全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·431·
内存在一定程度的变异，所研究的5个荚果中，H1分
为2个RAPD带型，H9为2个，H10为3个，H14只
有一株在一个引物中有一条不同的条带，H23则所有
带型均相同，5个荚果群体内GS均很高，最小也为
92．5926％，说明同一荚果群体在组织培养过程中其
变异程度相当小，运用组培方法建立霍山石斛稳定的
无性快繁体系是切实可行的，不但能挽救濒临灭绝的
霍山石斛，而且能满足市场的大量需求；同时，H1、
H9、H10、H23群体间的GD较小，H14与其他4个
荚果的则较大，说明H14是距其他4个荚果亲缘关
系较远的一个群体，很有可能不是同一种，在产地就
已经混杂，当然这一结果还有待于进一步的研究。但
至少首次从分子水平证明在霍山产地，霍山石斛种群
内存在较大的差异，因此确定霍山石斛种源真伪、保
持遗传稳定性，是建立适合市场需求的稳定的霍山石
斛快繁体系首要的前提条件。
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不同种质资源及贮藏条件对缬草种子发芽率的影响
黄宝康，郑汉臣。，张巧艳，秦路平
(第二军医大学药学院，上海200433)
摘要：目的探讨不同种质资源、贮藏条件及萌发温度对缬草种子发芽率的影响。方法采用不同条件贮藏的缬
草种子进行常规种子发芽试验，计算不同萌发条件下的种子发芽率。结果 不同来源的缬草种子发芽率有较大差
异，缬草的种子发芽率要高于其变种宽叶缬草的发芽率，栽培缬草的种子发芽率要远高于野生缬草种子的发芽率。
贮存时间、贮存温度、萌发温度等因素对缬草种子发芽率均会产生影响。结论 为保持缬草种子的发芽率，贮藏过
程中要保持适当的低温和透气性，要长期保存缬草种子，则必须要以较低的温度保存；种子繁育要在适宜的时间和
温度等条件下进行。
关键词：缬草；种质资源；贮藏条件；发芽率
中图分类号：R282．21 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)03—0431—04
Effectsofvariousseedsourcesandifferentstorageconditions
onseedgerminationrateofValerianaofficinalis
HUANGBao—kang，ZHENGHan—then，ZHANGQiao—yan，QINLu—ping
(SchoolfPharmacy，SecondMilitaryMe icalUniversity，Shanghai200433，China)
Abstract：ObjectiveToinvestigatetheffectsof eedsourcesandtorageconditionsontheeedger—
minationrateofValerianaofficinalis．MethodsTheseedsofV．officinalisunderdifferentstoragecondi一
收稿日期：2004—07—08
基金项目：国家自然科学基金资助项目(30270152)
作者简介：黄宝康(1969一)，男，浙江东阳人，第二军医大学药学院副教授，在读博士研究生，主要从事中药资源与品质评价及中药新药
的研究与开发工作。 E—mail：hbk999@sohu．com
*通讯作者：Tel(021)25074577ECmail：hczheng@sohu．tom
万方数据
·432· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
tionswereusedasmaterialsforgerminationtest，andthegerminationratewascalculatedandcompared
accordingtOtheresults．ResultsTheseedgerminationrateofvalerianssvariedwithdifferentsources．
TheseedgerminationrateofV．officinalisishigherthanthatofV．officinalisvar．1atifolia，andtheseed
germinationrateofcultivatedvalerianasmuchhigherthanthatofthewildplant．Thestorageperiods，
storagetemperature，andgerminationconditionsalsoaffectthegerminationrate．ConclusionTomain—
taintheseedgerminationrate，these dofV．officinalisshouldbestoredinconditionswithventilationnd
atsuitablelowtemperature．Lowert mperaturehelpstoprolongtheseedlifewithrelativelyhighgermina—
tionrate．Valerianaseedshouldalsobepropagatedatavailabletemperatureconditionsinproperseasons．
Keywords：Valerianaoff cinalisL．；seedsource；storagec ndition；germinationrate
缬草Valeriana锨cinalisL．为败酱科缬草属
植物，又名欧缬草。在欧洲已有悠久的应用历史，既
可作为香料植物，也可作为花卉和药用，因其有良好
的镇静催眠和抗抑郁作用，在欧洲及美国常被用于
治疗轻、中度失眠，缬草及其制剂已被英、美、法、德、
俄、意等22国药典收载[1]。目前缬草提取物及其制
剂在国际上十分畅销，连续几年销售额列植物药前
10名[2]，国内外对缬草的研究也引起了人们的关
注，不少国家已经对其进行开发，缬草在《中华人民
共和国药典》中虽然未被收载，但其制剂和缬草油等
早已被广泛使用。
缬草在我国的分布主要在西南及东北地区，其
中西部和西南部最多，研究表明产于我国的缬草也
具有缬草素类镇静催眠活性成分，具有开发利用价
值。缬草在我国分布虽然较广，但资源量并不十分丰
富，我国多为利用野生缬草资源，不利于大规模生
产。在我国由于近年旅游开发以及环境的破坏和无
节制的采挖，野生状态的缬草资源已急速下降。而野
生状态下缬草种子(瘦果)多数不育，发芽率很低。为
了探讨缬草种子的繁殖技术，为实现缬草的人工栽
培或者实施GAP提供科学依据，笔者收集了不同
产地的缬草种子进行了发芽试验，并对影响种子发
芽的因素进行了考察比较。
1材料
2002年5月一2003年9月分别从本校植物园、
浙江天目山、北京植物园、沈阳植物园、山西五台山
树木园收集缬草种子，产于欧洲的欧缬草种子由布
拉格植物园惠赠(表1)，所有种子材料及标本均经
笔者鉴定。将种子筛选，除去空瘪种子，分别采用透
气纸袋与聚乙烯袋贮存，常规保存方法参照《中药材
生产质量管理规范》的基本要求，控制温度与湿度条
件，温度为(4±1)℃，相对湿度小于50％；低温保存
条件为一(20±1)℃，相对湿度小于50％。
2方法与结果
2．1 常规发芽试验(参照农作物种子检验规程
GB／T3543．4的规定)：取缬草种子100粒，于30
vC温水浸润4h，置培养皿中(垫3层吸水滤纸，每日
加水保持滤纸湿润但水不要超过纸面)培养，观察发
芽情况，记录发芽时问，以种子胚根完全长出，子叶
两片展开为种子完全发芽标准，计算发芽率，发芽
率一发芽株数／100x100％。重复3次，取平均值。
2．2 不同产地对缬草种子发芽率的影响：取不同产地
缬草种子(纸袋封口4℃保存)，于2004年3月按上述
发芽方法进行发芽，保持温度20℃左右，发芽时间为
9～15d，发芽率见表1。结果表明，缬草的种子发芽率
要高于其变种宽叶缬草的发芽率。栽培缬草的种子发
芽率远高于野生状态缬草种子的发芽率。栽培缬草由
于生长地点不同，种子发芽率也存在差异。
表1不同产地缬草种子发芽率
Table1 Germinationrateofvalerianaseedsfromdifferenthabitats
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·433·
2．3 不同包装材料贮存对发芽率的影响：以本校药
用植物园栽培缬草收获的种子(编号V1)，分别采用
透气性能较好的纸袋包装与不透气的聚乙烯塑料管
密封常规方法4℃保存一定时间，作发芽试验。结果
以纸袋包装的缬草种子6个月后发芽率为5l％，高
于用聚乙烯塑料管包装组(7％)，采用后者贮存的缬
草种子9个月后，发芽率基本降为零(见表2)。
表2不同贮存时间对缬草种子(V1)发芽率的影响
Table2 Effectofstoragedifferenttimesonseed(V1)
germinationrateofV．officinalis
贮存时间／月——
I
发芽率／％
Ⅱ Ⅲ Ⅳ
卜4 C纸袋贮存组 Ⅱ一室温聚乙烯塑料管贮存组 Ⅲ一4 C贮存，
赤霉素处理组 Ⅳ一冰箱低温(一20℃)贮存组
I—seedsarestoredinpaperbagat4℃ Ⅱ一seedsarestoredinvinyl
tubeatroomtemperatureⅢse dsarestoredat4℃andsoaked
withGibberellinbeforetest IV seedsarestoredinfreezerat一
20℃
2．4低温保存对发芽率的影响：以缬草种子V1，封
贮于纸袋，置于冰箱中一20。C保存，于不同时期测
定发芽率，结果对贮存1～3个月的缬草种子可以提
高发芽率，对贮存6个月的缬草种子发芽率影响不
明显，而经低温贮存24个月的缬草种子，较常温贮
存的发芽率有较大提高。
2．5赤霉素处理对发芽率的影响：常规方法保存的缬
草种子V1，用100mg／L赤霉素浸泡39min后，再用
常规方法发芽，结果发芽率未有明显的提高，仅对收获
后立即作发芽试验的缬草种子可以提高发芽率。
2．6 不同贮存时间对发芽率的影响：缬草种子V1用常
规方法贮存～定时间后作发芽试验，结果表明，当年收获
的缬草种子立即作发芽试验仍可以发芽，发芽率在23％
左右。经过放置1～3个月后，发芽率有所上升，可达
50％左右，而经12个月后，发芽率有所下降，至24个月
后，发芽率下降较明显，仅为11％。见表2。
2．7不同萌发温度对发芽率的影响：缬草种子V1，
收获后封于透气纸袋中常规方法贮存90d后，在不
同季节根据自然环境温度进行发芽试验，发芽期问
室内温度波动在±2℃，温度值取平均温度，环境相
对湿度在30％～50％。结果表明，15～27。C均为较
适宜的发芽温度，发芽率较高(表3)，温度过高或过
低均不利于缬草种子发芽。而在恒温箱中，发芽率十
分低下，温度37℃时无一发芽。
表3环境温度对缬草种子(V1)发芽率的影响
Table3 Effectofenvironmenttemperatureonse d(V1)
germinationrateofV．officinalis
月份 平均环境温度／℃ 发芽率／％ 发芽时间／d
12
15
18
22
27
30(恒温箱)
37(恒温箱)
3讨论
缬草多野生于高海拔的山坡、沟谷及灌丛中，且多
为零散生长，种子细小，每克种子约有2000～2500
粒，单株缬草产种子量很少，且多数不育，为了提高缬
草种子的繁育效率，可以对野生缬草进行人工栽培驯
化，经过驯化后的缬草种子结实率与发芽率均有较大
的提高，如欧洲缬草已有较久的栽培时问，种子驯化条
件较好，来自捷克的缬草种子发芽率在试验的几组种
子中是最高的。国内北京及沈阳植物园对缬草引种栽
培也已有一定的时间，表现出发芽率也较高，而纯野生
状态的缬草种子，发芽率十分低下。估计可能与野生状
态下缬草种子成熟程度极不一致、高海拔地区的生长
环境也不利于昆虫授粉有关，另外引种驯化的条件如
土壤、纬度等对种子发芽率也会有一定影响。本院药用
植物园收集的缬草种子发芽率一般，一方面与引种的
原品质有一定关系，另一方面由于栽培驯化时间不是
很长，对种子收集后未进行生活力检测，可能与部分种
子不育有关。
缬草种子采用不同包装材料对发芽率具有较大
影响，完全隔绝空气密闭保存后，随保存时间的延
长，发芽率下降很快，可能与缬草种子在保存过程中
仍有呼吸作用等生命活动与保持发芽率密切相关，
因此保存过程中需要一定量的空气。缬草种子低温
保存可以延长生命力时间，有利于种子的保存。
缬草种子(瘦果)较为细小，种皮(果皮)较薄，当
年收获后可以立即发芽，保持一定的发芽率。用赤霉
素处理对种子发芽率影响不显著，说明缬草种子不
存在休眠期或休眠期较短，休眠由其他因素自行可
以解除，是否还存在其他因素，有待于进一步的研
究。另外在试验过程中发现一个有趣的现象，缬草瘦
万方数据
·434· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
果顶端的羽状冠毛对发芽有很大影响，去除羽状冠
毛的缬草种子可以正常发芽，而未去除的发芽率极
低，甚至不发芽。缬草种子是否存在休眠或者说是否
羽状冠毛与种子的休眠状态的解除有一定关系，尚
值得进一步研究。
缬草的繁殖可以用种子，也可以用根茎移栽，采用
根茎存活率高，但繁殖系数低，在大规模栽培中不适
用，仍以种子繁殖为主。为了提高种子的发芽率，提高
繁殖效率，建议采用优质的野生缬草亲本经驯化栽培
2～3年后，收获缬草种子，可以当年秋季播种，最迟至
次年春季播种，在常温条件下，保存时间不宜超过1
年。如需较长时间保存，则宜于冰箱低温保存。
致谢：北京植物园刘永刚研究员、北京大学陈虎
彪教授、武汉植物园王有为研究员、沈阳植物园王文
元老师、捷克布拉格植物园PavelSekerka博士惠赠
缬草种子及给予的指导帮助。
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盾叶薯蓣四倍体诱导的研究
李运合1，胡春根2，姚家玲H，张友德1
(1．华中农业大学生命科学技术学院，湖北武汉430070；2．华中农业大学园艺林学学院，湖北武汉430070)
摘要：目的选育盾叶薯蓣Dioscoreazingiberensis新种质资源，以期为高产、高皂苷元含量薯蓣育种打下基础。
方法 以刚露出绿色芽点的盾叶薯蓣愈伤组织块为材料，采用两种方法处理：①愈伤组织块浸泡到秋水仙素水溶
液中。②培养基中添加秋水仙素。结果成功获得了染色体数加倍的薯蓣新材料，其中以1×103mg／L秋水仙素水
溶液浸泡24h效果最好，诱导率达到35．2％，四倍体植株与二倍体亲本相比，二者在外观形态、生理指标、显微结
构上有明显区别。结论 四倍体植株体型大、具生长优势，离体条件下利用愈伤组织块诱导多倍体是盾叶薯蓣倍性
育种的一条有效途径。
关键词：盾叶薯蓣；秋水仙素；四倍体
中图分类号：R282．21 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)03—0434—05
InducementoftetraploidDioscoreazingiberensis
LIYun—hel，HUChun—gen2，YAOJia—lin91，ZHANGYou—del
(1．CollegeofLifeScienceandTechnology，HuazhongAgriculturalU iversity，Wuhan430070，China；2．College
ofHorticultureandForestrySciences，HuazhongAgriculturalUniversity，Wuhan430070，China)
Abstract：ObjectiveTocreatn wtetraploidresourceofDioscoreazingiberensisinthehopeofpoten—
tialbreedingmaterialswithhighyieldandhighlevelofdiosgenin．MethodsCalluswithtinygreenbuds
weredirectlysoakedincolchicinesolutionorculturedinmediumpluswithcolchicinetoprohibittheisola—
tionofchromosomesandinducetetraploidmutants．ResultsTetraploidswereachievedsuccessfully．The
mostefficienttreatmentforinducingtetraploidwasoakingthetinybudsin1×103mg／Lcolchicinesolu—
tionfor24h，theinducingratecouldbeupto35．2％．Theinducedt traploidsexhibitednotabledifference
withcommonwildtype(diploids)inmorphology，physiology，andm croscopicstru ture．ConclusionThe
tetraploidplantsshowtheadvantagesof iganticsizeandvigorousgrowth．Thus，thee tablishedtech—
niquesystemtoinducetetraploidfromtissueculturedcalluswouldprovideanefficientalternativepathway
formedicinalpl ntsofDioscoreaL．breeding．
Keywords：DioscoreazingiberensisC．H．Wright；colchicine；tetraploid
收稿Et期：20040512
作者简介：李运合(1977)，男，河南新乡人，现中山大学生命科学学院2003级博士生，研究方向为植物发育及分子生物学。
*通讯作者Tel：(027)87286292E—mail：yaojlmy@mail．hzau．edu．cn
万方数据
不同种质资源及贮藏条件对缬草种子发芽率的影响
作者： 黄宝康， 郑汉臣， 张巧艳， 秦路平， HUANG Bao-kang， ZHENG Han-chen， ZHANG
Qiao-yan， QIN Lu-Ping
作者单位： 第二军医大学药学院,上海,200433
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(3)
被引用次数： 4次

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