全 文 ：·30· 中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月
油产率较低。
研究结果表明提取方法不同，其挥发成分及其
量差异很大。正己烷提取物产率最高，其植物蜡、泪
柏醇量很高，分别占挥发成分的40％以上。超临界
二氧化碳萃取物中植物蜡成分较少，其主要挥发成
分为泪柏醇，高达70％。水蒸汽蒸馏法提取的精油
中植物蜡几乎没有，泪柏醇量较低，这与文献报道结
果基本一致[3]。研究发现引种的鼠尾草中泪柏醇量
很高，有开发价值。
对比分析表明水蒸汽蒸馏不适合提取二萜醇泪
柏醇及植物蜡，而超临界CO。萃取对二萜醇泪柏醇
有很好的选择性，对植物蜡的提取率较低，泪柏醇
可作为高级龙涎香香料合成原料，因此利用超临界
CO。萃取分离技术不仅可以得到鼠尾草挥发油，还
能得到价值高的泪柏醇。
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山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成研究
韩凤梅，程伶俐，李路军，陈 勇。
(湖北大学中药生物技术省重点实验室，湖北武汉430062)
山麦冬为百合科植物湖北麦冬Liriopes icata
(Thunb．)Lour．var．proliferaY T．Ma的干燥
块根，是湖北大宗道地药材。现代研究表明，其主要
活性成分山麦冬多糖有降血糖、延缓衰老、抗疲劳、
辅助抑制肿瘤、抗辐射等作用口’2]。而目前对于山麦
冬多糖的分离纯化及单糖组成分析尚未见报道。本
实验分离纯化得到了一种水溶性山麦冬多糖，并对
其相对分子质量及单糖组成进行了研究。
1材料与方法
1．1 主要仪器、试剂及材料：BSZ～160自动部分收
集器(Az海青浦沪西仪器厂)；TH一1000梯度混合
器(上海金达生化仪器有限公司)；(2．5ClTI×40era)
色谱柱(武汉大学玻璃仪器厂)；UV一1601紫外可
见分光光度计(日本岛津公司)；体积排阻色谱一多角
度激光光散射仪(SEC—LLS，WyaatTechnology
corporation，USA)；7890Ⅱ型气相色谱仪(上海天美
科学仪器有限公司)。
山麦冬产于襄阳欧庙山麦冬药材基地，并经本
室王万贤教授鉴定为湖北麦冬L．spicata
(Thunb．)Lour．var．proliferaY T．Ma。DEAE一
纤维素(上海生化试剂公司)；各种单糖均为国产生
化试剂；正二十烷(GC，EINECS204-018—1
TSCA)；三甲基氯硅烷(CP，中国医药集团上海化学
试剂公司)；六甲基二硅氮烷(AR，国药化学试剂有
限公司)；其余试剂均为分析纯。
1．2多糖的提取、分离与纯化[3“]：将山麦冬洗净，
60℃干燥2h，粉碎。称取100g置500mL圆底烧
瓶中，加石油醚250mL于60--．,90℃回流1h脱脂，
滤过，石油醚回收。滤渣挥干溶媒后以80％乙醇250
mL浸渍过夜，80～90℃回流提取2次，每次1．5h，
滤过，药渣加蒸馏水500mL浸1h后于90℃温浸
提取40min，滤过，再用250mL蒸馏水90℃温浸
30min，过滤，合并滤液，减压浓缩至75mL。用Sav—
ag法脱蛋白质，加1％活性炭脱色2次，抽滤，滤液
加95％乙醇使含醇量达80％，冰箱静置过夜。过滤，
残渣依次用95％乙醇、无水乙醇、乙醚、丙酮洗涤后
于60℃烘干，得褐色山麦冬粗多糖7g。
用DEAE一纤维素柱分离制备精制山麦冬多糖。
吸取0．5％上述山麦冬粗多糖水溶液2mL上
DEAE一纤维素柱(2．5cm×36cm)，待多糖渗入
DEAE一纤维素中后，用蒸馏水洗脱，体积流量1
mL／min，每3rnin收集1管，隔管用苯酚硫酸法检
测，直至无洗脱峰为止。
1．3 多糖相对分子质量测定方法[5]：多糖相对分子
质量测定采用体积排阻色谱结合激光光散射检测器
测定，实验条件为：G6000PWXL(7．8mmX300
收稿日期：2006—04—12
*通讯作者陈勇Tel／Fax：(027)88663590E—mail÷address：eyl01610@nPC．gov．en
万方数据
中草115ChineseTraditionalandHerbalDrugs第38卷第1期2007年1月．31．
mm)与G4000PWXL(7．8mm×300ram)体积排阻
串联柱，示差折光检测器与多角度激光光散射仪连
用检测，检测波长为632．8rim，检测温度为25℃，
流动相为0．9％NaCl，使用前用0．2肛m的超滤膜
处理，体积流量为1mL／min。精制山麦冬多糖样品
用0．9％NaCl配制成5mg／mL溶液，进样前用
0．2弘m的超滤膜处理，进样体积为200肛L。
1．4单糖组成分析方法[4’6]：多糖的单糖组成分析
采用气相色谱测定，实验条件为：7890Ⅱ型气相色谱
仪，SE一30弹性石英毛细管柱(30m× ．32mm×
0．5肛m)，FID检测器，载气N240mL／min，H240
mL／min，空气400mL／min，尾吹40mL／min，柱前
压0．08MPa，柱温210℃，进样器温度260℃，检测
器温度260℃，分流进样1pL。以2mol／L三氟乙
酸2mL溶解25mg精制山麦冬多糖样品，封管于
100℃水解6h，取出，在70℃水浴中用氮气吹干浓
缩，再置干燥器中24h。以1mL吡啶溶解后于冰水
浴中依次加入0．8mL六甲基二硅氮烷和0．4mL
三甲基氯硅烷，于20℃静置6h，离心，取上清液直
接进气相色谱分析。用标准三甲基硅烷化单糖对照，
衍生方法同上，正二十烷作内标物，根据保留时间及
峰面积大小计算各单糖的组成比例。
2结果与分析
2．1 山麦冬多糖的分离纯化：用蒸馏水洗脱DEAE一
纤维素柱得到一个山麦冬多糖组份，再用0---0．2
mol／LNaOH进行梯度洗脱，无多糖组分流出。加大
上样浓度与上样量上柱6次，共上样3g，收集多糖洗
脱液，于流水中透析3d，真空冷冻干燥后得精制山麦
冬多糖1．62g。精制山麦冬多糖在260和280nm处
无吸收，说明其中不含核酸和蛋白质。由此可见，山麦
冬粗多糖中含精制山麦冬多糖54．o％，其余的
46．o％可能为低聚糖和单糖等杂质。
2．2理化性质：精制山麦冬多糖为白色无定型状固
体，极易吸潮。溶于水，尤易溶于热水，不溶手高浓度
乙醇、丙酮、乙醚等有机溶剂，水溶液呈透明粘稠状。
硫酸咔唑反应呈阴性，说明不含糖醛酸，为中性多糖。
2．3相对分子质量测定结果：精制山麦冬多糖相对
分子质量测定结果：其数均相对分子质量(Mn)为
8787，重均相对分子质量(脚)为9242，Z均相对分
子质量(尬)为9586，分布宽度(Mw／Mn)为1．05。
2．4单糖组成分析结果：4种混合标准单糖的三甲
基硅烷衍生物的气相色谱图见图1，精制山麦冬多
糖水解物的三甲基硅烷衍生物的气相色谱分析结果
见图2。实验结果表明，精制山麦冬多糖是一个由单
一葡萄糖组成的均多糖，其中葡萄糖的峰有两个，后
一个为其在衍生化的过程中产生的异构峰。
1
O 10 11 12 13 14 15 16
t／min
图1混合标准单糖气相色谱图
Fig．1Gaschromatographicanalys sofmixture
ofseveralstandardmonosaccharides
3
八 ， 6L ^
0 10 1l 12 13 14 15 16
t／min
卜甘露糖2一果糖3，6-葡萄糖4一半乳糖
5一正二十烷(内标)
1-man2-fru3，6-glc4-gal
5-eicosane(internalstandard)
图2精制山麦冬多糖中单糖组分的气相色谱图
Fig,1Gaschromatogramofmonosaccharidecomposition
ofrefinedRa ixLiriopespolysaccharide
3讨论
水提山麦冬多糖主要是由单一葡萄糖组成的均
多糖，其水溶性较好，且粘稠度非常高，极易吸潮，推
测是麦冬中黏性物质的主要成分。用体积排阻色谱一
多角度激光光散射法(SEC—LLS)测定其相对分子
质量表明其重均相对分子质量为9242。其咔唑反应
呈阴性表明山麦冬多糖为中性多糖。有关其详尽的
结构分析和生物活性还有待进一步深入研究。
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万方数据
山麦冬多糖的分离纯化及单糖组成研究
作者： 韩凤梅， 程伶俐， 李路军， 陈勇
作者单位： 湖北大学,中药生物技术省重点实验室,湖北,武汉,430062
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2007,38(1)
被引用次数： 10次
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