全 文 ：·1412· 中革焉ChineseTraditionalandHerhlDrugs第38卷第9期2007年9月
RP—HPLC测定不同产地不同采集期天山雪莲中绿原酸和芦丁
苏来曼·哈力克，凯赛尔·阿不拉，敏德
(新疆维吾尔自治区药品检验所，新疆乌鲁木齐830002)
天山雪莲为菊科植物雪莲Saussurea
involucrata(Kar．etKir．)Sch．一Bip．的干燥地上
部分，系维吾尔族习用药材。维吾尔语名称为“塔格
来丽斯”，汉语名称为雪莲或雪莲花，在我国仅分布
于新疆维吾尔自治区天山、阿尔泰山，海拔2100～4
100m雪先富金石滩石缝中，国外俄罗斯、蒙古、哈
萨克斯坦及吉尔吉斯坦也有分布“”]。由于雪莲采
挖严重，数量日益稀少，已列入国家三级保护植物目
录“]。天山雪莲能补肾活血，强筋骨，温肾助阳，祛风
胜湿，用于风湿性关节炎、肺寒咳嗽、月经不凋、小腹
冷痛等病症的治疗口“]。天山雪莲主要含芦丁等黄
酮类、紫丁香苷等木脂素类、太苞雪莲内酯等内酯
类、大苞雪莲碱等生物碱类、多糖类等化学成
分”。]。在薄层色谱实验过程中，新发现天山雪莲药
材含绿原酸，采用液相一质谱联用仪进一步做了确证
试验，为有效控制新疆不同产地和不同采集期天山
雪莲药材质量，采用反相高效液相色谱法同时测定
了绿原酸及芦丁的量。
l仪器与试药
岛津Lc一10ATVP高效液相色谱仪，SPD—
M10AVP=极管阵列检测器，CLAsS～VP5．032
色谱工作站。
绿原酸、芦丁对照品(中国药品生物制品检定
所，批号分别为110753—200212、0880—9705，供定量
测定用)；甲醇为色谱纯，水为重蒸馏水，其他试剂均
为分析纯。 。
天山雪莲药材：从产地分别为新疆阜康、巩留、
和静、库车、巩乃斯、巴里坤、青河、可可托海、特克
斯、尼勒克、乌鲁木齐南山水西沟(野生和栽培)、奇
台(栽培)、塔士库尔于共收集16批样品，经苏来
曼·哈力克主任药师与中国科学院新疆生态地理研
究所沈观冕研究员鉴定均为菊科植物雪莲
Saussureainvolv∞rataK r．etKin．Sch．一Bip．(其
中产地为塔士库尔干的雪莲经鉴定为绵头雪莲．s．
1anicepsHand．一MaZZ．)。
2方法与结果
2．1色谱条件与系统适用性：色谱柱为Inertsil
oDs_3CIB柱(250nlm×4．6mm，5pm)；流动相：
甲醇一0．4％磷酸(38，62)}体积流量：1．0mL／minf
检测渡长：340rim；柱温；40℃。在此色谱条件下，雪
莲药材中绿原酸及芦丁的保留时间为4．9和
17．0min，理论塔板数依次为5000、8000。色谱峰
达到完全分离，绿原酸及芦丁与相邻峰的分离度均
大于2且峰形对称，绿原酸及芦丁的对称因子分别
为1．11和1．06，见图l。
8 12 16 20
f，mm
1．绿原酸2一芦丁
l-ehlorogeaieacidZ—rutin
圈l绿原酸豆芦丁对照品(A)和冒莲药材色谱圈(B)
Fig．1HPLCChromatogramsfchloreogenicacid,
rutlnreferenceSIIbstanee(A)andHtrba
SaussureaeCumFIore(B)
2．z对照品溶液的制备：分别精密称取120℃减压
干燥至恒重的芦丁和绿原酸对照品适量，加50％甲
醇制成芦丁80pg／mL、绿原酸60pg／mL的混合溶
液，即得。
2．3供试品溶液的制备：取药材粉末(过3号筛)t
g，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入50％甲醇
50mL，称定质量，超声处理10min，放冷，再称定质
量，用50％甲醇补足减失质量，摇匀，滤过，取续滤
液，即得。
2．4线性关系考察：精密称取绿原酸对照品10．13
肇薯品霁：絮巢量2．-1哈7力克(1960一)．维吾尔旗．主任药师．主要从事中药、维吾尔药材筮制剂质量研究。T。l；(0991)z305956
Fax：(0991)2815314E-mail=sideyrnan—hlC茸hotmail．coin
万方数据
中苹焉ChineseTraditionalndHerbllDrugs第鹅卷第9期2007年9月·1413·
mg及120℃干燥至恒重的芦丁对照品10．10mg
置10mL棕色容量瓶中，加50“甲醇适量溶僻并定
容至刻度，摇匀，制成绿原酸1．013mg／mL及芦丁
1．010mg／mL的混合储备液，精密吸取此储备液
0．2、0．4、0．6、1．0、1．6、z．0mL，置10mL棕色量瓶
中，加50％甲醇至刻度，摇匀，分别吸取lOpL，注入
液相色谱仪，记录峰面积，以进样量为横坐标，峰面
积为纵坐标绘制标准曲线。得绿原酸标准曲线回归
方程为；y=2528121．2X+18457．5，r=
0．9997；芦丁标准曲线回归方程为：
Y=160126．7X一55314，r=0．9997；结果表
明，绿原酸在0．2026～2．026Pg有良好的线性关
系，芦丁在0．202～2．02,ug有良好的线性关系。
z．5精密度试验：精密吸取芦丁0．0788mg／mL
和绿原酸0．0592mg／mL的混合对照品溶液，重复
进样5次，每次10pL，分别测定芦丁和绿原酸的峰
面积值，结果绿原酸的RSD一1．70％，芦丁的
RSD=1．2z％，显示仪器精密度蘸好。
2．6稳定性试验：取同一样品(产地为巩留)适量，
照前述方法制备供试品溶液，室温下放置，每隔1h
进样10“L，连续进样5次依法测定芦丁和绿原酸
的峰面积值，结果芦丁和绿原酸的日内RSD分别为
1．41％和0．60％；取同一样品在上述色谱条件下测
定，每隔1d测一次峰面积值，连续测定5d，结果芦
丁和绿原酸的日间RSD分别为1．28蹦和0．30％。
表明供试品溶液室温下5d内稳定。
2．7重现性试验：取上述样品适量，照前述方法分
别制备供试品溶液5份，照测定法进行测定，结果芦
丁平均质量分数为0．322“，RSD=1．56％I绿原酸
为0．476％，RSD；1．59％，结果表明本测定方法的
重现性良好。
2．8 回收率试验：取供试品适量，精密称定，置具塞
锥形瓶中，分别精密加入低、中、高质量浓度的绿原
酸对照品溶液5．0、6．5、7．5mL(0．5024 mg／
mL)，再分gⅡ精密加入芦丁对照品溶液6．0、7．0、
8．5mL(0．3360mg／mL)，再精密加入50％甲醇
39．0、36．5、34．0mL(均用已标化的50．0mL滴定
管)，按供试品制备方法制备，上述色谱条件测定，结
果绿原酸和芦丁平均回收率分别为99．80％、
98．98％，RSD分别为0．91％、2．11％。
2．9样品测定：分别精密称取16批不同产地天山
雪莲药材粉末各1g，按上述方法测定。测定结果芦
丁量为0．143％～1．448％，平均0．466％(Ⅳ=16)，
绿原酸质量分数为0．076％～0．821％，平均为
．423％b=16)。乌鲁木齐南山水西沟人工栽培品
雪莲叶比较茂盛，芦丁质量分数高迭1．488％，可能
与此有关，因目前雪莲人工栽培品开花成功的较少，
还需进一步深入研究。测定结果见表1。
裹1天山■莲药材中芦丁与绿原醴蔫定结果(_一2)
TableDetermlnaUouofturina dchloreogenle
ncIdInHerbaS蝴sⅣ，删Cure，fo憎
3讨论
3．1 流动相的优化：比较了不同系统和流动相比
例[1““]，如甲醇一水一乙腈一冰醋酸(30t 57．5，10I
2．5)、乙腈一[水，磷酸(100；1)](40t 60)、甲醇一
水一磷酸(50t 50t0．2)等，效果不理想，不能同时满
足芦丁和绿原酸的很好分离。甲醇一0．4％磷酸溶液
的比例经调试，结果38，62比例芦丁和绿原酸峰得
到较好分离，且保留时间合适。
3．2检测波长的选择；分别取样品、芦丁及绿原酸
对照品，用SPD—MIOA二极管阵列检测器从190～
370nm扫描，结果绿原酸在327nm处有最大吸收，
芦丁在359nm处有最大吸收，根据上述检测波长
的比较，在340ilm处芦丁和绿原酸的峰面积值较
理想，故选择340tim为两个成分的同一检测波长。
3．3供试品提取条件的选择：取供试品适量，分别
采用了甲醇、50％甲醇及70％乙醇为提取溶剂进行
超声处理，药材中绿原酸和芦丁的量分别为2．99、
4．83、4．50mg／g和2．16、3．12、3．10mg／g。结果表
明用50％甲醇作溶剂，绿原酸和芦丁的提取率最
高。以50％甲醇作为提取溶剂。并按lo、zo、30rain
不同时间超声处理，药材中绿原酸和芦丁的量分别
为4．72、4．68、4．74mg／g和3．21、3．12、
3．10mg／g，结果表明10rain即能提取完全。
致谢：天山雪莲药材中绿原酸成分的确证试验，
在中国药品生物瓠品检定所中药室完成。
万方数据
·1414· 中革焉ChineseTraditionalandHerl幢lDrugs第38卷第9囊2007年9月
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HPLC法测定高乌头药材中高乌甲素
周军辉，李静。王新莉，王答祺，李思峰
(陕西省西安植物园，陕西省植物研究所，陕西西安710061)
高乌甲素是从毛茛科植物高乌头Aconitum
sinomontanumNakai根中提取的一种二萜类单体生
物碱拉巴鸟头碱(1appacontine)。高乌头又名九连
环、麻布七、统天袋，分布于我国西部和中部，民同用
于治疗跌打损伤、风湿、急慢性细胞性痢疾、急慢性
肠炎等；具有镇痛作用‘”“、抗心律失常作用o】、抗
炎作用Cs]，临床上适合癌痛和各种手术质疼痛等中
度以上疼痛的治疗，能够代替阿片类药物控制癌症
病人的疼痛，并可减少阿片类药物所带来的呼吸抑
制和成瘾症。关于高乌头药材的质量控制报道极少，
未见应用HPLC法测定其中的高乌甲素的报道。通
过实验研究，建立了HPLC法测定高乌头药材中有
效成分高乌甲素的方法，结果令人满意，可以较好地
用于高乌头药材的质量控制，为相关的复方制剂及
生药的内在质量控制提供可靠依据。
1仪器、药材与试剂
1．1 仪器：Waters515高效液相色谱仪(包括
Waters515泵，Waters2487检测器等)，N2000色
谱工作站；天津东康DS6150超声波清洗机(频率为
40kHz，功率为150W)。
1．2药材与试剂：高乌头药材由陕西大河药业有限
责任公司提供(为甘肃永登、皋兰等地产商品药材)，
均由陕西省植物研究所王答祺副研究员鉴定为毛茛
科植物高乌头AconitumsinomntanumN kai的根，
样本保存于陕西省植物研究所。所用商乌甲索对照品
(自制)由陕西大河药业有限责任公司提供，经红外光
谱、紫外光谱、”C～NMR和1H—NMR等方法确定结
构，熔点为221～223℃lTLC检查为单一斑点；面积
归一化法计算质量分数在99．0％以上；高乌头药材
粉碎后过40目筛，60℃干燥3h，密封保存，待用。甲
醇，乙腈为色谱纯，其余试剂均为分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱为江苏汉邦LichrospherC
柱(150mmx4．6mrll，5nm)，流动相为甲醇一乙腈一
0．05tool／LNaH2P03溶液(10l 20I 7 )}体积流
量为1．0mL／min；检测波长252nm；柱温25℃}进
样量：10pL；理论塔板数按高鸟甲素峰计算应不低
于2000。
2．2对照晶溶液的制备：精密称取高乌甲素对照品16。
2mg置50mL量瓶中，加甲醇至刻度，摇匀，即得。
2．3 供试品溶液的制备：精密称取高乌头粉末
0．500g，与0．1g生石灰混合均匀，置具塞锥形瓶
器誓茹霁：留举甚乞臻8一)，男，河南鄢瞳人，丽士，助瑶研究员．主要从事植物化学分离分析与新药开发。
E—mail：zhoujunhui@sohu．COrn
啪
脚
叫
嘲
M
万方数据
RP-HPLC测定不同产地不同采集期天山雪莲中绿原酸和芦丁
作者： 苏来曼·哈力克， 凯赛尔·阿不拉， 敏德
作者单位： 新疆维吾尔自治区药品检验所,新疆乌鲁木齐,830002
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(9)
被引用次数： 6次

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