全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·443·
高效毛细管电泳法测定红景天中没食子酸的含量
祝馨怡1，罗兴平h2，陈立仁1，柳春辉1，李永民1
(1．中国科学院兰州化学物理研究所，甘肃兰州 730000；2．甘肃省药品检验所，甘肃兰州730000)
藏药红景天有高原人参之称，具有滋补强壮、耐
缺氧、抗疲劳、抗辐射、抗病毒、抗癌及适应原样作
用，不但有类似人参、刺五加的滋补强壮作用，而且
在某些方面更优于这两种药物[1]。已报道的红景天
主要成分为红景天苷及其苷元酪醇、没食子酸及其
苷类、山柰酚及其苷类、草质素及其苷类[2]，没食子
酸具有较强的抗菌、抗病毒和抗肿瘤作用[3]。目前，
HPLC法[43和TLCS法[51测定中药中没食子酸的含
量已有报道，但红景天中没食子酸的含量测定尚未
见报道。本实验用高效毛细管电泳法(HPCE法)测
定了红景天中没食子酸的含量，该法快速、灵敏，结
果准确、可靠。可用于红景天药材及其制剂中没食子
酸的含量分析。
1仪器与试药
P／ACEMDQ型毛细管电泳仪(Beckman
Coulter公司，美国)；二极管阵列(PDA)检测器；石
英毛细管柱(河北永年光导纤维厂)，80cm×75
／am，有效长度57cm。
磷酸氢二钠(分析纯，北京新光化学试剂厂)，甲
醇(色谱纯，山东省禹王实业有限公司禹城化工厂)，
对照品没食子酸(中国药品生物制品检定所)，红景
天RhodiolaFoseaL．(甘肃省奇正药业公司，由甘肃
省药品检验所鉴定)，所用其他试剂均为分析纯，实
验中配制缓冲液和样品液所用的水均为去离子水
(Milli—Q)。
2方法与结果
2．1实验条件：压力进样0．0034MPa×8s；运行
时间15min；分离电压20kV(恒压分析)；柱温：25
。C；检测波长：214nm；运行缓冲液为20mmol／L磷
酸盐缓冲液(pH一7．5)。毛细管在使用前用0．1
mol／LNaOH、H。O、运行缓冲液分别冲洗3min，每
次进样前用运行缓冲液淋洗2min。电泳分离图见
图1。
2．2缓冲液的制备：配制150mmol／L磷酸盐储备
蕾—育—唷r 1～1—1——矿1矿市
时间t／rain
图1 没食子酸(A)和红景天样品(B)的电泳分离图
Fig．1Electrophoretogramofgallica id(A)
andR．roseas mple(B)
液，各取适量以制得pH为8．5～5．5，5～40
mmol／L磷酸盐缓冲溶液(用H。PO。调pH)。
2．3对照品溶液的制备：精密称取没食子酸对照品
适量，加50％甲醇制成0．15mg／mL对照品溶液。
2．4供试品溶液的制备：取红景天粉末约1．5g，精
密称定，置于100mL锥形瓶中，精密加50％甲醇
50mL，密塞，称定质量，超声处理1h，放冷，再称定
质量，用50％甲醇补足减失的质量，摇匀，滤过，取
滤液经0．45弘m微孑L滤膜滤过后即得。
2．5 标准曲线制备：精密称取没食子酸对照品适
量，加50％甲醇制成0．4mg／mL溶液，作为对照品
贮备溶液。精密吸取对照品贮备液0．5、1．0、2．0、
3．0、4．0、5．0mL分别置10mL量瓶中，用50％甲
醇稀释至刻度，摇匀，分别进样测定峰面积积分值，
以对照品峰面积积分值为纵坐标(y)，相应对照品
质量浓度(x)为横坐标进行线性回归，计算没食子
酸在0．02～0．2mg／mL具有良好线性关系，线性回
归方程为：Y一4352563X一25946．5，r一0．9996。
2．6 精密度试验：取没食子酸对照品溶液，在优化电
泳条件下重复进样5次，分析测定对照品峰面积积分
值，RSD：1．45％，表明本分析方法精密度较好。
2．7重现性试验：取红景天样品(批次2)按样品测
定方法处理后在优化条件下测定，6次平行实验，结
收稿Et期：2004—06—26
基金项目：中国科学院百人计划
作者简介：祝馨怡(1976一)，女，山东青州人，博士，主要从事液相色谱研究。
Tel：(0931)8278931Fax：(0931)8277088E—mail：chenlr@as．1zb．ac．cn
万方数据
·444· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
果测得红景天样品中含没食子酸分别为4．17、
4．23、4．15、4．18、4．21、4．24mg／g(RSD一0．85％，
咒一6)，表明样品处理过程和测定方法均有良好的重
现性。
2．8稳定性试验：取红景天样品溶液，在0、0．5、1、
2、4、8h分别按上述电泳条件分析测定，记录峰面
积积分值，结果峰面积积分值的RSD一0．65％。可
见样品提取溶液在8h内是稳定的。
2．9回收率试验：采用加样回收法，取红景天(质量
分数为4．18mg／g)样品共6份，精密称定，精密加
入一定量对照品贮备液(o．1684mg／mL)，依法制
备供试品溶液、进样，记录色谱图，计算平均回收率
97．52％，RSD一1．19％。
2．10样品测定：分别取不同批次的红景天样品按
样品溶液制备方法处理后在优化分离条件下测定，
计算样品中没食子酸的质量分数，结果见表1。
表1 红景天样品测定结果(n一3)
Table1 DeterminationofR．r seasample(拧一3)
批次 没食子酸／(mg·91) RSD／％
3讨论
3．1缓冲体系的选择：按常规的毛细管区带电泳方
法，分别考察了硼砂、磷酸盐、Tris—H。PO。等缓冲液
体系作为运行缓冲液时样品的分离情况，实验发现
磷酸盐缓冲液体系对样品的分离效果较好，没食子
酸能够与样品中其他组分完全分离。
3．2 缓冲溶液pH值对分离的影响：选择20
mmol／L磷酸盐缓冲溶液作为运行缓冲液，pH值在
8．5～5．5变化，考察pH值变化对样品中没食子酸
分离的影响，结果表明随着pH值的减小，没食子酸
的迁移时间逐渐延长，而其他组分的迁移时间变化
较小，因此没食子酸与其他组分的分离更完全。当
pH为7．5时，没食子酸的迁移时问适中，峰形较好
并且与其他组分可以实现基线分离，因此选择pH一
7．5的磷酸盐缓冲体系作为运行缓冲液。
3．3 磷酸盐浓度对分离的影响：在pH为7．5时，
考察了5、10、15、20、30、40mmol／L磷酸盐缓冲液
作为运行缓冲液时对样品的分离情况，研究发现随
着盐浓度增加，没食子酸的出峰时问延长，而其他组
分的出峰时间变化较小，因此没食子酸与其他组分
的分离更加充分。当磷酸盐浓度为20mmol／L时，
没食子酸出峰时间适中，峰形较好且可以实现与其
他组分的基线分离。因此20mmol／L的磷酸盐缓冲
液(pH7．5)为最佳运行缓冲液。
3．4运行电压的选择：提高分离电压可以缩短分析
时间，实验中比较了15～25kV分离电压时的没食
子酸分离情况，电压为20kV时分离时间合适，分
离效率较高且峰形较好，因此选择20kV电压作为
分离电压。
3．5检测波长的选择：取没食子酸对照品溶液为分
析对象，20mmol／L磷酸盐缓冲液(pH7．5)为运行
缓冲液，在190～330nm进行二极管阵列扫描，结
果214nm为检测波长，检测灵敏度高，基线稳定。
3．6样品提取方法考察：分别采用30％甲醇、50％
甲醇、70％甲醇、甲醇等溶剂对红景天样品进行超声
提取比较试验，结果表明样品用50％甲醇超声提取
1 h效果最佳。
3．7 高效毛细管电泳作为一种新的分离分析方法，
具有高效、快速、操作成本低和试剂用量少等突出优
点，在药物分析中得到日益广泛的应用。本实验建立
的红景天药材中没食子酸的毛细管区带电泳(CZE)
分离分析法，可使没食子酸与其他组分得到完全分
离，为红景天及其制剂中没食子酸的含量分析提供
了一个很好的色谱参考条件。
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万方数据
高效毛细管电泳法测定红景天中没食子酸的含量
作者： 祝馨怡， 罗兴平， 陈立仁， 柳春辉， 李永民
作者单位： 祝馨怡,陈立仁,柳春辉,李永民(中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃,兰州,730000)， 罗
兴平(中国科学院兰州化学物理研究所,甘肃,兰州,730000;甘肃省药品检验所,甘肃,兰州
,730000)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(3)
被引用次数： 6次

参考文献(5条)
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6.赵兴玲 中药有效成分分离分析及活性筛选的毛细管区带电泳研究[学位论文]硕士 2006

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