全 文 ：中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月·1257·
的内在质量。中药复方的有效性是各种成分协同作用的结
果，现在的这种评价方式显然难以体现中药复方经皮制剂的
真实结果。当然，对于衡量透皮成分的有关标准，还应该以药
物的有效性来评价。
4．2展望：尽管目前中药复方经皮吸收还存在着一些问题，
但中医药外治法有着悠久的历史和确切的疗效，中药外用制
剂的经皮吸收研究已经起步，许多学者正向着这方面进行有
益的尝试。先从单味药物，如丹参、冰片等研究经皮吸收是一
条可行的思路；在中药制剂中加入经皮促进剂，如氮酮、丙二
醇等，以及从中药中寻找经皮吸收促进剂，均有助于中药发
挥其药用效果；同经络学说、脏象学说等传统的中医理论相
结合，是中药复方经皮制剂开发的优势；将蛋白质组学应用
到中药复方多组分、多环节、多靶点的作用研究，可望对中药
复方的作用机制研究取得突破性进展。随着经皮机制的更加
清楚，新促透方法的不断出现，好的实验技术、研究思路的逐
渐提出，中药复方经皮给药制剂这一新的领域一定会有更大
的发展。
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安神中药药理研究方法综述
彭 博，刘新民。，王立为
(中国医学科学院中国协和医科大学药用植物研究所，北京 100094))
摘要：安神中药药理研究的主要实验方法有自主活动测试(抖笼法、空场实验、洞板实验等)、睡眠实验、对抗中枢
兴奋实验。关于自主活动主要的评价指标有动物的活动次数、走格数、运动路程、钻头次数及持续时间；睡眠实验的
指标有睡眠动物数、睡眠潜伏期和持续时间；对抗中枢兴奋实验的指标有惊厥动物数、惊厥潜伏期和持续时间。针
对现有的实验方法、评价指标及其意义进行综述，为建立适合中医药特点的安神中药药理研究方法提供参考。
关键词：安神；药理方法；中药
中图分类号：R285．52；R286．13文献标识码：A 文章编号：0253—2670(2005)08—1257—04
收稿日期：2004—10-28
基金项目：国家中医药管理局中医药留学回国人员科技活动择优资助课题(2003LHR01)
作者简介：彭博(1979一)，女，吉林省吉林市人，硕士，研究方向为中药神经药理实验方法学。
*通讯作者刘新民Tel：(010)62899741E—mail：liuxm62@sohu．eom
万方数据
中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
SurveyOilpharmacologicalmethodologyofsedativeChinesemateriamedica
PENGBo，LIUXin—min，WANGLi—wei
(InstituteofMedicinalPl ntDevolopment，ChineseAcademyofMedicalScience
andPekingUnionMedicalCo lege，Beijing100094，China)
Keywords：nourishingheartandtranquilizing；pharmacologicalmethods；Chinesemateriamedica
以安定神志为主要功效的药物称为安神中药，主要用于
治疗心气虚、心血虚等各种原因所致的心神不宁、烦躁易怒、
失眠多梦、头晕目眩、健忘、惊风和癫痫等症。现代研究证明
有改善睡眠、促进学习记忆、抗焦虑、抗精神病和抗癫痫的药
理作用。本文仅就安神中药药理研究中有关镇静和抗惊厥的
行为学检测方法、评价指标及其意义进行综述。
1 自主活动测定实验
自主活动测定是研究神经精神药物最简便和常用的实
验方法，目前在对安神中药的研究中主要应用抖笼法、空场
实验、洞板实验。
1．1 抖笼法：传统的方法是用细线将吊笼固定于横杆与换
能器之间，用二导生理记录仪描记小鼠活动曲线。记录曲线
的振幅、各种波形的个数和曲线下面积以反映小鼠自主活动
强度。实验发现有镇静作用的安神中药能明显抑制小鼠的自
主活动口。]，主要表现为活动曲线各种波形的个数减少，以中
波和大波减少的程度为甚；活动曲线下面积减少；曲线振幅
降低。该方法灵敏度高，仪器简单，但所用指标只能对动物的
活动进行半定量或定性分析。
封洲燕口]应用计算机控制的小鼠抖笼活动记录仪对比
研究了酸枣仁皂苷A(JuA)和安定的镇静作用。实验中定量
记录了小鼠活动曲线下的面积、振幅总和(A。。。。)和基线记录
曲线振幅总和(A“。。)；同时设计了短时间窗(1S)扫描法，计
算小鼠大活动的时间和静息时间。通过记录以上指标，发现
应用lOmg／kgJuA后50min记录的数据与20min的数据
相当或药效更明显；但应用0．5mg／kg安定后50min记录
的数据较20rain的数据有明显反弹，从而得出酸枣仁的作
用比安定更加温和、持久、平稳。除以上指标，为了消除多路
抖笼记录中的系统误差，减少小鼠个体差异的影响，实验还
应用了A。，对A“。的百分比。由此提示，应用定量指标使评
价作用温和的安神中药的特点成为可能，并且能提高实验的
准确性。
1．2空场实验：Hall首先提出圆形空场实验，后又有人改进
为方形空场。传统实验记录了动物总的走格数、站立次数和
持续时间、静止和运动时间及其占总时间的百分比[4]。实验
发现有安神作用的中药呈剂量依赖性显著减少小鼠在2min
内的走格数、站立次数和运动时间[5]。赵智强等[63进一步应
用动物走格抑制率区分了3种复方安神中药的作用强度，认
为抑制率越大，安神药的作用越强。为了进一步提高实验的
灵敏度和准确性，Madani等[7]应用了计算机控制的空场实
验，以运动总距离和平均速度代替传统的走格数作为评价自
主活动的指标。
有的实验对空场采取区域分割，从而完整揭示动物在其
中的活动情况[8]。主要记录动物在中央区、内部区、边缘区运
动距离和时间，并计算它们占总的运动距离和时间的百分
比[7．9]。实验研究认为在评价镇静药作用中，动物在中央区停
留时间和运动路程所占的比例运动总路程更加敏感稳定[9]。
Schmitt等Bo]在评价药物镇静作用时，向空场实验中引入了
新奇事物，结果显示药物能明显减少动物向新奇事物靠近的
次数，缩短一次观察新奇事物持续的最长时间，但是有镇静
作用的莫索尼定(Moxonidine)在较低剂量下(o．05mg／kg)
可以使动物产生前探究性活动(pro—exploratory)，主要表现
在动物向新奇事物靠近的次数、在中央区和内部区的活动明
显增加。
Parshad等[11]给大鼠ip100mg／kg的楝树提取物，对自
主活动的变化进行观察，结果慢性多次注射和急性一次注射
分别使其活动量下降34％和36％。进一步应用最大颤搐力
(PTF)实验和蟾蜍坐骨神经动作电位测试发现药物能使大
鼠腓肠肌最大颤搐力明显下降；蟾蜍坐骨神经动作电位的振
幅、传导速度及上升坡度均有所下降，与对照组无明显差异。
因而认为楝树提取物对大鼠有镇静作用，但此作用与外周神
经无关。由此提示结合空场实验和电生理实验方法可用来研
究安神药的作用机制。
综上所述，在研究药物的镇静安神作用时，大多数空场
实验应用总的运动距离(走格数)和站立次数作为指标，这两
个指标评价安神中药的效果比较肯定。
1．3 洞板实验：Boissier等首先建立小鼠的洞板模型，File
等将其应用于大鼠，现在常用于检测动物的自主活动，实验
主要记录5rain内鼠的钻头次数和持续时间。Adzu等[121研
究发现有镇静作用的酸枣仁水提取物明显减少小鼠钻头次
数。有报道安非他明呈剂量依赖性增加钻头次数，但明显缩
短钻头持续时间，由此提示这两个指标可能代表两种动机不
同的探究性活动，因此在评价安神中药作用时有必要同时记
录两者。
1．4其他
1．4．1抑郁模型的方法[1⋯：小鼠悬尾法和强迫游泳实验是
评价抗抑郁药的经典实验，目前也有人将其用于安神药的研
究中。实验固定小鼠尾部使其头向下悬挂，记录6rain内小
鼠不动时间；或将小鼠放入水深为20cm的容器中2rain
后，记录5min内小鼠不动的时间。结果发现ig安神胶囊能
明显延长悬尾实验中小鼠的不动时间，并且呈剂量依赖性明
显延长小鼠游泳不动时间。
1．4．2焦虑模型的方法：明暗箱实验和高架十字迷宫实验
可以同时评价安神中药的镇静和抗焦虑作用，以明暗穿箱次
数、总入臂次数来衡量动物自主活动，有镇静作用的药物能
万方数据
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使两者减少。随着计算机的引入，以动物进入开臂远端的距
离、运动速度和总移动路程作为评价自主活动的指标。但近
年研究认为进入闭臂的次数来评价动物自主活动可靠性较
大，原因是它仅代表动物活动情况而不反映其焦虑状况。目
前国内尚没有报道应用该实验来评价安神中药的镇静作用。
1．4．3协调平衡运动和肌张力的实验：主要方法有牵引实
验、爬杆实验、转棒实验、倾斜板实验。镇静药有中枢抑制作
用，能降低动物肌张力，同时破坏平衡协调能力。以上实验对
镇静药和有镇静作用的抗焦虑药敏感，常作为评价镇静药的
辅助手段。
除此以外，安非他明和去水吗啡诱导动物出现刻板动作
和攀爬动作的实验也可以用来评价安神药的作用。注射安非
他明和去水吗啡后，由于分别激活了黑质一纹状体和中脑边
缘系统多巴胺通路而导致鼠出现刻板动作和攀爬动作。据报
道有镇静作用的Enlandrophragmaangolense(Welw)C．
DC．(Melianceae)的甲醇提取物ip100～400mg／kg能使安
非他明诱导的刻板动作和去水吗啡导致的攀爬动作次数明
显减少口“。原因可能是镇静药对中枢神经系统有抑制作用，
从而抑制了多巴胺D。、D。受体。有抗精神病作用的药物通过
直接抑制多巴胺受体也能减少以上两项指标，因此在评价安
神药作用时，需进一步区分其抗精神病作用和镇静作用。实
验证明抗精神病药在不影响动物被动回避反应的情况下抑
制主动回避反应；但有非选择性中枢抑制作用的镇静药能同
时抑制动物的主动和被动回避反应[1⋯。
2睡眠实验
大多数睡眠实验是建立在镇静安神药物与巴比妥类药
物的协同作用基础之上。常用的方法有：协同闽剂量或阈下
剂量的戊巴比妥钠睡眠实验，再入睡实验。主要观察动物入
睡潜伏期、睡眠持续时间和入睡率。研究酸枣仁的安神作用
时发现，它能缩短阈剂量戊巴比妥钠睡眠的入睡潜伏期并使
醒来后再次入睡的小鼠数量增多[1“。给小鼠连续10dig酸
枣仁水煎液0．2mL／10g，脑组织中的多巴胺(DA)和高香
草酸(HVA)水平明显低于正常对照组，认为酸枣仁可能通
过降低中枢神经系统单胺类神经递质起到安神作用[1“。实
验发现阔叶无花果甲醇提取物呈剂量信赖性明显延长阈剂
量戊巴比妥钠的睡眠时间，结果提示它有镇静作用，并认为
此作用可能与药物作用于大鼠睡眠调节中枢或抑制戊巴比
妥钠的代谢有关[1⋯。因此为了避免因只影响肝药酶而减少
戊巴比妥钠代谢的药物产生的假阳性反应，在评价胡椒根乙
醇提取物和酸枣仁的安神作用时应用了阈下剂量戊巴比妥
钠的睡眠实验，结果两者均能明显增加小鼠入睡率。
魏怀玲等[181应用多次给药后小鼠戊巴比妥钠睡眠时间
的实验比较了赤灵芝孢子粉水溶性提取物(肌生液)和安定
的镇静催眠作用。实验得出多次注射肌生液与仅注射相同剂
量肌生液一次对延长小鼠戊巴比妥钠睡眠时间的作用几乎
一样；但是多次注射安定后，其延长戊巴比妥睡眠时间的作
用明显弱于仅注射一次的作用。提示连续多次应用肌生液一
段时间后，不会出现类似于安定的普遍耐药性，因此认为这
种方法有利于评价安神中药的作用特点。
以上用来评价安神药的睡眠实验多使用正常的动物，但
这种方法不能明显的减少觉醒时间，很难精确的评价药物的
作用。因此有研究通过ip咖啡因或侧脑室注射对氯苯丙氨
酸(PCPA)诱导动物的药物性失眠模型，也可以通过游泳导
致运动后失眠模型，记录动物不同睡眠时相的睡眠潜伏期和
持续时间。结果表明白芍总苷能改善正常或失眠等不同状态
下的大鼠睡眠，能使失眠鼠的各项睡眠参数恢复正常；朱砂
安神丸能明显缩短PCPA导致的失眠猫的清醒期，延长慢波
睡眠I期及总睡眠时间。由此证明有安神作用的中药能翻转
失眠动物模型的睡眠剥夺效应[1⋯。除此之外，在评价安神药
物作用时可应用其他因素导致的动物失眠模型，如水平台
法、足部电击法、改变动物昼夜周期等。
3对抗中枢兴奋实验
中枢兴奋剂是能提高中枢神经系统功能活动的药物，主
要有咖啡因、安非他明、回苏灵、士的宁、戊四唑、印防己毒素
和硫代氨基脲等，对抗中枢兴奋作用实验常作为评价安神中
药的药理方法而被载入经典的教科书中。
3．1抗中枢兴奋剂导致的动物活动过度：在研究朱砂和酸
枣仁的安神作用的实验中应用了安非他明导致的小鼠活动
过度模型。观察小鼠自主活动情况发现，朱砂虽然对正常小
鼠的自主活动基本无影响，但能明显对抗安非他明引起的活
动增加[2叩；而酸枣仁能同时减少正常小鼠和活动过度小鼠
的自主活动[2“。由此可知，有安神作用的药物能抑制中枢兴
奋剂导致的活动过度，并且认为在评价安神药时活动过度小
鼠模型敏感性较正常小鼠高[2⋯。
3．2抗惊厥实验：抗惊厥实验是评价安神药常用的方法，电
刺激和中枢兴奋药等多种因素均能刺激中枢引起动物惊厥。
实验主要记录动物第一次出现惊厥的潜伏期、惊厥抽搐次数
和持续时间、惊厥率、死亡潜伏期、死亡时间和死亡率。
具有安神作用的药物(如安神药、平肝熄风药和开窍药
等)能够延长惊厥和死亡潜伏期、减少惊厥次数和惊厥的动
物数。Btiytikokuroglu等[223应用咖啡因导致的惊厥实验比较
了镇静药作用强弱，认为药物延长惊厥潜伏期的程度越大说
明其镇静作用较强；反之，作用较弱。方永奇等[2朝应用士的
宁和印防己毒素分别产生了脊髓强直性惊厥和脑性惊厥的
动物模型，并且发现石菖蒲挥发油能缩短士的宁导致的脊髓
性惊厥的潜伏期，但能延长印防己毒素导致的脑性惊厥的潜
伏期。康永等F20]研究发现朱砂有明显对抗戊四氮惊厥的作
用，但对士的宁所致惊厥未见有明显影响。由此认为不同的
惊厥模型可以用来区分不同安神药的作用部位。
敖平等[243研究表明ig胡椒根乙醇提取物1h后没有明
显减少最大电刺激导致的惊厥动物数量，而2h后开始发挥
抗惊厥作用，4h及8h作用均较强，推测其后期的抗惊厥作
用可能与37，47一次甲二氧基肉桂酰哌啶有关。邓红珠等乜1实
验发现红毛五加醇提取液对安非他明和戊四唑导致的惊厥
有明显的对抗作用；但是它不能拮抗阈上或阈下剂量的印防
己毒素引起的惊厥，反而增加小鼠的惊厥和死亡发生率。因
万方数据
·1260· 中草药ChineseTraditionalandHerbalDrugs第36卷第8期2005年8月
而认为红毛五加的镇静作用机制有别于苯二氮革类，即不通
过作用于7一氨基丁酸(GABA)受体实现。通过生化方法证明
其总苷成分能明显降低小鼠脑内去甲肾上腺素(NE)和DA
的水平，故初步认为红毛五加的中枢镇静作用是通过降低脑
内单胺类递质水平实现的口“。由此提示在评价安神中药的
作用时，不同因素导致的惊厥模型可以进一步用来研究药物
的作用机制。
有的应用电击引起小鼠的激怒反应(竖立、两前肢离地、
对峙、互相撕咬)，记录2rnin内激怒反应出现的潜伏期和次
数[5]。结果冬虫夏草能延长激怒反应出现的潜伏期，而复方
酸枣仁汤能明显减少激怒反应的次数。由此证明有安神作用
的药物对电刺激造成的中枢神经系统异常兴奋活动行
为——激怒反应具有类似氯丙嗪样的安定作用。
4结语
目前评价安神中药作用中，抖笼法、空场实验、睡眠实验
和抗惊厥实验应用较多。洞板实验、高架十字迷宫和明暗箱
实验可以同时用来评价镇静作用和抗焦虑作用。随着人们生
活和心理压力加大，失眠、焦虑等神经精神疾患有逐年增高
的趋势，中药因具有整体综合调节和不良反应小的特点而在
这类疾病的治疗中有独特优势。但中药在应用中多为复方配
伍，运用时需考虑到性味归经等药性理论；而且中药的成分
和药理作用复杂，因此其药效学评价方法不能完全照搬西医
的研究方法。利用计算机、信息技术和图像分析处理等现代
技术建立适合中医药特点、可推向国际的安神中药药理实验
方法和评价标准，对于推动中医药现代化和国际化进程有重
点意义。
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万方数据
安神中药药理研究方法综述
作者： 彭博， 刘新民， 王立为， PENG Bo， LIU Xin-min， WANG Li-wei
作者单位： 中国医学科学院,中国协和医科大学药用植物研究所,北京,100094
刊名： 中草药
英文刊名： CHINESE TRADITIONAL AND HERBAL DRUGS
年，卷(期)： 2005,36(8)
被引用次数： 6次

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