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Inhibitory activity of endophytic fungi from three plants of Opuntia Mill.

3种仙人掌植物内生真菌抑菌活性的研究



全 文 :中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月·917·
分列第一和第二,湖白菊位居第三。
4结论
综上所述,苏北中药材种植基地7个不同栽培
类型菊花中,花序的各个指标,即直径、瓣数、瓣长、
瓣宽、长宽比、单花鲜质量都有较大差异,对单花鲜
质量与以上指标进行相关分析的结果表明,单花鲜
质量与直径和瓣长均呈显著正相关。各栽培类型的
株高、分枝数、花头数、折干率、产量也各异,其中以
红心白菊的分枝数、花头数、产量最大;产量与花头
数间呈显著正相关,单株头状花序(即花头数)数量
是影响菊花产量的首要因素。
7个不同栽培类型菊花的总黄酮、绿原酸的量差
异很大。小白菊、新白菊、小红心白菊3个栽培类型的
绿原酸的量未达到《中国药典))2005年版一部菊花项
下的最低限量,而且他们的总黄酮的量也相对较低。
如前所述,尽管新白菊、小红心自菊的产量及其某些
植物学性状有一定优势,但其总黄酮、绿原酸的量甚
低;且小白菊的产量和内在质量均不理想,鉴于目前
苏北中药材种植基地药农种植的菊花品系中这3种
栽培类型仍占有一定比重,严重影响经济收益和菊花
药用功效,因此,建议生产上应淘汰小白菊、新白菊和
小红心白菊这3个栽培类型。综合考虑菊花质量和产
量这两大因素,7个供试菊花栽培类型中,推荐长瓣白
菊和红心白菊为中药材种植基地的首选菊花栽培类
型,湖自菊和黄菊花可作为备选栽培类型。
通过3年试验研究,虽然笔者筛选出长瓣白菊
和红心白菊等优良栽培类型,但因药用菊花在栽培
过程中容易发生变异,结合苏北中药材种植基地存
在的菊花品种退化,产量、质量不稳定的现象,以及
开花后期易遭霜冻、滩涂土壤(pH7.8。盐分较高)影
响生长等问题,有必要开展菊花优良品种的选育工
作。笔者将在江苏省高技术研究项目“药食兼用菊花
优良品种的选育”(BC2005318)的研究1:作中,继续
筛选优良的菊花种质资源,采用现代生物技术和传
统育种技术相结合的方法培育出适合该种植基地的
菊花优良品种,为该地区的菊花生产做出贡献。
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3种仙人掌植物内生真菌抑菌活性的研究
秦盎,邢珂,吴少华,张琦,陈有为1
(云南大学省微牛物研究所教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南昆明 650091)
摘要:目的从墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的内质茎巾分离内生真菌.并进行初步鉴定及活性筛选。方
法选择30种病原微生物作为指示菌进行抑菌试验。结果从3种仙人掌的茎中分离出111株内生真菌,其中49
株内生真菌对一种或多种病原微生物有抑制作用,来自墨西哥仙人掌、元江仙人掌、绿仙人掌的抗菌活性菌株比例
分别为48.4%、42.9%及42.3%,其中平板抑菌直径大于l5mi l的高抗菌株有20株。抗菌活性菌株主要分布于青
霉属、曲霉属等19个属中。结论首次从仙人掌中分离和鉴定出111株内生真菌,仙人掌内生真菌中Jl泛分布着
活性菌株。
关键词:仙人掌属;内生真菌;抑菌活性
中图分类号:R282.2 文献标识码:A 文章编号:0253~2670(2006)06—0917~05
作@者m简BI介蛔::秦20嘶盛-09(112鸭21),男,江苏仪征人,现主要从事真菌资源及应用微生物学研究
*通讯作者陈有为Tel:(0871)5033539E—mail;ywchen@ynu.edu.cn
万方数据
·918- 中苹蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月
InhibitoryactivityofendophyticfungifromthreeplantsofOpuntiaMill.
Q1NSheng,XINGKe,WUShao—hua,ZHANGQi.CHENYon~wei
(KeyLaboratoryforMicrobialResources,MinistryofEducation,YunnanInstituteofMicrobiology,
VunnanUniversity,Kunming650091,China)
Abstract:ObjectiveToisolateendophytiefungifromthestemsofOpuntiaflcusindica,0.micro
dasys,and0.vulgarissoastoidentifythemandoinhibitoryactivityscreening.MethodsThirty
pathogenicmicroorganismsrelatedohumanndplantwereantagonizedasindicativeagentsbythendo—
phyticfungitotestheirnhibitoryactivity.ResultsOnehundredanelevene dophyticfungiwereiso—
latedfromtheabovethreeplantsofOpuntiaM ll.andmongthemforty—ninehadinhibitoryactivity
againstoneormorepathogenicmicroorganisms.Thepercentageof nt/microbialstrainswasasfollows:
O.microdasys48.4%,0.五cusindica42.9%,and0.vulgaris42.3%.Twentystrainshadhighantimi—
erobialactivitiesandtheirnhibitionzonediameterwasat1east15mm.Theactivestrainswereidentified
to19genera,sucha PenicilliusLamarkandAspergillus.ConclusionO ehundredanelevenendophytic
fungiarefirstlyisolatedanidentifiedfromthethreeplantsofOpuntidM ll.andmanyofthestrainshave
theinhibitoryactivity.
Keywords;OpuntiaMill.;endophyticfungi;inhibitoryactivity
仙人掌是仙人掌科仙人掌属(OpuntiaMill.)
植物。仙人掌属中已发现的种有300余个,该属植物
大多数原产美洲和非洲东部。我国引种仙人掌历史
悠久,云南、四JIl、广东、广西、湖南等地都有野生仙
人掌分布。仙人掌在中国作为药用植物具有悠久的
历史,《本草纲目拾遗》记载仙人掌味淡、性寒,具有
行气活血、清热解毒、消肿止痛、健脾止泻、安神利尿
的功效。仙人掌植物中含有有机酸、甾醇、生物碱、黄
酮和萜类等成分,近年来的研究表明,仙人掌具有抑
菌、消炎、镇痛、降血糖、抗胃溃疡及抗癌等多种药理
作用及多种临床用途“]。
植物内生真茼是近年来研究较热的一类微生物
资源,尤其是某些内生真菌还可以产生和宿主植物
相同或相似的生理活性成分“。自1993年.Strobel
等从短叶红豆杉的韧皮部分离到一株产抗癌药物紫
杉醇内生真菌以来,不断有从植物内生真菌中发现
抗菌、抗肿瘤等活性物质的报道。3。4J。当前,由于生态
环境的破坏、植物资源的过度采伐,能被用来寻找生
理活性物质的植物资源越来越少,而从普通生境中
寻找产抗生索类活性物质的菌株也越来越困难,由
于植物内生真茼代谢产物丰富,作为一种寻找开发
药物的重要资源已受到人们的日益关注。本实验对
仙人掌植物内生真菌进行分离,并对具有广谱抗菌
活性的菌株进行了初步筛选,从而为植物一内生真菌
的生态关系研究以及植物内生真菌资源的利用提供
一定的依据。
l材料
1.1植物样品来源:元江仙人掌Opuntiaficusindi—
c(1Mill.采自云南省元江县,为当地的一种野生梨
果仙人掌;墨西哥仙人掌0.microdasys(Lehm.)
Pfeiff采自云南省元江县,为我国引种的一种墨西
哥仙人掌;绿仙人掌0.vulgarisMill.采自云南省
昆明市,为云南省一种野生仙人掌。以上植物样品由
云南大学杨丽源鉴定。
1.2拮扰测定指示菌
1.2.1草兰氏阳性细菌:金黄色葡萄球菌(Staphy
lococcusa reus);枯草芽孢杆菌(Bacillussubti is);
白色葡萄球菌(S.albus);蜡状芽孢杆菌(Bacillus
cereus);结核分枝杆菌(Mycobacteriumtuber—
culosis);肺炎链球菌(Streptococcuspneum niae);甲
型溶血链球菌(s.hemolyticus);乙型溶血链球菌
(S.hemolyticus);耻垢分枝杆菌(M.$megmatis);
表皮葡萄球菌(S.Ⅱ“M“5);藤黄八叠球菌(Sardine
lutea)。
1,2,2 革兰氏阴性细菌:大肠杆菌(Escherichia
coli);普通变形杆菌(Pratevulgaris);铜绿色假单
孢菌(Pseudomonasaeruginosa);伤寒沙门氏菌
(Salmonellatyphi);宋内氏痢疾杆菌(Shigellason
nei)。
1.2.3皮肤致病真菌:白色念珠菌(Candidaalb —
cans);紧密单孢枝霉(Hormodendrumcompact m);
石膏样小孢子菌(Microphytongypseum);皮炎单孢
枝霉(H.dermatitidis);裴氏着色真菌(H.pe
drosoi);星形石膏样毛癣菌(Trichoit,hyton
万方数据
中草蒋ChineseTraditionalandHerbalDrugs第37卷第6期2006年6月·919·
gypseum);犬小孢子菌(Microsporumcanis)。
1.2.4植物病原真菌:灰葡萄孢(Botrytiscinerea);
棒束孢(Isariasp.);玉蜀黍离蠕孢(Bipolaris,,nay—
dis);小长喙霉(Ophiostomaminus);黑曲霉(A}
pergillusniger);燕麦镰孢(Fusariumavenaceum);
毛壳菌(Chaetomiumsp.)。上述供试指示菌均由云
南省微生物研究所提供。
2方法
2.1仙人掌内生真菌的分离和纯化:预先取仙人掌
健康植株用自来水冲洗干净、晾干水分后,切取仙人
掌肉质茎,采用下述方法进行表面消毒:75%酒精漂
洗(20~30s)一无菌水冲洗一0.2%升汞漂洗(10~
20s)一无菌水冲洗数次。上述仙人掌原植物样品经
处理完毕,在无菌状态下切成0.2CIII×0.2cm长段
(片)置于培养基内,于(28±1)℃条件下静止培养。
培养5~10d后,培养基中可见有菌落形成,挑取植
物组织周围的菌落转接人PDA斜面中,经纯化后
即得内生真菌。
2.2仙人掌内生真菌的培养:将内生真菌菌株分别
接人7mLPDA液体培养基,置于(28士2)℃摇床
上,200r/rain旋转培养5d,无菌条件下滤过除去菌
丝体,取发酵液加入等体积95%乙醇浸提,48h后浓
缩至干,加入无菌水制成发酵样品,做抑菌试验。
2.3指示菌的培养:将斜面培养的指示菌用无菌水
稀释或洗下其孢子(细菌终浓度约为108/mL,真菌
孢子终浓度约为106/mL),制成菌悬液。
2.4抑菌试验:采用滤纸片法。在无菌条件下分别
取供试指示菌悬液各0.2mL,加入相应的固体培养
基制成含菌平板;在培养基表面轻贴上无菌滤纸片,
稍干后,用无菌微量移液器分别加入40pL仙人掌
内生真菌发酵液,细菌置于(37土1)℃,真菌置于
(28土1)℃,培养48h后,分别测量抑菌圈直径的
大小。
2.5 内生真菌的分类鉴定:采用真菌插片培养方
法,对分离获得的内生真菌进行显微形态特征的观
察、分类鉴定。分类检索参照文献报道“M。
3结果与分析
3.1 3种仙人掌植物内生真菌的抑菌活性:从上述
3种仙人掌植物中分离到内生真菌nl株,其中元
江仙人掌28株,墨西哥仙人掌3l株,绿仙人掌52
株。内生真菌的抑菌试验结果见表1。可以看出,所
分离到的111株仙人掌内生真菌中共有49株内生
真菌对一种或多种指示菌有抑制作用(占总分离菌
株数的44.1%)。3种仙人掌植物内生真菌的抗菌活
性菌株所占比例都超过40%,其中墨西哥仙人掌内
生真菌抗菌活性菌株所占比例最高,达48.4%。说
明植物内生真菌中存在着广泛的抗菌活性菌株。
裹1 3种仙人掌植物内生真菌的抑菌活性硬宿主分布
Table1 Antjpathogenicactivitiesandhostdistribution
ofendophyticfungifromthreeplants
ofOpuntiaM l
1竞抑菌活性.”抑菌圈赢径<10mill.”抑菌圈直径10~15
him,”抑菌圈直径>15mm
1hoinhibitoryactivity.2Idiameterofinhibitionzo e<10
mm,”diameterofinhibitionaonein10——15mill,“diame—
terofinhibitionzone>15nllrl
从表1可以看出,3种,fill人掌植物内生真菌活
性菌株的分布也有一定的差异。元江仙人掌内生真
菌中的中等活性菌株(抑菌圈直径10~15ITlm)所
占比例最高,低活性菌株(抑菌圈直径<10mm)与
高活性菌株(抑菌圈直径>15mm)所占比较较低;
而墨西哥仙人掌内生真菌中3种活性菌株数目相
当;在绿仙人掌内生真菌中,高活性菌株所占比例最
高,中等活性菌株的数日也较多。
3.1.1元江仙人掌内生真菌的抑菌活性:元江仙人
掌内生真菌对所有的细菌指示菌都有抗性,28株内
生真菌中,对铜绿色假单孢菌有抑菌作用的活性菌
株最多达到了10株(占35.7%),且抑菌圈直径大
多数在10mm以上,对伤寒沙门氏菌与宋内氏痢疾
杆菌有抗性的活性菌株也较多,都有6株(占
21.4%);同时对供试的14种病原真菌中的皮肤致
病真菌白色念珠菌、石膏样小孢子菌和植物病原真
菌灰葡萄孢、棒柬孢、玉蜀黍离蠕孢5种真菌都有抑
制生长作用,最大抑菌圈直径为17mm。元江仙人
掌内生真菌高抗菌株较少,3株高抗菌株的抑菌谱
都较广且对细菌有较强的抑制作用,都为曲霉属。
3.1.2墨西哥仙人掌内生真菌的抑菌活性:墨西哥
仙人掌内生真菌除对枯草芽孢杆菌与甲型溶血链球
菌没有抑菌作用外对其他细菌均有抗性,其中对宋
内氏痢疾杆菌有抑菌作用的活性菌株最多达到了
13株(占41.9%),对铜绿色假单孢菌有抑菌活性的
菌株也有9株(占29%),对会黄色葡萄球菌、白色
葡萄球菌和大肠杆菌有抑菌活性的茼株最少,只有
万方数据
·920· 中草鸯ChineseTraditionalandHerhalDrugs第37卷第6期2006年6月
2株;同时对供试的皮肤致病真菌白色念珠菌、皮炎
单孢枝霉和植物病原真菌棒束孢、灰葡萄孢、小长喙
霉5种真菌也有抑菌作用,最大抑菌直径为15
inril。活性菌株除分布在青霉属、曲霉属、头孢霉属
等常见种类外,在其他非常见种类,如节串孢霉属以
及无抱目的丝核菌属等属中也有分布。
3.1.3绿仙人掌内生真菌的抑菌活性:绿仙人掌内
生真菌对16种细菌指示菌都有抑制作用,其中对宋
内氏痢疾杆菌有抑菌作用的活性菌株最多达到了
16株(占30.8%),对铜绿色假单孢菌和结核分枝杆
菌有抗性的菌株所占比例也较高,各占总分离菌数
的23.1%,对大肠杆菌和肺炎链球菌有抗性的括性
菌株较少,都只有3株。同时对3种皮肤致病真菌白
色念珠菌、皮炎单孢枝霉、石膏样小孢子菌以及4种
植物病原真菌棒束孢、灰葡萄孢、小长喙霉、玉蜀黍
离蠕孢都有抑菌活性。绿仙人掌内生真菌中的高抗
菌株最多.有12株(占23.1%),且多数可以抑制宋
内氏痢疾杆菌,主要分布于镰孢霉属、交链孢属等属
中,其中一株茎点霉的抑菌谱较广,抑菌圈直径也较
大,表现出较强的抑菌作用。
3.2仙人掌内生真菌抗菌活性菌株鉴定结果统计:
3种仙人掌植物内生真菌抗菌活性菌株分布在19
个属(表2),其中以交链孢属为主,占活性菌株总数
的12.2%。此外3种仙人掌内生真菌活性菌株的属
种分布具有多样性的特征。元江仙人掌内生真菌活
性菌株较少,分布在青霉属、曲霉属等属中;墨西哥
仙人掌内生真菌活性菌株分布在12个属中,以头孢
霉属、卵形孢霉属为主,各占其活性菌株的20%、
13.3%;绿仙人掌活性菌株分布也较广,分布在交链
孢属、葡萄孢霉属、盘多毛孢属等10个属中,以交链
孢属为主。
4讨论
仙人掌植物内生真菌中广泛分布着抗菌活性菌
株(占分离总菌数的40%以上),内生真菌的抗菌活
性、属种分布都具有多样性的特征。3种仙人掌植物
内生真菌的抗菌活性菌株属种分布及数目具有一定
的相似性也存在较大的差异,最西哥仙人掌内生真
菌中的活性菌株类型最多,绿仙人掌中的活性菌株
属种分布也较广,元江仙人掌中的最少。同属的内生
真菌对不同的病原菌的拮抗作用及抗菌效果较为相
似但也有差异.不同属的菌株对同一指示菌的拮抗
作用也有较大的差别。另外,元江仙人掌与墨西哥仙
人掌均采自属于亚热带气候的云南元江河谷地区,
而绿仙人掌采于气候17【j季如春的昆明.两个地区仙
裹2 3种仙人掌植物内生真菌抗菌活性菌株属的分布
Table2 Antipathogenicstrainsa distributionofendo—
phytiefungifromthreeplantsofOpuntiaM ll
人掌内生真菌在属种分布上有不小的差异,说明植
物内生真菌的分布与植物所处的气候环境因素也相
关。3种仙人掌内生真菌活性菌株在一些不常见的
属中电有分布,如黑盘孢科的盘多毛孢属以及无孢
目的丝核菌属等属。有关植物与内生真菌的生态关
系值得进一步研究。
上述研究还表明,3种仙人掌植物内生真菌中高
活性菌株占有一定的比例(占分离菌株的18%),其
中一株曲霉的抑菌谱较广且抑菌圈直径也较大,对金
黄色葡萄球菌的抑菌圈直径达32mill,可能产生了
抗生素类物质,其分子分类及代谢产物我们将进一步
研究。植物内生真菌作为一类新的生物活性物质资
源.且近年来不断有从各种内生真菌中发现新抗生素
的报道,因此通过人一】:发酵来生产括性物质无疑为新
型药物的开发提供了新的途径。植物内生真菌开发应
用前景广阔,应大力开展这方面的研究。
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李卫建。2,李先恩”
(1,中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所,北京100094;2.农业鄢环境保护科研监测所.天津300191)
摘要:目的研究不同生长期连翘果实干物质及叶和果实中有效成分的积累规律。方法采用百果质量研究果
实干物质的积累,HPLC法测定连翘叶与果实中有效成分的量。结果5~7月是连翘果实干物质积累的重要时期。
在整个生长过程中,种子、叶和壳中连翘酯昔、连翘昔、芦丁的量均呈下降趋势。8月下甸至9月上甸,果实干物质积
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量分数趋于稳定且达最低。青翘中有效成分的量高于老翘,青翘中连翘酯苷、连翘苷与芦丁的比例与老翘存在显著
差异。结论在北京地区,8月下旬至9月上旬,为青翘最佳采收期;10月20日左右为老翘的最佳采收期。
关键词:连翘;干物质;连翘酯苷}连翘苷;芦丁
中圈分类号:R2^12 文献标识码:A 文章编号:0253—2670(2006)06092I一 4
Regulationofdrysubstancedactivecomponentsaccumulation
infruitofForsythiasuspensa
LIWet—jianl”.LIXian—enl
(InstituteofMedicinalPl nttChineseAcademyofMedicalScienesandPekingUnionMedicalCo lege,Beijing100094,
China;2.EnvironmentMonitorInstitute,MinistryofAgriculture.Tianjin300191.China)
Abstract:ObjectiveTostudythregulationofdrysubstancedactivecomponentsaccumulationin
thefruitofForsythiasuspensa.MethodsThedrysubstanceofthfruitwasanalyzedbythemethodof
hundredgrainmass.Thecontentsof heactivecomponentsinleaves,shucks,andseedswereanalyzedby
HPI。C.ResultsTheperiodforF.suspensatoaccumulatethedrysubstancewasmainlyMayandJuly.
Duringthewholegrowthphase,theactivecomponents,suchasforsythiaside,forsythin,andrutindif—
ferentparts,wered creasing.Fromthelastten—dayofAugusttothefirsttendayofSeptember.theaccu—
mulationofthedrysubstancecamtostabilityandthecontentsofactivecomponentsinshucksandseed
werestable-Thecont ntsofactivecomponentsinshucksdecreasedrapidlyfromSeptembertOOctober,
andthencametostabilityandthecontentsi shucksistheleastduringthelastten—dayofOctober.Sothe
contentsofactivecomponentsinyoungerF.suspensaarehigherthanthatinelderone,andtheproportion
amongforsythiaside,forsythins,andlutionisalsosignificantlydifferentfromelderseeds.ConclusionIt
ismorepreferabletopickyoungerF.suspensafromthelasten—dayofAugustto hefirstten—dayof
SeptemberandtopickelderF.suspensaduringlastendayofOctober.
Keywords:Forsythiasuspensa(Thunb.)Vahl;drysubstance‘forsythiaside;forsythin;rutin
连翘为木犀科植物连翘Forsythiasuspensa
(Thunb.)Vahl的干燥果实,具有清热解毒、消肿散
结之功效。连翘药材来源以野生资源为主,产区“采
青”时间过长,采收期混乱,是造成连翘品质差异的
收稿Et期:2005一1020
尊翥蒙菲筝焉鬟譬8。ii:器i晋菱薯嚣☆’现E主-m要ail从:x事ian药en用li植@s物in质a,量co控rn制和农产品质量安全研究。
万方数据
3种仙人掌植物内生真菌抑菌活性的研究
作者: 秦盛, 邢珂, 吴少华, 张琦, 陈有为, QIN Sheng, XING Ke, WU Shao-hua,
ZHANG Qi, CHEN You-wei
作者单位: 云南大学省微生物研究所,教育部微生物资源开放研究重点实验室,云南,昆明,650091
刊名: 中草药
英文刊名: CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年,卷(期): 2006,37(6)
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抑菌作用[期刊论文]-精细化工2005,22(4)
6. 梁蓓蓓.刘华钢.曹俊涛.LIANG Bei-Bei.LIU Hua-Gang.CAO Jiu-Tao 仙人掌果多糖对S180荷瘤小鼠抑瘤作用的
实验研究[期刊论文]-癌症2008,27(6)
7. 张苗苗.张蓉.王生荣 高寒草地植物内生真菌的分离及其抑菌活性初探[期刊论文]-安徽农业科学2009,37(7)
8. 陆晓东.王琦.LU Xiao-dong.WANG Qi 骆驼蓬内生真菌抑菌活性的研究[期刊论文]-菌物研究2010,08(2)

引证文献(10条)
1.常东东.戴好富.左文健.梅文莉 海南龙血树内生真菌A12中的抗菌活性成分研究[期刊论文]-中国抗生素杂志
2012(6)
2.戴文君.张秀环.黄贵修.戴好富.梅文莉 见血封喉内生真菌的分离鉴定及抑菌活性研究[期刊论文]-中草药
2009(6)
3.周生亮.陈才法.房兴堂.蒋虹.魏志文 5种药用植物内生真菌的分离及其抑菌活性的研究[期刊论文]-徐州师范大
学学报(自然科学版) 2007(4)
4.高蓬明 冬凌草内生真菌抗肿瘤活性菌株筛选[期刊论文]-安徽农业科学 2008(29)
5.郭庆启.张娜.张岭 微波辅助提取仙人掌多糖工艺条件及抑菌效果的研究[期刊论文]-中国调味品 2010(10)
6.李光富.汪正威.李雪玲 葱内生真菌抑菌活性初探[期刊论文]-楚雄师范学院学报 2008(9)
7.崔晋龙.郭吉刚.范黎 远志内生真菌分离鉴定及活性筛选[期刊论文]-微生物学通报 2007(5)
8.王玉君.崔晋龙.苏红.范黎 远志内生真菌抑菌活性筛选[期刊论文]-微生物学通报 2009(3)
9.崔晋龙.范黎.丁翠.王玉君 栽培黄芩高活性内生真菌菌株的筛选与鉴定[期刊论文]-西北植物学报 2007(7)
10.赵春安.罗珊珊.毕艳艳.李海燕 三种水生植物内生真菌多样性及其抗真菌活性[期刊论文]-微生物学通报
2009(9)


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