全 文 :·936· 中革鸯ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6胃
HPLC法测定金雀根中carasinolB
周红,舒娜,胡昌奇+
(复旦大学药学院天然药化教研室,上海200032)
金雀根是豆科植物锦鸡儿属植物锦鸡儿Cara
ganasinica(Buc’hoz)Rehd.的根或根皮,味甘微
辛、性平,具有清肺益脾、活血通脉的功效。我国民间
主要用于治疗虚损劳热、咳嗽、高血压、妇女白带、血
崩、关节痛风、跌打损伤和高血压等n]。近年发现金
雀根的醋酸乙酯部位具有较强的刺激成骨细胞增殖
的话性,并发现该部位的主要化学成分是二苯乙烯
类化合物。其中化合物carasinolB(c。。H。;O。3)01就
是从金雀根的醋酸乙酯可溶部位分得的二苯乙烯四
聚体,体外细胞试验证明确实有刺激成骨细胞增殖
的活性,质量分数较高而且性质稳定o]。笔者将
earasinolB制备成对照品,建立了HPLC法测定金
雀根中carasinolB的分析方法,并对3批不同产地
的药材进行了测定。
l材料
1.1 仪器与试剂:Agilent1100series高效液相色
谱仪及DAD检测器,安捷伦科技有限公司;色谱用
硅胶(160~200目,200~300目),青岛海洋化工厂
分厂。甲醇、乙腈(色谱纯,DIMATechnology
INC),醋酸钠、冰醋酸(分析纯)。
1.2 药材:金雀根分别采集于湖北省黄梅地区
(2004年7月和12月)和云南昆明(2001年12月),
原植物由华东师范大学生物系冯志坚教授鉴定。
2方法与结果
2.1色谱条件:色谱柱ThermoC,8(150mm×4.6
trim,5fzm);流动相:甲醇一乙腈一醋酸盐缓冲液(pH
4.50)(14:12:74);体积流量1mL/min;检测波
长为284nm;柱温30℃。上述色谱条件下carasinol
B的保留时问为14rain左右。
2.2对照品的制备:取金雀根醋酸乙酯部位浸膏
240g,先片j160~200目硅胶柱色谱得到化合物
carasinolB,再用200~300目硅胶反复进行柱色谱
纯化,氯仿一甲醇(7:l~5:1)洗脱,得到carasino]
B的对照品160.3mg,HPI。C法检测质量分数大于
99.0%,符合作为对照品的要求。
2.3对照品溶液的制备:精密称取carasinolB的
对照品11.80mg,置于50mL量瓶中,流动相超声
溶解定容,摇匀,微孔滤膜(O.45pm)滤过,作为对
照品溶液(质量浓度为236gg/mL)。
2.4 供试品溶液的制备:精密称定金雀根粉末
1.000g,加入50%乙醇50mL,加热回流lh,冷却
后,滤纸滤过,用50%乙醇50mL洗药渣两次,合并
滤液并浓缩,浸膏溶于50mL蒸馏水中,同体积醋
酸乙酯萃取3次,合并醋酸乙酯层并浓缩,流动相溶
解后定容,摇匀,微孔滤膜(o.45pm)滤过,作为供
试品溶液。
2.5线性关系考察:将carasinolB对照品的储备
溶液分别配制成236、118、94.4、59、47.2、18.88、
9.44}tg/mI。的对照品溶液,经微孔滤膜(0.45pm)
滤过,在上述色谱条件下,进样20止,记录色谱图。
质量浓度(c)与峰面积值(A)的回归方程为:A一
5.9598C一4.5291,r=0.999,线性范围9.44~
236pg/mL。
2.6精密度试验:精密吸取同一供试品溶液,重复
进样5次,每次20pL,以carasinolB的峰面积计,
RSD为1.34%。
2.7重现性试验:精密称取供试品5份.制成供试
品溶液,测定carasinolB的峰面积,结果RSD为
1_29%。
2.8稳定性试验:供试品溶液每隔24h测1次.共
测3次,earasinolB峰面积的RSD为1.03%。
2.9加样回收率试验:精密称取样品0.5g,5份,
加入47.2、18.88、9.44/‘g/mLcarasinolB对照品
溶液1mL,按供试品测定方法测定,carasinolB的
平均回收率为98.39%,RSD为1.09%(n一5)。
2.10样品测定:分别精密称取样品3批各1.000
g,制成供试品溶液,进行测定,记录carasinolB的
峰面积,计算质量分数,结果见表1。
收稿日期:2005—10-20
基金项目:围家自然科学基金资助项目(30270155)
作者简介:周红(1981一),女,在凄硬十生,主要从事天然药物化学的研究
Tel:(021)54237339E—mail:Izhouho”9800829@yahooconcn
*通讯作者胡昌奇
万方数据
中草蔼ChineseTraditionalandHerbDrugs第37卷第6期2006年6月
表1盒雀根中carasinolB的测定(H=3)
Table1 Determi呻tionofcarasinoIBin砌扭 A
CaraganaeSinicae抽一3)
3讨论
本实验将carasinolB制备成对照品,并建立了
金雀根中carasinolB的测定方法(图1)。本实验建
立的分析方法快速、简便,具有良好的精密度、稳定
性和重现性。
CarasinolB体外细胞试验证明具有刺激成骨
细胞增殖的活性,它属于二苯乙烯类化合物,是余雀
根的活性成分之一,主要存在于金雀根的醋酸乙酯
可溶部位,性质稳定,可以作为金雀根的质量控制
样品。
本实验同时分析了不同产地不同采集时间的金
雀根中carasinolB的量。得到的结论是采集于相同
时间都是12月份的,湖北黄梅的量高于云南昆明
’carasinolB
一图1 CarasinolB对照品(A)及金雀根(B)的HPLC图
Fig.1HPLCChromatogramsofcarasinolB(A)
andRadhCaraganaeSinicae(B)
的,而采集于相同地点都是湖北黄梅的7月份的量
高于12月份的。有效成分量的不同可能是由于土
壤、气候、水份、温度等的不同造成的。
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HPLC法测定羌活中阿魏酸、羌活醇、苯乙基阿魏酸酯和异欧前胡素
古丽娜·沙比尔“2,郭洪祝1,郭 慧1,马晓驰1,王炜1,果德安”
(1.北京大学药学院,北京100083;2.新疆中药民族药研究所,新疆乌鲁术齐830002)
羌活为伞形科植物羌活Notopterygiumincisu
TingexH.I.Chang、宽叶羌活N.forbesiiBoiss.
或川羌活N.franchetiiBoiss.的根及根茎,有散表
寒、祛风湿、利关节等功效,用于治疗感冒风寒、头痛
无汗,风寒湿痹、项强筋急、骨节酸痛、风水浮肿、痈
疽疮毒等“]。本属植物的主要活性成分为香豆素类
化合物。羌活为《中国药典))2005年版一部收载品
种,但对羌活药材未作定量测定要求,其质量仅通过
测定挥发油的量来控制,规定总挥发油不得少于
0.028mL/g[2]。为了有效地控制羌活药材的质量,
本实验选择羌活药用部分中量较高的4种有效成分
(阿魏酸、羌活醇、苯乙基阿魏酸酯、异欧前胡素)作
为定量指标,建立羌活的RP—HPLC测定法,为中药
羌活内在质量的评价提供科学依据。
1仪器与试药
高效液相色谱仪:Agilent1100型高效液相色
谱仪(德国AgilentTechnologies)。配二级管阵列检
测器和ChemStation色谱工作站,四元溶剂系统、在
线脱气机、自动进样器、柱温箱。Sardoris电子天平
(德国Statarius公司)。HPLC级乙腈(加拿大LTD
公司);色谱纯甲醇(北京市华准化学试剂科技开发
部);冰醋酸为分析纯(北京化学试剂公司);双蒸水
(Milliporesimplicity纯水制备系统)。
羌活对照药材购自中国药品生物制品检定所
(批号:120935—200405)。四川羌活药材从四川阿坝
州采集,其他23批羌活药材均购自当地药店或医
院.由本室果德安教授鉴定。对照品羌活醇(no—
topter01)、苯乙基阿魏酸酯(phenethylferulate)和
异欧前胡素(isoimperatorin)3种成分均为笔者分离
所得,并经4大光谱(uV、MS、1H—NMR、”C—NMR)
箨霎品霁:警蔷蒜1.-1沙0比尔(1963),女(维吾尔旅),新疆伊犁人,副研究员。2002~2005年在北京大学药学院特培,访问学者.研究方
+通讯作争7案黎霎量T控e制l:及(01天0)然82药80物15化16学研F究ax。:(。1。T)e8H28(009297100)26;:恶l:gE如-m@aiblJnl29u⋯lnadr‘cs,alK‘ 16墨com
万方数据
HPLC法测定金雀根中carasinol B
作者: 周红, 舒娜, 胡昌奇
作者单位: 复旦大学药学院,天然药化教研室,上海,200032
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(6)
被引用次数: 2次
参考文献(3条)
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2001
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9. 朱水永 白鲜皮与混用品的鉴别[期刊论文]-海峡药学2006,18(4)
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引证文献(2条)
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2.路静.杨万政.王捷.姚玉军 蒙药锦鸡儿的研究进展[期刊论文]-中国民族医药杂志 2010(4)
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