全 文 ：·612· 中草酋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月
HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱
饶毅1，黎莉2，刘隆洪3，袁华生3，魏惠珍1，黄周华1，杨世林1
(1．中药固体制剂制造技术国家工程研究中心，江西南昌 330006；2．江西中医学院，江西南昌330006
3．江西翔云生物药业有限公司．江西遂川 343900)
防己为防己科粉防已StephaniatetrandraS．
Moore的干燥根，粉防己根中含有粉防己碱、防己诺
林碱、轮环藤酚碱等成分，具有解热镇痛、风瀑止痛、
利尿消肿之功效一⋯。其中粉防己碱(TET)和防己诺
林碱(FAN)是其主要活性成分．TET能够有效抑制
由胶原、凝血酶、肾上腺素等引起的血小板聚集，
FAN能够在体外抑制组胺的释放。因此，以粉防己
碱和防己诺林碱的量来作为防己药材的质量控制指
标具有十分重要的意义。
目前国内主要是利用薄层扫描法、薄层色谱分
光光度法和薄层色谱荧光法测定粉防己碱的
量”“，利用HPI。C法测定粉防己碱和防己诺林碱
的文献报道较少“]。2005年版《中国药典》改进了定
量测定的方法，采用HPI，C方法，使用离子对色
谱o]，由于流动相中加入十二烷基磺酸钠，易分层沉
淀，操作过程中要严格控制温度、时间等。本实验采
用HPI。C法对防己药材中粉防己碱和防已诺林碱
成分同时进行测定，样品处理方法简单，测定结果准
确，方法专属性强．精密度高，重现性好。
1仪器、试剂和药品
岛津LcIOATVP高效液相色谱仪，sPD—
M10AVPDAD检测器，SIL10ADVP自动进样
器，cI．Ass—VP色谱工作站，色谱柱为岛津Shim—
pack：Vp—ODS；(250mm×4．6mln，5弘m)；甲醇、
三乙胺均为色谱纯，磷酸为分析纯，水为millipo超
纯水。粉防己碱、防己诺林碱(中国药品生物制品检
定所，批号分别为0711-200005，0793—200003)；防己
药材(购于江西遂川翔云药业有限公司，由江西中医
学院中药鉴定教研室傅小梅博士鉴定)。
2方法和结果
2．1 色谱条件：岛津Shim—pack：Vp—ODS(250
mlTl×4．6mm)色谱柱；流动相：乙腈一0．2％磷酸
(63：37)(三乙胺调pH至8．0)；体积流量：1mI√
rain；进样量：10pI。；检测波长：282nm。理论塔板数
以粉防己碱计算不低于5000。色谱图见图1。
2
A
4 6 8 】0 12 14
2 4 6 8 10 12 14 16 18
，／min
1一防己诺林碱2一粉防己碱
卜fangchinoline2-tetrandrine
围1 防己诺林碱和粉防己碱混合对照晶(A)
与样品(B)色谱图
Fig．1HPLCChromatogramsoffangchinolineand
tetrandrinemixture(A)·andsample(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取粉防己碱、防己
诺林碱对照品适量，用甲醇溶解，制成含粉防己碱
0．1mg／mL，含防己诺林碱0．05mg／mL，即得。
2．3供试品溶液的制备：取防己药材粉末，精密称
取0．4g，置100mL平底烧瓶中，精密加甲醇50
mI。，称定质量，水浴加热心流1．5h，放冷，擦干瓶外
壁，再称定质量，加甲醇补足减失的质量，摇匀，取上
清液，即得。
2．4线性关系考察：精密称取防己诺林碱、粉防己
碱对照品，以甲醇溶解．制得防己诺林碱、粉防己碱
0．526、0．975mg／mL的对照品溶液。精密吸取此溶
液0．05、0．10、0．20、0．40mL，加甲醇稀释至2．0
mL，摇匀。分别进样，以峰面积平均值为纵坐标，以
对照品质量浓度为横坐标，绘制标准曲线，得两个成
分的回归方程：防己诺林碱Y一42419X+3698．1，
r=0．9999，线性范围：0．0105～0．1052mg／mL；
粉防己碱y一71963x+828．9，r一0．9999。线性
范围：0．0195～o．1950mg／mL。
肇莩晶羿：翟∞毅-08(-119564)，江西省南昌市人，博上，教授，硕士生导师，从事中药质量控制和分析化学J=作
万方数据
中草酋CMneseTraditional蚰dHerbalDrugs第37卷第4期2006年4月·613·
2，5 精密度试验：精密吸取同一供试品溶液10
HI。，重复进样6次，测定，结果其峰面积防己诺林碱
RSD为0．35％；粉防己碱0．37％。
2．6重现性试验：精密称取防己药材粉末0．4g共
6份，按“供试品溶液的制备”项下进行处理并测定，
每份进样两次各10pI。，以峰面积平均值计算，防己
诺林碱RSD为0．48％；粉防己碱0．63％。说明该方
法的重现性好。
2，7稳定性试验：精密吸取供试品溶液lopI。，分
别在0、2、4、6、8、10、12、30h进样1次，连续8次，
计算峰面积平均值。结果防己诺林碱RSD为
0．32％，粉防己碱0．33％。表明样品在30h内稳定。
2．8加样回收率试验：称取肪己药材粉末约0。2g
共6份，精密称定，分别按相当于药材中防己诺林碱
和粉防己碱的80％、100％、120％的量加入混合对
照品溶液，按“供试品溶液的制备”项下进行处理并
测定，计算回收率．平均回收率为防己诺林碱
99．12％，RSD为3．36％；粉防己碱101．55％，RSD
为4．14％。
2．9样品测定：取防己药材粉末各约0．4g，精密称
定，按“供试品溶液的制备”项下进行处理并测定，结
果见表l。
表1防己中粉防己碱和防己诺林碱的测定(月一3)
Table1 Determinationoftetrandrineandfangchinoline
inrootofS．tetrandraB(H一3)
3讨论
3．1 检测波长的选择：经岛津SPD—M10AVP
DAD检测器分析，样品282nm处有吸收峰，而242
nm处虽然吸光度值高，但并不在吸收峰／谷处，因
此，应选择在282nm波长处来测定样品中防己诺
林碱、粉防己碱的量。
3．2在提取条件的筛选中，分别采用了冷浸10h
后超声1．5h，回流提取3h和索式提取6h的方
法，以峰面积为评价指标进行考察，回流得率比超声
的高，且与索式提取相当，由于回流方法相对简便，
所以选择了回流提取的方式。进一步试验不同回流
时间(20、40、60、90rain)，发现回流时间对得率影响
不大，可选择1．5h回流提取。
3．3色谱柱的选择：试验中选择了依利特Hypersil
ODS2(250mm×4．6him，5pm)、VARIAN
Microsorb—MV100—5ClB(250mm×4．6mm，5
pm)、岛津Shim—pack：Vp一0DS(250mm×4．6
mm)色谱柱，流动相采用乙腈一0．2％磷酸(63：37，
三乙胺调pH至8．0)，发现只有岛津色谱柱能在分
析条件下使样品中粉防己碱峰体现出较好的对称
性。所以采用岛津柱。
3．4在流动相的筛选过程中发现，如果流动相中没
有三乙胺，可见峰形的拖尾较严重，其原因可能是粉
防己碱中的碱性氮原子易与C，。色谱柱上未完全封
尾的氢氧根产生的氢键结合，使其难以洗脱，造成拖
尾。加入三乙胺后可取代粉防己碱与色谱柱中的氢
氧根产生的氢键结合，减少粉防己碱在色谱柱上的
吸附。使其易于洗脱，从而改善色谱峰的形状。在本实
验流动相筛选过程中曾用过二乙胺，僵其分离效果较
三乙胺差。综上所述，认为本方法简便、专属性强、灵
敏度高且重现性好，适用于粉防己碱的定量分析。
References：
[13 LiJP·DiLZ，XuH-DeterminationoftelrandrineinLeifeng
IAnimenthydoublewavelengthTI．C·scanning[J]Chin
T’raditHerbDurgs(中草药)，2002，33(5)：407．
[2]LlYQ，Chen1J．ZhuJH TI．CSDeterminationofIetra—
hydropalmatine，tet*andrineanddemethyltetrandrinein
Tong[ikeInjection订]ChinJP^盯mA al(药物分析杂志)．
2001，2l(1)：2830
[3]LouJS，ZhangC1．．Pharmacokineficsol{ lrandrineinrabbit
invivoEJ]ChinTraditHerbDurg。(中草药)，1993。24
“)=24
[41WangSY，WanI．，YanDExtractndisolationof⋯一
phenolalkaloidinRadixStephaniaeTetrandraeEJ]．Chin
TraditPatMed(中成药)，1998，20(10)；1617．
Is]SongXF，YuJ I)elerminationofleTrandrineandfang-
chlnoiineinQingshenjianfeiTabletshyRP—HPI．C[J]．Chin
TradltHerbDurgs(中草药)，2005，27(4)：4054 7．
[6]ChP(中同药妊)Is]．Vol1．2005
《中草药》杂志被确认为允许刊载处方药广告的第一批医药专业媒体
据国家药品监督管理局、国家工商行政管理局和国家新闻出版总署发布的通知，《中草药》杂志
作为第一批医药专业媒体，允许发布“粉针剂、大输液娄和已经正式发文明确必须凭医生处方才能
销售、购买和使用的品种以反抗生素类的处方药”广告。
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万方数据
HPLC法同时测定防己药材中防己诺林碱和粉防己碱
作者： 饶毅， 黎莉， 刘隆洪， 袁华生， 魏惠珍， 黄周华， 杨世林
作者单位： 饶毅,魏惠珍,黄周华,杨世林(中药固体制剂制造技术国家工程研究中心,江西,南昌,330006)
， 黎莉(江西中医学院,江西,南昌,330006)， 刘隆洪,袁华生(江西翔云生物药业有限公司
,江西,遂川,343900)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(4)
被引用次数： 6次

参考文献(6条)
1.Li J P;Di L Z;Xu H Determination of tetrandrine in Leifeng Liniment by double-wavelength TLC-
scanning[期刊论文]-中草药 2002(05)
2.Li Y Q;Chen L;Zhu J H TLCS Determination of tetrahydropalmatine,tetrandrine and
demethyltetrandrine in Tonglike Injection[期刊论文]-药物分析杂志 2001(01)
3.Lou J S;Zhang C L Pharmacokinetics of tetrandrine in rabbit in vivo 1993(01)
4.Wang S Y;Wan L;Yan D Extract and isolation of nonphenol alkaloid in Radix Stephaniae Tetrandrae
1998(10)
5.Song X F;Yu J Determination of tetrandrine and fangchinoline in Qingshenjianfei Tablets by RP-HPLC
[期刊论文]-中草药 2005(04)
6.中国药典(一部) 2005

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引证文献(6条)
1.刘永刚.刘勇.何瑞杰.赵保胜.韩静.马群 HPLC测定防己中防己诺林碱和粉防己碱的含量[期刊论文]-中国实验方
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3.张立 高效液相色谱法同时测定复方防己颗粒中粉防己碱和防己诺林碱的含量[期刊论文]-中国医院药学杂志
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5.魏素.吴俊贤.黄春晓 HPLC法测定复方罗布麻片中防己诺林碱与粉防己碱的含量[期刊论文]-今日药学 2010(7)
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