全 文 ：中草菊 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月·1177·
表2三七不同炮制品中主要皂苷类成分的
相对质■分数对比
Table2 Comparisonofrelativesaponinsindifferent
processedpro uctsofP．notoginseng
部分色谱峰得到基线分离，并且得到的色谱峰形较
好，结果较为稳定。
实验结果显示，经炮制后三七中主要皂苷类成
分三七皂苷R，、人参皂苷Rg。及Rb。的量均有不同
程度降低，但炮制后人参皂苷Rg。及Rb。相对质量
分数增加。其中高温高压蒸制(如105℃蒸制1．5h
及110℃蒸2h)或常压蒸制时间越长(如常压蒸制
8．5h)，主要皂苷类成分的量降低越多；但用油炸或
黑豆汁蒸制的炮制法皂苷类成分的量降低相对较少。
将不同三七炮制品的HPLC图谱与未经炮制
的三七生品的HPLC图谱进行比较，可见油炸、黑
豆汁蒸制7h、常压蒸制4h的三七炮制品的HPLC
图谱多出了2个小峰；而105℃蒸制1．5h的三七
炮制品的HPLC图谱比三七生品的HPLC图谱多
出了3个小峰，其色谱图与其他炮制品的图谱相比
也有较大差别。这些成分的产生以及蒸制后皂苷类
成分的变化与药效学实验结果证实其具有最佳补血
强身作用，三七炮制条件及传统中医认为的三七“生
撵熟补”之说可能存在一定的联系，待进一步探讨。
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正交设计优选罗布麻叶中总黄酮提取工艺
杨志芳1’3，王维娜2，杨坤3，吴琳琳2，杨新波4，黄正明3+
(1．军事医学科学院，北京 100850；2．中国科学院生态环境研究中心，北京100850；3．中国人民解放军302医院
药学部，北京100039；4．中国人民解放军总医院老年医学研究所，北京100853)
罗布麻ApocynumvenetumL．为夹竹桃科植
物，又名红麻，是生长在盐碱沙荒地区的野生植物。
我国罗布麻的资源非常丰富，用罗布麻叶作茶饮及
药用有悠久的历史。《中国药典>>2005年版也有记
载：“平肝安神，清热利水，用于肝阳眩晕，心悸失眠，
浮肿尿少，高血压，神经衰弱，肾炎浮肿”。现代药理
学研究认为其可预防和治疗老年高血压、感冒、气管
炎，对增强机体抗病能力有一定的作用，为延年益
寿，养生之药口]。罗布麻叶中主要含有金丝桃苷、异
槲皮素、槲皮素一3—0一槐糖苷、芸香苷、槲皮素等黄酮
类成分[2]，为进一步开发和利用野生植物资源，本实
验进行了罗布麻叶中总黄酮最佳提取工艺的研究。
1仪器与试药
罗布麻叶购于北京绿野药业公司，经安徽天科
药物研究所王先荣教授鉴定为夹竹桃科植物罗布麻
叶A．venternL．的干燥叶，粉碎，备用。芦丁对照品
购于中国药品生物制品检定所(批号0080—9705)。
试剂均为分析纯。
FA一2004电子天平(上海天平仪器厂)，UV一
3400紫外分光光度计(日本日立公司)，752型紫外
分光光度计(上海第三分析仪器厂)。
2方法与结果
2．1 因素及水平考察：根据罗布麻总黄酮的理化性
质，选择提取次数、乙醇体积分数、提取时间和乙醇
收稿日期：2005—12—08
作者简介：杨志芳(198l一)，女，山西朔州怀仁县人，军事医学科学院硕士研究生，研究方向为中药药理及新药研发。
E—mail：yangzf710@126．com
*通讯作者黄正明Tel：(010)66933233E—mail：Huang—zhengming@sohu．tom
万方数据
·1178· 中草喃 ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第8期2006年8月
用量4个因素，每个因素选择3个水平，设定因素水
平表，见表1。
表1因素水平
Table1 Factorsandlevels
因 素rjF．一A乙醇体积分数／％ B乙醇用量／倍C提取时间／hD次数／次2．2罗布麻总黄酮的测定2．2．1对照品溶液的制备：精密称取在120℃减压干燥至恒重的芦丁对照品50mg，置25mL量瓶中，
加甲醇适量，置水浴上微热，溶解，放冷，加甲醇稀释
至刻度，摇匀，精密量取10mL，置100mL量瓶中，
加水至刻度，摇匀，即得(含无水芦丁0．2mg／mL)。
2．2．2供试品溶液的制备：取正交试验所得提取液
lmL，置25mL量瓶中，加乙醇稀释至刻度，摇匀，
作供试品溶液，备用。
2．2．3测定波长的选择：取供试品溶液3mL和对
照品溶液3mL，分别置分光光度仪上绘制吸收曲
线，在500nm处有最大吸收，测定波长为500nm。
2．2．4 标准曲线的制备：精密吸取对照品溶液
1．0、2．0、3．0、4．0、5．0与6．0mL，分别置于25mL
量瓶中，各加水至6mL，加5％亚硝酸钠溶液1
mL，摇匀，放置6min，加10％硝酸铝溶液lmL，摇
匀，放置6min，加氢氧化钠试液10mL，再加水至刻
度，摇匀，放置15min，用空白溶剂6mL同法作空
白，照分光光度法《中国药典>>2005年版一部附录
VA)在500nm波长处测定吸光度，以吸光度为纵
坐标，质量浓度为横坐标，绘制标准曲线。回归方程
为A=0．4743C一0．0072，，．一0．9998。结果表明
芦丁在0．2～1．2mg与吸光度线性关系良好。
2．2．5测定：精密吸取供试品溶液3mL，置25mL
量瓶中，照标准曲线制备项下的方法，自“各加水至
6mL”起依法操作。以供试品溶液3mL加水稀释至
25mL作空白，依法测定吸光度。从标准曲线上读出
供试品溶液中芦丁的质量，计算，即得。
2．3实验与结果：准确称取罗布麻叶，每份50g，按
L。(34)正交表设计方案进行试验，提取液稀释后作
供试品溶液，进行测定，以测得罗布麻总黄酮为指标
进行分析，结果及方差分析见表2、3。
由R值可知，各因素对试验结果的重要次序为
D>A>B>C，由方差分析可知，提取次数对总黄酮
表2 L，(34)正交试验结果
Table2 ResultsofL·(34)orthogonaltest
实验号 A B C D 总黄酮得率／％
9 3
I 9．67
Ⅱ 9．62
I 11．30
R 1．68
，0．05(Z，Z)一19’’’001(2’2)一99
得率有显著性影响，提取时间对总黄酮得率几乎没
有影响，综合各种因素，选定罗布麻总黄酮提取工艺
为A381C3D1。
2．4工艺验证试验：为考察上述优选提取工艺的稳
定性，按该工艺条件进行重复试验3次，测定罗布麻
总黄酮的得率，结果平均得率为12．75％，RSD为
2．16％，表明本实验制定的工艺路线稳定可靠。
3讨论
3．1 通过R值可得最佳因素水平为A。B。C。D。，但
经方差分析C因素没有统计学意义，对试验结果的
影响不大，考虑到大生产中经济、有效等方面的因
素，优选工艺A。B。C。D。，即用生药10倍量70％乙醇
回流提取3次，每次2h。
3．2本实验通过正交试验法对罗布麻的提取工艺
条件进行了优化，并按最佳工艺进行了验证试验，结
果证明用该工艺提取罗布麻总黄酮工艺简单、提取
率高、操作控制容易、稳定性好，为罗布麻工业生产
提供了合理依据。
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万方数据
正交设计优选罗布麻叶中总黄酮提取工艺
作者： 杨志芳， 王维娜， 杨坤， 吴琳琳， 杨新波， 黄正明
作者单位： 杨志芳(军事医学科学院,北京,100850;中国人民解放军302医院药学部,北京,100039)， 王
维娜,吴琳琳(中国科学院生态环境研究中心,北京,100850)， 杨坤,黄正明(中国人民解放军
302医院药学部,北京,100039)， 杨新波(中国人民解放军总医院老年医学研究所,北京
,100853)
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2006,37(8)
被引用次数： 12次

参考文献(2条)
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