全 文 ：中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1873·
金莲花药材HPLC指纹图谱研究
马英丽，胡 冰，田振坤，苏连杰
(黑龙江中医药大学药学院，黑龙江哈尔滨150040)
摘要：目的建立金莲花药材的HPLC指纹图谱。方法以荭草苷为内标物，采用HPLC法分析10个不词产地
金莲花样品的黄酮苷，并进行相似度计算。色谱条件：HypersilC-s柱(200mm×4．6mm，5“m)，流动相为甲醇一水
梯度洗脱，体积流量为1．0mL／min，检测波长340nm，柱温45℃。结果本研究建立的分析方法有较好的重复
性．不同产地的金莲花药材色谱峰面积比值有一定的差异。结论本法操作简便，重现性好，可用于不同产地药材
的指纹图谱的测定和质量评价。
关键词：金莲花；指纹图谱；高效液相色谱法
中图分类号；R282．7 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)12—1873—03
HPLCFingerprintofFlosTrollii
MAYing—li，HUBing，TIANZhen—kun，SULian—jie
(CollegeofPharmacy，HeilongjiangUniversityofTraditionalChineseMedicine，Harbin150040，China)
Keywords：FlosTr llii；fingerprint；HPLC
金莲花为毛茛科植物金莲花Trolliuschinensis
Bunge的干燥花，广泛分布于我国东北、华北和内蒙
古地区。近年来研究结果表明，金莲花有抑菌和抗病
毒的作用，其有效成分是黄酮类化合物[1]。文献报道
金莲花药材以总黄酮为定量指标，也有人使用薄层
扫描、高效液相色谱法通过测定荭草苷和牡荆苷的
量来控制金莲花药材的质量[2矗]。在大部活性成分尚
不清楚的情况下，而测定总成分或是一两个化学成
分的量还不能真正反映原药材质量的稳定性。指纹
图谱能够为科学评价与有效控制金莲花质量提供新
方法，因此笔者在多年对金莲花化学成分和提取工
艺研究的基础上，用HPLC法研究了不同产地金莲
花药材的指纹图谱。这一研究将有助于金莲花药材
以及提取物和制剂的质量控制。
1实验材料
1．1 仪器试剂：日本岛津LC一2010A液相色谱
仪；日本岛津化学工作站；SPD一10A检测器；
AB204一N型1／10万电子分析天平；甲醇(色谱试
剂，美国DIMA公司)；磷酸(色谱试剂，天津市科
密欧化学试剂开发中心)。
1．2 供试样品：荭草苷样品为自制，经结构鉴定、
HPLC分析，质量分数为98．3％；金莲花样品共10
批，经黑龙江中医药大学生药学教研室苏连杰教授
鉴定为毛茛科植物金莲花TrolliuschinensisBunge
的干燥花，见表1。
表1金莲花样品来源
Table1 SamplesourcesofFlosTrollii
样品号 样品来源 样品号 样品来源
1 河北围场 6 黑龙江东宁
2 黑龙江塔河 7 河北廊坊
3 内蒙牙克石 8 河北石家庄
4 内蒙赤峰 9 黑龙江黑河
5 河北沽源 lo 内蒙古根河
2方法与结果
2．1对照品溶液的制备：精密称取荭草苷对照品适
量，用甲醇配制成0．2mg／mL的溶液。
2．2供试品溶液的制备：精密称取金莲花样品3．0
g，置于具塞三角瓶中，加入50mL甲醇，浸泡24h，
称质量，超声提取40rain后再称质量，损失部分用
甲醇补足，滤过，滤液定容于50mL量瓶中，过
0．45弘m微孔滤膜，备用。
2．3 色谱条件：HypersilC18柱(200mm×4．6
mm，5肛m)(大连依利特科学仪器有限公司)，流动
相为水(A)一甲醇(B)，采用线性梯度洗脱程序：o～
30rain(8％B～15％B)，30～70rain(15％B～
9％B)，70～130rain(19％B～45％B)，体积流量
为1．0mL／min，检测波长340nm，柱温45℃。
收稿日期：2006—01—29
基金项目：哈尔滨市科技攻关计划项目(2004AA3CSl70—1)
作者简介：马英丽(～)，女，教授，博士生导师。研究方向：中药活性成分及质量标准化研究。
Tel：(0451)82196178E—mail：mylt666@sina．com
万方数据
·1874· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
2．4方法学考察
2．4．1精密度试验：精密称取1号样品，按供试品
溶液制备方法操作，连续进样6次，记录指纹图谱。
结果表明，各色谱峰的相对保留时间和其相对峰面
积比值基本一致，RSD为1．3％～2．8％，符合指纹
图谱要求。
2．4．2重现性试验：精密称取1号样品6份，按供
试品溶液制备方法操作，分别进样，记录指纹图谱。
结果表明，各色谱峰的相对保留时间和其相对峰面
积比值基本一致，RSD为1．7％～4．6％，符合指纹
图谱要求。
2．4．3稳定性试验：精密称取1号样品，按供试品
溶液制备方法操作，分别在0、4、8、12、24h测定，记
录指纹图谱。结果表明，各色谱峰的相对保留时间和
其相对峰面积比值基本一致，RSD为1．2％～
3．9％，符合指纹图谱要求。
2．5金莲花的指纹图谱：以1号药材为样品，按确
定条件测定其指纹图谱，共获得21个色谱峰(图
1)。测定了10个不同产地的金莲花样品，且10个样
品的共有峰面积均在90％以上。其相对保留时间
见表2，典型色谱图见图2。其中7号峰为金莲花主
要指标成分荭草苷，将其作为内参比峰。以其色谱峰
对内参比峰的相对保留时间定性，按下式计算各色
谱峰相对于其内参比峰的峰面积比X。’
R
A B
20
』一、k立誓
0 20 40 60 80 100120 0 20 40 60 80 104)120
f／min
图1 荭草苷(A)和金莲花样品(B)指纹图谱
Fig．1Fingerprintoforientin(A)andFlosTrollii(B)
X=A。／Aisw，，A州第i个样品第J个组分的峰面
积，Ais：第i个样品的参比峰面积，W，：样品质量(g)。
表2 10批金莲花药材共有指纹峰的相对保留时间
Table2 RelativeretentionmeofcommonpeaksfortenbatchesofFlosTrollii
生——』坠———篡L一．鲤．一犟．．．!塑 ．!挚．．．!鸳 ．!鲤
t|rain
图2 10批金莲花样品指纹图谱
Fig．2FingerprintoftebatchesofFlosTrollii
2．6相似度分析：指纹图谱表征的是样品整体的特
征，进行指纹图谱比较，可以反映样品间的亲疏程
度，但是单纯的直观比较指纹图谱的峰的多少和面
积的大小，只是定性比较，而且又带有个人的主观
性。相似度可以定量地描述指纹图谱，本实验用相似
度分析对样品进行了比较，可以定量地、客观地对样
品进行评价[4]。用沈阳药科大学计算机中心编制的
“指纹图谱相似度计算软件”以夹角余弦、相关系数
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1875·
和欧氏距离作为测度，分别计算各样本的相似度，结
果见表3。可知相似度在0．90～1．00的3、4、5、7、8
号样品相似性较好，可评价为质量较好的一类。
表3相似度计算结果
Table3 Similaritydegreeofsamples
样品号欧氏距离夹角余弦相关系数 样品号欧氏距离夹角余弦相关系数
1 0．86 0．94 0．93 6 0．74 0．83 0．87
2 0．82 0．91 O．92 7 1．00 0．99 0．99
3 0．94 0．96 0．95 8 0．99 1．00 1．OO
4 0．92 O．94 0．94 9 0．88 0．93 0．95
5 0．98 1．00 0．99 10 0．86 0．94 0．95
3讨论
3．1供试品提取溶剂及提取方法的考察：试验中笔
者考察了水、60％乙醇、95％乙醇、甲醇4种提取溶
剂，水煎煮、索氏提取、超声提取3种提取方法，最后
选定使用甲醇作为提取溶剂进行超声提取的方法，
该法所得色谱峰较多，且分离度较好。
3．2流动相的确定：金莲花药材的成分较复杂，主
要为黄酮类化合物，选择单一的流动相无法分离，采
用梯度洗脱可以在整个分析时间内(130min)，各
色谱峰的峰型、分离效果均好。本实验过程中选择了
甲醇一水(H。PO。调至不同pH)、乙腈一水(H。PO。调
至不同pH)、甲醇一乙腈一水(H。PO。调至不同pH)、
甲醇一水、乙腈一水、甲醇一乙腈一水6种流动相系统，
结果甲醇一水系统分离效果最好。
3．3参照物的确定：金莲花中含有的有效成分为黄
酮苷类化合物。鉴于指纹图谱的目的是鉴别药材和
成药的质量，选定金莲花活性成分中量较高的荭草
苷作为本指纹图谱技术要求的参照物。
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Univ(沈阳药科大学学报)，2003，20(5)：360—362．
管花秦艽的生药学研究
赵志礼1，苏 洁”，王峥涛2
(1．上海中医药大学生药学教研室，上海201203；2．上海中医药大学中药研究所，上海201203)
摘要：目的对甘肃秦艽习用品——管花秦艽Gentianasiphonantha进行生药学研究。方法形态学、组织学及
理化鉴定方法。结果管花秦艽的叶较窄，子房、果实有柄，可与其近缘种秦艽G．macrophylla相区别；其根的组织
结构中出现中柱裂分现象；理化特征与麻花艽G．straminea十分相似。结论可为管花秦艽药材的研究及秦艽新
资源的开发提供资料。
关键词：龙胆属；管花秦艽；生药学研究
中图分类号：R287．i 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)12—1875—04
PharmacognosticalstudiesonrootofGentianasiphonantha
ZHAOZhi—lil，SUJiel，WANGZheng—ta02
(1．DepartmentofPharmacognosy，ShanghaiUniversityofTr ditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China；2．Ins—
tituteofChineseMateriaMedica，ShanghaiUniversityofTraditionalChineseMedicine，Shanghai201203，China)
Keywords：GentianaL．；therootsofGentianasiphonanthaMaxim．exKusnez．；pharmacognostical
study
《中国药典》规定，秦艽原植物来源为龙胆科植
物秦艽GentianamacrophyllaPa ．、麻花艽G．
stramineaMaxim．、粗茎秦艽G．crassicaulisDuthie
exBurk．或小秦艽G．dahuricaFisch．，其根入药，
具祛风湿、清湿热、止痹痛之功效‘1|。秦艽为常用中
药，临床应用广泛。但长期以来的过度采挖，以及生
收稿日期：2006—02—16
作者简介：赵志礼(】956一)，男，甘肃兰州人，理学博士，教授，主要从事中药资源学与中药品质评价研究。
Tel：(021)51322202E—mail：zhilzhao@sohu．eom
*2006届硕士生
万方数据
金莲花药材HPLC指纹图谱研究
作者： 马英丽， 胡冰， 田振坤， 苏连杰， MA Ying-li， HU Bing， TIAN Zhen-kun， SU
Lian-jie
作者单位： 黑龙江中医药大学药学院,黑龙江,哈尔滨,150040
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(12)
被引用次数： 4次

参考文献(4条)
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引证文献(4条)
1.窦武宇.罗文蓉.杨扶德 不同产地金莲花的鉴定学研究[期刊论文]-甘肃中医学院学报 2010(4)
2.张水利.苏连杰 金莲花茎叶的HPLC指纹图谱研究[期刊论文]-中草药 2012(6)
3.姜鸿.王光函.邸子真.邹桂欣.尤献民 火绒草HPLC指纹图谱初步研究[期刊论文]-辽宁中医药大学学报 2008(6)
4.李艳荣.杜义龙.潘海峰 金莲花药材高效液相色谱指纹图谱及两种黄酮类成分含量测定[期刊论文]-医药导报
2012(11)


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