全 文 ：·236· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月
血尿停经肝微粒体代谢后可抑制GMC的增殖，考
虑与血尿停由生地、水牛角粉、知母、当归、旱莲草、
生蒲黄、虎杖、三七等组成，具有养阴清热、活血化瘀
的功效有关。近年来，大量的实验研究显示，具益气养
阴、清热利湿、活血化瘀作用的中药复方能明显抑制
系膜增生性肾小球肾炎动物模型的GMC增生和系
膜基质增多[7’8]，本实验结果与体内实验结果一致。
IL一6和ET都是GMC的自分泌细胞因子，也
是重要的炎症介质。IL一6在细胞增生激活转导信号
和Ras／Map级联反应或HGF／c—met轴中起重要
作用o]。IL一6在一定浓度范围内以剂量依赖方式诱
导GMC增生[1叫，在肾小球肾炎的发病中有重要作
用[11|。ET是一种具有21个氨基酸的强烈缩血管多
肽，肾脏也是其合成的场所。ET一1是一个能导致
GMC持续增殖的细胞因子，在肾小球肾炎发病机
制中起着重要作用[12,13]。大量的体内外实验研究显
示有多种细胞因子参与GMC的增生、迁移和黏附。
在病理情况下，这些细胞因子刺激GMC过度增生，
增殖的GMC分泌出一系列细胞因子及炎症介质，使
损伤进一步扩大。随着GMC的增殖及系膜基质的增
多，最终导致肾小球硬化、肾单位毁损[14|。血尿停经
肝微粒体代谢后可明显地抑制IL一6和ET一1的产
生，推测血尿停抑制GMC增殖的机制可能是通过抑
制IL一6和ET一1的产生，打破了IL一6、ET一1和
GMC增殖之间的恶性循环而实现的。
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补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影响
唐映红1，邓常青”，刘旺华2，张秋雁2，李花2，贺福元3
(1．湖南中医学院药理教研室，湖南长沙410007；2．湖南中医学院病理生理实验室，湖南长沙410007；
3．湖南中医学院药剂学教研室，湖南长沙410007)
摘 要：目的 研究补阳还五汤(BYHWD)中生物碱、多糖、苷、苷元4类有效部位对大脑中动脉闭塞(MCAO)
后局灶性脑缺血大鼠脑梗死的作用。方法用颈内动脉线栓法建立大鼠局灶性脑缺血模型，检测脑梗死体积，并比
较其神经功能行为评分。结果脑缺血6h，模型组脑梗死体积显著增大(尸收稿日期：2004—05—21
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30171132)；教育部高等学校学术与技术带头人资助项目；湖南省优秀博士论文作者科研项目
作者简介：唐映红(1962一)，女，湖南株洲人，医学硕士，副研究员，主要从事心脑血管药理研究。Tel：(0731)5381272
*通讯作者Tel：(0731)5381111E—mail：dehangq@sohu．corn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月·237·
(P<0．01)；生物碱、多糖、苷、苷元各组脑梗死体积较模型组缩小(P<0．05、0．01)；生物碱、苷、苷元和多糖可使
MCAO大鼠神经功能行为评分下降(P织出现梗死，补阳还五汤4类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元能减少脑梗死体积，改善脑缺血后神经行为症状。生
物碱和苷的抗脑缺血作用较强，这可能是补阳还五汤抗缺血性脑损伤的部分物质基础。
关键词：补阳还五汤；有效部位；脑缺血；大脑中动脉闭塞
中图分类号：R285．5 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)02—0236一04
EffectoffourkindsofactivefractionsofBuyangHuanwuDecoction
oncerebralinfarctionvolumeinfocalcerebralischemiarats
TANGYing—hon91，DENGChang—qin92，LIUWang—hua2，ZHANGQiu—yan2，LIHua2，HEFu—yuan3
(1．DepartmentofPharmacology，HunanCollegeofTr ditionalChineseMedicine，Changsha410007，China；
2．DepartmentofPathophysi0109y，HunanCollegeofTraditionalChineseMedicine，Changsha410007，China；
3．DepartmentofPharmaceutics，HunanCollegeofTr ditionalChineseMedicine，Changsha410007，China)
Abstract：0bjectiveToinvestigatetheffectoffourkindsofactivefractions(alkaloid，polysaccha—
ride，glycoside，aglycone)ofBuyangHuanwuDecoction(BYHWD)onthevolumeofcerebralinfarction
andthescoresofnervousf nctionbehaviorinfocalcerebralischemiaratsftermiddlecerebralarteryOC—
clusion(MCAO)．MethodsThemodelratsofMCAOwereinducedbythemethodofnylonmonofilament
viatheinternalcarotidarteryfor6h。imageanalysistechniquewassedtocalculatethevolumeofcerebral
infarctionandtorecordthescoresofnervousf nctionbehavior，thentOcompareth m．ResultsAfter
cerebralischemiafor6h。bothevolumeofeerebralinfarctionofratsinthemodelgroupandthescores
ofthenervousf nctionbehaviorwereincreasedmarkedly(Pratsinalkaloid，polysaccharide，glycoside，andaglyconegroupswersignificantlylowerhanthatofrats
inthemodelgroup(Ppolysaccharide，glycoside，andaglyconegroupsweresignificantlylowerthanthatofratsinthemodel
group(P<0．05，0．01)．EffectsofalkaloidanglycosidewerSUperiortothatofpolysaccharideandagly—
cone．ConclusionAfterMCAO，thebraintissueoccursinfarction．Thefourkindsofactivefractionsof
BYHWDcandecreasethevolumeofcerebralinfarctionofratsandimprovethenervousf nctionbehavior
symptomofratsafterMCAO．Effectsofalkaloidanglycosidearesuperiortothatofpolysaccharideand
aglycone。whichmaybet epartialsubstancebasisofBYHWDantagonisingcerebralischemiainjury．
Keywords：BuyangHu nwuDecoction(BYHWD)；activefractions；cerebralischemia；middlecere—
bralarteryocclusion(MCAO)
脑血管病的发病率居各种老年疾病的前3位，
其中以缺血性脑血管病居多，并有逐渐上升和年轻
化的趋势，严重危害着人类健康，影响着病人的生活
质量。文献曾报道以益气活血法组方的复方补阳还
五汤及其有效部位可对抗脑缺血再灌注损伤，调节
缺血后热休克蛋白70的表达[1]。另有研究表明，补
阳还五汤及其有效部位可扩张脑血管、改善脑循环、
对抗脑缺血后兴奋性氨基酸的毒性等[2]。脑梗死灶
大小是准确评估脑缺血的指标，对于评价药物抗脑
缺血的作用具有重要的应用价值。为进一步探讨该
方抗脑缺血的物质基础，在前段研究基础上，本实验
研究该方4类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元对脑
缺血大鼠脑梗死体积的影响，以进一步明确该方的
作用和有效物质基础。
1材料与方法
1．1 实验动物：清洁级SD大鼠，雌雄兼用，体重
(305．o±14．5)g，中南大学湘雅医学院动物学部提
供，合格证号：医动字第20—010号。
1．2药物：补阳还五汤原方由黄芪60g，赤芍9g，
川I芎6g，当归9g，地龙9g，桃仁9g，红花9g组
成。上述药物由本院药剂科购买并鉴定，按该方组成
比例提取各类有效部位，调质量浓度为：生物碱
5．25mg／mL，多糖20．25mg／mL，苷元1．65mg／
mL，苷33．66mg／mL。尼莫地平注射液购自浙江一
新制药股份有限公司，规格20mg／100mL，批号
01092001。
1．3主要试剂和仪器：多聚赖氨‘酸(Poly—L—
Lysine)为武汉博士德生物有限公司提供，批号
03042512。水合氯醛购自上海五联化工厂，批号
20020624。直径0．26mm单尼龙线为市售，使用前
剪成5cm长线段，筛选出前端光滑、钝圆、大小一
致者，于2cm处作好标记，前段3cm浸入0．1％
万方数据
·238· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月
Poly—L—Lysin，5m n，自然晾干，临用前在前端蘸取
肝素。大鼠脑垫(美国ZivicMiller公司生产)。
2，3，5一氯化三苯四唑(TTC)，为Sigma公司产品，
用生理盐水配成2％TTC溶液。AB204一wO型电
子天平(瑞士梅特勒一托力多有限公司生产)；马头牌
GPS型双极电凝器(上海医用激光仪器厂生产)。
1．4动物分组及给药：大鼠按性别、体重随机分为
8组，即生物碱组(0．0525 g／kg)、苷组(0．3366
g／kg)、尼莫地平组(O．002g／kg)、假手术组(生理
盐水)、模型I组(生理盐水)、模型Ⅱ组(蒸馏水)、
多糖组(o．2025g／kg)、苷元组(O．0165g／kg)。前
5组ip给药，给药体积为10mL／kg，于缺血前5
min注入；后3组ig给药，体积为10mL／kg，于缺
血前1h给药。
1．5模型制备：参照文献方法[31采用左侧颈内动脉
单尼龙线线栓法制备大鼠大脑中动脉闭塞
(MCAO)局灶性脑缺血模型，并予以改进。术前禁
食12h，自由饮水。实验前ip10％水合氯醛(o．35
g／kg)麻醉，保留自主呼吸，仰卧位固定，术中体温
由肛温计监测，并用白炽灯加热维持肛温在36．5～
37℃，防止低温对脑缺血的影响。大鼠颈正中切口，
分离暴露左侧颈总动脉、颈外动脉、颈内动脉和翼腭
动脉，分离过程中电凝血管小分支以防出血。结扎翼
腭动脉，在距颈总动脉分叉1cm处结扎颈外动脉，
并于结扎处远心端用电凝器灼断以游离颈外动脉。
动脉夹夹闭颈总动脉，提起颈外动脉游离端使其与
颈内动脉成一直线，于颈外动脉结扎处近心端约
0．5em处剪一切口，将线栓蘸取肝素后，由切口向
颈内动脉插入至有阻力感停止(18．0±0．5mm)，
固定线栓。尼龙线插入深度从颈总动脉分叉处计。手
术后动物保温(28℃左右)饲养，阻闭6h后处死
动物。假手术组仅结扎颈外动脉、翼腭动脉，不插入
线栓。
1．6神经功能行为评分：脑缺血6h后采用盲法评
估记录神经功能行为评分，参考文献方法[4]，各动物
各项积分累加为神经功能行为评分值。
1．7脑梗死体积测定：神经功能行为评分完成后，
动物麻醉后断头处死，迅速取脑，生理盐水冲洗残
血，置0℃生理盐水中15min，再取出置于大鼠脑
垫中，间隔2mm连续做6个脑组织冠状切片，迅速
放人2％TTC溶液中，37℃恒温孵育30min，染
色后置4％甲醛中固定。24h后将脑片用数码相机
(Kodak，DC240，美国)拍照，输入计算机，用多功
能真彩色病理图像分析仪(美国MEDIACYBER—
NETICSIMAGE—ProTlusVersion4．0软件)测
量梗死灶面积(玫瑰红色区为正常脑组织，苍白色
区为梗死区)，各脑片梗死面积之和乘以厚度(2
mm)为总的梗死体积。以梗死灶体积占全脑体积的
百分率进行分析。
1．8数据处理：考虑给药途径对药效的影响，ig给
药各组与ip给药各组分别进行统计分析。数据均用
；±s表示，用SPSSIO．0版统计软件进行统计。多
组间比较用方差分析，组间两两比较方差齐时用
LSD检验，方差不齐时用Dunnett’ST3检验。
2 结果
与假手术组比较，模型I组和模型Ⅱ组相对脑
梗死体积显著增加(P生物碱、苷和尼莫地平组相对梗死体积均显著缩小
(P也可使相对脑梗死体积显著缩小(P类有效部位中，以生物碱缩小相对梗死体积的作用
最强，苷次之，而苷元和多糖的作用相对较弱。神经
功能行为积分比较表明，缺血后各组动物均出现神
经功能损害症状，各组动物神经功能行为积分值均
显著高于假手术组(P物碱、苷和尼莫地平组神经功能行为积分值均有所
下降(P<0．05、0．01)，与模型Ⅱ组相比，多糖和苷
元组积分值也明显下降(P效部位中，以生物碱和苷降低神经功能行为积分值
的作用较强，多糖和苷元的作用次之。结果见表1。
表1 各组大鼠脑梗死体积和神经功能行为评分比较(i±s)
Table1 Comparisonofcerebralinfarctionvolumeand
nervousf nctionbehaviorscoresofratsinall
experimentalgroups(z士s)
与假手术组比较：z、p<0．05△△P<0．01
与模型I组比较：4P<0．0544P<0．01
与模型Ⅱ组比较：’P<0．05一P<0．01
ap<0．05Az、p<0．01F5Sham—operationgroup
4P’P<0．05‘‘P<0．01USmodelgroupI
3讨论
局灶性脑缺血动物模型是人们研究脑梗死的理
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月·239·
想方法之一。大脑中动脉区是脑梗死的好发部位，因
此，对猫、大鼠等动物用手术阻断一侧大脑中动脉，
即可形成局灶性脑缺血模型。大鼠脑血管解剖特点
与人类比较类似，并且损伤部位恒定，实验重复性
好。因此本研究采用大鼠线栓法MCAO局灶性脑
缺血模型来研究补阳还五汤4类有效部位的作用。
在制备模型中，选择直径为0．26mm尼龙线，可避
免烧灼使线栓线头大小不均匀对实验结果的影响；
线栓前端涂poly—L—lysine可增加缺血程度的稳定
性[51；且插入时蘸取肝素可防止线栓部位血栓形成。
作为评价抗脑缺血效应的指标，脑梗死体积测
定是最直接的指标。TTC水溶液是一种无色溶液，
它是呼吸链中吡啶一核苷结构酶系统的质子受体，是
脂溶性光敏感的复合物，还原后在正常组织中呈现
红色，而缺血组织不产生此变化而呈苍白色。故
TTC染色用于测定梗死灶大小具有快速、直观地确
定梗死范围的优点，且境界清楚。有文献报道，脑组
织在缺血6h时，TTC染色显色的范围才与HE染
色显示的缺血区域一致。故本研究选择了线栓法
MCAO局灶性脑缺血模型，观察大脑中动脉闭塞后
6h脑组织梗死体积的变化，并观察补阳还五汤4
类有效部位生物碱、多糖、苷、苷元对脑缺血的保护
作用。结果表明，由补阳还五汤中提取的4类有效部
位均有缩小梗死灶体积的作用，对照药尼莫地平也
可使梗死灶体积缩小。提示该方中生物碱、多糖、苷、
苷元具有确切的抗脑缺血作用，这4类有效部位可
能为该方治疗缺血性脑血管病的主要物质基础。这
4类有效部位中，以生物碱作用最强，苷次之，而苷
元和多糖缩小梗死体积的作用较弱。这与以往的研
究基本相似嘲。神经功能积分也表明，4类有效部位
均可使缺血后神经功能行为积分下降，其中以生物
碱和苷的作用较强，这也佐证了生物碱和苷可能为
该方中重要的抗脑缺血作用的有效部位。对补阳还
五汤抗脑缺血有效部位及其机制的深入研究，必将
对阐明该方作用的物质基础及揭示脑缺血的治疗效
果具有重要的理论意义和应用价值。
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龙葵碱对H22荷瘤小鼠细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响
季宇彬，王胜惠，高世勇，汲晨锋，邹翔
(哈尔滨商业大学药物研究所博士后科研工作站，黑龙江哈尔滨 150076)
摘 要：目的 观察龙葵碱对H。。荷瘤小鼠肿瘤细胞膜流动性和膜蛋白水平的影响。方法 采用荧光探针DPH标
记法测定肿瘤细胞膜流动性，考马斯亮蓝法测定肿瘤细胞膜蛋白水平。结果龙葵碱可显著降低H。。荷瘤小鼠肿瘤
细胞膜流动性，降低H：。小鼠肿瘤细胞膜蛋白水平。结论 龙葵碱是通过影响肿瘤细胞膜的流动性和肿瘤细胞膜上
的蛋白水平恢复细胞的正常生理活性而达到抗肿瘤作用。
关键词：龙葵碱；H。。荷瘤小鼠；膜流动性；膜蛋白水平
中图分类号：R286．91 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)02—0239—03
收稿日期：2004—06—15
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30400591)；黑龙江省自然科学基金资助项目(D0024--13)；哈尔滨市青年科学基金资助项目
(2004AFQXJ035)
作者简介：季宇彬(1956一)，男，博士，教授，博士生导师，多年来一直致力于中药药理、肿瘤药理及分子药理学研究。
万方数据
补阳还五汤4类有效部位对局灶性脑缺血大鼠脑梗死体积的影
响
作者： 唐映红， 邓常青， 刘旺华， 张秋雁， 李花， 贺福元， TANG Ying-hong， DENG Chang-
qing， LIU Wang-hua， Zhang Qiu-yan， LI Hua， HE Fu-yuan
作者单位： 唐映红,TANG Ying-hong(湖南中医学院药理教研室,湖南,长沙,410007)， 邓常青,刘旺华
,张秋雁,李花,DENG Chang-qing,LIU Wang-hua,Zhang Qiu-yan,LI Hua(湖南中医学院病理
生理实验室,湖南,长沙,410007)， 贺福元,HE Fu-yuan(湖南中医学院药剂学教研室,湖南
,长沙,410007)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(2)
被引用次数： 15次

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