全 文 ：·1194· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
正交试验优选人参中丙二酰基人参皂苷的提取工艺研究
孙光芝1，王继彦2，刘 志1，匿圈3，张俊杰1，郑毅男3。
(1．吉林农业大学生物防治研究所，吉林长春130118；2．长春中医学院，吉林长春130118；
3．吉林农业大学中药材学院，吉林长春130118)
丙二酰基人参皂苷(malonyl—ginsenoside)又称
为丙二酸单酰基人参皂苷，是一类极性大，亲水性
强，极易溶于水的酸性皂苷，另外该类化合物分子中
酰基键极不稳定，很容易水解，遇酸、碱或在热水、热
甲醇条件下都会发生水解反应脱去丙二酸，成为相
应的人参皂苷[1“]。丙二酰基人参皂苷Rb。具有促
进小鼠齿状突长时程增效作用，对神经生长因子诱
导外培养鸡胚的背根神经突的外生长有增强作
用[5’63；本课题组也发现该类皂苷的提取物(以M—
Rb。、M—Rb：、M—Rc为主)具有很强的降糖活性，能
降低糖尿病模型小鼠血糖，促进肝糖元合成。然而该
类皂苷在总皂苷的提取工艺中，常常和水溶性杂质
一起被废弃掉。为了减少这部分皂苷的损失，为开发
新药提供技术储备，本实验对人参中丙二酰基人参
皂苷的提取工艺进行了优化研究。
1实验材料、仪器与试剂
实验材料系2004年9月上旬采于抚松县的鲜
人参的根(主根)，经吉林农业大学中药材学院
『李向高l教授鉴定。
Agilent1100高效液相色谱仪；旋转蒸发仪。
乙腈为色谱纯，其他试剂为分析纯。丙二酰基人
参皂苷M—Rb。、M—Rb。和M—Rc对照品为自制，质
量分数分别为99．54％、99．39％、99．42％。
2方法与结果
2．1丙二酰人参皂苷的HPLC测定
2．1．1色谱分析条件：／．t-BondapakTMC一18色谱柱；
柱温：35℃；检测波长：203nm；体积流量：1mE／
min；流动相：乙腈一0．05mol／LKH2P04(25：75)；
进样量：20弘L。
2．1．2供试品溶液的制备：鲜人参根切碎，精密称
取2．5g，按正交试验设计的工艺进行提取，40‘C下
浓缩提取液，用30％乙腈溶解，定容至10mL量瓶
中，摇匀放置，用前用0．25肛m滤膜滤过，即得。
2．1．3对照品溶液的制备：精密称取丙二酰人参皂
苷M—Rb，、M—Rb。和M—Rc对照品分别为3．70、
3．00、2．50mg，用30％乙腈定溶于2mL量瓶中，摇
匀，然后精密吸取0．1mL对照品溶液置于1mL量
瓶中，用30％乙腈稀释至刻度，摇匀，即得。
2．1．4标准曲线的制备：分别吸取上述对照品溶液
10、20、40、80、160、320、640肛L，分别置于1m 量
瓶中，加30％乙腈稀释至刻度，制备成不同质量浓
度的系列对照品溶液。分别精密吸取不同质量浓度
的系列对照品溶液各20弘L进样，测定峰面积。以色
谱峰面积为纵坐标(y)，进样量为横坐标(x)，绘制
标准曲线，计算回归方程。
M—Rbl：Y=2685．0050X一5．3410，r一
0．99979，线性范围：0．01853～1．18592mg／mL。
M—Rb2：y一2139．3203X一5．8157，r=0．99966，
线性范围：0．0154～o．9882mg／mL。M—Rc：y一2
114．0541X一3．8801，，．一0．99961，线性范围：
0．0129～O．8250mg／mL。
2．1．5稳定性试验：取供试品溶液，精密吸取20
弘L，按上述色谱条件，分别于0、2、4、8h检测峰面
积，计算得丙二酰基人参皂苷M—Rb。、M—Rb。和M—
Rc的RSD分别为1．00％、1．35％、2．64％。
2．1．6精密度试验：取丙二酰基人参皂苷M—Rb。，
M—Rb。和M—Rc的对照品溶液，精密吸取20肛L，按
上述色谱条件进行分析，连续5次，测定峰面积，计
算得其RSD分别为1．63％、1。65％和1．95％。
2．1．7重现性试验：取同一鲜人参根样品5份，制
备供试品溶液，分别精密吸取20肛L，按上述色谱条
件，测定峰面积，结果M—Rb。、M—Rb：和M—Rc的
RSD分别为3．49％、4．09％和3．79％。
2．1．8回收率试验：采用加样回收法。分别取质量
分数M—Rbl0．240％、M—Rb20．188％、M—Rc
0．117％的鲜人参根碎末0．5g，用80％甲醇冷浸提
取5次，40℃下浓缩提取液，用30％乙腈溶解，定容
至2mL量瓶中，摇匀放置，用0．25肛m滤膜滤过。
收稿日期：2005—11—09
作者简介：孙光芝(1967～)，女，吉林长春人，副研究员，主要从事中药活性物质研究与开发。
*通讯作者郑毅男E—mail：jlndxdhs@126．corn
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8,el·1195·
精密取6份样品，分别准确加入一定量的人参皂苷
M—Rb，、M—Rb。、M—Rc对照品，按上述色谱条件测
定，结果M—Rb。平均回收率为100．72％(RSD为
2．670A)；M—Rb：平均回收率为100．25％(RSD为
2．48％)；M—Rc平均回收率为101．09％(RSD为
2．15％)。
2．1．9测定：采用外标法计算丙二酰基人参皂苷
M—Rbl、M—Rb2和M—Rc。
2．2提取工艺的正交设计：由于丙二酸单酰基人参
皂苷是极性大、亲水性强皂苷，受热易转化脱去丙二
酸单酰基，因此在红参和加热高温提取的提取物中，
不含有M—Rb。、M—Rb。和M—Rc3种酸性皂苷[7]。为
避免丙二酰基人参皂苷的转化，本实验采用冷浸方
法提取。根据预试验，以溶剂倍数(A)、溶剂体积分
数(B)、提取时间(C)和提取次数(D)为影响因素，各
取3个水平，考察指标为丙二酰基人参皂苷总量
(M—Rb，、M～Rb。和M—Rc3种丙二酰基人参皂苷的
量之和)。采用L。(34)正交表，因素水平见表1，试验
结果见表2。
表1因素水平
Table1 Factorsandlevels
因 素水平——
A／倍 B／％ C／h D／次
序号 A B C D 丙二酰基皂苷／％
2．3验证试验：鲜人参根切碎，精密称取2．5g，用
80％甲醇冷浸提取，合并提取液，于40℃下浓缩后，
用30％乙腈溶解，定容至10mL量瓶中。结果丙二
酰基人参皂苷的量为1．286％，与表2中数据相比
紧次于最高的量值。因而确定丙二酸单酰基人参皂
苷提取最佳工艺为：溶剂倍数为20倍，甲醇体积分
数为20％，提取时间12h，提取次数5次。
3讨论
溶剂的倍数、提取时间和提取次数均为丙二酰
基人参皂苷的提取量有显著的影响，溶剂的体积分
数对丙二酰基人参皂苷的提取量影响较弱，认为
20％～80％甲醇均可，从节约的角度应用20％甲
醇，从提取中性皂苷的角度应用80％甲醇。
提取丙二酰基人参皂苷优化组合是A。，B。，C。，
D。，即溶剂倍数为20倍，甲醇体积分数为20％，提
取时间12h，提取次数5次。
工艺中采取冷浸和低温保藏是为了尽量减少丙
二酰基人参皂苷的转化，20％甲醇提取与高体积分
数甲醇相比丙二酰基人参皂苷的量多而其他皂苷相
对减少，20％甲醇提取有利于丙二酰基人参皂苷的
分离制备。
笔者在研究人参皂苷的过程中，从中国鲜人参
中发现了两种丙二酰基人参皂苷，至此已发现的丙
二酰基人参皂苷有5个；除了已知的5个丙二酰基
人参皂苷外，是否还有其他丙二酰基人参皂苷，需要
进一步研究探讨。
文献已报道丙二酰基人参皂苷Rb，具有一定
的药理活性，本课题组亦发现其降糖活性，那么其他
丙二酰基人参皂苷单体是否也有药理活性尚需进一
步探讨。
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万方数据
正交试验优选人参中丙二酰基人参皂苷的提取工艺研究
作者： 孙光芝， 王继彦， 刘志， 李向高， 张俊杰， 郑毅男
作者单位： 孙光芝,刘志,张俊杰(吉林农业大学生物防治研究所,吉林,长春,130118)， 王继彦(长春中
医学院,吉林,长春,130118)， 李向高,郑毅男(吉林农业大学中药材学院,吉林,长春
,130118)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 4次

参考文献(6条)
1.Kitagawa I;Taniyama T;Hayashi T Malonylginsenoside Rb1,Rb2,Rc,Rd,four new malonylated dammarane-
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引证文献(4条)
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2.何毓敏.鲁科明.袁丁.张长城 竹节参总皂苷的制备工艺及含量测定[期刊论文]-中国中药杂志 2008(22)
3.张晓俊.闫桂琴 翅果油树叶片中三萜皂苷的提取工艺研究[期刊论文]-浙江农业科学 2012(1)
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