酸乙酯、氯仿等
有机溶剂。乙醇毒性小、渗透性强、易于回收、价格也
较便宜，因此选定不同体积分数的乙醇为提取溶剂。
2．3提取次数的选择：称取10g蔓荆子干燥粉末，
加入50mL70％乙醇，在85℃下提取4h，然后将
提取过的粉末分别在相同条件下进行第2、3、4次提
取，结果各次总黄酮的提取率分别为0．6392％、
0．1589％、0．1266％、0．072％，表明，经过3次提
取，可以认为总黄酮基本提取完全。
2．4正交试验设计：根据已有的资料和实际情况，
选用乙醇体积分数、固液比、提取时间、提取温度作
为考察因素，以蔓荆子中总黄酮的提取率为考察指
标，选用L。(34)正交表设计，因素水平见表1。正交
收稿日期：2006—05—04
基金项目：广西教育厅科研资助项目(桂教科研E2004120号)
作者简介：尹文清(1968一>，女，湖南省郴州市人，副教授，博士，现在桂林三金药业股份有限公司博士后科研工作站从事科研工作，主要
从事天然产物化学的研究。E—mail：Yinwq0000@yahoo．eom．cn
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第2期2007年2月·217·
试验结果及方差分析见表2、表3。
表1因素水平
Table1 Factorsandlevels
表2 L，(34)正交试验结果
Table2 ResultsofL9(34)orthogonaltest
方差来源自由度离差平方和 方差 F值 显著性
实验结果分析可知，影响蔓荆子总黄酮提取的
主次因素为D>A>B>C，即提取温度>乙醇体积
分数>固液比>提取时间。最佳提取工艺为
A。B。C。D。，即5倍量的体积分数为70％的乙醇在85
荆子各i0g，按最佳工艺条件平行操作，测定吸光
度，根据回归方程得出蔓荆子中总黄酮的提取率，结
果见表4。
表4最佳工艺的验证
Table4 Resultsofoptimumtechnology
结果表明：用最佳工艺条件提取，总黄酮的提取
率均高于其他各正交试验值，故本最佳工艺条件合
理，同时也表明此工艺具有较好的稳定性。
3讨论
3．1 蔓荆子中所含的黄酮类化合物一般以苷元的
形式存在，易溶于氯仿、醋酸乙酯、乙醇、甲醇等有机
溶剂中，难溶于水。所以在提取后采取了浓缩后水
沉，除去一些水溶性有色物质，以降低分光光度法测
定总黄酮的误差。
3．2蔓荆子中总黄酮的最佳提取条件为：乙醇的体
积分数为70％，固液比为1：5，提取时间为4h，提
取温度为85℃。方差分析表明，提取温度和乙醇的
体积分数是影响提取效果的显著因素，因此在提取
过程中要注意控制温度。蔓荆子中的黄酮类化合物
具有多种药理活性，有着良好的开发应用前景；该提
取工艺具有稳定性好、黄酮得率高、操作简单、生产
成本较低的优点，适用于工业生产，为开发蔓荆子总
黄酮提供了较好的理论基础。
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℃下提取4h为最佳提取工艺。方差分析可知，A因 C中h医am中．髫玉器；；嬲i轰：Z如鳓跏删帼外医靴
素和D因素为显著因素，B因素和c因素为不显著 [3|Zh⋯angZ。Z,一“!’．金nal登沁o!．vite。xina。ndp-h．ydrox．ybenzo，ic
因素，即提取温度、乙醇的体积分数对提取蔓荆子总 I-J]．NatProdResDev(天然产物研究与开发)，1994，6(3)：
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2．5最佳提取工艺的验证：精密称取3份干燥的蔓 c[J]hem．iL，c笛等i艺霉i乞了(筝豸筠?裟；，1裟，do)．iffer。e，tn。一嚣蓍8
(上接第188页)
植物忽地笑中主要次生代谢物，加兰他敏的氢溴酸
盐已被国内外用于轻至中度阿尔茨海默综合症的治
疗。通过对忽地笑中有效成分加兰他敏的分析评价，
对进一步开发利用石蒜属资源提供了实验依据。
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万方数据
正交设计优选蔓荆子中总黄酮的提取工艺
作者： 尹文清， 陈柳生， 王力生， 张青松
作者单位： 尹文清,陈柳生,张青松(广西师范大学化学化工学院,广西,桂林,541004)， 王力生(桂林三
金药业股份有限公司,广西,桂林,541004)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(2)
被引用次数： 1次

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