全 文 ：中草黄 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月
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川射干中射干苷的制备方法
柳 伟，李路军，李 宇，韩凤梅，陈 勇+
(湖北大学中药生物技术省重点实验室，湖北武汉430062)
摘要：目的从川射干中制备射干苷。方法提取液经DM401型大孔吸附树脂分离纯化制备川射于总异黄酮，
总异黄酮再经半制备型色谱分离制备射干苷。结果 产品经熔点、薄层色谱、IR、UV、ESI—MS、NMR分析，并与文
献对比，确定为射干苷，质量分数>98％。结论该方法重复性好，制备的射于苷纯度高。
关键词：川射干；射干苷；制备色谱
中围分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)02—0209一02
PreparativemethodoftectoridinfromrhizomefIristectorum
LIUWei，LIu-jun，LIYu，HANFeng—mei，CHENYong
(HubeiProvinceKeyLaboratoryofBiotechnologyofTraditionalChineseMedicine，
HubeiUniversity，Wuhan430062，China)
Keywords：IristectorumMaxim．；tectoridin；preparativech om tography
川射于是鸢尾科鸢尾属植物鸢尾Iristectorurn
Maxim．的干燥茎根，为《中国药典92005年版新增
品种，功能是清热解毒、消痰利咽、消积，用于咽喉肿
痛、痰咳气喘等症。川射干中总异黄酮较药典其他射
干品种高，射干苷是其中的一个主要活性成分，常用
作药材及其相关制品的质量控制指标。制备型
HPLC具有分离过程样品不易变性、产品回收率与
纯度高、制备周期短等特点，特别适合某些珍贵和难
分离物质的分离纯化[1]。本实验采用大孔树脂吸附
与半制备色谱对川射干乙醇提取液进行了分离纯
化，得到了高纯度的射干苷。
1仪器与材料
KnauerSmartline半制备型高效液相色谱仪
(SmartlineUV2500检测器，KnauerSmartline工
作站)，Agilentll00HPLC(G1328BDAD检测器，
Agilent1100工作站)，FD—n冷冻干燥机(北京博
医康实验仪器有限公司)；DM401大孔树脂(天津市
海光化工有限公司)，川射干药材(经本院植物学教
研室王万贤教授鉴定)，GF。；。(20cm×5cm)硅胶薄
层板(青岛海洋化工厂出品)，岛津UV一1601紫外
光谱仪，710FT红外光谱仪(尼高利公司)，
INOVA600核磁共振仪(美国Varian公司)，LCQ叫
型质谱仪(美国Finnigan公司，包括电喷雾电离源，
TSPAS3000自动进样器，自带Xcalibur软件)。
2方法与结果
2．1 射干苷的提取与纯化：先将60目10g川射干
干粉用5倍量石油醚回流脱脂1h，然后以80％乙
醇(固液比1：8)回流提取2次，每次2h[ ]。合并提
取液并浓缩至100mL，上DM401大孔树脂柱进行
动态吸附，然后以3倍量于柱体积的水洗脱，再以同
样量20％乙醇洗脱，最后用80％乙醇洗脱，体积流
量均为1mL／min。以盐酸一镁粉反应检测总异黄酮
洗脱液(发生红色反应)，收集含异黄酮洗脱液，得到
500mL收集液。收集液经0．45btm滤膜后进半制
备HPLC纯化。实验条件：武大ODSC。。柱(200
mmx20miD．，15弘m)，55％甲醇水流动相，体积流
量为8mL／min，265nm波长检测，上样量200弘L。
收集14．5～16min组分(图1)，并减压浓缩后冷冻
干燥得白色粉末，再经重结晶得到白色结晶25mg。
2．2样品检测
收稿日期：2005—04—19
作者简介；柳伟(1975一)，男，湖北人，湖北大学2003级硕士研究生，从事天然药化研究。
*通讯作者陈勇 E—mail：cylOl610@npc．gov．cn
万方数据
·210· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第2期2006年2月
*一射干苷
*一teetoridin
图1 射干苷半制备RP—HPLC色谱图及中心切割示意图
Fig．1Centralincisionoftectoridinbysemi—
preparativeRP-HPLC
2．2．1薄层色谱检测：取白色结晶样品分别配制成
1．8mg／mL和40／zg／mL乙醇溶液，经薄层色谱分
析。实验条件为：硅胶GF。。。板，氯仿一甲醇一冰醋酸
(8：2：0．1)为展开剂，点样量10弘L，展开，展距15
cm，取出晾干后在UV254nm下观察，在绿色荧光
背景下均只呈现单一暗斑(图2)。
1—40ptg／mL
2-1．8mg／mL
图2射干苷TLC图
Fig．2TLChroma—
togramoftectoridin
2．2．2 HPLC纯度分析：分
别取0．9mg／mL和9gg／mL
的白色结晶样品乙醇液进
HPLC分析。实验条件：武大
ODSC18柱(200mm×4．6
mm，5弘m)，36％～60％甲醇
水为流动相；体积流量为1
mL／min，265nm波长室温检
测。以面积归一化法计算，主
峰面积质量分数为98．3％。然
后分别用40％、50％、60％甲
醇水洗柱，均未发现杂质峰。
HPLC图见图3。
JL
0 lO 20 30 40
t／mm
图3射干苷样品HPLC色谱图
Fig·3HPLCChromatogramoftectoridinsample
2．2．3结构分析：白色结晶的熔点为257～258℃。
UV扫描在331、265nm处有吸收峰，265nm为主
峰，331nm为肩峰。il瓜,、v。KB。rcm～：3423．6(s，一OH)，
1628(s，一OH)，1516，1585，1614(m，苯环)；核
磁数据为：1H—NMR(CD30D)3．405～3．541(6H，
br，糖H一2”，3”，4”，5”，6”)3．879(3H，S，6一OCH3)，
5．085(1H，d，H一1”)，6．836(1H，d，H一37，57)，
6．859(1H，S，H一8)，7．382(1H，d，H一2’，67)，
8．171(1H，S，H一2)；”C—NMR(DMSO)60．315
(q，6-CH3)，60．647(t，糖，C一6”)，69．641(d，糖，
C一2”)，73．131(d，糖，C一3”)，76．709(d，糖，C一4”)，
77．300(d，糖，C一5”)，94．022(d，C一8)，100．125
(糖，C一1”)，106．472(s，C一10)，115．108(d，C一37
57)，121．055(S，C一3)，121．066(S，C一1’)，
130．209(d，C一27 67)，132．444(s，C一6)，152．493
(s，C一5)，152．912(s，C一9)，154．570(d，C一2)，
156．646(d，C一7)，157．489(S，C一47)，180．795
(s，C一4)。ESI—MS数据为：m／z461(苷)，299(苷
元)，284(苷元一CH。)，281(苷元一H：O)。
经以上测定结果分析，并与文献报道对照[3]，确
认该物质为射干苷。
3讨论
本实验以川射干为原料，采用乙醇提取结合大
孔吸附树脂柱色谱和半制备型HPLC两级分离纯
化制备了高纯度射干苷。产品经过多种检测技术分
析，纯度符合新药审批办法规定对对照品的要求。
实验发现，在对药材进行乙醇提取前进行石油
醚脱脂，可以有效减少脂溶性成分对柱色谱的干扰，
提高柱色谱的效率。在比较了D101、D101—1、
DA201、DM301、DM401树脂，发现DM401型树脂
的吸附与解吸效果最好。半制备型色谱条件以川射
干总黄酮提取物的分析型色谱分离条件为基础，但
由于上样量、体积流量等的改变，制备峰形不佳，主
峰与杂质峰未完全分开。本实验采用中心切割法收
集14．5～16min内目标物洗脱液，有效避免了杂质
的干扰。
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万方数据
川射干中射干苷的制备方法
作者： 柳伟， 李路军， 李宇， 韩凤梅， 陈勇， LIU Wei， LI Lu-jun， LI Yu， HAN Feng-
mei， CHEN Yong
作者单位： 湖北大学,中药生物技术省重点实验室,湖北,武汉,430062
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(2)
被引用次数： 2次

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引证文献(2条)
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