全 文 :·1826· 中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
药,人参中成分复杂。人参皂苷是人参的主要活性成
分,属于三萜类物质,在结构上具有类似GC样的甾
环结构。人参在抗应激、调节免疫等方面作用有类似
GC样作用。先前的研究发现,人参茎叶总皂苷在体
外能够增强地塞米松诱导的GR受体特异性荧光素
酶报告基因的表达[6],进一步的研究发现,这种作用
可能是通过其抑制地塞米松对GRmRNA以及蛋
白的下调作用而实现的[7]。人参茎叶总皂苷是多苷
元的复合物,不同的人参单体皂苷的作用及其机制
也不完全一致。本课题组利用双荧光素酶报告基因
检测方法,以地塞米松作为参照,观察了人参二醇以
及三醇皂苷单体Rb,、Re、Rg。、Rg。对GR报告基因
的诱导表达,结果显示,G—Rg。可特异性诱导GR报
告基因表达,具有剂量依赖性;并且G~Rg。作用
HL一7702细胞后,细胞GR蛋白表达明显下降,本
实验结果初步显示G—Rg。具有GC样的活性,此结
果可能对发现人参以及人参皂苷新的药理学作用以
及作用靶点奠定一定的实验基础。
References:
[1]WangBX.GinsengResearch(人参的研究)[M].Tianjin:
TianjinScienceandTechnologyPublishingHouse,1985.
[23SambrookJ,RussellDW.MolecularCloning:ALaboratory
Manual(分子克隆:实验指南)[M].Beijing:SciencePress,
2002.
[3]BradfordMM.Arapidandsensitivemethodforthequanti—
tationfmicrogramquantitiesofproteinutilizingtheprin—
cipleofprotein—dyebinding[J].AnalBiochem,1976,72
(5):248—250.
’
[42MeierCA.Regulationofgeneexpressionbynuclearhot—
moner ceptors[J].JReceptSignTransdRes,1997,17(1—
3):319-335.
[5]HoeckW,RusconiS,GronerB.Down—regulationandphos—
phorylationofglucoeorticoidre eptorsinculturedcells.
Investigationswithamonospecificant serumagainstabac-
teriallyexpressedreceptorfragment口].JBiolChem,
1989,264(24):14396—14402.
[6]LiY,LiM,WangX,eta1.Experimentalstudyoneffectof
ginsenosidesofginsengstemandleafinenhancingthe
transactivationofglucocorticoidre eptorinducedbyDexa—
methasoneinvitro[J].ChinJIntegrTraditChinW■盯Med
(中国中西医结合杂志),2004,24(8):710—713.
[7]LingCQ,LiY,ZhuXY,eta1.Ginsenosidesmayreverse
theDexamethasone—induceddown—regulationofglucocor-
ticoidreceptor[J].GenCompEndocrinol,2005,140:203—
209.
洋金花有效部位及其组分对二甲基亚砜损伤的中国仓鼠
卵巢细胞的保护作用
唐玲1,王秋红1,杨炳友1,肖洪彬1,孙艳萍2,匡海学p
(1.黑龙江中医药大学,黑龙江哈尔滨150040;2.北京大学中国药物依赖性研究所,北京100083)
摘 要:目的 观察洋金花不同提取物(有效部位、醉茄甾内酯组分和黄酮组分)对二甲基亚砜(DMSO)损伤的
中国仓鼠卵巢(CH0)细胞的保护作用。方法常规传代培养CHO细胞,采用噻唑蓝(MTT)法和乳酸脱氢酶
(LDH)法测定细胞活性。结果3%DMSO与CHO细胞共同孵育24h后,经MTT法检测细胞存活率明显下降。
洋金花有效部位(10~80,ug/mL)剂量依赖性增加细胞活性;洋金花醉茄甾内酯组分(30~120Fg/mL)对DMSO
的细胞损伤作用无明显影响,而洋金花黄酮组分(2.5~20vg/rnL)呈剂量依赖性减轻DMSO对细胞的损伤作用。
4.5%DMSO与CHO细胞共同孵育24h后,细胞LDH的漏出率明显增加。洋金花有效部位(10~80}tg/mL)、洋
金花醉茄甾内酯组分(30~120,ug/mL)和洋金花黄酮组分(2.5~20,ug/mL)均不能降低细胞LDH的漏出率。
结论洋金花中的黄酮组分可以减轻DMSO的细胞毒性,此种药理作用可能与改善细胞线粒体的功能有关,而对
细胞膜的损伤无明显保护作用。
关键词:洋金花;中国仓鼠卵巢(CHO)细胞;二甲基亚砜(DMSO);醉茄甾内酯;黄酮组分(FC)
中图分类号:R285.5 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)12—1826—06
ProtectiveeffectsofactivefractionandconstituentsfromFlosDaturae
onChinesehamsterovarycellsinjuriedbydimethylsulfoxide
.TANGLin91,WANGQiu—hon91,YANGBing—youl,XIAOHong-binl,
SUNYan—pin92.KUANGHai—xuel
收稿日期:2006—03—14
基金项目:国家自然科学基金资助项目(30371736)
作者简介:唐玲(1977一),女,黑龙江省哈尔滨市人,黑龙江中医药大学博士研究生,主要从事中药复方药效物质基础及其作用机制研
究。 E—mail:tangyulin96688@163.com
*通讯作者匡海学Tel:(0451)82110803Fax:(0451)82110803E—mail:hxkuang@hotmail.com
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·18 7·
(1.HeilongjiangUn versityofTraditionalChineseMedicine,Haerbin150040,China;2.NationalInstitute
onDrugDependence,PekingUniversity,Beijing100083,China)
Abstract:0bjectiveToobserveth protectiveeffectsofvariousextractsfromFlosDaturae(FD),
includingactivefraction(AF—FD),withanolidesconstituent (WC—FD),andflavonoidsconstituents(FC—
FD)onChinesehamsterovary(CHO)cellsagainstcytotoxicitynducedbyDMSO.MethodsT‘he
survivalr teofCHOcellswasexaminedbvMTTassayndLDHleakagessays.ResultsUsingMTT
assay,coincubationofCHOcellswith3%DMSOfor24hresultedinasignificantreductionofsurvival
rateofCHOcells.AF—FDwastestedinarangeof10—80ug/mLtoimprovethsurvivalrateofCHOcells
ina dose—dependentman er.FC—FD(2.5—20/19/mL),butnotWC—FD(30一120ug/mL),could
significantlyrelievetheinjuryinducedby3%DMSOinCHOcells.InthemeasurementofLDHleakage,
coincubationofCHOcellswith4.5%DMSOfor24hobviouslyincreasedLDHrelease.However,allth
compoundstested,includingAF—FD(10—80ug/mL),WC—FD(30一120ug/mL),andFC—FD(2.5—20
弘g/mI。)hadnoeffectonLDHleakageinducedby4.5%DMSO.ConclusionThefindi gssuggestthat
theFC—FDmayprotectCHOcellsfromDMSOcytotoxicityassessedbvMTTassay,whichmaybe
associatedwithimprovingm tochondrialfunction。butotprotectingthemembraneinjuryofCHOcells.
Keywords:FlosDaturae(FD);C:hinesehamsterovary(CHO);dimethylsulfoxide(DMSO);
withanolidesconstituents(WC);flavonoidsconstituents(FC)
洋金花FlosDaturae为茄科植物白花曼陀罗
DaturametelL.的干燥花,药用历史悠久。洋金花
性味辛、温,具有较强的药理活性,可以平喘止咳、镇
痛解痉。临床上广泛用于慢性气管炎[1]、软组织损
伤[2]、银屑病[3“3等的治疗。洋金花主要活性成分为
生物碱、黄酮[51以及醉茄甾内酯类化合物口]。本实验
室从洋金花70%乙醇提取物中得到有效部位,进
一步分离获得醉茄甾内酯组分和黄酮组分。二甲基
亚砜(DMSo)的细胞生物活性较为复杂,可以影响
细胞的增殖和分化[73;高浓度时能够诱导细胞的程
序性死亡r8],具有明显的细胞毒性作用。本研究在建
立了DMSO细胞损伤模型的基础上,观察了洋金花
有效部位、黄酮组分以及醉茄甾内酯组分对DMSO
细胞毒性的影响。
1材料
1.1药物:洋金花药材购于河北省安国药材批发市
场,并经黑龙江中医药大学药学院生药学教研室王
振月教授鉴定。
将洋金花用70%乙醇回流提取后,采用稀酸
浸取乙醇提取物,将此酸溶液进行阳离子交换树脂
柱色谱分离。对阳离子交换树脂柱色谱流出液进行
大孑L吸附树脂柱色谱分离,再用50%乙醇洗脱,得
洋金花有效部位(占生药量的1.5%)。进一步将此
有效部位用SephadexLH一20柱色谱法分离,分别
得到醉茄甾内酯组分(含醉茄甾内酯类化合物
91%)和黄酮组分(含黄酮类化合物96%)。其中黄
酮组分占洋金花有效部位的55%。
1.2细胞系:中国仓鼠卵巢(CHO)细胞由北京大
学中国药物依赖性研究所梁建辉研究员提供。
1.3 主要试剂:DMEM培养基为Hyclone产品,
噻唑蓝(MTT)购自Sigma公司,乳酸脱氢酶
(LDH)试剂盒购自北京北化康泰临床试剂有限公
司,胎牛血清购自天津市财慧生化制品厂,其余试剂
均为国产分析纯。
2方法
2.1 细胞培养:CHO细胞用含有10%胎牛血清的
DMEM培养基培养,同时加入100U/mL链霉素
和100U/mL青霉素,于37C、5K0CO。培养箱中
全湿培养,2~3d换液1次。
2.2 MTT法检测细胞活性:在24孔培养板中接
种密度为1×105/mL的CHO细胞,每孔1mL,培
养48h,细胞处于亚融合状态。加入不同体积分数
(0、0.75%、1.5%、3%、6%、12%)DMSO孵育24
h,每孑L加入MTT液50扯L,终质量浓度为250
mg/L,于37℃、50%CO。培养箱中继续培养4h,
然后于室温下每孔加入酸性异丙醇2mL,吹打细胞
至MTT活细胞还原产物甲膦完全溶解,振动混匀
后,于570nm处测吸光度(A)值,计算细胞存活率
(细胞存活率一A实验组/A对照组x100%)。
在亚融合状态的CHO细胞中先加入3%
DMSO,再加入洋金花有效部位(10、20、40、80肛g/
mL)或醉茄甾内酯组分(30、60、120/ag/mL)或黄
酮组分(2.5、5、10、20/xg/mL)培养24h,采用
MTT法测定细胞活性。
选择两块24孔培养板,接种密度为1×105/
mL的CHO细胞,每孑L1m ,培养48h待细胞处
万方数据
·1828· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
于亚融合状态后,一块板加入3%DMSO;另一块板
同时加入30ADMSO和20弘g/mL洋金花有效部
位共同孵育,于0、6、12、18、24、30h采用MTT法
测定细胞活性。
2.3 LDH活性测定:在培养48h的CH0细胞中
加入DMSO(2.25%、4.5%、90A)继续培养24h,
然后按LDH试剂盒说明操作,分别测定细胞培养
液和细胞裂解液中LDH活性。测定细胞裂解液中
LDH活性时,先用1%TritonX一100裂解细胞。计
算细胞LDH漏出率[LDH漏出率一培养液中
LDH活性/(培养液中LDH活性+裂解液中LDH
活性)×100%]。
在亚融合状态的CHO细胞中先加入4.5%
DMSO,再加入洋金花有效部位(10、20、40、80ug/
mL)或醉茄甾内酯组分(30、60、120gg/mL)或黄
酮组分(2.5、5、10、20/19/mL)培养24h,然后测定
LDH的活性。
2.4统计方法:实验结果以z±S表示。采用单因素
方差分析(One—wayANoVA),LSD检验进行组间
两两比较。
3 结果
3.1洋金花有效部位对DMSo损伤CHO细胞存
活率的影响:CHO细胞在24孔培养板中孵育48h
后,细胞处于亚融合状态。加入不同体积分数
(o.75%~12%)DMSo,孵育24h。采用MTT法
测定细胞活性。结果表明,细胞的存活率随着
DMSO体积分数的增加显著降低,3%DMS0使
CHO细胞的活性降低了14.18%,6%DMSO使其
降低了53.02%,12%DMsO使其降低了
76.59%。与空白对照组相比差异具有显著性,根据
上述实验结果,选择3%DMSO作为细胞损伤的体
积分数。
表1结果显示,3%DMSO细胞损伤组(模型
组)与对照组比较差异显著(P<0.01),说明3%
DMSO能明显降低细胞活性,而且3%DMSO对
CHO细胞产生损伤的模型稳定,可以重复。在3%
DMSO损伤因子存在下,加入10~80pg/mL洋金
花有效部位,结果表明,洋金花有效部位各组呈剂量
依赖性地增加细胞活性,其中20、40、80pg/mL组
和模型组比较差异显著(P
的保护作用。其中,80弘g/mL洋金花有效部位组比
对照组的细胞活性强,说明80#g/mL洋金花有效部
位本身就对CHO细胞增殖具有一定的促进作用。
为进一步观察洋金花有效部位细胞保护作用的
时程变化,接种CHO细胞,培养48h后,共同加入
3%DMSO和20弘g/mL洋金花有效部位,图1的
结果显示,18、24、30h与单用3%DMSO组比较差
异显著,说明洋金花有效部位至少作用18h后才对
损伤的CHO细胞有保护作用。
衰1洋金花有效部位对DMSO损伤CHO细胞存活率的
影响(;士s,捍一4)
Table1 EffectofAF—FDonsurvivaIrateofCHO
cellsinjuriedbyDMSO(x±s,n一4)
与对照组比较:一P<0。01⋯P
U b lZ 18 24 JU
t|h
与3%DMSO组比较:’+P
时程变化(i士s,靠=4)
Fig.1TimecoursechangeofprotectiveeffectofAF—FD
onCHOcellsinjuriedbyDMSO(;士s,矗一4)
.2洋金花有效部位对DMSO损伤CHO细胞
LDH活性的影响:预实验结果显示3%DMSO对
LDH漏出率不产生明显影响,因此,增加DMSO体
积分数,选择2.25%~9%DMSO。结果可见,随着
DMSO体积分数的增加,呈剂量依赖性地增加细胞
LDH的漏出率。正常CHO细胞组LDH漏出率为
(64.93±3.48)%(,z=4),2.25%、4.5%、9%
DMSO组细胞LDH漏出率分别为(64.20土
1.01)%、(72.38±3.84)%(雄一4,P<0.05)、
(94.55±1.10)%(咒一4,P<0.001)。DMS0体积
分数为4.5%时对CHO细胞产生了明显的损伤。
如
加
∞
∞
96\褂烬烛霉器
万方数据
中草蔼ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·18 9·
因此,在随后的有关LDH漏出率测定的实验中均
选择4.5%DMSO处理细胞。
从图2可以看出,0^tg/mL洋金花有效部位组
与对照组相比,差异显著,说明4.5%DMSO能明
显增加细胞LDH漏出率。在4.50ADMSO损伤因
子的存在下,加入10~80弘g/mL洋金花有效部位
后,各剂量组与4.5%DMSO损伤组相比,差异没
有显著性(P>0.05),说明洋金花有效部位(10~
80pg/mL)不能减轻细胞损伤时LDH的漏出率。
对照组0 10 20 40 80
洋金花有效部位P/(ug·mL。1)
与对照组比较:一P
图2洋金花有效部位对DMSO损伤CHO细胞LDH
漏出率的影响(j士s,弛一4)
Fig.2EffectofAF—FDonLDHleakageinCHOcells
injuriedbyDMSO(;±s,席一4)
3.3 洋金花醉茄甾内酯组分对DMSO损伤CH0
细胞的影响:在24孔板中孵育48h的CHO细胞
处于亚融合状态,加入30、60、120弘g/mL洋金花醉
茄甾内酯组分后继续孵育24h,同样采用MTT法
和LDH法测定细胞活性。MTT法测定结果表明
(图3),30、60、120弘g/mL各剂量组与DMSO损伤
组相比,未见显著性差异,说明30、60、120弘g/mL
洋金花醉茄甾内酯组分对DMSO损伤的CHO细
胞无明显保护作用。
LDH测定结果表明(图4),洋金花醉茄甾内酯
组分30、60、120弘g/mL各剂量组与DMSO损伤组
相比,未见显著性差异,说明30、60、120pg/mL醉
茄甾内酯组分对DMSO损伤的CHO细胞LDH的
漏出没有明显保护作用。
3.4洋金花黄酮组分对DMSO损伤CHO细胞的
影响:在3%DMSO的存在下,加入2.5~20肛g/
mL洋金花黄酮组分,培养24h后,用MTT法测
定细胞活性。结果表明,黄酮组分(2.5~20弘g/
对照组0 30 60 120
洋金花醉茄甾内酯组分P/(ug·mL。1)
与对照组比较:+P
存活率的影响(z±S,撑=4)
Fig.3EffectofWC—FDonsurvivalrateofCHOcells
injuriedbyDMSO(工士s,穗一4)
孚
60
褥
丞40
o
一 20
0
对照组 ! 塑 塑 !!!
洋金花醉茄甾内酯组分P/(ug·mL。)
与对照组比较:一P
LDH漏出率的影响(j±s,聘一4)
Fig.4EffectofWC—FDonLDHleakageinCHOcells
injuriedbyDMSO(;±s,一一4)
mL)呈剂量依赖性地增强细胞活性,其中5、10、20
弘g/mL组和3%DMSO细胞损伤组(模型组)比
较差异显著(P
接种CHO细胞,培养48后,加入4.5%
DMSO和2.5~20pg/mL的洋金花黄酮组分,培
养24h,测定LDH漏出率。结果显示(表3):与对
照组比较,4.5%DMSO组及2.5~20/19/mL洋金
花黄酮组分各剂量组LDH的漏出率显著性增加。
然而,2.5~20p.g/mL洋金花黄酮组分各剂量组与
4.5%DMSO组LDH的漏出率相比,并无显著性
差异,说明洋金花黄酮组分在2.5~20弘g/mL对于
4.5%DMSO损伤CHO细胞膜导致LDH漏出率
增加无明显影响。
4讨论
本实验结果表明,虽然DMSO是一种常用的有
∞
∞
∞
∞
∞
加
罨瓣蜉他翟器
鼢
硇
∞
∞
∞
如
加
m
0
_j6\静丑嘿}{o一
万方数据
·1830· 中草药 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月
表2洋金花黄酮组分对DMSO损伤CHO细胞存活率
的影响(z±s,一一4)
Table2 EffectofFC—FDonsurvivaIrateOfCHo
cellsinjuriedbyDMSO@±S,露一4)
与对照组比较:+P
。P<0.0544P<0.0144。P<0.001US3%DMSOgroup
表3洋金花黄酮组分对DMSO损伤CHO细胞LDH
漏出率的影响(J±S,n一4)
Table3 EffectofFC—FDonLDHleakageinCHOcells
injuriedbyDMSO(x-4-S,n一4)
与对照组比较:+尸
数的DMSO显示出完全不同的细胞生物活性。
0.5%DMSO对细胞冻存和复苏具有明显的保护作
用。9]。1%~2%DMSO可以影响细胞的生长周期,
使细胞的生长停止在G。期[10|。研究资料表明
DMSO对血液细胞、神经瘤细胞以及结肠癌细胞具
有分化诱导作用[9]。此外,2.5%DMSO可以诱导角
质化细胞[9]、EL一4淋巴瘤细胞EnJ等产生凋亡。本实
验观察到0.75%和1.5%DMSO对CHO细胞的
增殖并无明显影响。增加DMSO体积分数至3%,
采用MTT法测定细胞活性,可观观察到DMSO明
显的细胞毒性作用。值得指出的是,3%DMSO并不
影响LDH的漏出率。从理论上讲,DMSO作为有机
溶剂对细胞膜双脂层结构的影响应该更加明显。然
而,实验结果表明并不完全如此。因此,在研究
DMSO的细胞毒性时,采用MTT法测定细胞活性
比LDH法可能更加敏感。
研究资料表明线粒体内膜存在琥珀酸脱氢酶,
可以将MTT还原为紫色甲膦[1引。因此,采用MTT
法测定细胞活性时,甲膦产物的多少可以间接地反
映线粒体的功能状况。本实验结果表明3%DMSO
可明显地抑制CHO细胞还原生成甲躜的能力。然
而,洋金花有效部位在10~80ttg/mL可以拮抗
3%DMSO对CHO细胞的抑制作用。本实验室以
往的研究证明洋金花有效部位为非生物碱水溶性成
分,并获得了该有效部位,在此基础上进一步分离得
到醉茄甾内酯组分和黄酮组分。本实验对醉茄甾内
酯组分和黄酮组分抗DMSO细胞损伤作用的药理
活性作了研究,结果显示黄酮组分在2.5~20弘g/
mL可以翻转3%DMSo对CHO细胞还原MTT
生成甲媵的抑制作用,显示出较好的细胞保护作用。
然而,醉茄甾内酯组分在30~120gg/mL时,采用
MTT法测定细胞活性,既未观察到细胞保护作用,
也未观察到细胞毒性作用。
细胞胞浆中含有丰富的LDH,在细胞膜通透性
和完整性正常的情况下,LDH难以从胞内漏至胞
外。当细胞膜受到损伤时,LDH的漏出率明显增加。
因此,采用LDH测定细胞活性时,LDH漏出率可
以反映细胞膜的完整性和通透性。实验结果表明,将
DMSO的体积分数提高到4.5%时,LDH的漏出
率明显增加,说明细胞膜的完整性和通透性受到明
显损伤,细胞活性降低。加入洋金花有效部位(10~
80t-g/mL)、醉茄甾内酯组分(30--120弘g/rnI。)以
及黄酮组分(2.5~20t-g/mL)均不能有效地降低
LDH漏出率,说明无论是洋金花的有效部位,还是
醉茄甾内酯组分或黄酮组分对于DMSO损伤细胞
膜的完整性和通透性均未显示出明显的保护作用。
本研究结果表明洋金花有效部位具有一定细胞
保护的药理活性,其主要有效成分是黄酮类化合物。
黄酮组分的细胞保护作用可能与其改善细胞内线粒
体的功能有关,而对细胞膜损伤的保护作用不明显。
致谢:北京大学中国药物依赖性研究所梁建辉
研究员对本研究给予的支持和帮助。
References:
[1]LiuKP.Treatmentof1 00casesofchronicbronchialcatarrh
withFlosDaturatincturemedication口].JChengduUniv
TraditionalChineseMedicine(成都中医药大学学报),1993,
16(1):2425.
E2]HuangGC,LiKJ,ZhuFS.Treatmentof42casesofacute
softissuecontusionw thFlosDaturaePlaster[J].J
NanjingU ivTraditChinMed(南京中医药大学学报),
1998。14(6):342343.
[3]ZhouJH,HeYX,ZhangJ G,eta1.Treatmentof100
casesofpsoriasiscl nicalobservationwithFlosDaturatotal
alkaloidsinjection[J].JTraditChinMedChinMaterMed
Jilin(吉林中医药),1986(6):14.
万方数据
中草菊ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第12期2006年12月·1831·
[43
[53
[6]
[7]
[8]
ThepsoriasisresearchteamofHeilongjiangUniversityof
TraditionalChineseMedicine.Treatmentpsoriasisreportof
242caseswithF如sDatura.[J].JTraditChinMed(中医
杂志),1985,26(2):32—33.
PateDW,AverettJE.FlavonoidsfromDaturametel[J].
Biochem@stEcol,1986,14(6):647—649.
ShinguK,FurusawaY,NoharaT,eta1.Solanaceous
studies.ⅪV.NewwithanoJides,daturametelinsC,D,E,
F,andG—AcfromDaturametelL.口].ChemPharmBull,
1989,37(8):2132—2135.
SouzaDosSantosAL,RodriguesML,AlvianoCS,eta1.
Herpetomonassamuelpessoai:Dimethylsulfoxide—induced
differentiationisinfluencedbyproteinaseexpression[J].
C“Ⅳ肘icrobiol,2003,46:1卜17.
GreinerC,WolferJ,HulsmannS,eta1. Bioelectrical
behaviorofhypoxichumanneoeorticaltissuenderthe
[9]
[10]
[11]
[12]
influenceofnimodipineandimethylsu foxide口].Brain
Res,2003,959:199—205.
ManabuK,KerkoI,YohkoK,eta1.DMS0Induces
apoptosisinSV40一transformedhumankeratinocytes,butnot
innormalkeratinocytes口].CancerLett,1996,108:185—
193.
FioreM,ZanierR,DegrassiF.ReversibleG(1)arrestby
dimethylsulfoxideasanewmethodtosynchronizeCh n se
hamsterc lls[J].Mutagenesis,2002,17:419—424.
LiuJ,YoshikawaH,N kajimaY,et1.Involvementof
mitochondrialpe meabilitytransitionandcaspase一9activation
indimethylsulfoxide—inducedapoptosisofEL一4lymphoma
cells[J].IntImmunopharmacol,2001,1:63—74.
HussainRF,NouriAME.Anewapproachformeasure
mentofeytotoxicityusingcolorimetricassay[J].JImmunol
Methods,1993,160(1):89—96.
归苓片改善动物学习记忆功能的研究
董文心1,阮克锋2,顾丰华1,沈平婊2,李朋云1,林志宏2
(1.上海医药工业研究院,上海200437;2.上海中药制药技术有限公司,上海201203)
摘 要:目的 研究归苓片(FBD)促进动物学习记忆功能的作用。方法小鼠ig给予35、70、140mg/kgFBD,连
续1周,观察FBD对东莨菪碱所致小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致小鼠记忆巩固不良和45%乙醇致小鼠记忆
再现障碍的影响,并观察FBD对大鼠双侧颈总动脉结扎所致的慢性脑部供血不足而产生的记忆障碍的改善作用。
结果FBD对由东莨菪碱所致的小鼠记忆获得障碍、亚硝酸钠所致的小鼠记忆巩固不良和45%乙醇所致的小鼠
记忆再现障碍均有明显的改善作用;并可改善大鼠双侧颈总动脉结扎所致的慢性脑部供血不足而产生的记忆障
碍。结论FBD可促进动物的学习记忆功能。
关键词:归苓片(FBD);记忆障碍;学习记忆功能
中图分类号:R286.74 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)12—1831—05
FBDusedtoimprovelearninga dmemoryfunctionofa imals
DONGWen—xinl,RUANKe—fen92,GUFeng—hual,SHENPing—ran92,LIPeng—yunl,LINZhi—hon92
(1.ShanghaiInst tuteofPharmaceuticalIndustry,Shanghai200437,China;2.ShanghaiTraditional
ChineseMedicineTechnologyCo.,Ltd.,Shanghai201203,China)
Abstract:ObjectiveTostudyonFBD(composedwithPoriaCOCOS,Atractylodesmacrocephala,and
Angelicasinensis)usedtoimprovelearninga dmemoryfunctionofa imals.MethodsThemicewere
treatedbyigFBDwiththedosesof35,70and140mg/kgforoneweekcontinuously.EffectofFBDon
dysmnesiaofacquiredlearningofmiceinducedbyscopolamine,dysmnesiaofme oryretentionofmice
inducedbyNaN02,anddysmnesiaofre ppearanceofmemoryofmiceinducedby45%ethanolwere
studied.Improvementforthdysmnesiaofmemoryduetochronicblooddeficiencyinbrainofratsinduced
byligatingthecarotidarteriesoftwosideswereobserved.ResultsFBDcanimprovethedysmnesiaof
miceinducedbyscopolamine,NaN02,and45%eth 01significantly,alsodysmnesiaduetochronicblood
deficiencyinbrainofratsinducedbyligatingthecarotidarteries.ConclusionFBDhasthefunctionto
improvethlearningandmemoryfunctionofa imals.
Keywords:FBD;dysmnesia;learningandmemoryfunction
收稿日期:2006~04—13
作者简介:董文心(1956),女,博士,研究员,在巴黎六大医学院获药理学硕士、博士学位,主要从事神经药理研究。
Tel:(021)55514666—362Fax:(021)65449361E—mail:dwxnn@sina.corn
万方数据
洋金花有效部位及其组分对二甲基亚砜损伤的中国仓鼠卵巢
细胞的保护作用
作者: 唐玲, 王秋红, 杨炳友, 肖洪彬, 孙艳萍, 匡海学, TANG Ling, WANG Qiu-hong,
YANG Bing-you, XIAO Hong-bin, SUN Yan-ping, KUANG Hai-xue
作者单位: 唐玲,王秋红,杨炳友,肖洪彬,匡海学,TANG Ling,WANG Qiu-hong,YANG Bing-you,XIAO
Hong-bin,KUANG Hai-xue(黑龙江中医药大学,黑龙江,哈尔滨,150040), 孙艳萍,SUN Yan-
ping(北京大学中国药物依赖性研究所,北京,100083)
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(12)
参考文献(12条)
1.Liu K P Treatment of 100 cases of chronic bronchial catarrh with Flos Datura tincture medication
1993(01)
2.Huang G C;Li K J;Zhu F S Treatment of 42 cases of acute soft tissue contusion with Flos Daturae
Plaster 1998(06)
3.Zhou J H;He Y X;Zhang J G Treatment of 100cases of psoriasis clinical observation with Flos Datura
total alkaloids injection 1986(06)
4.The psoriasis research team of Heilongjiang University of Traditional Chinese Medicine Treatment
psoriasis report of 242 cases with Flos Datura 1985(02)
5.Pate D W;Averett J E Flavonoids from Datura metel[外文期刊] 1986(06)
6.Shingu K;Furusawa Y;Nohara T Solanaceous studies.ⅪⅤ.New withanolides,daturametelins C,D,E,F,and
G-Ac from Datura metel L 1989(08)
7.Souza Dos Santos A L;Rodrigues M L;Alviano C S Herpetomonas samuelpessoai:Dimethyl sulfoxide-
induced differentiation is influenced by proteinase expression[外文期刊] 2003(1)
8.Greiner C;Wolfer J;Hulsmann S Bioelectrical behavior of hypoxic human neocortical tissue under the
influence of nimodipine and dimethyl sulfoxide[外文期刊] 2003(2)
9.Manabu K;Kerko I;Yohko K DMSO Induces apoptosis in SV40-transformed human keratinocytes,but not in
normal keratinocytes[外文期刊] 1996
10.Fiore M;Zanier R;Degrassi F Reversible G (1) arrest by dimethyl sulfoxide as a new method to
synchronize Chinese hamster cells[外文期刊] 2002(5)
11.Liu J;Yoshikawa H;Nakajima Y Involvement of mitochondrial permeability transition and caspase-9
activation in dimethyl sulfoxideqnduced apoptosis of EL-4 lymphoma cells[外文期刊] 2001(1)
12.Hussain R F;Nouri A M E A new approach for measure ment of cytotoxicity using colorimetric assay
[外文期刊] 1993(01)
本文读者也读过(9条)
1. 刘维民.闫凯麟.吴智群.LIU Wei-min.YAN Kai-lin.WU Zhi-qun TSA对人肝癌细胞SMMC-7721的抑制作用及其机
制[期刊论文]-现代肿瘤医学2007,15(10)
2. 贾海群.刘筱.曾成鸣.JIA Hai-qun.LIU Xiao.ZENG Cheng-ming 二甲基亚砜对轴突退行性病变的保护作用[期刊
论文]-第二军医大学学报2006,27(3)
3. 黄波.陈锋.朱茂祥.杨陟华.张蓉芳 二甲基亚砜拮抗烹调油烟冷凝物遗传毒性的研究[期刊论文]-环境与健康杂
志2007,24(3)
4. 黄群.黄新.包国荣 二甲基亚砜碱性溶液中时间对超氧阴离子自由基浓度的影响[期刊论文]-海峡药学
2004,16(2)
5. 王勇 二甲基亚砜对贫铀诱发人支气管上皮细胞损伤的保护机制研究[学位论文]2006
6. 郅媛媛.毛立民.李国林.郭福林.朴松林 TSA促进口腔鳞状细胞癌凋亡的实验研究[期刊论文]-现代口腔医学杂志
2009,23(1)
7. 李建锋.王树凯.周辉.党博 二甲基亚砜对大鼠颅脑损伤后Survivin基因表达的影响[期刊论文]-中国实用神经疾
病杂志2008,11(4)
8. 薛佳佳.周红敏.孟凡星 二甲基亚砜在心脏和中枢神经系统药理作用概述[期刊论文]-承德医学院学报
2010,27(1)
9. 彭坤.邢怡桥.项奕.叶美红.艾明.杨安怀.杨燕宁 二甲基亚砜对培养人视网膜色素上皮细胞增殖的影响[期刊论
文]-眼科新进展2004,24(2)
本文链接:http://d.wanfangdata.com.cn/Periodical_zcy200612027.aspx