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Comparison of leaf epidermis characters on Flos Lonicerae and Lonicera

金银花与山银花原植物叶表皮特征的比较研究



全 文 :中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1869·
9.12%,均达到《中国药典))(2005年版一部)规定的
标准,与黄小平和钟国跃最近报道的黄连总生物碱
和盐酸小檗碱的量测定结果相近[9’1⋯,表明湖北利
川市福宝山黄连GAP基地选育的大花叶和无光叶
品系质量较好,高产性状突出,适合作为黄连种子基
原用于GAP栽培。建议黄连产区在实施规范化种
植的过程中将大花叶和无光叶品系作为优良种子予
以推广。
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金银花与山银花原植物叶表皮特征的}匕较研究
耿世磊1,赵晟1,姚飞平1,徐鸿华2
(1.华南农业大学生命科学学院药用植物研究中心,广东广州 510642;2.广州中医药大学中药学院,广东广州510405)
摘要:目的探求一种准确、简便、快速鉴定金银花药材和山银花药材植物来源的方法。方法利用光学显微镜
和扫描电子显微镜观察比较忍冬属5种植物(忍冬、华南忍冬、红腺忍冬、水忍冬、大花忍冬)的叶表皮特征。结果
在光学显微镜和扫描电镜下该属不同植物的叶表皮特征存在显著差异。结论 叶表皮特征可有效地用于金银花和
山银花药材原植物的物种鉴别,并据此分别列出了光学显微镜和扫描电镜下忍冬属5种植物叶表皮特征的分种检
索表。
关键词:金银花;山银花;叶表皮特征;忍冬属;扫描电镜
中图分类号:R282.7一 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)12—1869—04
ComparisonofleafepidermischaractersonFlosLoniceraeandLoniceraconfusa
GENGShi—lei1,ZHAOShen91,YAOFei—pin91,XUHong—hua2
(1.ResearchCenterofMedicinalPl nt,CollegeofLifSciences,SouthChinaAgricutureUniv rsity,
Guangzhou510642,China;2.CollegeofChineseMat riaMedica,GuangzhouU iversity
ofTraditionalChineseMedicine,Guangzhou510405,China)
Abstract:ObjectiveToexploreanapproachtoidentifyingtheplantsourceofFlosLoniceraeand
Loniceraconfusarapidly,precisely,andefficie tly.MethodsUsingLMandSEMtoobserveandcompare
thecharactersofleafepidermisofthefivespeciesofLonicerL.includingL.japonica,L.confuse,L.
hypoglauca,L.dasystyla,andL.macr ntha.ResultsThereareobviousdifferencesi leafepidermis
amongthefivespeciesofLoniceraL.underLMandSEM.ConclusionThecharacteristicsoflear
epidermiscanbeusedtoidentifytheplantsourceofFlosLoniceraeandL.confusa.Accordingtotheir
characteristicsunderLMandSEM.theretrievalkeystothefivespeciesofLoniceraL.haveb en
compiled.
Keywords:FZ∞Lonicerae;LoniceraeconfusaDC;l afpidermischaracters;Lonicerae.;SEM
收稿日期:2006—02—19
基金项目:广东省自然科学基金项目(5006633);广东省中医药局科研项目(1040102);华南农业大学校长基金科研项目(K03156)
作者简介:耿世磊(1965一),男,博士,副教授,主要从事中药资源开发与利用方向的研究。
万方数据
·1870· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
金银花FlosLonicerae为大宗、常用药材,具有
悠久的药用历史。《中国药典》(2000年版)[1]收载了
忍冬科忍冬属植物忍冬LonicerajaponicaThunb.、
红腺忍冬L.hypoglaucaMiq.、山银花(华南忍冬)
L.confusa(Sweet)DC.和水忍冬(毛花柱忍冬)
L.dasystylaRehd.为金银花的4种法定药用品
种。但2005年版的《中国药典》[2]对此做了修订,在
金银花药材下仅有忍冬这一种植物为合法来源,而
将灰毡毛忍冬L.macranthoidesHand.一Mazz.、红
腺忍冬、华南忍冬等均作为另一种药材——山银花
L.confusa(Sweet)DC.予以收载。除此而外,全国
各地尚有几十种同属植物在民间作为药用[3“],由此
造成了这些药材来源上的极大混乱。已有研究表明,
金银花药材的主要指标成分绿原酸的量因物种来源
不同而有极大差异,物种来源对药材质量有着重要
影响[5“]。因而,准确鉴定物种来源是开展金银花和
山银花药材质量控制工作的第一步。但是由于忍冬
属植物在种间的一般形态特征上极为相似,且在实
际工作中常常难以获得完整的植物标本,只能依靠
残缺的植物碎片进行鉴别,由此给物种鉴定工作带
来了很大困难。
近十几年来,利用植物的叶表皮特征进行植物
分类方面的研究受到越来越多的重视[7’8]。因植物的
叶表皮特征具有较高的遗传稳定性,含有丰富的分
类信息,可用于植物种间或属间分类及其系统关系
探讨[910],而且只需要少量的植物叶片便可开展研
究。但目前对忍冬属植物叶表皮特征的研究尚缺乏
相关的资料。因此,本研究以忍冬、红腺忍冬、华南忍
冬和毛花柱忍冬为研究对象,以大花忍冬L.
macrantha(D.Don)Spreng.(广东民间亦作为金
银花药材来源)为外类群,利用光镜和扫描电镜方
法对其叶表皮形态特征进行比较研究,以期探求一
种准确、简便、快速鉴定金银花和山银花药材植物来
源的方法。
1材料与方法
实验材料均采自野外,并移栽于华南农业大学
药用植物研究中心药圃。材料来源见表1。每种材料
均取植株中部的成熟叶片。
用于光学显微镜观察的材料:将新鲜叶片中部
切成5,mm×5mm的小块,放入10%铬酸和10%
硝酸溶液中,蒸馏水冲洗,剥离表皮,番红溶液染色,
蒸馏水漂洗,10%甘油封片。在LEICADMLB显
微镜下观察、测量、照相。各种测量结果均为5枚叶
表皮各5个视野测量数值的平均值;计算气孔指数
时,取下表皮封片中20个视野的平均值,其公式
为:气孔指数一单位视野气孑L数×100/(单位视野气
孔数+单位视野普通表皮细胞数)。
用于扫描电镜观察的材料:取新鲜叶片自中部
切成5mm×5mm小块,酒精系列脱水,用双面胶
带粘于样品台上,喷金镀膜后在FEI—XL30ESEM
环境扫描电子显微镜下观察、照相。
2观察结果
2.1 叶表皮光学显微镜下的特征:5种植物叶表皮
光学显微镜下的观察结果见表1。
5种植物的上、下表皮细胞为不规则形或多边
形。其上表皮细胞的垂周壁平直或为浅波纹状
(图1—1~3、5、7、8);下表皮细胞的垂周壁为浅波纹
状或深波纹状;气孔器都分布在叶片的下表皮,上表
皮未见有气孔分布,气孑L器均为无规则型(图1—4、
6),其大小在各个种之间略有差异,长度为21.36~
表1 5种忍冬属植物叶表皮光学显微镜下的特征
Table1 CharactersofleafepidermisoffivespeciesofLoniceraL.underLM
表皮毛的分布情况:+,稀疏;++,散布;+++,稠密
Distributionofepidermalhair:+,sparseness;++,scatter;+++,denseness
万方数据
中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1871·
29.96btm,宽度为18.09~20.70,urn,气孑L密度在各
种间有明显差异,其中,水忍冬气孑L器分布最为稀
疏,仅有170.4个/ram2;而红腺忍冬的气孔器分布
则最为密集,达到466.3个/ram2(图1—6);5种植物
的下表皮上均有表皮毛分布,但表皮毛的类型和分
布状况在不同种间存在差异(表1)。
2.2 叶表皮电镜下的特征:在扫描电镜下观察,5
种植物上、下表皮细胞的角质层均呈不同程度的凸
起,呈现出一定的纹饰式样(图2—1、3、5、7、9),但各
个种凸起的程度和方式有所不同。从上表面来看,忍
冬的角质层呈不规则的皱褶状强烈凸起(图2—1);
华南忍冬的凸起呈浅波纹状并略有皱褶(图2—3);
红腺忍冬的凸起程度较浅,呈浅波状(图2—5);水忍
冬则凸起明显,呈平直的板状,并有清晰的条纹状角
质覆盖(图2—7);大花忍冬的角质层突起明显较宽,
呈平直的强烈凸起(图2—9)。在下表面,几种植物的
气孔器均为近圆形或长圆形,仅分布于下表面,明显
突出于表皮细胞(图2—2、4、6、8、lO)。气孔器具有较
厚的角质层形成的外拱盖,外拱盖表面平滑,只有水
忍冬的外拱盖具庞状突起(图2—8)。在外拱盖的外
侧,均具有一轮厚角质层形成的突起。这种突起的宽
度及与外拱盖之间的距离,在不同种间存在明显不
同:忍冬的角质突起较薄,与外拱盖之间形成较深的
纵沟(图2—2);华南忍冬的突起则较厚,与外拱盖间
形成狭沟(图2—4);红腺忍冬的突起最厚,且圆滑,
与外拱盖之问构成极浅的沟(图2—6);水忍冬的突
起最薄,与外拱盖间形成极宽的沟,且有条纹状突起
的角质相连(图2—8);大花忍冬的突起较厚,与外拱
盖问形成的沟较宽而深,且在沟中部明显隆起,占沟
长度近1/3(图2—10)。
3讨论
综合上述观察结果,忍冬与华南忍冬较为相似,
主要区别在于忍冬的气孔密度、气孔指数较大;忍冬
表皮细胞平直状,华南忍冬为波状,且气孔器较小;
l~3、5、7~8一叶上表皮形态4、6一叶下表皮形态1、2忍冬3、4华南忍冬5、6-红腺忍冬7一水忍冬8一大花忍冬
1—3,5,7—8一upperepidermisofleaf4,6-lowerepidermisofleafl,2一L.japonica3,4-上.confusa
5,6-L.hypoglauca7-L.dns,st,k8-L.macrantha
图1 5种忍冬属植物光镜下的叶表皮形态
Fig.1MorphologicalcharactersofleafepidermisonfivespeciesofLoniceraL.underLM
l、3、5、7、9一叶上表皮形态2、4、6、8、10一叶下表皮气孔器特征1、2-忍冬3、4-华南忍冬5、6-红腺忍冬7、8一水忍冬9、10一大花忍冬
1,3,5,7,9-morphologicalcharactersofupperpidermis2,4,6,8,1O-stomatalapparatuscharactersoflowerpidermis
1,2-L.japonica3,4-工.confusa5,6-L.hypoglauca7-L.d systyla8 L.macrantha
图2 5种忍冬属植物扫描电镜下的叶上表皮蜡脂质形态及下表皮气孔器特征
Fig.2CerolipoidmOrphoIogicalcharactersofupperpidermisandstomatalapparatus
charactersoflowerpidermisonfivespeciesofLoniceraL.underSM
万方数据
·1872· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
忍冬气孔器的外拱盖外侧的角质突起较薄,与外拱
盖间形成较深的纵沟,而华南忍冬的突起则较厚,与
外拱盖间形成狭沟。红腺忍冬的特征在于其气孔的
外拱盖外侧的突起厚且圆滑,与外拱盖间形成极浅
的沟。几种植物中水忍冬是一个很特别的种,其气孔
最长,长宽比值最大,气孔密度最小,上下表皮细胞
角质层凸起明显,呈平直的板状,并有清晰的条纹状
角质覆盖,其气孔的外拱盖具庞状突起,外拱盖的外
侧突起最窄且与外拱盖间形成极宽的沟,并有条纹
状突起的角质相连,这些都是区别于其他几个种的
显著特征。忍冬属5种植物的分种检索表见表2、3。
由于忍冬属不同植物花蕾中的有效成分绿原酸
的量在种间存在较大差异,因此在实际工作中必须
准确鉴定其植物来源,才能对药材开展严格的质量
控制。无论是金银花药材还是山银花药材均以花蕾
人药,而忍冬属不同植物的花蕾在形态上均极为相
似,依据花蕾的形态特征区分其物种来源十分困难。
上述观察结果显示,忍冬属不同植物在光镜下的叶
表皮形态特征和电镜下的叶表皮形态特征,均可作
表2依据叶表皮光学显微镜特征的忍冬属5种植物
分种检索表
Table2 RetrievalkeystofivespeciesofLoniceraL.
accordingtOtheircharactersunderLM
1.上表皮细胞垂周壁呈波浪状弯曲
2.下表皮密被腺毛;气孑L器分布明显密集⋯⋯⋯⋯⋯⋯
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯红腺忍冬Lonicerahypoglauca
2.下表皮以非腺毛为主,腺毛稀疏分布;气孑L器分布较疏
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯华南忍冬L.confusa
1.上表皮细胞垂周壁平直或稍弯,但绝不呈波浪状
3.气孔器分布稀疏;气孔器大,长约30pm,长宽比约
1.51⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯水忍冬L.dasystyla
3.气孔器分布较密;气孑L器较小,长度小于27弘m,长宽
比小于1.30
4.上表皮垂周壁平直;气孑L指数约14.9⋯⋯⋯⋯⋯
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯忍冬L.japonica
4.上表皮垂周壁多少有些弯曲;气孔指数约16.2⋯
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯大花忍冬L.macrantha
表3依据叶表皮扫描电镜特征的忍冬属5种植物
分种检索表
Table3 RetrievalkeystofivespeciesofLoniceraL.
accordingtotheircharactersunderSEM
1.上表皮细胞角质层呈皱褶状突起
2.下表皮气孔器外拱盖外侧的角质层突起较薄,与外拱
盖形成较深的纵沟⋯⋯⋯⋯⋯⋯忍冬L.japonica.
2.下表皮气孔器外拱盖外侧的角质突起较厚,与外拱盖
形成狭沟⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯华南忍冬L.confusa
1.上表皮细胞角质层呈平直或浅波状突起,绝无皱褶
3.上表皮角质层突起平直呈板状,有清晰的条纹状角质
覆盖⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯水忍冬L.dasystyla
3.上表皮角质层突起多少呈浅波状,无条纹状角质覆盖
4.下表皮气孔器外拱盖外侧的角质突起厚且圆滑,与
外拱盖间形成极浅的沟;较多分布有蘑菇状腺毛
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯红腺忍冬L.hypoglauca
4.下表皮气孔器外拱盖外侧的角质突起厚,与外拱盖
问形成的沟较宽而深;稀疏分布有腺毛⋯⋯⋯⋯
⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯⋯大花忍冬L.macrantha
为分种的依据,据此可建立一种准确鉴定金银花与
山银花药材原植物的方法。
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万方数据
金银花与山银花原植物叶表皮特征的比较研究
作者: 耿世磊, 赵晟, 姚飞平, 徐鸿华, GENG Shi-lei, ZHAO Sheng, YAO Fei-ping, XU
Hong-hua
作者单位: 耿世磊,赵晟,姚飞平,GENG Shi-lei,ZHAO Sheng,YAO Fei-ping(华南农业大学生命科学学院
药用植物研究中心,广东,广州,510642), 徐鸿华,XU Hong-hua(广州中医药大学中药学院
,广东,广州,510405)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(12)
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