全 文 ：中草喃 c帖Ⅱ盼eTraditionalandHerbMDrags第37卷第3期2006年3月·463·
化种子鸟类对黄鬃果实的破坏，影响黄檗的繁殖。
2．2．2人为因素：1)毁林种地特别是长白山区毁林种参，是
对森林资源的巨大破坏，也是黄檗致危的重要人为因素。2)
农药的大量使用使某些昆虫数量减少，影响了传粉，致使结
实率下降。3)生态环境的破坏使传播种子鸟类的减少，使黄
檗不能自然更新。4)盗采盗伐的影响
黄檗材质优良，是人们重点砍伐对象，国家虽然已经禁
止天然林砍伐，但盗伐现象在林区仍然极为猖獗。
黄柏是常用中药，也是提取小檗碱的重要原料，禁止天
然林砍伐后黄柏的药材来源减少，价格上升，促使不法之徒
上山盗采野生黄柏药材，轻者将黄檗大树站立剥皮，重者锯
倒剥皮，致使大量黄檗成树惨遭破坏，在调查的老粱山样地
中400m2的面积内的7株黄檗树有4株被站立剥皮，两株
被锯倒剥皮，只有一株未遭破坏。在2003年以前一直保护较
好的前白鸡腰样地，2004年8月样地内的一百多株树龄50
年以上、胸茎30～80cm的黄檗全部被盗伐、剥皮。由于采树
皮的季节都在夏季，致使黄檗在果实成熟前死亡，失去了天
然更新的机会，从而导致黄檗在该地区灭绝。森林的采伐和
乱砍、盗伐是黄檗致危的另一致命的人为因子。
3解危措施
3．1原地保护
3．1．1保护黄檗的生存环境：通过加强立法、严格执法等行
政措施，严格禁止毁林种地、种参，保护黄檗的生态环境，保
护区域内的生物多样性，保护黄檗的传粉昆虫和传播种子的
鸟类，促进黄檗种群的自然更新。严惩乱砍、盗伐和非法采集
中药黄柏的不法分子，保护有限的天然黄粜资源。
3．1．2对黄檗天然种群的更新进行人为干预：由于黄檗种
子在自然条件下不易成熟，成熟种子不易脱落，成熟的脱落
种子在纯自然条件下不能萌发，在自然条件下黄檗投有无性
繁殖的能力，致使黄檗种群自然更新能力极差。针对这些情
况，可在有黄檗分布的区域内采取局部问伐，增强林内光照，
对有成熟种子脱落地域的土地进行翻动踩压，使种子与土地
紧密结合，促使种子萌发，从而优化黄檗种群年龄结构，在人
为干预下促使黄檗种群的更新。
3．1．3人工扩大区域内的黄檗种群的数量及规模：在有黄
檗分布的区域内采集成熟黄檗种子，经人工处理后回播于该
区域，或人工育苗后移栽到黄檗自然分布的区域，不经人为
管理．令其自然生长，亦可采集黄檗枝条，经药剂处理后扦插
于该区域，之后也不经人工管理，从而扩大区域内黄檗种群
的数量及规模。
3．2迁地保护：在黄檗分布的区域采集成熟种子或枝条．经
人工处理后播种或扦播于生态环境与气候条件与原产地相近
但无黄檗分布的区域，从而扩大黄檗的分布范围及种群数量。
由于黄檗可药用、材用、绿化等．具有很高的经济价值，
并且适应能力较强，有成熟的人工栽培技术作支撑o“]．异地
引种栽培易于成活，也易被人们接受，可在林内、荒山、路边、
宅旁大量栽种黄檗，促进农民收人．满足人们对黄檗木材、药
材的需求，从而促进黄檗野生资源的保护和合理利用。目前
在贵州、湖北乃至新疆天山、哈密等地都有引种黄檗的报
道口]，黄檗的迁地保护切实可行。
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中药中黄曲霉毒素检测概况
陈建民，张雪辉，杨美华，金钱
(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，教育部“中草药物质基础与资源利用”
重点实验室，北京100094)
摘要：介绍了近10年来中药污染黄曲霉毒素检测概况，早期研究主要采用TLC和ELISA法均发现部分中药污
染了黄曲霉素，但实验报告结果差异很大，而且尚未形成公认的标准方法。评述了TLC、ELISA和IAC一衍生化
HPLC荧光检测法。认为ELISA法可能发展成为样品的快速检测方法，而IAC—HPLC检测法是最有前途的方法，
目前国内外在食品检测中采用的多种衍生物方法均可引入用于中药检测。
关键词：中药；黄曲霉毒素；检测
中圈分类号：R286．013文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)03—0463—04
收稿日期：2005—07—08
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E—mail：chenjianmin@hotmail．eom
万方数据
·464· 中革菊ChineseTradiUonala dHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月
Asurveyofdeterminationof flatoxininChinesemateriamedicia
CHENJian—min，ZHANGXlie—hui，YANGMeihua，JINYue
(InstituteofMedicinalPl ntDevelopment，ChineseAcademyofMedicalSciences
andPekingUnionMedicalCo lege，Beijing100094，China)
Keywords：Chinesemateriamedicia；aflatoxin；determination
黄曲霉毒素(aflatoxins，AF)是黄曲霉Aspergillus
mⅦsLink和寄生曲霉AspergillusparasiticusSpeare产生
的一类代谢产物，特曲霉也能产生黄曲霉毒囊，但产量少。
1961年首次发现污染了AF的花生饼能使大鼠诱发肝癌，
1962年鉴定AF这组化台物均为二呋哺香豆索的衍生物，已
证实有17种衍生衍，最重要的为黄曲霉毒紊B】、岛、GhGz
和M，(AFBL、AFB2、AFG。、AFG?和AFM，)等6种化台物。
前4种主要存在于植物性样品中，特别是含油脂或淀粉的花
生、核桃、大豆、玉米等食品中，后1种是AFB在动物体内的
代谢产物，主要存在于牛奶及奶制品中。近年研究也发现一
些中药材也存在AF的污染，AF污染已引起了WHO和全
世界人们普遍关注。随着农产品和食品中AF限量日益严
格，其检测方法随之不断改进。在农产品和食品方面，已有较
成熟的方法叶“。世界上还没有公认的植物药中AF限量标
准，我国原外经贸部wM一2001《药用植物及制品进出口绿色
行业标准》‘41中AF限量标准为小于5ng／g，由于中药中AF
检测开展较晚和较少，直接引用农产品方法进行检测存在一
些问题。本文对近年来中药中AF检测情况进行了概述。
1 AF的理化性质
AF易溶于氯仿、甲醇，不溶于水、正己烷、石油醚和乙
醚。耐热(一般烹调加工的温度下破坏很少)，280C发生裂
解，可被强碱、强氧化剂破坏。在氢氧化钠溶液中内酯环开环
成香豆素钠盐溶于水。霉菌菌株在25～32C、80％～90％湿
度、氧气1％眦上的条件下可产生AF。在紫外照射下，产生
荧光，激发光七。365hill时，B族产生黄色荧光(k425
rim)，G族产生绿色荧光(上。450nrll，。全部为右旋(一)光学
活性体。在362nnl(或350rim)处AF紫外吸收的摩尔吸收
系数：AFB：>AFB。>AFG。(塑AFM，)>AFG2(表1)。
表l黄曲霉毒素的紫外吸收(甲醇)
Table1 UVAbsorptionofaflatoxins(method
AF的种类 相对分子质量 波长／nm 摩尔吸收系数———面—————1砭—————i万—一—i五面一
265 12400
360 21800
B2 314 222 18600
265 12100
362 24000
GL 328 216 27400
242 9 600
265 9 600
362 17700
G2 330 214 25300
244 10500
265 900
36Z 】9 300
MI 328 265 14150
357 21250
2 AF的检测
根据欧盟1525／98号指令要求食品及实物组分中AFB，≤
2gg／kg，AF总量(AFB·+AFB2+AFG，+AFG。)≤4腿／
kg，我国食品标准为5～20pg／kg，即样品浓度范围常在0．1
vg／kg～0．1mg／kg，因此对检测方法灵敏度和准确性有较高
的要求，而固为日常需检测的商品(样品)数量巨大，所以要求
检测方法尽量简便、快速。已报道的检测方法有薄层色谱法、酶
联吸附免疫法、免疫和柱荧光法、免疫亲和柱一HPLC法等。
2．1薄层色谱法：其原理是将样品经过提取、净化后，适量
点于硅胶薄层板上，展开后，在紫外灯下与随行AF对照品
色谱点距对照，目测或荧光扫描检测，是一种半定量的分析
技术。
薄层色谱法有单项展开和双向展开，在紫外灯下，AFB
对应的色谱点显浅黄荧光，AFG为弱的绿色荧光。Rf减少
的顺序为AFB。、AFB。、AFG．、AFG：，具体分析操作可参照
GB／T5009．2—1996和GB／T5009．23一1996第一法，检出限
为1～5pg／kg。目测的RSD为20％～30％，荧光扫描可降
至约5％。卢志雁等采用此法检测了神曲、越鞠保和丸等7
种中药材或中成药，其中神曲中含AF200--229ng／gt越鞠
保和丸为1056ng／g“]。李春蓉等检测了桃仁、胶大海等50
种中药材，仅桃仁，胖大海检出AF(<5ngtg)[5]。
2．2酶联免疫吸附法(ELlSA)：其基本原理是想将已知的
抗体或抗原结合在某种固相载体上，并保持其免疫活性。测
定时，将待检标本和酶标抗原或抗体按不同步骤与固相载体
表面吸附的抗体或抗原发生反应，用洗涤的方法分离抗原、
抗体复合物和游离成分．然后加人酶，底物催化显色，进行定
性或定量测定。该法是近年我国中药研究人员开展最多的检
测方法。李汶等采用此法检测30种常用中药材和7个品种
20批次中成药，23种药材和18个批号中成药的AF>20
1tg／903。刘鹏等采用ELISA法检铡18批中成药，全部检出
AFB，，但均低于1卜g／go一。李延生等采用此法检测22种中
药，50跖AF大于20耀如，25批中成药AF为250--878ng／
妇。汤杨采用此法检测了44个品种的中成药(含片剂、冲剂、
丸剂，胶囊剂)AF检出率达89％，24个品种5l批中药材中
有41批AF>20Pg／g[”]。匡佩琳等Ⅱ1叫33也报道了运用
ELISA法中药中AF的检测情况。
2．3 HPLC检测法：由于AF具有较强的紫外吸收和产生
荧光的特性，因此可以进行HPLC一紫外或荧光检测；而
AFB，和AFG。其荧光强度相对弱一些，在含水流动相中容
易产生荧光淬灭，所以为提高检测灵敏度，常采用柱前三氟
醋酸(TFA)衍生法““，柱后溴化n““、碘化01，Kobracell电
化学衍生法[1”和柱后光化学衍生法等，AFBt、AFBz荧光增
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第3期2006年3月·465·
强。为除去样品中干扰成分，食品检测中常采用各种固相萃
取小柱进行净化和富集，主要有以硅胶，c。。键和硅胶，
Florisil硅土，极性、非极性离子交换树脂等为填充剂的多功
能和交联有AF特异抗体的免疫亲和柱(1Ac)口。”]。免疫亲
和柱对AF有特异吸附，而这种吸附又可以被极性溶剂洗
脱。将提取、净化、浓缩一次完成，大大简化了前处理过程，提
高了工作效率和方法的准确度、精密度。目前使用最多的是
美国Vicam公司的AliaTesto-柱和德国卜Biopharm公司的
EasiextractAfla oxia柱。
笔者曾考察我国进出口商品检验行业标准(SN0339
95)中HPLC—TFA法和EI．ISA法检测22种中药材及中成
药，结果见表2。Storka等采用IAC—HPLC溴化衍生法检测
了大荨麻、番泻叶、辣椒粉等几种生药和提取物中AF。Tas—
saneeyakul等用IAC一电化学衍生HPLC法测定了28种泰
国草药产品，有5种产品受到AF污染，但低于泰国允许限
量20pg／g[1“。笔者还对39种药材和中成药进行了IAC—
HPLC拄后溴衍生荧光检测和IAC一荧光分光光度法(SFB)
的检测，结果秦艽、生建曲、生麦芽、前胡、杏仁出现阳性结
果，而大多数SFB法阳性结果的药材用HPLC法确证并没
有受到AF污染口⋯。
裹2 ELISA和HPLC—TFA法测定中药中AFBl
Table2 DeterminationofAFBlInChinesmateria
medtciabyELISAandHPLC—TFA
中药名称
AFBl／(mg·kg一1)
ELISA}{PLC—TFA
种曲 49．3 2．57
青皮 257 0
自芍 42 0．37
番泻叶 100 0
黄芪 200 827
陈皮 106 3．20
柴胡 10 0
丹皮 2．5 0
地丁 14．6 0
金钱草 12 0
扳蓝根 100 0
山楂 28 2．24
自术 15 0
黄苓 16．9 0
麦冬0 0
胖大海 19 0．73
积实 23．5 0
续断 44．7 0
姜黄 17 0
茯苓0 0
银翘解毒丸 295 未测
滴眩治瘫丸 23．7 未测
3结果与讨论
3．1从文献检测结果可看出，植物药材在生产、贮藏过程中
确实存在被AF污染的可能性，应特别关注经发酵工艺的曲
类药、种子类中药，注意南方高温、高湿地区及库房中长霉药
材的检测。
3．2由于许多中药材含有香豆素及产生荧光的生物碱和萜
类等化合物，对采用薄层色谱法检测AF产生严重干扰。双
向展开、加压薄层色谱可以减轻干扰。采用氨熏，观察荧光点
颜色变化，再加热除氨，重现原来颜色；或在斑点上滴加三氟
醋酸观察荧光是否加强等手段可帮助确证。受方法本身限
制，建议将TLC仅作为一个快速的限量检测方法。
3．3 E1．ISA方法是一种灵敏的高特异性的快速检测方法，
适用于大批量样品的普查，但由于供用酶、抗体，对保存条
件，保存时问、温度均有一定要求，其次在研制抗体时交叉反
应主要考虑的是其他霉菌毒素及脂肪、蛋白、糖等的干扰，没
有考虑中药化学成分的于扰。此外样品的酸、碱pH性质甚
至样品溶液中古醇量都可能造成很阳性结果。而国内目前的
ELISA试剂盒，大多质量不稳定，不同厂家、不同批次检测
结果差异较大。因而目前不同实验室中药检测结果难以比较
参照。根据相似的酶联免疫原理研制质量可靠、稳定的试剂
盒或检稠条(卡)，进一步查明哪些类型化学成分可能产生干
扰，是今后研究的一个重要方面。
3．4各种固相萃取柱在农产品和食品的AF检测中是很好
的样品前处理方法．但在中药的检测中，未能找到合适的洗
脱液适用于各种中药和不同剂型样品，仍然是IAC柱效果
最好．仅需注意样品渍的pH影响。一些中药成分虽能被
IAC柱吸附，但不干扰HPLC检测；必要时操作中可加入氯
化纳溶液、三氯化铝溶{瘦等试剂减少干扰物。只是IAC柱价
格较贵，又是一次性使用，检测成本高；多次使用受操作者、
操作条件及不同样品的影响较大，实验室内和实验室间测定
误差较大。目前ELISA法和1AC荧光光度法．由于所使用
的抗体目前尚不能很好区分AFB。、AFB：和AFG：、AFGz，
因此实际检测的是AFB。、AFBz、AFG。、AFG=的总量；IAC
荧光光度法操作过程不使用AF对照液，故最安全。
3．5 IACHPI。C检测中药中AF量是最有前途的方法，无
论采用柱前衍生或柱后衍生，方法的灵敏度、精密度都能满
足AF检测要求。柱前TFA衍生灵敏度最高，但重现性受操
作者技术影响较大；在线柱后衍生法自动化程度高、重现性
好，但需增加衍生化器和衍生化剂输液泵等设备，衍生化反
应受温度、时同，衍生剂浓度的影响，而反应时间需要考虑反
应管体积、HPLC流动相流速和衍生剂流动相的影响。
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番红花化学成分及生物活性研究进展
何美莲。陈家宽，周铜水’
(复旦大学生命科学学院天然药物研究中心，上海200433)
摘要：着重对番红花柱头所台的化学成分及其代谢途径进行了综述。根据化合物的结构特点，理化性质及代谢途
径，番红花中的化学成分可归纳为水溶性色素、脂溶性色素、挥发油及挥发油前体苷类几种类型，研究表明这些结
构多样的成分均是由脂溶性的玉米黄质降解产生。此外，还对国内外有关番红花花被以及侧芽等不同部位化学成
分的研究进展，强及香红花提取物及番红花苷成分在心脑血管、肝脏、肾脏、免疫系统、肿瘤以及抗氧化方面的广泛
药理活性进行了全面综述，为全面开发利用番红花资源提供参考。
关键词：番红花；代谢途径；生物活性
中围分类号：R282，71 文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2006)03—0466—05
Advancesinreserachof emicaleonstituentsinCrocussativus
andtheirbiologicalactivities
HEMei—lian，CHENJiakuan，ZHOUTong—shui
(ResearchCenterofNaturalMedicines，SchoolofLifeSciences，FudanUniversity，Shanghai200433，China)
Keywords；CrocussatlvusL．；metabolicpathway；biologicalactiv ties
番红花CrocussativusI。，为鸢尾科番红花属植物o]。中医
将其干燥柱头入药，称为西红花(Stigm(2Croci)，具有活血化
瘀、凉血解毒、解郁安神之功效，用于经闭瘴瘕、产后瘀阻、温毒
发斑、忧郁痞厨、惊悸发狂等症“]。番红花原产歇洲南部至伊
朗．经印度传人西藏，故亦称藏红花，习用至今，现在我国浙江、
江西、江苏、北京、上海有少量栽培。它既是一种名贵药材，也是
一种名贵香料，现代药理研究表明番红花具有很强的循环系统
作用以及抗肿瘤、抗氧化等生物活性。由于其广泛的生物活性，
近来，人们越来越关注它的开发利用。本文就其不同部位化学
成分和生物活性作一综述，为全面开发利用番红花提供参考。
l化学成分
由于番红花的药用部位是其柱头，因此对番红花化学成
分的研究也主要集中在柱头，近年来也对番红花花被和侧芽
中的化学成分进行了研究。迄今为止，从番红花中已发现化
学成分100多种，现分述如下。
1．1柱头中的化学成分：番红花柱头中存在一条独特的代谢
途径，能将脂溶性的玉米黄质降解产生藏红花酸、部分挥发油
和藏红花苦素；藏红花酸进一步耱苷亿形成特殊的水溶性色
警銎是皙：蓄鉴：军孕重大科技专项(200lBA7。lA61)；上海科委中药现代化专项(03D219547,03D219532)
尊翥第荏窑。毒搿浆79Tehlt女(02’安])6徽59太42湖20人6’7罂曼孽需要毒％怂毒蚕慧烹等研究5开发。B。i““。“”9@”h·。”
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万方数据
中药中黄曲霉毒素检测概况
作者： 陈建民， 张雪辉， 杨美华， 金钺， CHEN Jian-min， ZHANG Xue-hui， YANG Mei-hua
， JIN Yue
作者单位： 中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物研究所,教育部中草药物质基础与资源利用重
点实验室,北京,100094
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(3)
被引用次数： 7次

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业科学2007,35(32)
3. 夏春龙 浅谈粮食黄曲霉毒素检测中样品的采集[期刊论文]-中国高新技术企业2010(8)
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引证文献(7条)
1.胡一晨.万丽.范成杰.吕维.杨芳.吉琅 免疫亲和柱净化HPLC柱后光化学衍生化法检测中药及染菌中药制剂中间体
的黄曲霉毒素[期刊论文]-中国实验方剂学杂志 2012(10)
2.刘晓霞.傅武胜.吴锦忠 植物药中黄曲霉毒素现代分析方法概况[期刊论文]-海峡预防医学杂志 2010(2)
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4.刘书宇.杨美华 伏马菌素的研究进展[期刊论文]-安徽农业科学 2009(24)
5.李峻媛.万丽.杨美华 真菌毒素限量标准及其在中药中的研究进展[期刊论文]-中草药 2011(3)
6.朱斌.马双成.林瑞超 天然药物及产品真菌毒素研究概况[期刊论文]-中国药事 2009(11)
7.程翔林 中药现代化研究关键问题与产业发展[期刊论文]-世界科学技术-中医药现代化 2010(5)


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