全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1183·
秦皮提取工艺的正交试验研究
顾苏俊，刘 萍，张玉萌，马凤彩，马桂花
(解放军总医院药品库，北京100853)
秦皮为木犀科植物苦枥白蜡树Fraxinus
rhychophyllaHance、白蜡树F．chinensisRoxb．、尖
叶白蜡树F．chinensisRoxb．var．acuminata
Lingelsh或宿柱白蜡树F．stylosaLingel h．的树干
皮。具有清热解毒、清肝明目的功效，用于热痢、泄
泻、赤白带下、目赤肿痛、目生翳膜等症。收载于《中
国药典92005年版一部。其主要有效成分为秦皮甲
素(aesculin)等。原材料采用HPLC法测定秦皮甲
素和秦皮乙素的总量为控制标准，方法较繁琐。本实
验采用正交试验优选工艺，并以改良的HPLC法测
定秦皮甲素，取样量小，而且简便、快速、准确，在实
际工作中同样可达到控制秦皮质量的目的。
1材料
美国安捷伦1050高效液相色仪，离心机(中国
上海鑫晶医疗器厂)。秦皮购自北京同仁堂，经鉴定
为木犀科植物白蜡树F．chinensisRoxb．干燥枝皮。
秦皮甲素对照品购自中国药品生物制品检定所，甲
醇为AR级。
2方法与结果
2．1 因素水平的确定：以粉碎粒度、加水量、煎煮时
间、温度为因素，因素水平见表1。
表1因素水平
Table1 Factorsandlevals
2．2提取方法：取秦皮样品共9份，各50g，按照正
交试验设计条件进行处理，提取浓缩至含秦皮原药
材1g／mL。取该浓煎液2mL，加入醋酸乙酯2mL，
振摇3rain，离心3min，吸出醋酸乙酯，同法操作6
次，合并醋酸乙酯，75。C水浴上挥干溶剂，密塞。
2．3秦皮甲素的HPLC测定
2．3．1色谱条件：色谱柱C。。；流动相甲醇一水(24：
76)，体积流量1．2mL／min，检测波长348nm，灵敏
度0．04，进样量10肛L。理论塔板数以秦皮甲素计大
收稿日期：2005—12-27
于2000，分离度为6．0。
2．3．2对照品溶液制备：精密称取秦皮甲素对照品
适量，在80℃干燥至恒重，加流动相配制成0．2
mg／mL的对照品溶液，备用。
2．3．3 标准曲线制作：精密量取对照品溶液
20．00、16．00、8．00、2．00、1．00mL，分别置25mL
量瓶中，加流动相稀释至刻度，摇匀，分别取10肛L
进行测定。以质量浓度为横坐标，峰面积为纵坐标，
进行回归分析，得回归方程y=59．13X一7．0260，
r一0．9998，结果表明秦皮甲素在0．07～6．00mg
与峰面积的线性关系良好。
2．3．4测定：用少量流动相超声溶解提取物，移至
25mL量瓶中，加流动相稀释到刻度，摇匀，用微量
注射器准确移取10弘L，进行分析。外标法定量。
2．4结果：正交试验结果见表2，方差分析见表3。
表2正交设计结果
Table2 Resultsoforthogonaltest
试验号 A B C D 秦皮甲素／(mg·mL_1)
R 0．0909 0．4718 1．0216 0．5983
5．8793
5．802
6．8413
4．7016
6．6552
7．6839
7．4188
6．1344
6．2418
A
B
C
D
误差
总平方和
0．0909 2 0．0455 0．3248 PdO．01
0．4718 2 0．2359 1．6838 PdO．Ol
1．02l6 2 0．5108 3．6460P<0．0l
0．5983 2 0．2992 2．1356 PdO．01
2．5217 18 0．1401
126．5561
提取条件重要排序为C>D>B>A，由于残留
3
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6』t
7
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1”如钾
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o髓托氐
万方数据
·1184· 中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
指标越小越好，所以较好的提取方法应为
C：D。B。A。，即煎煮120min、125。C、粉碎粒度为
8mm×3．5mITl、加水8倍。
2．5验证试验：为进一步考察上述优选工艺的稳定
性，选用上述优化条件，取50g药材，采取用水8倍
量、煎煮120rain、125℃、粉碎粒度8mm×3．5
mm、重复3次，结果所得秦皮甲素的质量分别为
5．44、5．38、5．67mg。
3讨论
秦皮始载于《神农本草经》，列为中品。秦皮甲素
为秦皮的有效成分，具香豆素类母体结构，收载于
《中国药典92005版一部中，采用HPLC法测定秦皮
甲素和秦皮乙素的总量为控制标准，方法较繁锁。有
关文献对秦皮进行测定分别有HPLC法、容量法、
紫外分光光度、纸色谱比色法、电泳一光密度计法、薄
层色谱一荧光法等法[1’2|。经多种条件比较，实验用改
良的HPLC法测定秦皮甲素。
曾考虑将秦皮乙素一起测定，但由于提取效果
不佳，出峰结果不理想而放弃，有待于今后继续
研究。
References：
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QinpiGranulebyHPLCEJ3．TraditCh nDrugResClin
Pharmacol(中药新药与临床药理)，2000，11(3)：172．
I-z]LiangYA，ZhuJJ．Quantitativede erminationof esculinin
CortexFraxiniCaulisbysecond—derivativedifferentialpulse
polarographyI-J1．PharmJChinPLA(解放军药学学报)，
2000，16(5)：254．
HPLC法测定养血当归精合剂中芍药苷
吴瑾瑾1，石森林2，徐菲拉3
(1．杭州市第四医院，浙江杭州 310003；2．浙江中医药大学，浙江杭州310000；
3．金华市中心医院，浙江金华312000)
养血当归精合剂由当归、J1I芎、熟地、黄芪、白
芍、阿胶、甘草等组成，具有补虚益气、养血调经的功
效，主要用于妇女气血两虚所致月经不调、闭经及痛
经等病症。该品目前有15家企业生产，但是临床疗
效不稳定。究其原因，是原生产工艺较粗糙，缺少量
化质量控制标准。为保证药品质量，进一步修订药品
质量标准，本实验采用HPLC法测定养血当归精中
芍药苷。
1材料与仪器
AgiLent1100高效液相色谱仪、UV检测器(美
国AgiLent公司)，CQ250型超声波清洗器(上海超
声波仪器厂)，PL5124型纯水机(美国PALL公
司)，C。。固相萃取小柱(江苏汉邦科技有限公司)，
AB一204一N电子天平(梅特勒一托利多)，lOlA一2
电热鼓风箱(上海市实验仪器总厂)，SX2—4～10箱
式电阻炉(沈阳市节能电炉厂)。
芍药苷对照品(批号0736—200117，中国药品生
物制品检定所)，甲醇为色谱纯，其他试剂均为分析
纯，养血当归精合剂(150mE／瓶)由浙江中医药大
学药学院提供。
2方法与结果
收稿日期：2006一01—1】
2．1 色谱条件：ZorbaxXDB—C18(150mm×3．9
mm，5弘m)色谱柱；流动相：甲醇一水一磷酸(35：65：
0．1)；检测波长：230nm；柱温：室温；体积流量：0．8
mL／min。理论板数按芍药苷峰计算不低于3500。
2．2溶液的配制
2．2．1供试品溶液的制备：准确移取养血当归精合
剂4．0mL于50mL量瓶中，加入甲醇36mL，密
塞，摇匀，冰箱放置6h以上，滤过，残渣用少量甲醇
洗涤，合并滤液，滤液水浴蒸干，残渣用蒸馏水溶解
于5mL量瓶中，以蒸馏水稀释至刻度，密塞，摇匀，
准确吸取该溶液300肛L于C，。固相萃取小柱(15
mm×8mm，500mg)上，分别用蒸馏水3．0mL、
35％甲醇5．0mL洗脱，收集35％甲醇洗脱液于5
mL量瓶中，并用流动相稀释至刻度，密塞，摇匀，过
0．45肛m微孔滤膜，即得供试品溶液。
2．2．2对照品溶液的制备：芍药苷对照品真空干燥
24h后，取约17mg，精密称取，置10mL量瓶中，
用甲醇溶解并稀释至刻度，密塞，摇匀，即得对照品
储备液。精密吸取此对照品储备液40弘L于10mL
量瓶中，用流动相稀释至刻度，密塞，摇匀，即得对照
品溶液(含芍药苷6．8ttg／mL)。
万方数据
秦皮提取工艺的正交试验研究
作者： 顾苏俊， 刘萍， 张玉萌， 马凤彩， 马桂花
作者单位： 解放军总医院药品库,北京,100853
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 7次

参考文献(2条)
1.Sun D M;Fan S L;Tu Y S Determination of aesculin in Qinpi Granule by HPLC[期刊论文]-中药新药与临床
药理 2000(03)
2.Liang Y A;Zhu J J Quantitativedetermination of aesculin in Cortex Fraxini Caulis by second-
derivative differential pulse polarography[期刊论文]-解放军药学学报 2000(05)

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10. 林远凤.黄燕萍 高效液相色谱法测定复方南板蓝根版中秦皮乙素含量[期刊论文]-中国药业2009,18(13)

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7.王晶.李红玉.王洪新 秦皮中秦皮乙素分离纯化的工艺研究[期刊论文]-中成药 2009(2)


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