全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月·219·
质量分数为0．8639mg／g，RSD为2．35％(卵一5)。
2．9稳定性试验：取同一样品，制备供试品溶液，分
别于0、1、2、4、6h进样，每次5弘L，结果岩白菜素质
量分数的RSD为0．53％，说明供试品溶液中岩白
菜素在6h内是稳定的。
2．10回收率试验：精密量取已测定含量的同一供
试品(岩白菜素质量分数为0．8639rng／g)5份，各
0．75g，加入岩白菜素对照品适量，制备供试品溶
液，精密吸取供试品溶液5ttL进样，测定，结果岩白
菜素的平均回收率为101．6％，RSD为1．44％。
2．11样品测定：取本品10批，制备供试品溶液，分
别取供试品溶液和对照品溶液各5肛L，进样测定，
结果见表1。可见10批样品中岩白菜素在0．42～
0．85mg／g，故定本品以岩白菜素(C。。H。。0。)计不得
低于0．40mg／g。
表1七神喉痹通颗粒中岩白菜素测定结果(咒一2)
Table1 Determinationofbergenini Qishen
HoubitongGranule(席一2)
批次
岩白菜素
批次
岩白菜素
／(mg·g1) ／(rag·g一1)
20000125 0．46 20010614 0．46
20000316 0．43 20011106 O．48
20000314 0．42 20020312 0．42
20000706 0．53 20020324 0．85
20000311 0．45 20020327 0．78
3讨论
3．1 在190～360nm测试岩白菜素对照品溶液的
吸收光谱，岩白菜素在、215nm和274nm均有吸收，
选择274nlTI作为检测波长，杂质对测定无干扰。
3．2 试验中选择了KromasilC18(200mmX
5．0mm，5um)、HypersilODS(150mm×4．6mm，
5 um)、SepucolCL8(250mmx4．6mm，5um)色谱
柱；流动相采用甲醇一水、乙腈一水系统，均能分离矮
地茶中岩白菜素，由于七神喉痹通颗粒中干扰成分
较多，最后选择以KromasilC18(200mmX5．0mm，
5um)色谱柱，乙腈一水(8：92)为流动相。
References：
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HPLC—ELSD测定参芪降糖颗粒中人参皂苷Rg。和Re的含量
王守箐
(临沂师范学院，山东临沂276000)
参芪降糖颗粒是由人参(茎叶)、黄芪等11味中
药制得的复方制剂，具有益气养阴，滋脾补肾功效，
主治消渴症，临床用于Ⅱ型糖尿病。人参为方中君
药，一般将其有效成分人参皂苷Re、Rg，作为制剂
的质量指标。目前参芪降糖颗粒定量部分为薄层扫
描法测定人参皂苷Re的含量[1]。本实验在参考文
献[2’33的基础上，采用HPLC—ELSD法同时测定人
参皂苷Re和Rg。的含量。结果表明，该法线性关
系、回收率良好，重现性优于薄层扫描法，可用于该
品种的质量控制。
1仪器与试药
收稿日期：2004—04—17
Agilentll00Series(美国Agilent公司)，
ELSD一2000(Alltech公司)；人参皂苷Re、Rg。对照
品(中国药品生物制品检定所)；参芪降糖颗粒(鲁南
制药股份有限公司)；阴性样品(自制)；乙腈为色谱
纯，其他试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：KromasilC18柱(150mlTlX
4．6mm，5肛m；天津特纳公司)；流动相：乙腈一水
(22：78，甲酸调pH至2．2)；体积流量：1．0mL／
min；柱温：室温；进样量：20肛L。ELSD参数：漂移管
温度110℃；空气流量3．0L／min。
万方数据
·220· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月
2．2对照品溶液的制备：分别精密称取于60℃减
压干燥4h的人参皂苷Re、Rg。对照品适量，以流动
相溶解并稀释成0．8mg／mL的溶液，作为对照品储
备液。临用时，取两种储备液适量，置同一量瓶中，以
流动相稀释成人参皂苷Re、Rg。质量浓度分别为
80、40／zg／mL的溶液作为对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：取本品适量，研细，精密称
取细粉1．5g，置具塞锥形瓶中，加80％甲醇50
mL，密塞，超声处理40min，放冷，滤过。精密取续
滤液10mL，挥去甲醇，残液以10mL水转移至分
液漏斗中，以醋酸乙酯提取3次，每次20mL，弃去
醋酸乙酯液，水液用水饱和的正丁醇提取4次(20、
20、15、15mL)，合并正丁醇液，用氨试液提取2次，
每次30mL，弃去氨液，正丁醇液挥干，残渣以流动
相10mL溶解，经微孑L滤膜滤过，即得。同法制备阴
性对照溶液。
2．4干扰试验：分别取对照品溶液、阴性对照溶液
20．uL注入液相色谱仪，记录色谱图，在与对照品色
谱图相应位置上，阴性对照溶液色谱图中无干扰峰
(图1)。
A
2
．
人人
0 5 10 1520250 5 l()15202505 1015 2025
时间t／min
图1对照品(A)、参芪降糖颗粒(B)和缺
人参的阴性对照(c)的HPLC图谱
Fig．1HPLCchromatogramsfmixedreference
substances(A)，ShenqiJiangtangGranula(B)。
andnegativesamplewithoutgingseng(C)
2．5线性关系考察：精密取对照品储备液适量，用
流动相制成含人参皂苷Rg，、Re质量浓度分别为
20、40、60、80、100、120肛g／mL和10、20、30、40、50、
60ptg／mL的溶液，分别取20肛L依次测定，以进样
量X(_ug)对峰面积y进行线性回归，得回归方程
R91：Y一35467X+79832，，．一0．9987和Re：Y一
573462X+4532796，r一0．9990，表明人参皂苷
R91在0．4～2．4pg、人参皂苷Re在0．2～1．2弘g
与峰面积呈良好的线性关系。
2．6精密度试验：取混合对照溶液重复进样5次，
结果人参皂苷Rg，峰面积的RSD一0．42％，人参皂
苷Re峰面积的RSD=0．26％。
2．7重现性与稳定性试验：取批号为031001样品，
平行制备6份供试品溶液，进样测定，结果人参皂苷
Rg，峰面积的RSD一0．3％，人参皂苷Re峰面积的
RSD=0．5％。取其中一份供试品溶液，制备后每隔
2h测定1次，结果人参皂苷Rg，峰面积的RSD一
1．1％，人参皂苷Re峰面积的RSD一1．4％，表明供
试品溶液在室温下12h内基本稳定。
2．8回收率试验：精密称取颗粒(批号：031001，含
人参皂苷Re为3．10mg／g，人参皂苷Rg。为1．42
mg／g)细粉0．75g，共9份，均分为3组，每组分别
精密加入人参皂苷Re与Rg。对照品储备液1．5、
3．0、4．0和0．8、1．5、2．0mg，照供试品溶液制备项
下方法处理，进样测定，并计算回收率，结果人参皂
苷Rg。和Re的平均回收度分别98．5％、98．3％，
RSD分别为0．7％、0．15％(以一9)。
2．9样品测定：取样品3批，制备供试品溶液，分别
取对照品溶液和供试品溶液20肛L注入液相色谱
仪，记录色谱图，计算，并与TLC法测定结果比较，
结果见表1。
表1 参芪降糖颗粒中人参皂苷Rg，
和Re的测定结果(聆一3)
TableDeterminationresultsofginsenosideRgland
ReinShenqiJiangtangGranula(n一3)
3讨论
3．1检测方法的选择：人参皂苷Rb、Rg。为人参重
要的活性成分，由茎叶获得的人参皂苷Rb含量很
低，测定参芪降糖颗粒中人参皂苷Rg。的含量对控
制制剂质量很有意义；由于人参皂苷Rg，、Re在紫
外区均为低波长末端吸收，采用ELSD检测器有较
大优势；故本实验采用HPLC—ELSD法测定人参皂
苷Rg，、Re的含量。
3．2 样品处理方法考察：《中华人民共和国药典》
2000年版一部中人参叶项下采用乙醚去酯溶性杂
质、大孔树脂纯化样品。由于本品为复方制剂，样品
经大孔树脂纯化后仍不能排除杂质干扰，因此本实
验采用醋酸乙酯除脂溶性杂质，正丁醇提取，氨试液
洗涤杂质，试验表明人参皂苷Rg，、Re的回收率高，
杂质不干扰指标成分测定。
3．3流动相的选择：人参皂苷的测定，一般使用乙
腈一0．05％磷酸溶液(1：4)为流动相，但使用ELSD
L
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第2期2005年2月·221·
检测器时，由于磷酸沸点高、不易气化，加上与样品
处理使用的氨试液残留部分形成盐，致使流动相基
线吸收过大，降低了检测器的灵敏度，故本实验中使
用甲酸代替磷酸。
3．4流动相pH值对人参皂苷Re、Rg。分离度的影
响：将乙腈、水按比例(22：78)混合，调其pH值，以
不同pH值的流动相分离样品。结果表明：pH>2．1
时分离度即符合要求，而且分离度随pH增大而增
大，但保留时间延长，峰形变宽，pH>2．3保留时间
已达46min，pH一2．6时人参皂苷Rg，、Re峰已变
得十分平缓，难以积分。经试验，确定pH为2．2。
References：
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HPLC法测定复方益肾颗粒中淫羊藿苷的含量
张林松
(镇江市药品检验所，江苏镇江212003)
复方益肾颗粒为临床验方，由淫羊藿、女贞子、
菟丝子、肉苁蓉等药物组成，具有补肾强身的功效。
用于腰酸足软、头晕耳鸣、阳痿遗精等症。其中淫羊
藿为方中主药，而淫羊藿苷则又是淫羊藿的主要有
效成分，因此本实验采用HPLC法测定淫羊藿苷的
含量，为控制本制剂质量提供了可靠的实验依据。
1仪器与试药
LC一10A高效液相色谱仪(日本岛津公司)，
SPD一10A检测器，KQ一500E型医用超声清洗器
(昆山超声仪器有限公司)。淫羊藿苷对照品(中国药
品生物制品检定所，供含量测定用，批号：0737—
9910)；复方益肾颗粒(自制)。乙腈、甲醇为色谱纯，
其余所用试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1 色谱条件：色谱柱YWGC，。(150mm×4．6
mm，10肛m)；流动相为乙腈一水(30：70)；体积流量
为1．0mL／min；检测波长为270nm；柱温为25℃；
进样量为10肚L。理论塔板数按淫羊藿苷计算不得
低于2500。
2．2对照品溶液的制备：精密称取淫羊藿苷对照品
10mg，置100mL量瓶中，加甲醇使溶解并稀释至
刻度，摇匀，即得。
2．3供试品溶液的制备：取本品，研细，称取1．5g，
精密称定，置于具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇溶液
25mL，称定质量，超声提取1h，放冷，擦干瓶外壁，
收稿日期：2004—05—28
再称定质量，加稀乙醇溶液补足减少的质量，摇匀，
滤过，取续滤液作供试品溶液。
2．4 阴性对照溶液的制备：按处方组成，剔除淫羊
藿，按复方益肾颗粒的制备工艺，制成不含淫羊藿的
阴性样品，按2．3项下方法，制成缺淫羊藿的阴性对
照溶液。
2．5线性关系考察：精密吸取上述淫羊藿苷对照品
溶液2、4、6、8、10肛L，在上述色谱条件下测定峰面
积值。以峰面积平均值对进样量进行回归处理，得回
归方程：Y=1962960．25X一30453．55，，．一
0．9997，线性范围为0．2～1．0P-g。
2．6精密度试验：取0．6mg／mL淫羊藿对照品溶
液10肛L，重复进样5次，测定，结果其峰面积RSD
为1．34％。
2．7重现性试验：取同一批供试品溶液(批号I)进
行5次平行试验，测定淫羊藿苷的质量分数，结果其
RSD为2．12％。
2．8稳定性试验：取供试品溶液(批号I)，每隔2h
进样10牡L，测定淫羊藿苷峰面积值，共测定5次，结
果其RSD为2．01％。表明供试品溶液在8h内基本
稳定。
2．9加样回收率试验：取批号为I的复方益肾颗粒
适量，研细，称取约0．7g精密称定，置于具塞锥形
瓶中，精密加入淫羊藿苷对照品稀乙醇溶液(o．031
12mg／mL)25mL，按2．3项下方法处理，计算加样
万方数据
HPLC-ELSD测定参芪降糖颗粒中人参皂苷Rg1和Re的含量
作者： 王守箐
作者单位： 临沂师范学院,山东,临沂,276000
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(2)
被引用次数： 1次

参考文献(3条)
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2.Huang Y Z;Wang N S Determination of ginsenoside Rg1、Rb and Panax notoginsenoside R1 in compound
Danshen Dropping Pill by HPLC--E1SD[期刊论文]-中药新药与临床药理 2002(03)
3.Chen X R;Yu J W;中国中药杂志 Determination of ginsenoside Rg1 and Re in Red Ginseng and Yujing
Capsula by HPLC-ELSD 2001(08)

引证文献(1条)
1.石钺.程星烨.曹阳 糖尿乐颗粒中人参皂苷Rg1、Re和Rb1的HPLC测定[期刊论文]-中成药 2007(4)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200502026.aspx