全 文 ：　　可以看到 ,在以上的 6 种大孔吸附树脂中 ,AB2
8、D2101、H PD2100、H PD2300、HPD2700 型树脂对
绞股蓝总皂苷的静态吸附能力均较好 ,其中 AB28
的静态饱和吸附量最大 ,但是同其他几种树脂相比
较并无显著的差异。在静态洗脱中 , H PD2700 型树
脂吸附的绞股蓝总皂苷更易洗脱 ,综合考虑其吸附
量与解吸率均较高 ,且洗脱率达到 80134 % ,因此 ,
选用的大孔吸附树脂为 HPD2700。
21314 　不同体积分数的乙醇液对绞股蓝总皂苷洗
脱效果的比较 :将绞股蓝总皂苷提取液通过树脂柱 ,
分别用 10 %、30 %、50 %、70 %、80 %、95 %乙醇 200
mL 进行洗脱 ,收集洗脱液并测定总皂苷的质量浓
度 ,计算洗脱率。结果见图 1。
乙醇体积分数/ %
图 1 　不同体积分数的乙醇对绞股蓝总皂苷洗脱的
比较
Fig11 　Comparison of elution results of total saponins
in G1 penta phyllum with different
concentration alcohol
　　可知绞股蓝总皂苷的洗脱取决于乙醇的体积分
数 ,乙醇体积分数越高 ,洗脱率越高。综合工业化生
产的诸多因素 ,确定先用蒸馏水洗去水溶性杂质 ,再
用 70 %乙醇液洗脱 ,收集 70 %乙醇洗脱部分。
21315 　吸附容量的确定 :吸取绞股蓝样品液 40 mL
上柱 ,预吸附 1 h ,过柱流出液重吸附 1 次 ,先用水洗
至流出液不显 Molish 反应 ,再用 70 %乙醇液洗脱 ,
控制流速 115 mL/ min ,收集洗脱液 ,平行 3 份 ,测定
样品液中绞股蓝总皂苷的质量浓度 ,计算吸附容量
[吸附容量 = (上柱液中总皂苷量 - 平均过柱液中总
皂苷量) / 干树脂质量 ] ,结果树脂吸附总皂苷量为
60912 mg ,树脂吸附容量为 12118 mg/ g 干树脂。
3 　讨论
　　闪式提取器是根据组织破碎原理设计而成的一
种新型提取器 ,是中药提取领域的一项新技术 ,其原
理是在适当溶剂存在下 ,利用高速机械剪切力和搅
拌力 ,迅速破坏植物细胞组织 ,使组织细胞内部的化
学成分 (或有效成分) 与溶剂充分接触 ,使有效成分
快速溶解转移 ,在很短时间内达到内外溶解平衡 ,然
后滤过即可。实验中可以看出 ,利用闪式提取器提
取作为一种新技术 ,有着相对较高的效价比 ,其所用
时间仅为常规回流提取的数十至数百分之一 ,而且
避免了不耐热成分的破坏 ,且收率高 ,操作简便 ,节
约能源 ,因此可以广泛应用于工业化生产。
　　树脂法是目前公认的比较好的皂苷富集和纯化
方法 ,替代传统的正丁醇萃取 ,使纯化工艺更为简单 ,
效率大幅度提高 ,收率和纯度也得到很大程度的改
善。HPD2700 大孔吸附树脂具有吸附快、解吸率高、
吸附量大等优点 ,非常适合绞股蓝总皂苷的纯化。
参考文献 :
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志 ,2007 ,14 (6) :482491
射干配方颗粒的制备工艺和质量标准研究
田成旺1 ,马丽娜2 ,张铁军1 3 ,韩世柳3
(11 天津药物研究院 ,天津 300193 ;21 天津中医药大学 ,天津 300193 ;31 天津大学 ,天津 300072)
摘 　要 :目的 　优化射干配方颗粒制备工艺 ,建立射干配方颗粒的质量标准。方法 　采用 L 9 (34 ) 正交设计安排试
验 ,用 TLC 对射干配方颗粒进行定性鉴别 ,用 HPLC 法进行测定。结果 　射干配方颗粒制备工艺为加 10 倍量
·3701·中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
3 收稿日期 :2008211217　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　　
基金项目 :国家科技支撑计划 (2006BAI06A01202) ,天津市科技发展计划项目 (043180911)
作者简介 :田成旺 (1978 —) ,男 ,山东泰安人 ,硕士 ,目前主要从事中药新药的研究与开发工作。
Tel : (022) 23006843 　E2mail :chew_tian @1261com3 通讯作者　张铁军　Tel : (022) 23006848 　E2mail :tiezheng4 @sina1com
70 %乙醇、加热煎煮 2 次 ,每次 2 h ,射干苷转移率可达 93 % ;薄层色谱中可检出特征斑点 ;射干苷在 011712～11712
μg 线性关系良好 ,平均回收率为 96199 %。结论 　提取工艺合理 , HPLC 法易于操作 ,重复性好 ,能够控制射干配
方颗粒的质量。
关键词 :射干 ;配方颗粒 ;质量标准 ;射干苷 ;高效液相色谱
中图分类号 :R28412 ; R286102 　　　文献标识码 :A 　　　文章编号 :025322670 (2009) 0721073203
　　射干是鸢尾科射干属植物射干 B el amcand a
chi nensis (L1 ) DC1 的干燥根茎 ,具清热解毒、利咽
消痰、散血消肿的功能[1 ] 。射干含丰富的异黄酮类
化合物 ,其中代表性成分有射干苷、野鸢尾苷、野鸢
尾黄素、鸢尾苷元等 ,具明显的抗炎及抗病毒作用 ,
近年来临床用于治疗流感及上呼吸道感染 ,效果较
好[2 ] 。中药配方颗粒是将单味中药通过科学加工并
提取中药材中有效成分 ,制成中药饮片新剂型 ,与传
统的汤剂相比 ,具有免煎易服、携带方便、剂量准确、
调配方便、制作工艺科学等优势。为了更好的控制
射干配方颗粒的质量 ,有效地保证其疗效 ,本实验对
其制备工艺和质量标准进行了研究。
1 　仪器与试剂
　　Dionex 高效液相系统 ,Chlomelon 色谱数据工
作站 ,射干苷对照品 (中国药品生物制品检定所 ,批
号 1116322200501) ;射干购自河北安国市祁津药材
行 ,经天津药物研究院张铁军研究员鉴定为射干 B1
chi nensis (L1 ) DC1 的干燥根茎 ;甲醇、乙腈为色谱
纯 ,磷酸为分析纯。
2 　方法与结果
211 　射干提取工艺的正交试验设计 :根据预试验结
果 ,以射干苷提取率和出膏率为考察指标 ,以乙醇体
积分数 (A) 、乙醇用量 (B) 、提取时间 ( C) 和提取次
数 (D)作为因素 ,因素水平见表 1。
表 1 　因素与水平
Table 1 　Factors and levels
水平
因　素
A/ % B/ 倍 C/ h D/ 次
1 50 8 1 1
2 70 10 115 2
3 90 12 2 3
　　准确称取射干药材 10 g ,根据表 1 所设定的因
素水平 ,按 L 9 (34 ) 正交表实施试验 ,沸腾后开始计
时 ,加热完毕 ,趁热滤过 ,滤液收集 ,滤渣加入相应溶
剂继续提取 ,直至试验结束。按照文献报道[3 ] 测定
各试验中射干苷的转移率及出膏率 ,以综合评分[综
合评分 = 权重系数 ( 40 %) ×出膏率 + 权重系数
(60 %) ×提取率 ]对结果进行分析 ,见表 2。
　　直观分析表明 ,各因素水平之间的极差大小依
次为D > C > B > A ,表明提取次数对试验结果影响
表 2 　L9 ( 34 )正交试验设计及结果
Table 2 　Design and results of L9 ( 34 ) orthogonal test
试验号 A B C D
转移率
/ %
出膏率
/ %
综合评
分/ %
1 1 1 1 1 46181 101 99 321 48
2 1 2 2 2 79120 181 03 541 73
3 1 3 3 3 84198 201 91 591 35
4 2 1 2 3 79188 181 86 551 47
5 2 2 3 1 67170 141 24 461 32
6 2 3 1 2 72178 161 15 501 13
7 3 1 3 2 81172 181 16 561 29
8 3 2 1 3 88126 171 07 591 78
9 3 3 2 1 54130 111 40 371 14
K1 48185 481 08 47146 38165
K2 50164 531 61 49111 53172
K3 51107 481 87 53199 58120
R 2122 51 53 6153 19155
最大 ,其次是提取时间、溶剂用量 ,乙醇体积分数对
试验结果的影响最小 ,最佳条件为 A3B2 C3 D3 。但
是可以看到 ,因素 D 中 ,D1 与 D2 差别很大 ,而 D2
与 D3 之间仅差 7197 ,若选 D3 ,需增加一次 10 倍量
乙醇 2 h 的提取 ,并且 ,随之也增加了需浓缩的药液
的体积 ,大大提高了能耗、溶剂成本和时间 ,因此 ,综
合考虑选择 D2 为宜。再看因素 A ,A2 与 A3 相差无
几 ,若选 A2 ,则乙醇用量较少 ,可有效的降低成本 ,故
选 A2 为宜。因此 ,最终确定工艺条件为 A2B2 C3 D2 ,
即用 10 倍量 70 %乙醇提取 2 次 ,每次 2 h。
　　经 3 批验证试验 ,射干苷的平均提取率为
93141 % ,平均出膏率为 18144 % ,表明此工艺基本
合理。
212 　制粒 :按照优化的工艺条件进行射干的提取 ,
提取液真空浓缩至相对密度为 1115～1120 ,喷雾干
燥后直接干法制粒 ,即得射干配方颗粒。
213 　射干配方颗粒的定性鉴别 :取本品粉末 015 g ,
加甲醇 10 mL ,超声处理 30 min ,滤过 ,滤液浓缩至
1 mL ,作为供试品溶液。另取射干苷对照品适量 ,
加甲醇制成 1 mg/ mL 的对照品溶液 ,作为对照品溶
液。照薄层色谱法试验 ,吸取上述两种溶液各 5
μL ,分别点于同一硅胶 GF254 薄层板上 ,以三氯甲
烷2甲醇2冰醋酸 (20 ∶3 ∶012) 为展开剂 ,展开 ,取
出 ,晾干 ,置紫外 254 nm 下检视显色清晰。供试品
色谱中 ,在与对照品色谱相应的位置上 ,显相同的颜
·4701· 中草药　Chinese Traditional and Herbal Drugs 　第 40 卷第 7 期 2009 年 7 月
色的荧光淬灭斑点。
214 　射干苷的 HPL C 法测定
21411 　色谱条件 :色谱柱为 Diamonsil TM C18 柱
(200 mm ×416 mm ,5μm) ;流动相 :甲醇2011 %磷
酸 (40 ∶60) ;柱温 : 30 ℃;体积流量 : 110 mL/ min ;
检测波长 :266 nm。色谱图见图 1。
t/ min
12射干苷
12tectoridin
图 1 　射干苷对照品( A)和射干配方颗粒( B)的
HPLC色谱图
Fig11 　HPLC Chromatograms of tectoridin reference
substance ( A) , and Rhizoma Belamcandae
dispensing granula ( B)
21412 　对照品溶液的制备 :精密称取射干苷对照品
2114 mg ,置 50 mL 量瓶中 ,用甲醇溶解并稀释至刻
度 ,摇匀 ,即得 4218μg/ mL 的溶液。
21413 　供试品溶液的制备 :精密称取射干配方颗粒
(批号 060701) 约 011 g 置 100 mL 量瓶中 ,加甲醇
80 mL 超声 30 min ,冷却后用甲醇加至刻度 ,摇匀 ,
0145μm 微孔滤膜滤过 ,取续滤液作为供试品溶液。
21414 　线性关系考察 :依次吸取 2、4、6、8、10、12、
14、16、18、20μL 射干苷对照品溶液注入高效液相
色谱仪 ,测定峰面积值。以进样量为横坐标 ,色谱峰
面积 为 纵 坐 标 , 得 回 归 方 程 : Y = 451365 X -
141505 , r = 01999 9。结果表明 ,射干苷在01171 2～
11712μg 时峰面积与质量浓度呈良好的线性关系。
21415 　精密度试验 :精密吸取上述供试品溶液 10
μL ,重复进样 6 次 ,按上述色谱条件测定 ,记录峰面
积 ,计算得 RSD 为 0135 %。
21416 　稳定性试验 :精密吸取上述供试品溶液 10
μL ,分别在放置 0、2、4、8、12、24 h 进样 ,按上述色谱
条件测定射干苷的峰面积 ,计算得 RSD 为 0174 %。
结果表明 ,供试品溶液在 24 h 内稳定。
21417 　重现性试验 :精密称取批号 060701 的射干
配方颗粒样品 6 份 ,制备供试品溶液 ,测定 ,计算得
出样品中射干苷的平均质量分数为 30112 mg/ g ,
RSD 为 1146 %。
21418 　加样回收率试验 :称取射干配方颗粒粉末约
0105 g ,共 6 份 ,精密称定 ,每份精密加入 115 mg 射
干苷对照品 ,制备供试品溶液 ,进样 ,测定 ,计算回收
率 ,结果平均回收率为 96199 % ,RSD 为 1125 %。
21419 　样品测定 :分别称取不同批号的射干配方颗粒
约 011 g ,精密称定 ,制备供试品溶液 ,按上述色谱条件
测定 ,采用外标法计算 ,结果见表 3。
表 3 　射干配方颗粒中射干苷的测定结果( n = 3)
Table 3 　Determination of tectoridin content in Rhizoma
Belamcandae dispensing granula ( n = 3)
批　号 射干苷/ (mg ·g - 1)
060701 301 12
060702 291 75
060703 301 64
3 　讨论
　　采用正交优化试验的方法 ,以射干苷的转移率
和出膏率进行综合评价 ,确定了射干的提取最佳工
艺参数为加 10 倍量 70 %乙醇 ,煎煮提取 3 次 ,每次
115 h。经 3 批验证 , 射干苷的平均提取率为
93141 % ,平均出膏率为 18144 % ,表明该工艺参数
合理可行。
　　TL C 法鉴别射干苷 ,准确可靠 ,用 H PL C 法检
测配方颗粒中射干苷 ,易于操作 ,重现性好 ,能有效
控制射干配方颗粒的质量。
　　射干异黄酮是射干药材中的主要活性成分 ,具
有显著的抗炎及抗病毒作用 ,射干苷是射干异黄酮
的代表性成分之一 ,因此 ,将射干制成配方颗粒 ,并
以射干苷作为质量控制指标是合理可行的。
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