全 文 ：·1020· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月
HPLC—ELSD法测定黄花蒿提取物中青蒿素
惠玉虎，何锦伟，杨朝昆，寇玉锋，陆福来
(西安皓天生物工程技术有限责任公司，陕西西安 710075)
摘要：目的建立HPLC—ELSD法对黄花蒿提取物中青蒿素的测定方法。方法采用HPLC—ELSD法。色谱柱：
InertsilODS一3(150mm×4．6mm，5um)；流动相为乙腈一水(69：31。用三氟醋酸调pH至3)；体积流量：1．0mL／
min；检测器漂移管温度：45C；载气体积流量：1．0L／min；分流：开；柱温：25‘C。结果青蒿素在0．5893～5．8935
mg／mL时面积的常用对数值与其质量浓度的常用对数值线性关系良好(r=0．989)；样品平均回收率为98．71％
(RSD为0．42％，n一6)。结论该方法灵敏、准确可靠，可作为黄花蒿提取物中青蒿素的定量方法。
关键词：黄花蒿提取物；青蒿素；HPLC—ELSD
中图分类号：R286．02 文献标识码：B 文章编号：0253—2670(2006)07—1020—02
Determinationof rtemisinininArtemisiaannuaextractbyHPLC—ELSD
HUIYu—hu，HEJin—wei，YANGZhao—kun，KOUYu—feng，LUFu—lai
(Xi’anHaotianBio—EngineeringT ch ologyCo．，Ltd．，Xi7an710075，China)
Keywords：ArtemisiaannuaL．extract；artemisinin；HPLC—ELSD
青蒿为菊科植物黄花蒿ArtemisiaannuaL．的
干燥地上部分，具有清热解毒、抗疟以及促进免疫等
作用。青蒿素是从青蒿中提取分离的一种特效抗疟
药，具有疗效高且毒性很低的特点。关于青蒿素的测
定方法已有报道，有UV、HPLC—UV等，但是由于
青蒿素结构特殊，没有生色基，又热不稳定，在紫外
检测前须与氢氧化钠反应定量转化成另一种在紫外
下有吸收的物质[1~3]。这些方法操作繁琐且不易精
确控制，影响定量的准确性。本实验对黄花蒿提取物
中青蒿素的测定采用反相高效液相色谱法，利用蒸
发光散射检测器直接进行检测。该方法不需要复杂
的前处理过程，操作简单，结果准确、可靠，可用作青
蒿素的质量控制。
1仪器与试药
Waters1525型高效液柑色谱仪(美国Waters
公司)，AlltechELSD2000ES型蒸发光散射检测器
(美国Alhech公司)，Empower色谱数据工作站(美
国wat否rs公司)，KQ一250型超声波清洗器(江苏
昆山超声仪器厂)。
青蒿素对照品(质量分数为99％，公司外购)。
黄花蒿粗提物(西安皓天生物工程技术有限责任公
司)。乙腈为色谱纯，水为二次重蒸馏水，三氟乙酸为
分析纯。
2方法与结果
2．1色谱条件：色谱柱：InertsilODS一3(150mm×
收稿日期：20051025
4．6mm，5um)；流动相：乙腈一水(69：31，用三氟
醋酸调pH至3)；体积流量：1．0mL／min；柱温：25
C。ELSD检测器条件：漂移管温度：45。C；气体体
积流量：1．0L／min；分流：开。在上述色谱条件下，
青蒿素保留时间约为6．3min，理论板数大于3000
见图1。
A
0 2 4 6 8 0 2 4 6 8
t|min
*青蒿素
*一artemisinin
图1 青蒿素对照品(A)和黄花蒿提取物(B)的HPLC图
Fig．1HPLCChromatogramofa te isininreference
substance(A)andA．annuaextract(B)
2．2对照品溶液的制备：精密称取青蒿素对照品约
25mg于25mL量瓶中，加乙醇溶解并定容，即得
对照品溶液。
2．3供试品溶液的制备：精密称取黄花蒿提取物
0．2g于25mL量瓶中，加乙醇约20mL，超声20
min，静置至室温后定容。用0．45肛m微孔滤膜滤
过，即得供试品溶液。
B
—L
万方数据
中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第7期2006年7月·1021·
2．4 标准曲线的制备：精密称取青蒿素对照品
24．12mg置25mL量瓶中，加入甲醇溶解并稀释
至刻度，作为贮备液。精密吸取一定量贮备液，配制
成质量浓度为0．5893、0．9648、1．178、2．3574、
5．8935mg／mL青蒿素对照品溶液，分别进样5
弘L，进行HPLC—ELSD分析。以峰面积(y)的常用对
数为纵坐标，以对照品质量浓度(x)的常用对数为
横坐标，绘制标准曲线。得其回归方程为：lgY一
1．34531gX+6；2238，r一0．989。由此可知青蒿
素在0．5893～5．8935mg,／mL与峰面积具有良好
的线性关系。
2．5精密度试验：精密吸取同一份供试品溶液重复
进样6次，每次进样5弘L，测定青蒿素峰面积，计算
得其RSD为0．70％(卵一6)。
2．6重现性试验：精密称取同一批黄花蒿提取物样
品适量，6份，制备供试品溶液，测定。结果青蒿素的
平均质量分数为15．30％，RSD为0．89％。
2．7稳定性试验：精密吸取同一供试品溶液，每隔
1 h进样测定1次，进样量5肛L，测定峰面积。结果
青蒿素峰面积的RSD为0．86％(咒一9)。结果表明
供试品溶液在8h内稳定性良好。
2．8加样回收率试验：精密称取含青蒿素15．30％
的黄花蒿提取物约0．1g，精密加入7．5210mg／mL
青蒿素对照品溶液2mL，制备供试品溶液，进行测
定，按标准曲线法计算结果。结果平均回收率为
98．71％，RSD为0．42％(卵一6)。
2．9样品测定：精密称取黄花蒿提取物样品10批，
制备供试品溶液，测定。每批样品测定3份，按标准
曲线法计算结果，以3次测定结果的平均值作为测
定值，结果见表1。
表1 黄花蓄提取物中青蓠素的测定结果(n=3)
Table1 DeterminationofartemisinininA．ann口a
extract(聘一3)
批号 青蒿素／％ RSD／％ 批号 青蒿素／％ RSD／％
05042815．45 0．22 0506015．15 0．42
05050915．14 0．56 05060615．25 0．60
05051215．21 0．34 05060715．66 0．59
05051815．84 0．59 05060815．37 0．24
05052015．30 0．82 05061015．28 0．30
3讨论
3．1 蒸发光散射检测器条件的选择：考虑到青蒿素
具有热不稳定性和影响ELSD响应信号的基本参
数为气体体积流量和漂移管温度的因素。因此，本试
验通过不同气体体积流量0．6、0．8、1．0、1．2、1．4、
1．6、1．8、2．0、2．2L／min和不同漂移管温度40、45、
50、55、60。C对青蒿素响应信号强度的影响进行了
最佳检测条件选择。最终确定ELSD最佳检测条件
为气体体积流量为1L／min，漂移管温度为45~C。
3．2流动相比例的确定：在上述色谱条件下，本实
验分别选择了不同流动相比例的甲醇一水、乙腈一水
及磷酸盐缓冲液、醋酸盐缓冲液、三氟醋酸进行试
验。结果证明：流动相选择乙腈一水(69：31，用三氟
醋酸调节pH至3)时，青蒿素与杂质分离效果最好。
References：
[1]c^P(中国药典)Is]．Vol1．2005．
E2]HuangHB，CenJM，FengJF．Determinationof rtemisinin
inArtemisiaⅡnn““口L．byRP—HPLCEJ]．JGuangxiUniv
(广西大学学报)，1994，19(2)：194—196．
[33WangWL．DeterminationofartemisinininRheumatoid
CapsulebyHPLCEJ]．ChinJBasicMedTraditChinMed
(中国中医基础医学杂志)，2003，9(12)：43—47．
黄连与生地不同配伍比例对黄连丸中小檗碱的影响
夏旋1，杨明炜¨，王文清2，方建国2，汪秋兰2，陆付耳1
(1．华中科技大学同济医学院附属同济医院中西医结合研究所，湖北武汉430030；
2．华中科技大学同济医学院附属同济医院药学部，湖北武汉430030)
黄连丸出自孙思邈《千金要方》，由黄连、生地等
组成。黄连为君，生地为臣，相须为用，共奏滋阴清热
之功效，主治消渴(相当于现代医学之糖尿病)。尽管
原方配伍比例为1：1，但在临床工作发现采用大剂
量的生地配伍黄连能明显增强黄连丸的降糖效应，
与其他学者的报道十分类似‘1|。因此，本研究采用高
收稿日期：2006—02—16
基金项目：湖北省卫生厅2004年度中医药中西医结合课题(2005．1-2006．12)
作者简介：夏旋(1980一)，男，湖北宜昌人，在读研究生，研究方向为中西医结合内分泌专业。
Tel：(027)83663304Fax：( 27)83662148E—mail：xiaxuan2003@sina．com
*通讯作者杨明炜Fax：(027)83662220E—mail；mwyang@tjmu．edu2cn 万方数据
HPLC-ELSD法测定黄花蒿提取物中青蒿素
作者： 惠玉虎， 何锦伟， 杨朝昆， 寇玉锋， 陆福来， HUI Yu-hu， HE Jin-wei， YANG Zhao-
kun， KOU Yu-feng， LU Fu-lai
作者单位： 西安皓天生物工程技术有限责任公司,陕西,西安,710075
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(7)
被引用次数： 9次

参考文献(3条)
1.中华人民共和国药典(一部)
2.Huang H B.Cen J M.Feng J F Determination of artemisinin in Artemisia annuua L.by RP-HPLC 1994(02)
3.Wang W L Determination of artemisinin in Rheumatoid Capsule by HPLC 2003(12)

本文读者也读过(10条)
1. 赵兵.余鹏.王玉春 应用2.5升循环超声提取装置提取青蒿素实验研究[会议论文]-2002
2. 翟海云.徐健君.陈缵光.王建伟.蔡沛祥.莫金垣.ZHAI Hai-yun.XU Jian-yun.CHEN Zuan-guang.WANG Jian-wei.
CAI Pei-xiang.MO Jin-yuan 双氢青蒿素的毛细管电泳高频电导法测定[期刊论文]-分析科学学报2005,21(6)
3. 赵芬琴.朴惠善 桦褐孔菌的抗突变活性成分研究[期刊论文]-中草药2006,37(12)
4. 郑清四.唐庆华.唐煌.Qingsi ZHENG.Qinghua TANG.Huang TANG 液固顶空气相色谱法测定双氢青蒿素中有机溶
剂残留[期刊论文]-生命科学仪器2009,7(2)
5. 张佳.张峰.王莹.王付丽 黄花蒿叶中抑菌成分提取方法的研究[期刊论文]-江苏农业科学2009(3)
6. 黄宝美.姚程炜.HUANG Bao-mei.YAO Cheng-wei 高效毛细管电泳电导法测定青蒿素的含量[期刊论文]-分析测试
学报2006,25(2)
7. 孙志蓉.王文全.翟明普.张锐锋.SUN Zhi-rong.WANG Wen-quan.ZHAI Ming-pu.ZHANG Rui-feng 甘草播种苗年生
长动态的研究[期刊论文]-中草药2006,37(11)
8. 黄宝美.莫金垣.杨冰仪.王瑛.朱宇同.Huang Baomei.Mo Jinyuan.Yang Bingyi.Wang Ying.Zhu Yutong 毛细管
电泳法测定双氢青蒿素的含量[期刊论文]-分析化学2005,33(2)
9. 井山林.彭国平.JING Shan-lin.PENG Guo-ping SFE等方法提取山葡萄藤中白藜芦醇的研究[期刊论文]-南京中
医药大学学报（自然科学版）2006,22(4)
10. 周军.黄琼.李志光.谢磊.黄可龙.ZHOU Jun.HUANG Qiong.LI Zhi-guang.XIE Lei.HUANG Ke-long 虎杖中白藜
芦醇的提取方法比较和优化研究[期刊论文]-云南化工2007,34(5)

引证文献(9条)
1.邓素兰.余继宏.毛丽梅 青蒿中青蒿素的提取分离研究[期刊论文]-安徽农学通报 2007(5)
2.薛洪宝.焦艳娜.庞国伟.刘海峰.唐静.李晖 青蒿中6种成分同时定量的高效液相色谱法研究[期刊论文]-四川大学
学报（工程科学版） 2009(4)
3.向文.李琳.刘吉华.余伯阳 UPLC-UV法测定不同产地青蒿中青蒿素的含量[期刊论文]-中国野生植物资源 2012(4)
4.刘海峰.薛洪宝.焦艳娜.杨甲甲.庞国伟.李晖 毛细管电泳间接激光诱导荧光法测定苦蒿和青蒿中酸性成分[期刊
论文]-四川大学学报：工程科学版 2011(4)
5.夏禹杰.曾建立.赵兵 超声强化溴化1-乙基-3-甲基咪唑从黄花蒿中提取青蒿素[期刊论文]-过程工程学报
2008(4)
6.廖巧.龙世平.杨春贤 青蒿素提取与检测工艺的研究进展[期刊论文]-农业科学与技术：英文版 2012(8)
7.廖巧.龙世平.杨春贤 青蒿素提取与检测工艺的研究进展[期刊论文]-安徽农业科学 2012(28)
8.廖巧.龙世平.杨春贤 青蒿素提取与检测工艺的研究进展[期刊论文]-农业科学与技术：英文版 2012(8)
9.廖巧.龙世平.杨春贤 青蒿素提取与检测工艺的研究进展[期刊论文]-安徽农业科学 2012(28)


本文链接：http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200607023.aspx