全 文 :中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月·445·
翻白草中黄酮类化合物的液相色谱分析
孟令云1,杨玲1,王佳祥2,才秀颖1,吴百杰3
(1.哈尔滨市职工医学院,黑龙江哈尔滨150080;2.黑龙江省分析测试中心,
黑龙江哈尔滨 150050;3.黑龙江卫生学校,黑龙江哈尔滨150030)
翻白草又名鸡腿儿,为蔷薇科植物翻白草
PotentilladiscolorBunge的干燥全草,多年生草本。
其资源丰富,遍及全国各地,生于丘陵坡地,山野草
丛中[1]。《草木便方》等均报道其有清热、凉血解毒、
止血、消肿的功效。现代医学研究表明其有抗菌、止
泻和免疫增强作用。全草含鞣质,根含鞣质0.04%、
淀粉37%。《东北药用植物》中报道其“植株各部分
均为黄酮类化合物”。本实验用HPLC法对翻白草
中黄酮类化合物的含量进行测定,为研究翻白草的
抗炎、降血糖的药理作用寻找科学依据。
1仪器与材料
Waters--600高效液相色谱仪(美国Waters公
司);Waters--2487紫外检测器(美国Waters公司);
威玛色谱工作站;水为超纯水;甲醇为色谱纯;其他试剂
均为分析纯。槲皮素(Sigma公司)。翻白草样品见表1。
表1 翻白草中槲皮素含量测定结果(席一3)
Table1 DeterminationofquercetininP.discolor(疗一3)
2方法与结果
2.1色谱条件:色谱柱为C18(250mm×4.6mm,5
肛m);流动相:甲醇一水一甲酸(50:48:2);体积流量
1.00mL/min;进样量20弘L;柱温30℃;检测波长:
368nm;灵敏度:0.200oAUFS。
2.2 供试品溶液制备:将供试样品干燥后粉碎混匀,准确
称取25g,加50%乙醇200mL回流提取3h,抽滤,将
滤液转移至250mL容量瓶中,用10mL50%乙醇溶液
清洗抽滤瓶3次,最后用50%乙醇溶液稀释至刻度。
2.3标准曲线制备:称取对照品槲皮素0.0540g,
用50%乙醇溶解并稀释至50mL,准确吸取此溶液
0、0.2、0.4、0.6、0.8、1.0mL用50%乙醇稀释至10
mL,配成质量浓度为0、21.6、43.2、64.8、86.4、
108.0ttg/mL的对照品溶液。在上述色谱条件下进
行测定,以质量浓度为横坐标,峰面积为纵坐标,绘
制标准曲线。回归方程为:Y=一44774.3810+
25266.2910X,r一0.9988。结果表明:槲皮素在
21.6~108.0tlg/mL线性关系良好。
2.4 精密度试验:精密吸取对照品溶液(0.0453
mg/mL)重复进样6次,每次20扯L,按上述色谱条
件测定,槲皮素峰面积积分值的RSD为0.29%。
2.5重现性试验:精密称取14样品5份,每份25
g,依法制备供试品溶液进行测定,其峰面积积分值
的RSD为0.63%。
2.6稳定性试验:取14样品供试品溶液,每隔1h
进样1次,共进样6次,按上述色谱条件分别测定,
峰面积积分值的RSD为1.05%(卵一6)。
2.7加样回收率试验:精确称取已测槲皮素含量样
品(14)5份各10g,分别精密加入槲皮素对照液1、
2、3、4、5mL,按样品制备方法制备,稀释至100
mL,按上述色谱条件测定,结果槲皮素平均回收率
为98.86%(卵一5)。
2.8 样品的测定:分别精密吸取对照品和供试品各20
肛L注入液相色谱仪中,依法测定,计算样品中槲皮素的
含量。测定结果见表1,各样品高效液相色谱图见图1。
】5 20 25 0 10 15 20 25 0 10 15 2025 0 10 15 20250 10 t5 2025
时间∥min
图1 对照晶(A)、1。样品(B)、2。样品(C)、34样品(D)和44样品(E)HPLC图谱
HPLCchromatogramofreferencesubstance(A),sample1。(B),samole24(C),sample34(D),andsample44
收稿日期:2004—05—09
基金项目:哈尔滨市科技攻关计划基金资助项目(0114211135—17)
作者简介:孟令云(1949一),女,哈尔滨人,生物化学教授,中华医学微量元素学会理事,研究方向为糖尿病生化药理学。
Tel:(0451)82062400E—mail:Mengli yun557@sohu.corn
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万方数据
·446· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第3期2005年3月
3讨论
从测定结果看,4种产地的翻白草的样品均含
有槲皮素,因地域不同,含量各异。4种翻白草中槲
皮素质量分数在69.5~105.72肛g/g,平均质量分
数85.4875弘g屈,说明翻白草植株各部分均含黄酮
类化合物槲皮素。黄酮类化合物中的槲皮素有抑制
非酶糖化作用[2],并通过抑制蛋白糖化来抑制醛糖
还原酶活性,有降血糖作用。本实验测定出翻白草中
黄酮类化合物槲皮素含量,为进一步研究翻白草可
能的降糖作用提供了科学依据。
References:
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lorBungeEJ].LishizhenMedMaterMedRes(时珍国医国
药)1998,9(5):436.
Ee]ChenY,ZhangQ.Recentsituationforpharmacologyre—
searchonfivehydroxylyye lowketon[J].Chin7’raditHerb
Drugs(中草药),1998,29(8):569570.
RP—HPLC法测定地骨皮中香草酸的含量
李康,陈晓辉,毕开顺
(沈阳药科大学药学院,辽宁沈阳 110016.)
地骨皮为茄科植物枸杞LyciumchineseMill.或
宁夏枸杞L.barbarumL.的干燥根皮。气微、味微甘
而后苦,具有凉血除蒸、清肺降火的功效,主治阴虚潮
热、骨蒸盗汗、肺热咳嗽、咯血、衄血、内热消渴等[1]。但
关于地骨皮药材中成分的分离与测定的报道不多。本
实验用RP—HPLC法首次分离并测定了不同产地地骨
皮药材中香草酸的含量,方法简便快速、灵敏准确,为
该药材的质量评价提供参考依据。
1仪器与试药
2010A型高效液相色谱仪(Shimadz),Class—
VP色谱数据处理系统。
地骨皮药材购于各地药店,均由沈阳药科大学
孙启时教授鉴定。
香草酸对照品(中国药品生物制品检定所),色
谱乙腈(天津四友公司),水(二次蒸馏水),冰醋酸
(分析纯),色谱甲醇(天津康科德科技有限公司),
95%乙醇(沈阳卫龙商贸有限公司),分析甲醇(天津
康科德科技有限公司)。
2方法与结果
2.1 色谱条件:DiamonsilC18色谱柱(200mm×
4.6mm,5肛m);流动相为乙腈一1%冰醋酸水溶液
(10:90,pH一3);体积流量为0.8mL/min,柱温为
30℃。检测波长为260nm。香草酸在此条件下有较
好分离,色谱行为见图1。
2.2对照品溶液的制备:精密称取香草酸6.1mg,
甲醇溶解于10mL量瓶中,吸取2.0mL于100mL
0 10 20 30 40 0 10 20 30 40
时间t/min
图1 对照品(A)和样品(B)HPLC色谱图
Fig.1HPLCchromatogramofreference
substance(A)andsample(B)
量瓶中,用甲醇稀释至刻度,配制成12.2弘g/mL的
对照品溶液。
2.3供试品溶液的制备:精密称取各地药材约1g,
用甲醇100mL索氏提取30min,减压回收溶剂,残
渣用甲醇溶解至10mL量瓶中,稀释至刻度,即得。
各产地均做一平行样。
2.4标准曲线的制备:分别精密吸取对照品溶液
0.10、0.50、1.00、2.OO、3.00、4.00、5.00mL,置
mL量瓶中,用甲醇稀释至刻度,进样10弘L,测定峰
面积。以峰面积平均值为纵坐标,其对应进样质量浓
度为横坐标,进行回归计算,得线性方程为
收稿日期:2004—0510
作者简介:李康(1975),男,四川人,在读博士,沈阳药科大学药物分析专业,主要从事中药现代化研究。
Tel:(024)23843711-3363E—mail:likan9229@sohu.COrn
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万方数据
翻白草中黄酮类化合物的液相色谱分析
作者: 孟令云, 杨玲, 王佳祥, 才秀颖, 吴百杰
作者单位: 孟令云,杨玲,才秀颖(哈尔滨市职工医学院,黑龙江,哈尔滨,150080), 王佳祥(黑龙江省分
析测试中心,黑龙江,哈尔滨,150050), 吴百杰(黑龙江卫生学校,黑龙江,哈尔滨,150030)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2005,36(3)
被引用次数: 16次
参考文献(2条)
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